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1、大便常規(guī)和隱血試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程一、目的用于規(guī)范大便常規(guī)和隱血試驗(yàn)的操作。二、適用范圍適用于大便常規(guī)和隱血試驗(yàn)的檢測(cè)。三、支持性文件全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程(第三版)、臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)(第三版)、隱血試驗(yàn)操作說明書四、大便標(biāo)本采集1、采集糞便標(biāo)本的方法因檢查目的不同而有差別,如一般檢驗(yàn)留取新鮮指頭大小(約5g)即可,放入干燥、清潔、無吸水性的有蓋容器內(nèi)送檢,標(biāo)本容器最好用內(nèi)層涂臘的硬紙盒,便于檢查后焚毀。血吸蟲毛蝴孵化則留全量新鮮便(不少于30g)。細(xì)菌檢查的糞便標(biāo)本應(yīng)收集于滅菌封口的容器內(nèi),勿混入消毒劑及其它化學(xué)藥品。2、檢查蟯蟲卵需要用軟玻璃紙拭子,在清晨排便前由肛門四周拭取標(biāo)本,也可用棉拭子拭取,
2、但均須立即鏡檢。3、檢查阿米巴滋養(yǎng)體,應(yīng)于排便后立即檢查。冬季需采取保溫措施,迅速送檢。4、不應(yīng)該采取尿壺或便盆中的糞便標(biāo)本。若標(biāo)本中混入尿液,可使柔弱的原蟲致死。用白明膠膜法檢查糞便中的胰蛋白酶活性時(shí),可因尿液中存在溶解白明膠的物質(zhì)而導(dǎo)致其檢查結(jié)果錯(cuò)誤的增高。糞便標(biāo)本中也不可混入植物、泥土、污水等,因腐生性原蟲、真菌抱子、植物種子、花粉易混淆實(shí)驗(yàn)結(jié)果。5、盛糞便標(biāo)本的容器必須有蓋,有明顯標(biāo)記。糞便標(biāo)本應(yīng)選擇其中膿血粘液等病理成分,若無病理成分,可多部位取材。采取標(biāo)本后,應(yīng)在一小時(shí)內(nèi)完成檢查,否則可因9H及消化酶等影響,而使糞便中細(xì)胞成分破壞分解。6、檢查膽石、胰石、寄生蟲體及蟲卵計(jì)數(shù),應(yīng)收集
3、24h糞便送驗(yàn)。7、隱血試驗(yàn),應(yīng)囑患者收集標(biāo)本前3日禁食動(dòng)物性食物。連續(xù)檢查3天,并選取外表及內(nèi)層糞便。收集標(biāo)本后須迅速進(jìn)行檢查,以免因長(zhǎng)時(shí)間放置使隱血反應(yīng)的敏感度降低。8、細(xì)菌檢驗(yàn)用標(biāo)本應(yīng)全部用無菌操作收集。五、常規(guī)檢驗(yàn)1、顏 色可根據(jù)觀察所見報(bào)告,如黃色、褐色、土灰色、綠色、紅色、柏油樣等。正常糞便因糞膽素而呈棕黃色,但可因飲食、藥物或病理原因影響而改變糞便顏色。灰白色見于鋇餐后、服硅酸鋁、阻塞性黃疽、膽汁減少或缺乏。綠色見于食用含葉綠素的蔬菜后及含膽綠素時(shí)。紅色見于下消化道出血、食用西紅柿、西瓜等。柏油樣便見于上消化道出血等。醬色常見于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水樣見于霍亂
4、。2、性 狀可報(bào)告為軟、硬、糊狀、泡沫樣、稀汁樣、血水樣、血樣、粘液血樣、粘液膿樣、有不消化食物等。正常時(shí)為有形軟便。1 球形硬便:便秘時(shí)可見。2 粘液稀便:見于腸壁受刺激或發(fā)炎時(shí),如腸炎、痢疾和急性血吸蟲病等。3 粘液膿性血便:多見于細(xì)菌痢疾。4 醬色粘液(可帶膿)便:多見于阿米巴痢疾。5 稀汁樣便:可見于急性腸胃炎,大量時(shí)見于偽膜性腸炎及隱孢子蟲感染。6 米泔樣便并有大量腸粘膜脫落,見于霍亂、副霍亂等。7 扁平帶狀便:可能因直腸或肛門狹窄所致。3、寄生蟲蟲體蛔蟲、蟯蟲、絳蟲節(jié)片等較大蟲體,肉眼即可分辨。鉤蟲蟲體常需將糞便沖洗過篩后方可看到。服驅(qū)蟲劑后排便時(shí)應(yīng)檢查有無蟲體。驅(qū)絳蟲后應(yīng)仔細(xì)尋找
5、有無蟲頭。4、直接涂片鏡檢1 潔凈玻片上加等滲鹽水12滴,選擇糞便的不正常部分,或挑取不同部位的糞便做直接涂片檢查。2 最好取大玻片,制成涂片后,應(yīng)覆以蓋片。涂片的厚度以能透過印刷物字跡為準(zhǔn)。3 在涂片中如發(fā)現(xiàn)疑似包囊,則在該涂片上加1滴碘液,在高倍下仔細(xì)鑒別,如仍不能決定時(shí),可取全量糞便濃縮法檢查。4 蟲卵的報(bào)告方式:未找到者注明“未找到蟲卵”,找到一種報(bào)告一種,找到幾種報(bào)告幾種,并在該蟲卵后面注明數(shù)量若干,以低倍視野計(jì)算。5 應(yīng)注意將植物纖維及其細(xì)胞與寄生蟲、人體細(xì)胞相鑒別,并應(yīng)注意有無肌纖維、結(jié)締組織、彈力纖維、淀粉顆粒、脂肪小滴球等。若大量出現(xiàn),則提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。6
6、細(xì)胞中應(yīng)該注意紅細(xì)胞、白細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等。7 夏科雷登(CharcotLeyden)結(jié)晶:為無色或淺黃色兩端尖而透明具有折光性的菱形結(jié)晶,大小不一。常見于腸道潰瘍,尤以阿米巴感染糞便中最易檢出。過敏性腹瀉及鉤蟲病患者糞便亦常可見到。8 細(xì)菌: 占糞便凈重的l3(4000億g干糞),正常菌群主要是大腸桿菌和腸球菌,占80;而過路菌(產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、綠膿桿菌等)不超過10;芽胞茵(如梭狀菌)和酵母菌為常住菌,但總量不超過10。正常菌群消失或比例失調(diào)可因大量應(yīng)用抗生素所致,除涂片染色找細(xì)菌外,應(yīng)采用不同培養(yǎng)基培養(yǎng)鑒定。六、隱血試驗(yàn)上消化道有少量出
7、血時(shí),紅細(xì)胞被消化而分解破壞,由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn),故稱為隱血。1、原理(匹拉米洞半定量檢查法)隱血試驗(yàn)是利用匹拉米洞半當(dāng)作呈色指示劑,在酸及H2O2的作用下,與血紅蛋白反應(yīng),產(chǎn)生紫藍(lán)紫紅的顏色,據(jù)此來進(jìn)行判讀及陽性結(jié)果半定量。2、【儲(chǔ)存條件及有效期】?jī)?chǔ)存條件:本試劑盒應(yīng)避光貯存在相對(duì)濕度不大于80%,無腐蝕性氣體和通風(fēng)良好的530室內(nèi)。有效期:原包裝未開封試劑的有效期為24個(gè)月,在有效期內(nèi)德已開封試劑應(yīng)在開封后3個(gè)月內(nèi)使用完,每次使用后應(yīng)及時(shí)擰緊瓶蓋,以免揮發(fā)或變質(zhì)。3、【樣本要求】 糞便檢體收集后應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè),以免因檢體長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致隱血反應(yīng)的敏感性降低。 4、【檢體的收集與準(zhǔn)備】 從采
8、集盒 (瓶)中取樣或?qū)y(cè)試卡及取樣木棒交給病人自行取樣,取樣時(shí)直接打開測(cè)試卡正面的蓋子,并利用取樣木棒挖取不同部位的糞便檢體 10-50mg(相當(dāng)于火柴頭大小)涂抹在測(cè)試卡A窗或B窗的方格內(nèi)(切勿超出方格之外) ,然后合上蓋子。若是病人自行取樣應(yīng)盡快將測(cè)試卡交回醫(yī)檢師處或檢驗(yàn)室,以進(jìn)行常規(guī)試驗(yàn)。(注:病人絕對(duì)不能自行打開測(cè)試卡背面印有“Development Window”的封蓋) 5、【檢驗(yàn)方法】 1)、將測(cè)試卡背面朝上,并打開印有“Development Window ”的封蓋。2 )、在方格內(nèi)左右兩側(cè)各滴一滴顯色劑A ,待試劑完全滲透之后,再各滴一滴顯示劑B。 3 )、當(dāng)加入顯色劑B 后
9、,于2min 內(nèi)判讀完畢。 6、【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】 1)、當(dāng)加入顯色劑B 后,立即產(chǎn)生紫藍(lán)色,報(bào)告為 (4 + )。 2)、當(dāng)加入顯色劑B 后,10s 內(nèi)產(chǎn)生紫藍(lán)色,報(bào)告為 (3+ )。 3)、當(dāng)加入顯色劑B 后,1min 內(nèi)產(chǎn)生紫紅色,報(bào)告為 (2 + )。 4)、當(dāng)加入顯色劑B 后,12min 內(nèi)才逐漸產(chǎn)生紫紅色,報(bào)告為 (1 + )。 5)、當(dāng)加入顯色劑B 后,于判讀時(shí)間內(nèi)無任何紫藍(lán)或紫紅的顏色反應(yīng),報(bào)告為陰性 ()。 敏感性:不小于50g(Hb)/g(stool) 7、【檢驗(yàn)方法的局限性】 本試劑盒僅作為對(duì)糞便隱血檢測(cè)的初檢及篩查試劑使用,不能替代胃鏡、直腸鏡、內(nèi)窺鏡和X 線檢查。 8
10、、【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 1)、批內(nèi)差:檢驗(yàn)限度中陽性測(cè)試結(jié)果的批內(nèi)差應(yīng)不大于3 張。 2)、批間差:檢驗(yàn)限度中陽性測(cè)試結(jié)果的批間差應(yīng)不大于3 張。 9、【注意事項(xiàng)】 1)、本試劑盒僅用于體外診斷,不作其他臨床用途。 2)、在糞便標(biāo)本的采集、運(yùn)送過程中和使用試劑進(jìn)行檢測(cè)時(shí),操作人員應(yīng)注意做好個(gè)人防護(hù),避免人體接觸,以防止可能產(chǎn)生的污染和自身感染。 3)、對(duì)無任何明顯癥狀但卻懷疑可能有少量出血的病人,建議應(yīng)連續(xù)取3 天糞便標(biāo)本,每天從標(biāo)本的不同部位取材做兩次實(shí)驗(yàn),3 天之內(nèi),共做6 次隱血檢查。 4)、檢驗(yàn)前2 天內(nèi)建議應(yīng)禁食動(dòng)物血、臟器及含葉綠素類食物;鐵劑、中藥、維生素C 等藥品,以盡量避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。 5)、本試劑盒不能與氧化劑共同存放,應(yīng)避免陽光直射及高、低溫和潮濕的貯存環(huán)境。 6)、冬天室溫
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