1、PET無菌線驗證培訓內容無菌線驗證培訓內容講課人：王有才講課人：王有才日期日期 ：201510092022-3-15一、無菌線驗證步驟一、無菌線驗證步驟二、無菌線二、無菌線CCP點管控點管控2022-3-15一、一、無菌線驗證步驟無菌線驗證步驟1、設備點檢及輔助系統測試：（1）設備點檢是確認現場實物與工藝流程圖上所有標識完全吻合（含管路設備，閥門，表盤等），如下圖2022-3-152022-3-15（2）輔助系統測試是各個單元能夠獨立完成自我工段的實現并聯動，出現異常能夠自動化處理。1CIP/COP/SIP/SOP單元能夠運行并保證設定參數能夠達到。當運行過程中出現異常（如濃度低于下限），程序

2、能夠自動停止并重新制備并重新計時。2無菌水單元能夠運行并制備達到無菌狀態的沖洗水，保證殺菌溫度，流量，回流量和背壓等。當無菌狀態失去時，能夠自動化處理（灌裝機立馬停機，對沖洗區做SOP并重新制備）。2022-3-15 3PAA單元能夠運行并制備符合設定參數的殺菌藥劑，如溫度，濃度，背壓和流量等。藥劑檢測需要人工滴定后將結果數值輸入程序，由設備自行調節。4無菌空氣氮氣能運行并提供符合設定參數的無菌氣體。壓力？5蒸汽障能保證閥門動作時的無菌狀態，應設定溫度預警程序，低于設定值失去無菌即需重新建立無菌系統。6正壓罩單元能夠保證各區壓差，塵埃粒子和風機檢漏。出現異常即需重新建立無菌環境。2022-3-

3、152、塵埃粒子檢測和煙霧測試、塵埃粒子檢測和煙霧測試（1）塵埃粒子檢測：高效過濾器安裝后，用塵埃粒子計數器對每一塊過濾器、過濾器和設備連接處進行檢漏（以0.3u大小計， 為0）（2）煙霧測試：驗證正壓罩各區域壓差是否正常？在模擬正常生產狀態下，從壓力最高的區域使用煙霧發生器發散煙霧。觀察煙霧流動方向。按照工藝參數設定值：罐裝區封蓋區沖洗區殺菌區出/入口2022-3-153、染色測試、染色測試 ：驗證COP清洗效果（1）染色試劑的配制：52g可溶性淀粉，2g胭脂紅用2L蒸餾水，混合煮沸，冷卻后使用。（2）用噴壺在正壓罩、手套、洗瓶、充填、封蓋區域任意噴灑。（3）靜置30分鐘（4）啟動COP觀察

4、清洗效果2022-3-154、正壓罩環境測試、正壓罩環境測試 ：經過正常的CIP/COP/SIP/SOP后，對 空間進行落菌、浮游菌的采集、涂抹、塵埃粒子的檢測。（1）落菌：在灌裝區、封蓋區、洗瓶區共放置10個培養皿，1小時后用操作手套取樣（2）浮游菌：每個區域一個點，抽氣量1000L（3）涂抹：用操作手冊在灌裝、封蓋、洗瓶區共涂抹10個點，每個棉簽涂抹面積10cm2（如果涂抹充填頭、洗瓶噴頭和殺菌噴頭，至少每個棉簽5個噴頭）。（4）塵埃粒子：每個區域1個點2022-3-155、貼片測試、貼片測試 ：驗證SOP空間效果（1）準備鋼片50片，尺寸3*5cm 。表面粗糙程度盡量接近設備表面（2）將

5、枯草芽孢桿菌接種于鋼片上，盡量在鋼片中間位置：105 和106各25片。（3）鋼片風干后，準備測試。先低后高（4）按照圖紙上標記位置進行懸掛鋼片（5）啟動COP/SOP，結束后按標號取下放入裝有無菌水的盒子里。膜過濾后培養48小時記錄殘留菌量。2022-3-152022-3-156、瓶內、瓶內/外，蓋內外，蓋內/外挑戰測試：外挑戰測試：驗證SOP包材殺菌效果（1）準備空瓶260只以上（2）用枯草芽孢桿菌接種： 105 和106各130片以上。接種位置按照不同瓶型來定。盡量接種到凹凸不平不易殺菌的地方。（3）空瓶正常風干后，準備測試。先低后高順序。系統必須先做好CIP/COP/SIP/SOP，無

6、菌罐內準備好無菌水（4）生產狀態，放入樣品（標記第一瓶）在出口取樣（5）對灌裝好的樣品膜過濾，培養48小時觀察殘留量（6）蓋子測試同上2022-3-157、培養基預測試：、培養基預測試：系統無菌能力測試（1）培養基配方，調配好后經過UHT 138*32S殺菌后存于大無菌罐中（2）系統在正常的CIP/COP/SIP/SOP后，進行培養基灌裝（以標準生產條件、最高生產速度），開機灌裝5000瓶（半瓶）、第24小時再灌裝5000瓶（半瓶）2022-3-15 第48小時再灌裝5000瓶（半瓶）；共計15000瓶。維持待機狀態期間，每4小時做一次短SOP（3）產品放入30-35條件下保溫，第7天、14天

7、打撿。2022-3-158、培養基測試：、培養基測試：系統無菌能力測試（1）培養基配方，調配好后經過UHT 138*32S殺菌后存于大無菌罐中。（2）系統在正常的CIP/COP/SIP/SOP后，進行培養基灌裝（以標準生產條件、最高生產速度），開機灌裝5000瓶、第24小時再灌裝5000瓶、48小時后灌裝8000瓶；第72小時灌裝10000瓶，依次打開洗瓶、充填、封蓋三個區域的安全窗各1分鐘，進行短SOP后繼續灌裝，灌裝2000瓶，總計30000瓶。全部為半瓶量灌裝，待機時每4小時做一次短SOP。2022-3-15 （3）產品放入30-35條件下保溫，第7天、14天打撿。2022-3-152022-3-15二、二、無菌線無菌線CCP點管控點管控 按照灌裝工藝流程按照灌裝工藝流程 灌裝機：灌裝機：正壓罩壓差：灌裝區洗瓶/蓋區殺菌區入/出口區殺菌單元：藥劑濃度？溫度？流量？無菌水單元：殺菌溫度？流量？冷卻溫度？灌裝：灌裝溫度