1、膚癢顆粒的質量控制研究(1)                   作者：吳和珍,宋愛華,楊艷芳,施 峰,劉焱文【摘要】  目的 建立膚癢顆粒的定性定量檢測方法。方法 采用薄層色譜法鑒別膚癢顆粒中地膚子、白英,高效液相色譜法測定紅花中羥基紅花黃色素A的含量。使用C18色譜柱,流動相為甲醇-乙腈-0.7%磷酸(24670),檢測波長為403 nm。結果 定性方法能夠檢出地膚子、白英；羥基紅花黃色素A在0.128

2、1.024 g范圍內與峰面積呈良好的線性關系,r0.999 8,平均回收率為99.52%,RSD1.97%(n5)。結論 該方法可作為膚癢顆粒的定性、定量檢測方法。 【關鍵詞】  膚癢顆粒；薄層色譜法；高效液相色譜法；羥基紅花黃色素A    Abstract：Objective To establish the qualitative and quantitative detective methods of Fuyang granules. Methods The TLC methods for identification of Fructus ko

3、chiae and Herba solani lyrati were established. A simple HPLC was established for the determination of hydroxysafflor A (HYSA). The mobile phase was methanol-acetonitrile-0.7% phosphoric acid (24670). UV detecting wavelength was at 403 nm. Results Fructus kochiae and Herba solani lyrati could be ide

4、ntified by TLC. HYSA showed a linear relationship at the concentration range of 0.1281.024 g, r0.999 8. The average recovery was 99.52% and RSD1.97% (n5). Conclusion The method can be used for qualitative identification and quantization determination of Fuyang granules.    Key words：F

5、uyang granules；TLC；HPLC；hydroxysafflor A     膚癢顆粒收載于中華人民共和國衛生部藥品標準·中藥成方制劑1,由紅花、地膚子、白英、蒼耳子、川芎5味中藥組成,具有祛風活血、除濕止癢的功效,臨床用于皮膚瘙癢癥,濕疹,蕁麻疹等瘙癢性皮膚病。原質量標準中只有2個理化鑒別,無薄層定性和含量測定方法。為了更好地控制制劑的內在質量,本試驗對其定性、含量測定方法進行了探索。1  儀器與試藥   Agilent 1100高效液相色譜儀,G1314A紫外檢測器。水為重蒸餾水,所用試劑均為分析純

6、。地膚子對照藥材、齊墩果酸對照品、羥基紅花黃色素A(hydroxysafflor A,HYSA)對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供。白英對照藥材購自湖北省中藥材公司,經湖北中醫學院藥學院鑒定教研室鑒定。膚癢顆粒由湖北東信藥業有限公司提供。2  方法與結果2.1  定性鑒別取本品4.0 g,研細,加乙醇40 mL,超聲處理5 min,濾過,濾液加鹽酸3.0 mL,加熱回流2 h,溶液放至室溫后,濾過,濾液于水浴上揮去乙醇至干,殘渣加水20 mL使溶解,轉移至分液漏斗中,以石油醚(6090 )萃取2次,每次15 mL,合并石油醚提取液,置水浴上揮干,殘渣加乙醇1 mL溶解,作

7、為供試品溶液。另取地膚子對照藥材1 g,加甲醇20 mL,超聲處理5 min,濾過,加鹽酸1.5 mL,加熱回流2 h,放至室溫后,濾過,于水浴上揮去乙醇至干,殘渣加水10 mL使溶解,溶液轉移至分液漏斗中,以石油醚(6090 )萃取2次,每次10 mL,合并石油醚提取液,置水浴上揮干,殘渣加乙醇1 mL溶解,作為對照藥材溶液。再取齊墩果酸對照品適量,以乙醇溶解,制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取上述3種溶液各10 L,分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以石油醚-三氯甲烷-丙酮(52

8、2)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,于105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材及對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。經3批樣品及陰性對照試驗,結果陰性無干擾。取本品6.0 g,加乙醇50 mL,加熱回流30 min,放冷,濾過,濾液回收乙醇至干,殘渣加水20 mL使溶解,溶液轉移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃取2次,每次15 mL,合并乙酸乙酯提取液,置蒸發皿中蒸干,殘渣加甲醇1 mL溶解,作為供試品溶液。取白英對照藥材2.0 g,加乙醇20 mL,加熱回流30 min,放至室溫,濾過,濾液置水浴上揮干,殘渣加水10 mL溶解,轉移至分液漏斗中,以乙酸乙酯萃

9、取2次,每次10 mL,合并乙酸乙酯提取液,置水浴上揮干,殘渣加甲醇2.0 mL使溶解,作為對照藥材溶液。照薄層色譜法2005年版中華人民共和國藥典(一部)附錄B試驗,吸取上述兩種溶液各10 L,分別點于同一以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯(51)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,于105 加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。經3批樣品及陰性對照試驗,結果陰性無干擾。2.2  含量測定色譜柱：Alltima C18柱(5 m,250 mm×4.6 mm)；流動相：甲醇-乙腈

10、-0.7%磷酸溶液(24670)；檢測波長：403 nm；柱溫：25 ；流速：1.0 mL/min；理論塔板數按HYSA峰計算應不低于3 000,陰性對照無干擾。在上述條件下,HYSA的保留時間約為11 min(見圖1)。本篇論文由網友投稿，讀書人只給大家提供一個交流平臺，請大家參考，如有版權問題請聯系我們盡快處理。取本品顆粒1袋,精密稱定,混勻,研碎,取約2 g,精密稱定,置25 mL量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取本品水溶液5 mL,置50 mL量瓶中,以甲醇稀釋至刻度,濾過,取續濾液25 mL,置蒸發皿中揮去甲醇至干,殘渣以25%的甲醇溶解并轉移至5 mL量瓶中,以25%的甲

11、醇溶液稀釋至刻度,搖勻,即得。取處方量1/10的藥材(缺紅花),置1 000 mL燒瓶中,按生產工藝加水提取2次,合并提取液,靜置8 h,取上清液濃縮至適量體積,轉移至100 mL量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,取溶液2 mL置25 mL量瓶中,加入糊精0.5 g,蔗糖粉1.5 g,照供試品溶液制備方法制備,即得。精密稱取HYSA對照品6.40 mg,置50 mL量瓶中,加25%甲醇溶解并稀釋至刻度,制成每1 mL含HYSA 0.128 mg的溶液作為儲備液。精密吸取儲備液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL置1 mL量瓶中,加25%甲醇稀釋至刻度,制成每1 mL分別含HYSA 0.01

12、2 8、0.025 6、0.051 2、0.076 8、0.102 4 mg的溶液。精密吸取上述溶液各10 L,注入高效液相色譜儀,測定。以峰面積為橫坐標,HYSA的量(g)為縱坐標,繪制標準曲線。線形回歸方程為：Y-2 165.1X23.921,r0.999 8。HYSA在0.1281.024 g范圍內與峰面積呈良好的線性關系。取本品同一供試品溶液,分別于制備后放置0、1、2、4、8、12 h,精密吸取20 L,注入高效液相色譜儀,測定,計算HYSA含量,HYSA含量相對標準偏差小于2.0%,表明供試品溶液在制備后12 h內測定基本穩定。精密稱取本品同一批樣品5份,按正文含量測定項下方法進行

13、測定,結果HYSA含量標準偏差小于2.0%,表明本方法重現性良好。    根據以上10批樣品測定結果,依據中藥新藥研究技術要求暫擬定本供試品每袋含紅花以HYSA(C27H30O15)計,應不少于3.5 mg。3  討論    本研究參照中華人民共和國衛生部藥品標準·中藥成方制劑“膚癢沖劑”質量標準1擬定,采用TLC法對制劑中的地膚子、白英進行鑒別,選擇的制樣方法及展開劑具有分離度好、重復性好、專屬性強的特點。    含量測定以紅花中HYSA為指標成分,采用高效液相色譜法進行含量測定。其方法的建立,參照200