1、第一章概論 首頁習 題習題參考答案習 題名詞解釋簡答題一、名詞解釋1. 靈敏度2. 誤差3. 噪音4. 最小檢測量5. 精度6. 可靠性7. 重復性8. 分辨率9. 測量范圍10. 線性范圍11. 響應時間12. 頻率響應范圍二、簡答題1.學習臨床檢驗儀器學課程的目的是什么？2.學習臨床檢驗儀器學課程的基本要求是什么？3.臨床檢驗儀器具有哪些特點？4.通常臨床檢驗儀器的分類是從哪兩個方面進行的？5.簡述臨床檢驗儀器的發展趨勢。6 臨床檢驗儀器常用的性能指標有哪些？7.臨床檢驗儀器有哪些主要部件？8.臨床檢驗儀器的維護應從哪幾個方面考慮？9.根據哪些標準選用臨床檢驗儀器？10.顯示裝置有何功能？

2、11.補償裝置有什么作用？49812.樣品前處理系統的工作任務是什么？習題 參 考 答案一、名詞解釋：1.靈敏度： 檢驗儀器在穩態下輸出量變化與輸入量變化之比，即檢驗儀器對單位濃度或質量的被檢物質通過檢測器時所產生的響應信號值變化大小的反應能力，它反映儀器能夠檢測的最小被測量。2.誤差： 當對某物理量進行檢測時，所測得的數值與標稱值(即真值)之間的差異稱為誤差，誤差的大小反映了測量值對真值的偏離程度。3. 噪音： 檢測儀器在沒有加入被檢驗物品(即輸入為零)時，儀器輸出信號的波動或變化范圍即為噪音。4.最小檢測量： 檢測儀器能確切反映的最小物質含量。最小檢測量也可以用含量所轉換的物理量來表示。如

3、含量轉換成電阻的變化，此時最小檢測量就可以說成是能確切反應的最小電阻量的變化量了。5.精度： 對檢測可靠度或檢測結果可靠度的一種評價，是指檢測值偏離真值的程度。精度是一個定性的概念，其高低是用誤差來衡量的，誤差大則精度低，誤差小則精度高。6.可靠性： 儀器在規定的時期內及在保持其運行指標不超限的情況下執行其功能的能力。它是反映儀器是否耐用的一項綜合指標。7.重復性： 在同一檢測方法和檢測條件(儀器、設備、檢測者、環境條件)下，在一個不太長的時間間隔內，連續多次檢測同一參數，所得到的數據的分散程度。重復性與精密度密切相關，重復性反映一臺設備固 有誤差的精密度。8.分辨率： 儀器設備能感覺、識別或

4、探測的輸入量(或能產生、能響應的輸出量)的最小值。9.測量范圍：在允許誤差極限內儀器所能測出的被檢測值的范圍。10.線性范圍： 輸入與輸出成正比例的范圍。也就是反應曲線呈直線的那一段所對應的物質含量范圍。11.響應時間： 表示從被檢測量發生變化到儀器給出正確示值所經歷的時間。12.頻率響應范圍： 為了獲得足夠精度的輸出響應，儀器所允許的輸入信號的頻率范圍。二、簡答題：1. 學習臨床檢驗儀器學課程的目的是什么？ 答:培養和提高醫學院校相關專業的各層次學生、實驗室工作人員熟練掌握和使用各類現代化檢驗儀器，使之在疾病的診斷和治療中發揮最佳的效能，成為相當急迫，重要的任務。因此，使各層次學生 和相關工

5、作人員了解和掌握名目繁多的檢驗儀器的性能質量，掌握各種常用檢驗儀器的工作原理、分類 結構、技術指標、使用方法、常見故障的排除、臨床檢驗儀器中的計算機技術，關注其發展趨勢及特點， 以使有限的儀器得到綜合應用,為他們更好地從事臨床檢驗工作打下堅實的基礎，這就是學習臨床檢 驗儀器學課程的目的。2. 學習臨床檢驗儀器學課程的基本要求是什么？答: 學習臨床檢驗儀器學課程的基本要求是：掌握主要臨床檢驗儀器的基本概念和基本工作 原理、儀器的基本結構，掌握各類儀器的主要系統、構成部件及其功能，掌握儀器的主要應用及常見故 障的排除。3. 臨床檢驗儀器具有哪些特點？ 答：臨床檢驗儀器具有以下特點：結構復雜、涉及的

6、技術領域廣、技術先進、精度高、對使用環境要求嚴格。4. 通常臨床檢驗儀器的分類是從哪兩個方面進行的？ 答：通常以臨床檢驗的方法為主對臨床檢驗儀器進行分類或以檢驗儀器的工作原理為主對臨床檢驗儀器進行分類。5. 簡述臨床檢驗儀器的發展趨勢。 答：由計算機技術和通信技術相結合而發展的計算機網絡，形成了多用戶共享高精度、高速度、多功能、高可靠性的檢驗儀器；臨床檢驗儀器正朝著集大型機的處理能力和小型機的應變能力于一身，超 小型、多功能、低價格、更新換代頻繁、床邊和家庭型的方向邁進；模塊式設計形成一個高質量多功能 的檢驗系統，實現了一機多用；生物傳感器和芯片的應用將使檢驗儀器小型化，靈活多用，相應的檢驗

7、儀器正在不斷出現和發展；專家系統技術更趨完善，使臨床檢驗儀器具有更高級的智能;儀器更機器人 化；自動化水平更高。檢驗結果標準化；儀器更個性化；儀器小型便攜化。6. 臨床檢驗儀器常用的性能指標有哪些？答：一個優良的檢驗儀器應具有的性能指標有：靈敏度好、精度高；噪音、誤差??；分辨率高，可 靠性、重復性好；響應迅速；線性范圍寬和穩定性好。7. 臨床檢驗儀器有哪些主要部件？3答：通常，臨床檢驗儀器有取樣裝置、預處理系統、分離裝置、檢測器、信號處理系統、顯示裝置、 補償裝置、輔助裝置、樣品前處理系統等主要部件。8. 臨床檢驗儀器的維護應從哪幾個方面考慮？ 答：使用前，操作人員應認真閱讀儀器操作說明書，熟

8、悉儀器性能，嚴格按照操作規程掌握正確的使用方法，才能使儀器始終保持在良好運行狀態；應該有一個符合檢驗儀器使用標準的環境；應有良 好的供電以保證檢驗儀器的精度和穩定性；應當按照儀器說明書提供的方法和標準(圖譜)對儀器定期進 行校驗；應該認真做好儀器的工作記錄。9. 根據哪些標準選用臨床檢驗儀器？答：要求儀器的精度等級高、應用范圍廣、檢測范圍寬、穩定性好、靈敏度高、噪音小、響應時間 短等；要求儀器的檢測速度快、檢測參數多，結果準確可靠，可靠性好；用戶操作程序界面全中文顯示， 操作簡便，快捷；有國內生產的配套試劑盒供應；器不失效的性能、壽命、可維修性和儀器的保存性能 好，如儀器的裝配合理、材料先進、

9、采用標準件及同類產品通用零部件的程度高，售后維修服務好等。 能充分體現高效益、低成本。10. 顯示裝置有何功能？ 答：顯示裝置的功能就是把檢測結果顯示出來。一般有模擬顯示和數字顯示兩種。11. 補償裝置有什么作用？ 答：補償裝置的作用是消除或降低客觀條件或樣品的狀態對檢測的影響，特別是樣品的溫度，環境的壓力、溫度的波動對檢測結果的影響。12. 樣品前處理系統的工作任務是什么？ 答：樣品前處理系統的工作任務是將標本分類、離心、分裝、編排、運送、存儲等，不僅用于生化分 析的樣品處理，還可以用于免疫/血清、血液常規分析和尿液分析等各種標本的樣品的分類和運送第二章顯微鏡技術和顯微鏡首頁習題習題參考答案

10、習題名詞解釋選擇題簡答題一、名詞解釋1光學顯微鏡2熒光顯微鏡3、相襯顯微鏡4暗視野顯微鏡5偏光顯微鏡6激光掃描共聚焦顯微鏡7倒置顯微鏡8紫外光顯微鏡9電子顯微鏡10透射電子顯微鏡11掃描電子顯微鏡12超高壓電子顯微鏡13掃描隧道電子顯微鏡14分辨率15放大率16數值孔徑17顯微攝影術18景深與焦長19視野20. 齊焦21像差22色差二、選擇題【A 型題】在五個選項中選出一個最符合題意的答案（最佳答案）。1在光學顯微鏡下所觀察到的細胞結構稱為()1A顯微結構 B超微結構 C亞顯微結構 D分子結構 E微細結構2研究細胞的亞顯微結構一般利用()A顯微鏡技術 B電子顯微鏡技術 C放射自顯影技術 D離心

11、技術 E共焦激光掃描顯微鏡技術3研究組織或細胞顯微結構的主要技術是() A顯微鏡技術B電鏡技術 C離心技術 D電泳技術 E放射自顯影技術4分離細胞內不同細胞器的主要技術是()A，顯微鏡技術 B電鏡技術 C離心技術 D電泳技術 E放射自顯影技術5用顯微鏡觀察細胞時，應選擇下列哪種目鏡和物鏡的組合在視野內所看到的細胞數目最多() A目鏡 10×，物鏡 4×B目鏡 10×，物鏡 10× C目鏡 10×，物鏡 20× D目鏡 10×，物鏡 40× E目鏡 15×，物鏡 40×6在物鏡里增加一個相位板和在

12、聚光鏡上增加一個環形光闌的顯微鏡是()A透射電鏡 B掃描電鏡 C熒光顯微鏡 D暗視野顯微鏡2E相襯顯微鏡7關于光學顯微鏡，下列有誤的是() A是采用日光作光源，將微小物體形成放大影像的儀器 B細菌和線粒體是光鏡能清晰可見的最小物體 C由光學系統、機械裝置和照明系統三部分組成 D可用于觀察細胞的顯微結構 E光學顯微鏡的分辨率由目鏡決定8關于光學顯微鏡的使用，下列有誤的是()A用顯微鏡觀察標本時，應雙眼同睜 B按照從低倍鏡到高倍鏡再到油鏡的順序進行標本的觀察 C使用油鏡時，需在標本上滴上鏡油 D使用油鏡時，需將聚光器降至最低，光圈關至最小 E使用油鏡時，不可一邊在目鏡中觀察，一邊上升載物臺9適于觀

13、察細胞復雜網絡如內質網膜系統、細胞骨架系統的三維結構的顯微鏡是() A普通光學顯微鏡B熒光顯微鏡 C相襯顯微鏡 D激光掃描共聚焦顯微鏡 E暗視野顯微鏡10關于激光掃描共聚焦顯微鏡，下列有誤的是()A以單色激光作為光源 B激光變成點光源后聚焦到標本成為點照明C點光源激光束在標本的整個焦平面進行光點掃描后在熒光屏上成像 D圖像信息要經電腦三維重建處理E所用標本須經超薄切片11下面對透射電鏡描述不正確的是() A利用泛光式電子束和透射電子成像 B觀察細胞內部超微結構C發展最早D性能最完善 E景深長、圖像立體感強12主要用于觀察活細胞中有規則的纖維結構如紡錘絲、染色體以及纖維絲等構造的光學顯微鏡是()

14、A熒光顯微鏡 B相襯顯微鏡3C普通顯微鏡 D暗視野顯微鏡 E偏振光顯微鏡13關于相襯顯微鏡，下列有誤的是()A利用了光的衍射和干涉特性 B可使相位差變成振幅差 C所觀察的標本要經固定處理 D一般使用高壓汞燈作光源 E裝有環形光闌、相位板等部件14光學顯微鏡的分辨率(最小分辨距離)是() A0.1µmB0.2µm C0.3µm D0.4µm E0.5µm15關于光學顯微鏡的分辨率，下列有誤的是()A是光學顯微鏡的主要性能指標 B也可稱為分辨本領 C與照明光的波長成反比 D指分辨出標本上兩點間最小距離的能力 E顯微鏡的分辨率由物鏡決定16分別使用光

15、鏡的低倍鏡和高倍鏡觀察同一細胞標本相，可發現在低倍鏡下()A相較小、視野較暗 B相較小、視野較亮 C相較大、視野較暗 D相較大、視野較亮 E相及視野的亮度均不改變17適于觀察小細胞或細胞群體復雜而精細的表面或斷面的立體形態與結構的顯微鏡是() A普通光學顯微鏡B熒光顯微鏡 C相差顯微鏡 D掃描電子顯微鏡 E透射電鏡18適于觀察細胞內超微結構的顯微鏡是()4A透射電鏡 B普通光學顯微鏡 C熒光顯微鏡 D相差顯微鏡 E暗視野顯微鏡19關于熒光顯微鏡，下列哪項有誤()A其光源通常為高壓汞燈或氙燈 B必需裝備為激發濾片和壓制濾片 C根據光化熒光的原理設計制造的 D可用于觀察固定細胞和活細胞 E使用時應

16、在較明亮的環境中進行20關于電子顯微鏡，下列哪項有誤()A 組織或細胞觀察前均需經超薄切片 B分為透射式和掃描式兩大類 C分辨率可達 0.3nm D利用電子束作照明源 E在熒光屏上成像21下列哪種顯微鏡需將標本進行超薄切片并經醋酸鈾等染料染色后才能觀察()A掃描式電子顯微鏡 B透射式電子顯微鏡 C掃描隧道顯微鏡 D熒光顯微鏡 E相差顯微鏡22電子散射少、對樣品損傷小、可用于觀察活細胞的電子顯微鏡是() A普通透射電鏡B普通掃描電鏡 C超高壓電鏡 D掃描透射電鏡 E掃描隧道顯微鏡23關于透射式電鏡，下列哪項敘述是錯誤的()A由德國科學家 Ruska 等發明 B以電子束作為光源 C電子透過標本后在

17、熒光屏上成像 D分辨率較高5E適于觀察細胞的外觀形貌24關于掃描式電鏡，下列哪項有誤() A 20 世紀 60 年代才正式問世 B景深長，成像具有強烈立體感C電子掃描標本使之產生二次電子，經收集放大后成像 D標本無需經超薄切片即可觀察 E適于觀察細胞的內部構造25適于觀察細胞表面及斷面超微結構三維圖像的儀器是()A普通光鏡 B熒光顯微鏡 C相差光鏡 D掃描電鏡 E透射電鏡26適于觀察培養瓶中活細胞的顯微鏡是() A透射電鏡B掃描電鏡 C熒光顯微鏡 D倒置顯微鏡 E相差顯微鏡27要將視野內的物像從右側移到中央，應向哪個方向移動標本()A左側 B右側 C上方 D下方 E以上都可以28當顯微鏡的目鏡

18、為 10X，物鏡為 10X 時，在視野直徑范圍內看到一行相連的 8 個細胞。若目鏡不變， 物鏡換成 40X 時，則在視野中可看到這行細胞中的()A2 個 B4 個 C16 個 D32 個 E64 個29收集轟擊樣品所產生的二次電子經轉換放大后在熒屏上成像的顯微鏡是() A透射電鏡6B掃描電鏡 C熒光顯微鏡 D倒置顯微鏡 E相差顯微鏡30下列哪種組成不是熒光顯微鏡的結構元件() A激發光源B二組濾光片 C二色鏡 D聚光鏡 E環形光闌31用于透射電鏡的超薄切片厚度通常為()A50 nm 100nm B0.2m C10mD2nmE100m32人們需要觀察立體感很強的細胞內的三度（維）空間的微細結構，

19、需要()技術 A光鏡技術B透射電鏡 C掃描電鏡 D超高壓透射電鏡 E免疫熒光鏡技術33用熒光染料標記的抗體處理細胞后在熒光顯微鏡下對細胞中特殊分子進行定位屬于()A放射自顯影技術 B免疫熒光顯微鏡技術 C免疫電鏡技術 D液相雜交技術 E原位雜交技術34關于超薄切片，下列()有誤A厚度在 50nm100nm 的切片稱為超薄切片 B通過超薄切片可將一個細胞切成 100 片200 片 C制備超薄切片需使用專門的器械超薄切片機 D超薄切片常用玻璃制成的刀切成 E組織細胞樣品被切片之前常需雙重固定但無需包埋735關于掃描隧道顯微鏡(STM)，下列()敘述錯誤ASTM 是 IBM 蘇黎世實驗室的 Binn

20、ig 等人在 1981 年發明的 B為掃描探針顯微鏡的一種，具有高分辨本領 C僅可在真空條件下工作 D依靠一極細的金屬針尖在標本表面掃描來探測標本的形貌 E可直接觀察到 DNA、RNA 和蛋白等生物大分子36落射式熒光顯微鏡的吸收濾片應安裝在() A激發濾片與分色鏡之間 B物鏡與分色鏡之間 C光源與激發濾片之間 D分色鏡與目鏡之間E物鏡與載玻片之間37下面哪一種措施與提高顯微鏡分辨能力無關() A使用波長較短的光源B使用折射率高的介質C擴大物鏡直徑 D使用放大倍率較高的目鏡 E提高分辨本領38.透射電鏡的反差取決于樣品對()的散射能力 A二次電子B入射電子 C樣品質量厚度 D樣品重量 E樣品性

21、質39某學生在顯微鏡下觀察標本切片，當轉動細調節螺旋時，有一部分細胞看得清晰，另一部分細胞較模糊，這是由于() A反光鏡未調節好 B標本切得厚薄不均 C細調節螺旋未調節好 D顯微鏡物鏡損壞 E聚光鏡光圈大小不適合40僅僅反映固體樣品表面形貌信息的物理信號是()A背散射電子 B二次電子8C吸收電子 D透射電子 E俄歇電子41如圖所示，1、2 為物鏡長度，3、4 為目鏡長度，5、6 為觀察時物鏡與標本切片間距離，哪種組合情況下，顯微鏡的放大倍數最大()123456A1、3、5B2、4、6C2、3、5D2、4、5E2、3、442在光學顯微鏡下，觀察透明的、染色較淺的細胞時，必須注意做到() A把光圈

22、縮小一些，使視野暗一些B把光圈開大一些，使視野暗一些C把光圈縮小一些，使視野亮一些 D把光圈開大一些，使視野亮一些 E以上全不是43在普通光學顯微鏡下，一個細小物體若被顯微鏡放大 50 倍，這里“被放大 50 倍”是指該細小物體的() A體積B表面積C像的面積 D長度或寬度 E像的長度或寬度44電子槍產生的電子是()A入射電子 B透射電子 C彈性散射電子 D二次電子 E俄歇電子945用來顯示組織和細胞的內部超微結構像的電子為() A入射電子B透射電子 C彈性散射電子 D二次電子 E吸收電子46下面哪種電鏡可以在觀察結構的同時，對組織細胞內的元素成分進行分析() A透射電鏡B掃描電鏡 C掃描隧道

23、顯微鏡 D超高壓透射電鏡 E原子力顯微鏡47下面哪項不是超高壓電子顯微鏡的優點()A可用于觀察厚切片 B可以提高分辨率 C可提高圖像質量 D結構復雜 E減少輻射損傷范圍48電子槍由()組成 A陰極、陽極 B陰極、柵極 C陽極、柵極 D陰極、陽極、柵極 E正極、負極、柵極49二次電子檢測系統不包括()A收集體 B顯像管 C閃爍體 D光電倍增管 E視頻放大器50掃描電鏡的反差是由()決定的 A二次電子產率 B反射電子產率 C吸收電子產率10D俄歇電子產率 E特征 X 射線產率【X 型題】每題的備選答案中有兩個或者兩個以上的正確答案。1物象在低倍鏡（10×）下清晰可見，換高倍鏡（40

24、15;）后看不見了，這是因為() A玻片放反了B高倍物鏡故障 C物象不在視野正中央 D焦距沒調好E 低倍物鏡故障2在普通光鏡上可用于調節視野內光線強弱的裝置有() A通光孔B反光鏡 C光闌 D聚光鏡 E目鏡3常用于觀察細胞超微結構的儀器是()A熒光顯微鏡 B相襯顯微鏡 C掃描電鏡 D透射電鏡 E暗視野顯微鏡4普通光鏡上決定放大倍數的部件有() A目鏡B物鏡 C反光鏡 D聚光鏡 E光闌5普通光鏡上的下列物鏡中哪些不能浸在香柏油中使用()A4×物鏡 B10×物鏡 C40×物鏡 D45×物鏡 E100×物鏡6透射電鏡所具有的特征有()11A分辨率高

25、B放大倍數高 C成像立體感強 D標本須超薄 E標本表面噴鍍金屬膜7掃描電鏡的基本特征是()A可見細胞表面的三維形態 B成像立體感強 C標本須超薄 D標本表面噴鍍金屬膜 E放大倍數高8在電鏡下所觀察到的細胞結構稱為() A顯微結構B超微結構 C亞顯微結構 D微細結構 E電鏡結構9電鏡標本制備時常用的固定劑()A鋨酸 B戊二醛 C丙酮 D聯苯胺 E過碘酸10熒光顯微鏡以紫外線為光源，通常采用落射式照明，是因為() A如采用柯拉式照明，紫外線會傷害人的眼睛 B紫外線穿透能力較弱 C紫外線可通過鏡筒中安裝的雙向反光鏡D視野背景很暗 E整個視場均勻照明11. 適于觀察無色透明活細胞微細結構的光學顯微鏡是

26、() A相襯顯微鏡B暗視野顯微鏡C熒光顯徽鏡 D偏振光顯微鏡12E普通顯微鏡三、簡答題1簡述光學顯微鏡的工作原理。2簡述光學顯微鏡的結構組成。3物鏡和目鏡在工作條件和技術要求上有哪些不同？4光學顯微鏡的性能參數有哪些？這些參數間的影響和制約關系如何？5簡述醫學檢驗中常用的熒光顯微鏡的原理、結構及用途。6. 簡述熒光顯微鏡的使用注意事項。7簡述相襯顯微鏡的工作原理、結構特點及其主要用途。8簡述偏光顯微鏡的結構特點、工作原理及其主要用途。9簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的工作原理。10簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的結構特點在醫學領域的主要用途。11. 電鏡的基本類型有哪些？各有什么特點？12掃描電鏡有哪些特

27、點？13電鏡由哪幾個主要部分組成？對成像質量影響較大的部件有哪些？14光學顯微鏡與電子顯微鏡的主要區別是什么?15掃描隧道顯微鏡是納米生物學研究工具，為何能用來觀察活的生物樣品？習題參考答案一、名詞解釋1光學顯微鏡：簡稱光鏡，是利用日光照明將小物形成放大影像的精密光學儀器，由光學系統、機械裝 置和照明系統三部分組成。光學系統由物鏡和目鏡組成，其核心是物鏡和目鏡中的兩組透鏡，其放大成像的 機理是先由物鏡形成放大的實像，再由目鏡進一步放大成虛像，最后在人眼中形成實像。2熒光顯微鏡：熒光顯微鏡是以紫外線為光源來激發生物標本中的熒光物質，產生能觀察到的各種顏色熒光的一種光學顯微鏡。3相襯顯微鏡：是把透

28、過標本的可見光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結構間的對比度，用于觀 察活細胞和未染色的標本的一種特殊顯微鏡。4暗視野顯微鏡：是利用特殊的聚光鏡使照明光線斜射而不能直接進入物鏡，形成暗視野，那些經過標 本散射的光線才能進入物鏡放大，在黑暗的背景中呈現標本明亮的輪廓的顯微鏡。5偏光顯微鏡：是利用光的偏掁特性，對具有雙折射性(即可以使一束入射光經折射后分成兩束折射光) 的晶態、液晶態物質進行觀察和研究的重要光學儀器。136激光掃描共聚焦顯微鏡：以單色激光作為光源的一種特殊光學顯微鏡。其物鏡和聚光鏡互相共焦點， 使得只有從標本焦面發出的光線聚焦成像，而焦面以外的漫射光不參加成像，改變焦平面，可獲得

29、細胞或原 標本不同層次的圖像，從而得到樣品的三維結構圖像。7倒置顯微鏡：當觀測活體標本時，需要把照明系統放在載物臺及標本之上，而把物鏡組放在載物臺器皿下進行放大成像的顯微鏡，又稱生物培養顯微鏡。8紫外光顯微鏡：使用紫外光源進行照明的顯微鏡。9電子顯微鏡：簡稱電鏡，是利用波長很短的電子束作為照明光源，通過電子流對細胞樣品的透射或反 射及電磁透鏡的多級放大而在熒光屏上成像的大型精密儀器。10透射電子顯微鏡：簡稱透射電鏡，是利用電子槍發出的高速電子束照射超薄的生物樣品，收集透射 電子流經電磁透鏡的多級放大后成像的儀器。11掃描電子顯微鏡：簡稱掃描電鏡，是一種主要用于觀察組織細胞表面或細胞內斷面的電鏡

30、。其工作原理是從電子槍發出的電子束經電磁聚光鏡匯聚成極細的電子探針，并在細胞樣品表面逐點掃描，收集樣品 表面產生的二次電子再經轉換、放大，最終在熒光屏同步掃描成像。12超高壓電子顯微鏡：生成電子束的電壓超過 500kV 的電子顯微鏡。13掃描隧道電子顯微鏡：當原子尺度的針尖在不到一個納米的高度上掃描樣品時，此處電子云重疊， 外加電壓（2mV2V），針尖與樣品之間產生隧道效應而有電子逸出，形成隧道電流，通過隧道電流獲取顯微 圖像的電子顯微鏡。14分辨率：也稱分辨本領，指分辨物體細微結構的的能力。15放大率：或稱放大倍數是指顯微鏡經多次成像后最終所成(放大的)像的大小相對于原物體大小 的比值。16

31、數值孔徑：又叫鏡口率，是物體與物鏡間媒質的折射率 n 與物鏡孔徑角的一半()正弦值的乘 積。17顯微攝影術：是利用顯微照相裝置，把顯微鏡視野中所觀察到物件的細微結構真實地記錄下來， 以供進一步分析研究之用的一種技術。18景深與焦長：在成一幅清晰像的前提下，像平面不變，景物沿光軸前后移動的距離稱“景深”。景物不動，像平面沿光軸前后移動的距離稱“焦長”。19視野：視野又稱視場，是指通過顯微鏡所能看到的標本所在空間的范圍。20. 齊焦：當某一物鏡調焦清晰后，變換其它物鏡時，也能基本保證焦距適當、成像清晰。21. 像差：光學儀器不可能使物點發出而進入系統的所有光線都是沿著高斯光學的理想光路成像， 從而

32、導致成像在形狀方面的缺陷，稱之為像差。22. 色差: 是一種由白光或復色光在即使嚴格滿足高斯條件下也存在的特殊類型的成像缺陷。當用 白光或復色光經透鏡成像時，會因各種色光存在著光程差而造成顏色不同、位置不重合、大小不一致的 不同成像效果，從而造成像和物體的較大失真。二、選擇題14【A 型題】1A2B3A4C5A6E7E8D9D10E11E12E13C14B15C16B17D18A19E20A21B22C23E24E25D26D27B28A29B30E31A32D33B34E35C36D37D38B39B40B41C42A43D44A45.B46.C47.D48.D49.A50.A【X 型題】1

33、ABCD2BCD3CD4AB5ABCD6ABD7ABD8BC9AB10BE11.ACD三、簡答題1簡述光學顯微鏡的工作原理。 答：顯微鏡是由兩組會聚透鏡組成的光學折射成像系統，是利用光學原理，把人眼所不能分辨的微小物體放大成像，供人們提取物質微細結構信息的光學儀器。把焦距較短、靠近觀察物、成實像的透鏡組稱為物鏡，而焦距較長，靠近眼睛、成虛像的透鏡組稱為目鏡。被觀察物體位于物鏡的前方，被物鏡 作第一級放大后成一倒立的實像，然后此實像再被目鏡作第二級放大， 得到最大放大效果的倒立的虛 像，位于人眼的明視距離處。2簡述光學顯微鏡的結構組成。 答：基本結構包括光學系統和機械系統兩大部分。光學系統是顯微

34、鏡的主體部分，包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。機械系統是為了保證光學系統的成像而配置的，包括調焦系統、載 物臺和物鏡轉換器等運動夾持部件以及底座、鏡臂、鏡筒等支持部件。照明設置的主要部件有光源、濾 光器、聚光鏡和玻片等。3物鏡和目鏡在工作條件和技術要求上有哪些不同？答：顯微鏡的物鏡、目鏡各由數只組成一套，物鏡和目鏡間的不同組合構成不同的放大倍率。物鏡 采用轉換器調換，顯微鏡的物鏡應滿足齊焦要求，即調換物鏡后，不需要重新調焦就能看到物體的像。 為此，不同倍率物鏡的共軛距應為常數。目鏡采用插入式調換，目鏡的相對孔徑很小，一般為 1/201/40。 顯微鏡的目鏡是在窄光束、大視場的條

35、件下工作的。4光學顯微鏡的性能參數有哪些？這些參數間的影響和制約關系如何？答：顯微鏡的性能參數主要有放大率、數值孔徑、分辨率、視場、景深、鏡像亮度、鏡像清晰度、 工作距離和機械筒長。顯微鏡的數值孔徑與其放大率成正比，與分辨率、景深成反比，它的平方與圖像 亮度成正比。因此，使用較大數值孔徑的物鏡，其放大率和分辨本領較高，但視場、景深、工作距離較15小。5簡述醫學檢驗中常用的熒光顯微鏡的原理、結構及用途。 答：熒光顯微鏡是以紫外線為光源來激發生物標本中的熒光物質，產生能觀察到的各種顏色熒光的一種光學顯微鏡。熒光顯微鏡是由光源、濾色系統和光學系統等主要部件組成。熒光顯微鏡與普通光學顯微鏡主要區 別在

36、于光源和濾光片不同。通常用高壓汞燈作為光源，可發出紫外線和短波長的可見光；濾光片有二組， 第一組稱激發濾片，位于光源和標本之間，僅允許能激發標本產生熒光的光通過(如紫外線)；第二組是 阻斷濾片，位于標本與目鏡之間，可把剩余的紫外線吸收掉，只讓激發出的熒光通過，這樣既有利于增 強反差，又可保護眼睛免受紫外線的損傷。光學系統主要有反光鏡、聚光鏡、目鏡、物鏡、照明系統等 組成。熒光顯微鏡可用于觀察檢測細胞中能與熒光染料特異結合的特殊蛋白、核酸等，其標本染色簡便、熒光圖像色彩鮮亮，而且敏感度較高。6. 簡述熒光顯微鏡的使用注意事項。 答：使用熒光顯微鏡時應注意以下事項：觀察對象必須是可自發熒光或已被熒

37、光染料染色的標本；載玻片、蓋玻片及鏡油應不含自發熒光雜質；選用最好的濾片組；熒光標本一般不能長久保存，若持續長霎時間照射(尤其是紫外線)易很快褪色。因此，如有條件則應先照相存檔，再仔細觀察標本；啟動高壓汞燈后，不得在 15 分鐘內將其關閉，一經關閉，必須待汞燈冷卻后方可再開啟。嚴禁頻繁 開閉，否則，會大大降低汞燈的壽命；若暫不觀察標本時，可拉過阻光光簾阻擋光線。這樣，即可避 免對標本不必要的長時間照射，又減少了開閉汞燈的頻率和次數；較長時間觀察熒光標本時，最好戴 能阻擋紫外光的護目鏡，加強對眼睛的保護。7簡述相襯顯微鏡的工作原理、結構特點及其主要用途。 答：相襯顯微鏡的基本原理是把透過標本的可

38、見光的光程差變成振幅差，從而提高了各種結構間的對比度，使各種結構變得清晰可見。光線透過標本后發生折射，偏離了原來的光路，同時被延遲了 1/4（波長），如果再增加或減少 1/4，則光程差變為 1/2，兩束光合軸后干涉加強，振幅增大或減小， 提高反差。相襯顯微鏡的結構特點：環形光闌（annulardiaphragm）位于光源與聚光鏡之間，作用是使 透過聚光鏡的光線形成空心光錐，聚焦到標本上；相位板（annular phaseplate）在物鏡中加了涂 有氟化鎂的相位板，可將直射光或衍射光的相位推遲 1/4，并能吸收直射光(背景光)的光強，使直射 光與衍射光的光強趨于一致，能更好地突出干涉的效果。相

39、襯顯微鏡主要用于觀察活細胞和未染色的標本。8簡述偏光顯微鏡的結構特點、工作原理及其主要用途。 答：是利用光的偏掁特性，對具有雙折射性(即可以使一束入射光經折射后分成兩束折射光)的晶態、液晶態物質進行觀察和研究的重要光學儀器。 偏光顯微鏡是在一般顯微鏡的基礎上增添了使普通光線轉變成偏振光和檢測偏振光的裝置或觀察干16涉圖樣的特殊透鏡，即光源前有偏振片（起偏器），使進入顯微鏡的光線為偏振光，鏡筒中有檢偏器（一 個偏振方向與起偏器垂直的起偏器），這種顯微鏡的載物臺是可以旋轉的。當載物臺無樣品時，無論如 何旋轉載物臺，由于兩個偏振片是垂直的，顯微鏡里看不到光線。而放入旋光性物質后，由于光線通過 這類物

40、質時發生偏轉，因此旋轉載物臺便能檢測到這種物體。移相裝置是偏光顯微鏡在使用過程中不可 缺少的附件。全波片、半波片及 1/4 波片可以使通過波片的偏振光分別延遲 2、 和 /2 的相位。 而補償器則可連續調節使通過的偏振光相位發生連續改變。移相裝置對觀察光的偏振性質是十分必要 的。利用偏光顯微鏡可以清楚地觀察到纖維絲、紡錘體、膠原、染色體、卵巢、骨骼、毛發、活細胞的結晶或液晶態的內含物、神經纖維、肌肉纖維等的細微結構等。9簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的工作原理。 答：激光掃描共聚焦顯微鏡利用單色激光掃描束經過照明針孔形成點光源，對標本內焦平面上的每一點進行掃描，標本上的被照射點，在檢測器的檢測針孔處

41、成像，由檢測針孔后的光電倍增管逐點或逐 線接收，迅速在計算機監視器屏幕上形成熒光圖像，照明針孔與檢測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的。 焦平面的點同時聚焦于照明針孔和檢測針孔，焦平面以外的點不會在檢測針孔處成像，這樣得到的共聚 焦圖像是標本的光學橫斷面，克服了普通熒光顯微鏡圖像模糊的缺點。另外在顯微鏡的載物臺上加一個 微量步進馬達，可使載物臺沿著 Z 軸上下移動，將樣品各個層面移到照明針孔和檢測針孔的共焦面上， 樣品的不同層面的圖像都能清楚地顯示，成為連續的光切圖像。10簡述激光掃描共聚焦顯微鏡的結構特點及其在醫學領域的主要用途。答：激光共聚焦顯微鏡是在熒光顯微鏡成像基礎上加裝了激光掃描裝置，利用

42、計算機進行圖像處理， 使用紫外或可見光激發熒光探針，從而得到細胞或組織內部微細結構的熒光圖像。另外在其載物臺上加 一個微量步進馬達，可使載物臺沿著 Z 軸上下移動，將樣品各個層面移到照明針孔和檢測針孔的共焦面 上，樣品的不同層面的圖像都能清楚地顯示，成為連續的光切圖像。激光掃描共聚焦顯微鏡(Laser Scanning Confocal Microscope，LSCM)具有高靈敏度、高分辨率、高放大率等特點。在醫學領域主要用于細胞三維重建、細胞定量熒光測定、細胞內鈣離子、pH 值和其它 離子的動態分析、細胞間通訊和膜的流動性等過程的研究。11. 電鏡的基本類型有哪些？各有什么特點？ 答：電鏡的

43、基本類型有透射電子顯微鏡與掃描電子顯微鏡。射電子顯微鏡與掃描電子顯微鏡都用于放大與分辨微小結構，這兩種技術通過標本對電子束的影響來探測標本結構。透射電子顯微鏡的電子束 穿過標本，聚焦成像于屏幕或顯像屏上，掃描電子顯微鏡的電子束在標本表面進行掃描，反射的電子聚 焦成像于屏幕或顯像屏。透射電子顯微鏡用于研究超薄切片標本，有極高分辨率，可給出細微的胞內結 構。掃描電子顯微鏡可以反映未切片標本的表面特征。12掃描電鏡與透射電鏡相比有哪些特點？答： 能夠直接觀察樣品表面的結構，樣品的尺寸可大至 120mm×80mm×50mm； 樣品制備過程 簡單，不用切成薄片；樣品可以在樣品室中作三

44、度空間的平移和旋轉，因此，可以從各種角度對樣品17進行觀察；景深大，圖像富有立體感。掃描電鏡的景深較光學顯微鏡大幾百倍，比透射電鏡大幾十倍；圖像的放大范圍廣，分辨率也比較高?？煞糯笫畮妆兜綆资f倍，它基本上包括了從放大鏡、光學顯 微鏡直到透射電鏡的放大范圍。分辨率介于光學顯微鏡與透射電鏡之間，可達 3nm；電子束對樣品的 損傷與污染程度較??； 在觀察形貌的同時，還可利用從樣品發出的其他信號作微區成分分析。13電鏡由哪幾個主要部分組成？對成像質量影響較大的部件有哪些？ 電子顯微鏡主要由電子光學系統(電子透鏡和電子槍)、真空系統、供電系統、機械系統和觀察顯示系統等幾部分組成。 對成像質量影響較大的

45、部件有電子透鏡和電子槍。電子透鏡存在各種像差，這是影響成像質量的主要因素。在實際設計中，是通過適當縮小口徑、提高加速電壓、增大電極圓筒或線圈直徑及減低放大率 來減少球差，通過降低電子的初速度、提高加速電壓和穩定電源電壓來減少色差的。14光學顯微鏡與電子顯微鏡的主要區別是什么?答：照明源不同。電鏡所用的照明源是電子槍發出的電子流，而光鏡的照明源是可見光。由于電 子流的波長遠短于光波波長，故電鏡的放大及分辨率顯著高于光鏡。透鏡不同。電鏡中起放大作用的 物鏡是電磁透鏡，而光鏡的物鏡則是玻璃磨制而成的光學透鏡。電鏡中的電磁透鏡共有三組，分別與光 鏡中聚光鏡、物鏡和目鏡的功能相當。成像原理不同。在電鏡中

46、，作用于被檢樣品的電子束經電磁透 鏡放大后打到熒光屏上成像或作用于感光膠片成像。其電子濃淡的差別產生的機理是，電子束作用于被 檢樣品時，入射電子與物質的原子發生碰撞產生散射，由于樣品不同部位對電子有不同散射度，故樣品 電子像以濃淡呈現。而光鏡中樣品的物像以亮度差呈現，它是由被檢樣品的不同結構吸收光線多少的不 同所造成。所用標本制備方式不同。電鏡觀察所用組織細胞標本的制備程序較復雜，技術難度和費用 都較高，在取材、固定、脫水和包埋等環節上需要特殊的試劑和操作，最后還需將包埋的組織塊切成超 薄標本片。而光鏡觀察的標本則一般置于載玻片上，如細胞涂片標本，細胞滴片標本等。15掃描隧道顯微鏡是納米生物學

47、研究工具，為何能用來觀察活的生物樣品？答：掃描隧道顯微鏡可在真空、大氣、常溫等不同環境下工作，甚至可將樣品浸在水和其它溶液中， 不需要特別的制樣技術。這些特點特別適用于研究生物樣品和在不同實驗條件下對樣品表面的評價。由 于沒有高能電子束，探測過程對樣品表面沒有破壞作用(如輻射， 熱損傷等)，所以能對生理狀態下生 物大分子和活細胞膜表面的結構進行研究，樣品不會受到損傷而保持完好。18第三章離心技術與離心機首頁習題習題參考答案習題名詞解釋選擇題簡答題一、名詞解釋1離心現象2重力沉降3沉降速度4擴散現象5解釋 R·C·F6解釋沉降系數7K 系數8最大轉速9最大離心力10最大容量1

48、1調速范圍12溫度控制范圍13工作電壓14電源功率二、選擇題【A 型題】在五個選項中選出一個最符合題意的答案（最佳答案）。1物體在離心力場中表現的沉降運動現象是指（） A向心現象B離心現象 C離心力 D向心技術1E失重現象2應用離心沉降進行物質的分析和分離的技術稱為（） A向心現象B離心現象 C離心技術 D向心技術 E失重現象3實現離心技術的儀器是（） A電泳儀B離心機 C色譜儀 D生化分析儀 E顯微鏡4當物體所受外力小于圓周運動所需要的向心力時，物體將作（） A向心運動B勻速圓周運動 C離心運動 D變速圓周運動 E保持不動5利用不同的粒子在離心場中沉降的差別，在同一離心條件下，通過不斷增加相

49、對離心力，使一個非 均勻混合液內大小、形狀不同的粒子分布沉淀的離心方法是（）A差速離心法 B速率區帶離心法 C等密度區帶離心法 D高速離心法 E超速離心法6在強大離心力作用下,單位時間內物質運動的距離稱為（） A沉降運動B重力沉降 C沉降速度2D離心技術 E向心力作用7在介質中，由于微粒的熱運動而產生的質量遷移現象，主要是由于密度差引起的，這種現象稱為（） A數量極移動B擴散現象 C細胞懸浮 D分離沉降 E重力場作用8相對離心力是（） A在離心力場中，作用于顆粒的離心力相當于地球重力的倍數 B在離心力場中，作用于顆粒的地球重力相當于離心力的倍數 C在離心力場中，作用于顆粒的離心力與地球重力的乘

50、積 D在離心力場中，作用于顆粒的離心力與地球重力的和 E在離心力場中，作用于顆粒的離心力與地球重力的差9單位離心力場下的沉降速度是指（） A向心速度B離心速度 C沉降系數 D上浮速度 E下沉速度10沉降系數與樣品顆粒的質量或密度的關系，下列敘述中正確的是（） A質量和密度越大,沉降系數越大B質量越小,沉降系數越大 C質量或密度與沉降系數無關 D密度越大,沉降系數越小 E質量和密度越小,沉降系數越大11利用樣品中各組份的沉降系數不同而進行分離的方法稱為（） A差速離心法B等密度區帶離心法 C超速離心法3D高速離心法 E沉降平衡離心法12密度梯度離心法又稱為 （） A分離離心法B組份分離法 C區帶

51、離心法 D低速離心法 E高速離心法13差速離心法和速率區帶離心法進行分離時，主要的根據是不同樣品組份的（） A密度B重力 C沉降系數 D體積 E形狀14在梯度液中不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內形成幾條分開的樣品區帶，達到彼此分離 的目的，這種方法是（）A差速離心法 B密度梯度離心法 C速率區帶離心法 D等密度區帶離心法 E分析離心法15根據樣品組份的密度差別進行分離純化的分離方法是（） A差速離心法B密度梯度分析離心法 C速率區帶離心法 D等密度區帶離心法 E分析離心法16Percoll 分離液從外周血中分離單個核細胞的分離方法屬于（） A差速離心法B速率區帶離心法4C等密度區帶離心

52、法 D分析離心法 E分析超速離心法17速率區帶法要求樣品粒子的密度與梯度液柱中任一點密度的關系必須是（） A大于B大于等于 C等于 D小于等于 E小于18下列轉頭標識代表固定角轉頭的是（） AFABV CSW DCF EZ19等密度區帶離心法對樣品進行分離和純化主要是利用不同的（） A質量B密度 C沉降系數 D體積 E分子大小20等密度區帶離心法對于密度梯度液柱的要求是（） A液柱頂部的密度明顯小于樣品組份的密度，液柱底部的密度明顯大于樣品組份的密度 B液柱頂部的密度明顯大于樣品組份的密度，液柱底部的密度明顯大于樣品組份的密度 C液柱頂部的密度明顯小于樣品組份的密度，液柱底部的密度明顯小于樣品組份的密度 D液柱頂部的密度明顯大于樣品組份的密度，液柱底部的密度明顯小于樣品組份的密度 E液柱頂部的密度明顯等于樣品組份的密度，液柱底部的密度明顯等于樣品組份的密度21低速離心機可達到的最大轉速是（） A1000B40005C6000D10000E2000022高速離心機可達到的