1、噻嗪酮在茶園環境中的殘留行為研究摘 要：研究了在江蘇南京、廣西南寧地區不同茶園環境氣候條件下噻嗪酮的殘留行為，不同處理劑量的殘留規律，及影響殘留消解因素（降水、溫度）的分析，探討了不同種植地域MRL值的制定理論依據。結果表明噻嗪酮在不同環境條件下的殘留行為不同，同季節施藥后在南京、南寧地區茶葉上的消解規律相近，同時受降水及溫度的影響較大，T檢驗表明茶葉上的噻嗪酮消解在南京、南寧地區無顯著差異，代表性的半衰期應為3.974.69天；在土壤中的殘留消解動態較為復雜，受土壤性質的影響較大，在南京、南寧地區的半衰期雖相近，但消解規律不同，有著顯著差異，代表性的半衰期應為：10.3429.96天，同時也

2、受溫度的影響。不同處理劑量的噻嗪酮藥后7天，在茶葉上的殘留量均小于10 mg/kg，建議噻嗪酮在茶葉上使用的安全間隔期為7天，推薦MRL為10 mg/kg。關鍵詞：茶葉；噻嗪酮；殘留；消解動態；T檢驗Dissipation of Pesticide Buprofezin in Tea Plantation under Different Climate Conditions in ChinaAbstract: The dissipation of pesticide of Buprofezin in tea plantation under different climate conditio

3、n (temperature and rainy frequency included) of Nanjing and Nanning was studied, basic profile information was provided for the MRL Limit. The results presented different dissipation behavior of buprofezin after employing in tea plantation under deferent climate condition and soil type, so did the f

4、inial residue of buprofezin at different treatment dosages. The dissipation of buprofezin in tea showed similar degradation magnitude both in Nanjing and Nanning, but affected by rainy frequency and temperature, the result of T-test also showed that there is no significant different of dissipation r

5、ate in these two locations, typical LC50 were 3.97-4.69 days. The dissipation of buprofezin in soil was more complex and complicated, characters of soil played an important role in pesticide dissipation, even the half time of buprofezin in soil were so closed both in Nanjing and Nanning, but the dis

6、sipation undergo different magnitude of residue(T test showed significant different), typical LC50 were 10.34-29.96 days. All the harvest residues of buprofezin employed at different doses on tea were less than 10 mg/kg after 7 days intervals in the same season of these two plots expect in winter of

7、 Nanjing, the MRL of buprofezin residue in tea was proposed to be 10 mg/kg and the post-harvest interval was suggested to be 7 days, at least. Key words: tea; buprofezin; residue; dissipation; T test噻嗪酮(Buprofezin)是噻二嗪類昆蟲生長調節劑，化學名稱為2-特丁亞氨-3-異丙基-5-苯基-3，4，5，6-四氫-2H-1，3，5-噻二嗪-4-酮，能抑制昆蟲幾丁質合成和干擾新陳代謝，對飛虱、

8、葉蟬、粉虱防治效果明顯1，在我國茶區廣泛使用，是我國出口茶葉中嚴重超標的農藥品種之一，位列第三位2。因為缺少殘留資料，歐盟已于：2 009年3月30日正式撤銷噻嗪酮的登記，而之前歐盟對其在茶葉中的限量標準為0.05mg/kg(Code No:0600000.6; Code No: 0610000)3，可以預見我國茶葉出口歐盟將會愈加困難。美國EPA對噻嗪酮的毒性分級為：急性經口為III級，急性經皮、急性吸入、眼睛刺激、皮膚刺激毒性為IV級，非皮膚致敏劑，雖有啟發性的致癌毒性證據，但不足以評估人類致癌的可能性，2 009年EPA開展了其環境激素（對甲狀腺樣副作用）風險分析，2 007年EPA對噻

9、嗪酮的殘留限量（MRL）進行了多次修定與限定，在作物上的殘留限量值0.05-80 ppm(40 CFR 180.511),對動物產品油脂，肝臟，肉產品的限定值為0.05 ppm,牛奶0.01 ppm4，但并未對茶葉上的殘留量進行具體的限定。因為噻嗪酮在不同植物及動物中的代謝產物不同，EPA于2 009年調整了檢測對象，當制定殘留限量值時（MRL），檢測對象為噻嗪酮（buprofezin）,當進行風險評估時，則需包括代謝產物BF4，BF9，BF12，BF2，BF23，不同作物或動物組織中所包含的對象不同5。美國EPA應用風險評估軟件模型DEEM-FCIDTM分析表明，對于13-49 歲的女性人群

10、，噻嗪酮急性膳食曝露風險為低風險，而慢性風險評估則表明，嬰兒及1-2 歲的兒童剛為高風險曝露人群4-6。國外持續對噻嗪酮進行基礎研究及風險評估，我國在此方面研究相對滯后，特別是環境風險性分析，而其環境釋放后的殘留消解行為及與環境因素的關系則是基礎，我國在這方面的研究報道較少，僅周碧青7于1 995年報道了福建安溪地區茶葉中噻嗪酮的殘留消解過程。1 材料與方法1.1田間實驗試驗于2 008-2 009年，分別于江蘇省南京、廣西省南寧地區的茶園進行,田間試驗方案設計按NY/T 788-2 004（農藥）殘留試驗準則進行，試驗對象為灌木叢態茶樹及單株茶樹。試驗開始時間：南京地區為2 008年11月、

11、2 009年4月，南寧地區為2 008年4月、2 009年4月，試驗期間記錄天氣情況，降水量與溫度。1.1.1噻嗪酮在茶葉上、土壤中的最終殘留 分別以292 ai.mg/kg（推薦最高劑量）、438 ai.mg/kg（1.5倍推薦最高劑量）的噻嗪酮噴霧處理1次和2次，施藥間隔期7天,對茶樹均勻噴霧，最后一次施藥后2天、7天、14天、21天取樣，采取多點隨機取樣法，每株分上、中、下、內、外取茶葉，共取1 kg；土壤以十點取樣法，在茶樹樹冠、根系范圍內用土壤鉆鉆取015 cm土壤2 kg；四分法處理樣品，于低溫冰柜中-20 C保存。1.1.2 噻嗪酮在茶葉上、土壤中的殘留消解動態 40%噻嗪酮懸浮

12、劑按913倍液（438 ai.mg/kg）對葉均勻噴霧處理一次，施藥后當天2 h、1、3、5、7、9、14、21、28、35、45、60天取樣，取樣及樣品處理方法同最終殘留試驗的處理方法。 選取試驗茶園旁的空白地塊進行土壤動態殘留試驗，以913倍液（438 ai.mg/kg）對土壤表面均勻噴霧，樣品的采集時間間隔期同前，取0-15 cm土層進行采樣檢測，五點取樣。取樣量2公斤，-20 保存。1.2檢測方法1.2.1 樣品中噻嗪酮的提取：稱取打碎的茶葉樣品5 g于三角瓶中，加入乙腈30 ml，高速均漿1分鐘，過濾后收集于裝有2克氯化鈉的100 ml的具塞量筒中，收集濾液40-50 ml，劇烈振蕩

13、2分鐘，靜置分層，取上層乙腈相定容至50 ml，待凈化；稱取打碎的土壤樣品10 g于三角瓶中，加入乙腈20 ml，搖床振蕩提取2小時，經無水硫酸鈉過濾于三角瓶中，洗滌殘渣后合并濾液約40 ml，加入2克氯化鈉，劇烈振蕩后靜置分層，取上清液定容至40 ml，待凈化。1.2.2 提取液的凈化：移取濾液10 ml，水溶40 氮氣濃縮蒸發至干，用2 ml正已烷溶解，斡旋振蕩器溶起，待凈化。凈化柱的填裝：從上至下（0.1克活性碳+0.5克弗羅里硅土），凈化柱依次用5 ml丙酮：正已烷（10：90），5 ml正已烷預淋洗柱子，當溶劑液面達到柱子表面時，把提取液轉移至凈化柱內后，用洗液丙酮：正已烷（10：9

14、0）進行洗脫，收集洗液10 ml，水浴40 氮吹至干，1 ml丙酮定容檢測。1.2.3 色譜檢測條件： 氣相色譜Agilent 6 890N （NPD，氮磷檢測器），毛細管柱：HP-5，30 m32 0m1.00 m，程序升溫：柱箱溫度初始80 0C，保持1 min，以15 0C/min升溫到280 0C，保持10 min；進樣口溫度：250 0C；檢測器(NPD)溫度：330 0C，載氣：高純氮氣，2.1 ml/min；不分流進樣，進樣量：1 L，噻嗪酮出峰時間為：12.575 min，方法的最低檢測濃度為0.01mg/kg。噻嗪酮在茶葉中的回收率為：添加水平0.05ppm：98.43%8.

15、47；0.5ppm：95.50%5.17；1.0ppm: 90.10%2.73,噻嗪酮在土壤中的添加回收率為:0.05ppm：111.17%16.08;0.5ppm：85.06%1.84;5.0ppm: 101.25%5.04。2 結果與討論2.1 噻嗪酮在茶葉中的消解動態實驗結果表明，噻嗪酮在茶葉中的消解規律符合一級動力學方程：南京地區噻嗪酮在茶葉上的半衰期LD50=4.66.38天；南寧地區：LD50=3.974.05天。其中200 8年南京地區的實驗開始時間為冬季，因為氣溫的影響，噻嗪酮的殘留半衰期要長于200 9年的實驗結果，而且殘留原始沉積量（62.3426 mg/kg）也比200

16、9年的原始沉積量增加了近6倍，天氣因素共同影響了噻嗪酮殘留消解。詳見表1。消解動態曲線見圖1。表 1 噻嗪酮在茶葉中的殘留消解動態方程Table 1 Degradation equations of Buprofezin in tea 試驗地點 試驗年份動態方程R LD50（天） LD90（天）南京2008C=62.3426e-0.1087t-0.87516.38 21.192009C=10.4878e-0.1479t-0.95014.69 15.57南寧2008C=14.4623e-0.1711t-0.90874.05 13.452009C=16.1044e-0.1745t-0.98393.

17、97 13.20T檢驗結果表明，噻嗪酮在茶葉中南京地區兩年的殘留消解行為差異顯著，在用藥劑、方法、對象一致的情況下，環境氣候條件的不同，顯著的影響了噻嗪酮在茶葉是的消解行為，分析原因降水、溫度的明顯不同是影響其消解形為的主要原因，尤其是溫度的影響，南京地區2 008年試驗期為冬季，而2 009年的試驗期為春夏之際，氣候條件差異明顯。而南寧地區兩年的消解動態無統計學差異，所得的消解方程與結果可以代表噻嗪酮在南寧地區，4月至7月期間在茶葉上用藥的消解行為，在相同的季節，南京地區2009年的噻嗪酮在茶葉上的消解行為與南寧地區的消解行為無顯著性差異，噻嗪酮在此兩地茶葉上的消解行為相似，而且殘留原始沉積

18、量亦相近（10.487 816.104 4 mg/kg）,因此3.974.69天可代表為該藥的消解半衰期，噻嗪酮在此兩地茶葉上的用藥規律與模式可以相互借鑒，對茶葉的飲用安全性有著相似的規律，可見在上述兩個地區噻嗪酮的用藥及安全間隔期的制定應與害蟲用藥防治時期相一致，見表2。表2. 噻嗪酮茶葉中消解動態差異分析-T檢驗（P0.05）（南京、南寧）Table 2.T test（P0.05） of dissipation of Buprofezin in tea in Nanjing,NanningT檢驗（P0.05）南京(2008)南寧(2008)南京(2009)南京(2009)南京(2009)南

19、寧(2009)南寧(2009)南寧(2008)P=0.01810.87090.92330.9838差異顯著性有統計學差異無顯著性差異無顯著性差異無顯著性差異圖1 噻嗪酮在茶葉上的殘留消解動態-南京、南寧（2008、2009）Figure 1.Dissipation curve of Burprofezin in tea in Nanjin,Nanning(2008、2009)2.2 噻嗪酮在土壤中的消解動態實驗結果表明：在南京地區噻嗪酮消解規律并不完全符合一級動力學方程，以一級動力學方程擬合后的結果為LD50=28.51153.82天；在南寧地區土壤中的消解殘留規律較為符合一級動力學方程：LD

20、50=10.3429.96天。詳見表3。消解動態曲線見圖2。表 3 噻嗪酮在土壤中的消解動態方程Table 3 Degradation equations of Buprofezin in soil試驗地點試驗年份動態方程RLD50（天）LD90（天）南京2008C=0.3753e-0.0045t0.21098153.82510.992009C=0.8221e-0.0243t-0.596328.5194.70南寧2008C=4.9002e-0.0670t-0.758810.3434.362009C=2.9738e-0.0231t-0.730029.9699.52T檢驗結果表明，噻嗪酮在土壤中的

21、殘留消解行為較為復雜，2 008、2 009年噻嗪酮在南京地區土壤中的消解動態雖差異不顯著（P=0.0709），但已達差異顯著的臨界狀態，在土壤性質相同的條件下，環境氣候條件，特別是溫度影響了噻嗪酮在土壤中的消解行為；相同施藥季節不同年份在南寧地區的試驗表明，噻嗪酮在南寧地區的土壤中的消解行為差異不顯著；而2 009年南京地區與南寧地區的土壤消解差異卻極顯著，雖然兩者的殘留半衰期相近，28.51天、29.96天，但二者的殘留動態數量級不同，南京地區的殘留原始沉積量遠小在南寧地區的沉積量（南京地區：0.375 30.822 1 mg/kg;南寧地區：2.973 84.900 2 mg/kg），綜

22、合環境氣候條件及此兩地區2 009年茶葉上殘留動態差異不顯著的結果，表明土壤性質的不同是造成消解不同的主要原因，其它年份的（除200 8年南京、南寧地區）顯著性差異也說明了同樣的原因，同時氣候條件（降水量）也是影響因素之一。詳見表4。表4.噻嗪酮土壤中消解動態差異分析-T檢驗（P0.05）（南京、南寧）Table 4.T test（P0.05） of dissipation of Buprofezin in soil in Nanjing,NanningT檢驗（P0.05）南京(2008)南寧(2008)南京(2009)南京(2009)南京(2008)南京(2008)南京2009南寧(2009

23、)南寧(2009)南寧(2008)南寧(2009)南寧(2008)P=0.070 90.256 40.000 040.030 40.000 20.056 9差異顯著性無顯著差異無顯著差異差異顯著差異顯著差異顯著無顯著差異圖2噻嗪酮在土壤中的殘留消解動態-南京、南寧（2008、2009）Figure 2.Dissipation curve of Burprofezin in soil in Nanjin,Nanning(2008、2009) 2.3 噻嗪酮在茶葉中的最終殘留以40%噻嗪酮懸浮劑292 a.i.mg/kg（推薦使用最高劑量），438 a.i.mg/kg推薦使用最高劑量1.5倍劑量）

24、噴霧后，施藥1、2次，7天以后，噻嗪酮在茶葉中的終殘留均小于10 mg/kg（除了南京地區200 8年冬季的試驗）。詳見表5。2 008年南京地區的最終殘留試驗，于害蟲非發生季節用藥(冬季)進行，藥劑殘留受低溫及天氣的影響較大,未能客觀反映實際害蟲防治適期用藥的殘留情況，與2 009年差異較大，試驗表明：安全間隔期、MRL的制定應與實際生產中害蟲用藥防治時期相一致，而且防治的害蟲對象，作物品種適用性，及用藥時間與季節應有嚴格的限定，而我國在這方面未有詳細規定。表5 噻嗪酮在茶葉中的最終殘留量南京、南寧(2008年、2009年)Table 3 Harvest residue of Buprofe

25、zin in tea leaves-Nanjin,Nanning(2008、2009)劑量處理 (a.i.mg/kg)用藥次數采收間隔期(天)殘留量(mg/Kg)SD南京南寧2008*20092008200929212121.603.271 20.230.007 40.24 0.008 20.210.010 91420.883.781 00.340.036 40.480.050 10.970.031 7735.420.747 51.590.222 61.900.315 63.690.218 02-7.870.258 23.981.082 011.440.350 12218.710.344 40

26、.170.005 10.140.027 70.170.027 61424.786.051 90.370.050 10.580.015 90.530.088 2737.650.287 32.620.080 02.380.245 61.700.104 1245.583.091 912.510.657 514.542.035 17.650.725 543812124.504.246 10.560.017 90.160.017 50.260.039 41424.881.952 50.540.067 40.510.024 30.630.359 7736.838.385 42.440.554 53.200

27、.421 72.720.213 42-17.080.153 54.921.326 87.140.092 922113.200.560 30.250.035 01.670.049 20.120.004 41429.245.850 30.740.142 15.120.692 70.460.001 8748.986.694 31.850.346 43.660.023 13.320.195 1256.283.318 314.021.585 016.180.280 013.491.559 4備注：-數據丟失。3 結論噻嗪酮在南京、南寧地區相同季節里用藥，在茶葉上的殘留消解動態規律相似，同時天氣狀況對噻嗪

28、酮的環境降解形為影響較大，特別是對茶葉上的殘留影響較大，降水可明顯減少其殘留量，而低溫則可延長其殘留半衰期。在土壤中的殘效期較長，較為復雜，不完全符合一級動力學方程，殘留行為受土壤的性質影響較大，其次受溫度等氣候條件的影響。40%噻嗪酮懸浮劑，按其推薦最高劑量292 a.i.mg/kg（推薦最高劑量）、438 a.i.mg/kg（推薦使用最高劑量1.5倍）于幼蟲盛末期噴霧處理，施藥1次，安全間隔期7天后，噻嗪酮在茶葉中的終殘留量小于10 mg/kg。安全間隔期及MRL的制定應與實際害蟲用藥防治時期相一致，防治的害蟲對象，作物品種適用性，及用藥時期應有嚴格的限定，否則會產生不同的殘留情況，加之我

29、國農業生產上高頻率的農藥使用，無序性的用藥，不僅會造成害蟲的抗藥性與再猖獗，而且極易造成殘留超標，因而農藥登記應轉變傳統的毒性分級模式，引入風險分析的理論8，科學調整與改變原有的農藥評定體系可從源頭上改變中國食品中農藥殘留的狀況。參考文獻：1 李擁軍，黃志強，戴華，等。茶葉中噻嗪酮殘留量的GC-M8測定J .分析測試學報，2002，21（2）：78-79。 LI Yong-jun，HUANG Zhi-qian，DAI Hua，et al. Determination of buprofezin residue in tea by gas chromatography-mass spectrom

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