1、專題17生物技術(shù)實(shí)踐，考點(diǎn)概述本專題的主干知識(shí)主要集中在微生物的培養(yǎng)與利用、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用即果酒和果醋的制作、酶技術(shù)、DNAI粗提取及鑒定和 植物組織培養(yǎng)，植物成分的提取和血紅蛋白的 提取與分離。這幾個(gè)內(nèi)容都比較貼近生活生產(chǎn)實(shí)際，不但可以與必修部分的內(nèi)容相聯(lián)系， 也為培養(yǎng)學(xué)生的生物科學(xué)素養(yǎng)起到了一定的作用，因此高考的力度逐年加大，高考的立意 重在對(duì)生物技術(shù)過(guò)程的研究和理解，更高的要求是根據(jù)有關(guān)內(nèi)容進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和分析。從命題角度看主要是以微生物的應(yīng)用為考察對(duì)象，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)或者其他考察，考察的內(nèi)容 多種多樣，考查方式和方向是更加密切的聯(lián)系人們的生活生產(chǎn)實(shí)際。微生物的利用在生物 技術(shù)實(shí)踐中占有

2、比較重要的地位，包括微生物的分離和培養(yǎng)技術(shù)、特定微生物的數(shù)量測(cè)定 等。本專題易考查培養(yǎng)基、消毒滅菌等有關(guān)微生物培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識(shí)，培養(yǎng)基的制備、高壓 蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)，并運(yùn)用相關(guān)技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微生物計(jì)數(shù)、微生物分離與培養(yǎng)等實(shí)際問(wèn)題。選修只以簡(jiǎn)單題或填空題形式出現(xiàn)。酶的應(yīng)用考點(diǎn)和必修 內(nèi)容聯(lián)系緊密，主要考查果膠酶在果汁生產(chǎn)中的應(yīng)用和加酶洗衣粉洗滌效果的探究等知識(shí) 點(diǎn)，以簡(jiǎn)答或?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)形式出現(xiàn)。傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)在食品加工中的應(yīng)用與生活實(shí)踐密切相關(guān)， 考查上注重基礎(chǔ)知識(shí)，主要考查實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃怼⒎椒ê筒僮鞑襟E，掌握相關(guān)的操作技能， 并將這些實(shí)驗(yàn)涉及的方法和技能進(jìn)行綜合應(yīng)用。考查形式

3、上，這部分內(nèi)容出現(xiàn)在選做題中，以非選擇題形式出現(xiàn)。 DNA和血紅蛋白的提取和分離與生活實(shí)踐密切相關(guān)，考查上注重DNA和血紅蛋白的提取和分離的基礎(chǔ)知識(shí)，主要考查實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹⒃怼⒎椒ê筒僮鞑襟E，掌握 相關(guān)的操作技能。考查形式上，這部分內(nèi)容出現(xiàn)在選做題中，以非選擇題形式出現(xiàn)。此部分考題難度不大，試題往往從生產(chǎn)生活實(shí)際入手，進(jìn)行綜合考查。復(fù)習(xí)每個(gè)小專題時(shí)建議“抓大放小”，也就是掌握大的方法和思路，力求從宏觀上去整體把握。對(duì)于一些 細(xì)節(jié)問(wèn)題沒(méi)有必要花費(fèi)太大的精力，因?yàn)楸緦ｎ}主要是一些生物技術(shù)操作中的技術(shù)手段和 方法，比如植物組織培養(yǎng)，主要要掌握組織培養(yǎng)的核心過(guò)程即脫分化和再分化，影響因素、 條件。一要從

4、實(shí)驗(yàn)角度剖析每項(xiàng)技術(shù)，把握其原理、材料、操作流程、注意事項(xiàng)等；二要 用比較的方法區(qū)分一些重要概念和方法；三要用聯(lián)系的觀點(diǎn)看待不同的技術(shù)，要聯(lián)系必修 教材中的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，注意將不同實(shí)驗(yàn)相關(guān)聯(lián)的知識(shí)進(jìn)行整合；四是有條件的最好能動(dòng)手做 實(shí)驗(yàn)。，考點(diǎn)精講【要點(diǎn)梳理】1.1口喬酉占(1)概念：人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。(2)營(yíng)養(yǎng)組成：一般都含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。此外，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、氧氣以及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的要求。(3)種類：按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。2.無(wú)菌技術(shù)(1)含義：指在培養(yǎng)微生物的操作中，所有防止雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵：防

5、止外來(lái)雜菌的入侵。(3)不同對(duì)象的無(wú)菌操作方法對(duì)一.接種針環(huán))口,培養(yǎng)皿此操作者的衣打和手M水源地力法類型I的燒火苗2下熱滅菌3巴氏消毒1紫外世化學(xué)藥物高壓蒸汽火苗3.大腸桿菌的純化培養(yǎng)(1)制備固體培養(yǎng)基：計(jì)算一稱量一溶化一滅菌一倒平板。(2)純化大腸桿菌平板劃線法：是通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步 稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。稀釋涂布平板法：是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布 到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。4 .菌種的保存方法對(duì)于頻繁使用的菌種，可以采用臨時(shí)保藏的方法。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。5 . 土壤中分

6、解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)分離原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣稍履蛎福@種物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到催化作用。(3)將點(diǎn)好樣的濾紙卷成圓筒狀，卷紙時(shí)不能將濾紙兩邊相互接觸，以避免由于毛細(xì)管現(xiàn) 象導(dǎo)致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快，溶劑前沿不齊，影響結(jié)果。（4）層析液沒(méi)及樣品原點(diǎn)，色素溶解于層析液中，造成實(shí)驗(yàn)失敗。層析液不可沒(méi)及樣品原 點(diǎn)，以免色素溶解于層析液中，使鑒定失敗。（5）沒(méi)有設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照。層析液中是否提取到胡蘿卜素，可通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)樣品中的3胡蘿卜素作對(duì)比予以確認(rèn)。，考點(diǎn)精練1.（四川省成都市石室中學(xué) 2019屆高三上學(xué)期入學(xué)考試生物試題）在玫瑰精油和橘皮

7、精油提取過(guò)程中，正確的是（.）A.玫瑰精油和橘皮精油都可用蒸儲(chǔ)、壓榨和萃取的方法提取B.分離的玫瑰精油油層還含有一定水分可用無(wú)水NaSO吸水C.新舞的橘皮中含有大量的果蠟、果膠等，為了提高出油率，需用CaCO3K溶液浸泡D.玫瑰精油和橘皮精油都有很強(qiáng)的揮發(fā)性，易溶于有機(jī)溶劑，都不可能是菇類化合物【答案】Bt解析】橘皮易焦糊適宜用壓榨法提取，不能用蒸館法提取，A項(xiàng)車對(duì)吳口無(wú)水Na2s04可 以啜去玫瑰精油油層含有的水分,B項(xiàng)正確，新鮮的橘皮中含有大量的果帽、果膠等，如 果直接壓榨，出油率低，為了提高出油率，需用石灰水溶漫浸泡，C項(xiàng)錯(cuò)誤。大部分植物 芳香油的王要成分是菇類化合物及其衍生物，但橘皮精

8、油的主要成分是檸檬懦,D項(xiàng)錯(cuò)誤, 故選員2.（北京市朝陽(yáng)區(qū) 2017-2018學(xué)年度高三第一學(xué)期期末練習(xí)生物試題）豆豉是大豆經(jīng)過(guò)發(fā) 酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵效果的因素，某小組將等量的甲、乙兩菌種分 別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻，再將兩者置于適宜條件下進(jìn)行發(fā)酵，并定期取 樣觀測(cè)發(fā)酵效果。以下推測(cè)不合理的是（）A.該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種，溫度屬于無(wú)關(guān)變量B.大豆發(fā)酵過(guò)程中部分蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槎嚯模纬啥刽莫?dú)特風(fēng)味C.若容器內(nèi)上層大豆發(fā)酵效果優(yōu)于底層，則發(fā)酵菌為厭氧菌D.煮熟大豆使蛋白質(zhì)變性，有利于菌體分泌酶作用于蛋白質(zhì)【答案】C【解析】根據(jù)題干信息分析，該實(shí)驗(yàn)的自變量是菌種的種

9、類（甲乙兩種菌種），而溫度屬于無(wú)關(guān)變量，A正確；大豆發(fā)酵過(guò)程中部分蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槎嚯模纬啥刽?寺風(fēng)味，B正確；若容器內(nèi)上層大豆發(fā)酵效果優(yōu)于底層，說(shuō)明發(fā)酵菌為需氧型，C錯(cuò)誤；煮熟大豆使蛋白質(zhì)變性，有利于菌體分泌酶作用于蛋白質(zhì)，D正確。3 .(四川省廣安第二中學(xué)校 2019屆高三上學(xué)期第一次月考生物試題)關(guān)于豆腐乳的制作，不正確的說(shuō)法是()A.毛霉是參與腐乳制作的主要微生物B.傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)豆腐乳一般在夏天進(jìn)行C.現(xiàn)代食品企業(yè)是在無(wú)菌條件下接種毛霉生產(chǎn)豆腐乳D.鹽的濃度過(guò)低，可能導(dǎo)致豆腐乳腐敗變質(zhì)【答案】B【解析】參與豆腐發(fā)酵的微生物有青霉、酵母、曲霉、毛霉等多種，其中起主要作用的是毛霉，A正確；

10、豆腐上生長(zhǎng)毛霉的適宜溫度為1518C,因此傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)豆腐乳應(yīng)在春天或秋天，B錯(cuò)誤；現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種直接接種到豆腐上，這樣可避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量，C正確；加鹽和加酒都能抑制微生物的生長(zhǎng)，避免豆腐腐敗變質(zhì)，D正確。4 .(四川省成都市第七中學(xué) 2019屆高中畢業(yè)班零診模擬考試生物試題)無(wú)菌技術(shù)包括以下幾個(gè)方面的敘述，其中正確的是()A.紫外線照射前，適量噴灑石碳酸等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果B.高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零后，開(kāi)啟鍋蓋C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.在微生物接種白實(shí)驗(yàn)中，用95%酉精對(duì)實(shí)

11、驗(yàn)者的雙手和超凈工作臺(tái)進(jìn)行消毒【答案】A【解析】用紫外線照射 30min,可以殺死物體表面或空氣中的微生物，在照射前，適量噴灑石碳酸等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果，A正確；高壓滅菌加熱結(jié)束時(shí)，待壓力表指針回到零后，才能開(kāi)啟鍋蓋，不能打開(kāi)放氣閥使壓力表指針回到零，B錯(cuò)誤；為=了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌、冷卻后才可以快速挑取菌落，C錯(cuò)誤；在微生物接種的實(shí)驗(yàn)中，一般用75剛精對(duì)實(shí)驗(yàn)者的雙手進(jìn)行消毒，用紫外線照射30min對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行滅菌，D錯(cuò)誤。(5)含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶，其理由是 。【答案】(1)稀釋涂布平板法(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落(3)生成的乳酸與 CaCO反

12、應(yīng)生成乳酸鈣，周圍形成透明圈透明圈(4) pH過(guò)低抑制了乳酸菌的生長(zhǎng)(5)抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長(zhǎng)【解析】(1)微生物常見(jiàn)的接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法法，鑒別培養(yǎng)基中， 一般需要加入瓊脂作為凝固劑制成固體培養(yǎng)基，然后觀察所獲單菌落的特征。(2)微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無(wú)菌操作，將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具 都需要進(jìn)行滅菌。操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)灼燒滅菌。平板劃線法分離水樣中的乳酸菌，在第 二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次的末端開(kāi)始劃線。這樣做的目的是通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。(3)某同學(xué)在配制平板時(shí)加入CaCO,從而成功篩選

13、出高效產(chǎn)生乳酸的菌株，其篩選依據(jù)的原理是乳酸會(huì)與 CaCO反應(yīng)形成透明圈，透明圈直徑越大，產(chǎn)生乳酸能力越強(qiáng)。(4)發(fā)酵到后期時(shí)，酸奶含量繼續(xù)增加，當(dāng)達(dá)到1.2%以上時(shí)，發(fā)酵速度逐漸變緩甚至停止，主要原因是pH過(guò)低，乳酸桿菌生存環(huán)境過(guò)于惡劣，乳酸桿菌與環(huán)境斗爭(zhēng)處于劣勢(shì)而導(dǎo) 致其生命活動(dòng)(發(fā)酵)受到抑制。(5)抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長(zhǎng)，因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。12.(福建省廈門(mén)市廈門(mén)外國(guó)語(yǔ)學(xué)校2019屆高三1月月考生物試題)蘋(píng)果醋是以蘋(píng)果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的，回答下列問(wèn)題：(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如左圖所示。左圖中過(guò)程和是蘋(píng)果醋生產(chǎn)的第一階段，在酵母菌細(xì)胞的 中進(jìn)行，其產(chǎn)物乙

14、醇與 試劑反應(yīng)呈現(xiàn)為灰綠色，這一反應(yīng)可用于乙醇的檢驗(yàn)；過(guò)程在酵母菌細(xì)胞的 中進(jìn)行。(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，根據(jù)醋酸桿菌的呼吸作用類型，該過(guò)程需要在 條件下才能完成，右圖裝置中通過(guò) 控制此條件。(3)在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同，第一階段的溫度 (填“低于”或“高于”)第二階段。(4)左圖中，能釋放能量并生成 ATP的過(guò)程是 (填序號(hào))。右圖中的排氣口長(zhǎng)而 彎曲，目的是。【答案】(1)細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) 重銘酸鉀 線粒體(2)有氧 充氣口充氣(3)低于(4)防止空氣中微生物的污染【解析】(1)酵母菌無(wú)氧呼吸的產(chǎn)物是酒精和二氧化碳，無(wú)氧呼吸

15、在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中進(jìn)行， 檢測(cè)酒精用酸性重銘酸鉀溶液，反應(yīng)呈灰綠色，為有氧呼吸第二、三階段，在線粒體中 進(jìn)行。(2)果醋制作的第二階段是乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^(guò)程，醋酸菌是嚴(yán)格的好氧菌，故需要在有 氧條件下進(jìn)行醋酸發(fā)酵。右圖裝置中通過(guò)向充氣口充氣來(lái)控制有氧條件。(3)第一階段是果酒發(fā)酵，其適宜溫度是1825 C,第二階段是果醋發(fā)酵，其適宜溫度是3035C,因此在生產(chǎn)過(guò)程中，第一階段的溫度低于第二階段。(4)有氧呼吸三個(gè)階段均能產(chǎn)生ATP,而無(wú)氧呼吸只在第一階段產(chǎn)生ATP,左圖中為有氧呼吸過(guò)程，為無(wú)氧呼吸過(guò)程，其中為無(wú)氧呼吸的第二階段，不產(chǎn)生ATP,故左圖中，能釋放能量并生成 ATP的過(guò)程是。右圖中的排氣

16、口長(zhǎng)而彎曲，目的是防止空氣 中微生物的污染。13 .(吉林省長(zhǎng)春外國(guó)語(yǔ)學(xué)校 2019屆高三上學(xué)期期中考試生物試題)回答下列有關(guān)提取植 物有效成分的問(wèn)題：(1)薄荷油具有易揮發(fā)、難溶于水等性質(zhì)，因此適合選用 法來(lái)提取。 收集到的液體冷卻后加入氯化鈉的目的是 ,然后加入無(wú)水硫酸鈉除去 殘留的水分。(2)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是 。對(duì)胡蘿卜進(jìn)行粉碎、干 燥時(shí)，要特別注意干燥的 和時(shí)間，以防止胡蘿卜焦糊。提取過(guò)程中 宜采用 方式加熱，以保障安全。(3)為了提高胡蘿卜汁的澄清度，需要加入果膠酶，該酶往往從某些微生物中提取。一般 來(lái)講，篩選微生物時(shí)常用的接種方法有 、,該 過(guò)程用到的培養(yǎng)基從功能

17、上講，屬于 培養(yǎng)基。【答案】(1)水蒸氣蒸儲(chǔ)促進(jìn)油水分層(2)萃取法溫度 水浴(3)平板劃線法稀釋涂布平板法選擇【解析】(D蒲荷油具有易揮發(fā)、難溶于水等性質(zhì)j因此適合選用蒸tgi去來(lái)提取。收集到 的液體冷卻后加入氯化鈉的目的是促進(jìn)油水分層，然后加入無(wú)水硫酸鈉除去殘留的水分。3)胡蘿I、素易滋于有機(jī)謖劑，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的方法是萃取法。對(duì)胡蘿卜 進(jìn)行粉碎、干燥時(shí)，要特別注意干燥的溫度和時(shí)間，以防止胡蘿卜席fib有機(jī)溶劑都易于 燃燒，所以提取過(guò)程卬宜采用水浴方式加熱，以保障安全“一般來(lái)講j篩選微生物時(shí)常用的接種方法有平板劃線法、腕涂布平板法,該過(guò)程用 到的培養(yǎng)是從功能上講屬干選擇培養(yǎng)基，

18、14 .(江蘇省海安高級(jí)中學(xué) 2019屆高三上學(xué)期第二次月考生物試題)鮮牛奶容易被金黃色葡萄球菌污染，該菌高度耐鹽，可引起人類肺炎等疾病。在血平板(培養(yǎng)基中添加適量血 液)上生長(zhǎng)時(shí)，可破壞菌落周圍的紅細(xì)胞，使其褪色。下圖為檢測(cè)鮮牛奶是否被金黃色葡 萄球菌污染的操作流程，請(qǐng)據(jù)圖回答:(1)鮮牛奶經(jīng)乳酸桿菌發(fā)酵可制成酸奶，在酸奶發(fā)酵過(guò)程中需控制的氣體條件是 (2)用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是 。經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù) 實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn) 的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。從功能 上分類，血平板屬于 培養(yǎng)基。(3)在3個(gè)血平板上各接種稀釋倍數(shù)為 103的菌液樣品0.1mL

19、,培養(yǎng)一段時(shí)間后平板上的 菌落數(shù)分別為38、46、54,則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為 。這一數(shù)值與實(shí)際值相 比可能。(4)分離純化微生物時(shí)，除了圖中接種方法，還常用平板劃線法。若要在五個(gè)區(qū)域劃線， 共需灼燒接種環(huán) 次，最后一次灼燒滅菌的目的是 。【答案】(1)無(wú)氧(隔絕空氣)(2)篩選出金黃色葡萄球菌(增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量，同時(shí)抑制其它微生物生長(zhǎng))周圍存在透明圈(無(wú)色、紅色消褪)鑒別(3) 4.6 X 108小(4) 6防止污染環(huán)境和感染操作者【解析】(1)乳酸桿菌為厭氧菌，鮮牛奶經(jīng)乳酸桿菌發(fā)酵可制成酸奶，在酸奶發(fā)酵過(guò)程中需控制的氣體條件是無(wú)氧(隔絕空氣)。(2)用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)的主要目的是篩選出金黃色葡萄球菌(增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量，同時(shí)抑制其它微生物生長(zhǎng))。經(jīng)多次規(guī)范操作、重復(fù)實(shí)驗(yàn)，血平板上均出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌。從功能上分類，血平板屬于鑒別培養(yǎng)基。(3)在3個(gè)血平板上各接種稀釋倍數(shù)為103的菌液樣品0.1mL,培養(yǎng)一段時(shí)間后平板上的菌落數(shù)分別為 38、46、54,則每升原菌液樣品中細(xì)菌數(shù)為 (38+46+54) +3X 103X 103X 10=4.68人X 10 個(gè)。(4)分離純化微生物時(shí)，除了圖中接種方法，還常用平板劃線法。若要在五個(gè)區(qū)域劃線，共需灼燒接種環(huán)6次，最后一次灼燒