1、微生物實驗室生物安全管理手冊實驗室生物安全管理體系文件目錄序號名稱備注1實驗室人員和項目準入制度2人員培訓考核制度3人員健康監護制度4生物安全檢查制度5實驗室人員生物安全行為規范6事件、傷害、事故和職業性疾病報告制度7實驗室生物危險標識使用規定8實驗室內務管理制度9實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度10實驗室廢棄物管理制度11實驗室消毒隔離制度12實驗室應急處置坎條13實驗活動生物安全標準操作規程實驗室人員和項目準入制度1.目的規范生物安全二級實驗室的使用和管理，保證操作人員，實驗對象和環境安全，確 保檢測結果準確可靠。2 .適用范圍適用于檢驗科生物安全二級實驗室安全運轉及在此環

2、境下的所有檢測工作。3 .職責進入生物安全二級實驗室從事檢測工作的所有人員嚴格按照本規定執行。4 .具體要求：4.1 概述本手冊規定的各項要求，首先是為了保證實驗室的安全運行，包括防止實驗室工作 人員的感染、防止實驗室操作的病原微生物對環境的污染、防止檢測樣品的污染， 保證實驗結果的準確可靠。本手冊規定的各項要求，同時也是為了保證實驗室的工作質量，即：實驗產生的各 項結果和數據，必須準確可靠：實驗室出具的檢驗報告，必須明確完整。4.2 實驗室操作規程開始工作前半小時。開啟實驗室主電源，使實驗室及生物安全柜投入運行。開啟順序：開啟屋頂風機開啟全排風開啟空調開啟安全柜打開房間紫外線燈。工作人員按照

3、下列要求進行個人防護，才能進入實驗室區域：（ 1）在更衣室中換穿工作服和工作鞋。（ 2）在清潔區內，根據實驗要求做好防護。（ 3）實驗中需使用腐蝕性試劑時，在膠乳手套外加帶一次性塑料手套；需要進行可能造成污染材料飛濺的操作時，需加戴防護面罩。一切準備工作就緒后，才將標本和試劑從冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即歸位，使其在冰箱外停留的時間盡可能短。4.不打開容器的觀察允許在生物安全柜外進行，否則，必須在生物安全柜內觀察結果。確保不含感染性的實驗材料，才可以從實驗室攜出。容器表面應用75%乙醇消毒。每一實驗步驟完成后，均應清理臺面。所有用過的試劑均應歸還原位；使過的吸管等長形器材放入儲存

4、污物的盒內；鋒利品放入專用的污物盒；紙巾軟物品放入污物袋；在臺面上噴灑75%乙醇，保持20 分鐘，然后以紙巾擦干。實驗室的其他表面，也應經常用75%乙醇擦拭。放置污染物品的容器裝滿時，應更換新的容器。實驗結束后，對用過的污染物品進行高壓消毒。工作完畢的更衣順序是，先用消毒液浸泡手套5 分鐘，然后依次除去口罩、防護服、鞋套，放入高壓消毒袋內，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。每次工作完畢，生物安全柜內用75%酒精擦拭臺面，消毒液消毒地面，開啟紫外線燈照射 1 小時后，逐一關閉實驗室送風和通風設備 關閉順序與開啟順序相反 。4.3 實驗記錄與實驗報告在實驗室內，實驗記錄應使用

5、鉛筆書寫。記錄內容應簡明扼要，包括實驗日期，實驗目的和實驗的基本條件等提示記憶的內容，并較詳細地記載觀察到的實際現象及數據結果。要求字跡應清晰，數字成行成列，以避免錄入錯誤。將上述記錄在紙張上的實驗記錄應用 80 福爾馬林，密閉熏蒸消毒6 小時后方可帶出實驗室。或閣著實驗室玻璃窗由清潔區工作人員抄錄一份。實驗記錄必須在實驗結束后 24 小時內錄入計算機。 記錄準確的實驗報告和錄入時間。再按照由實驗室帶出的書寫記錄，準確地記載實驗結果和數據。錄入后，書寫記錄保存 1 周，以備查驗。實驗記錄錄入后，一般不得修改。因數據記錄錯誤，錄入錯誤，或實際觀察到的實驗結果改變，必須更改記錄時，不要刪除已經錄入

6、的描述和數據，而應錄入新的描寫和數據，并注明更改原因。每月一次，將上月計算機的實驗記錄做出備份，備份的實驗記錄不得修改。實驗室負責人應定期檢查實驗記錄，核對備份與原始的實驗記錄，對記錄中的缺陷提出修改意見。實驗記錄保存一年。已使用的實驗記錄 （ 出具報告，發表論文，或以其他方式引用 ） ，在使用后再保存一年。如無特殊必要，備份的實驗記錄一般永久保存。在需要出具正式實驗報告的場合，報告由實驗者填寫署名，交實驗室負責人記錄核對后簽字，再由單位簽發人簽字并加蓋公章發出。4.4 標本保管規則 根據標本的性質、目的進行保存，每分標本分兩份，一份檢測時使用，另一份備用。標本因各種原因損失時，啟用后備標本，

7、并重新備份。確定不用的標本，采用高壓滅菌后焚燒的方式銷毀。4.5 實驗室裝備保養實驗室的定期保養按照提供實驗室設備廠商的規定進行，主要是對機械和電器部分進行維護。實驗室內的儀器設備的保養由實驗室工作人員進行。維護有專業人員進行。生物安全柜的濾器必須按說明書規定的時間定期由專業人員更換，其它儀器設備也應根據實際需要清潔保養。儀器設備需要更新，需要離開實驗室進行維修，或損壞需要更換，以及必須臨時進入實驗室使用，使用完畢后必須撤出實驗室的貴重儀器，在撤出實驗室之前必須以恰當的方式嚴格消毒，方可處理或重新投入使用。4.6 意外情況處理發生可疑的實驗室感染事故時，應對被感染的人員進行隔離觀察。如果判定為

8、法定的傳染病感染，應按 傳染病防治法 的規定報告，同時給予有效的隔離治療一、 人員培訓考核制度1. 目的規范實驗室相關人員的培訓考核2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3. 人員培訓考核制度3.1. 實驗室工作人員的培訓新工作人員進入實驗室前，必須經過培訓，取得進入實驗室工作的資格。培訓由實驗室負責人組織進行，并指定熟悉實驗室工作的人員擔任輔導。培訓內容包括：（ 1）相關檢驗的國家診斷標準、處理原則以及本手冊內容。（ 2）實驗室所有設備的使用方法。（ 3）個人防護方法。（ 4）實驗室基本技術。（ 5）實驗室消毒凈化的方法。3.2. 實驗室工作人員的資格考試新工作人員經過培訓后，由實驗

9、室負責人組織考核。通過考核后，還須與有資格的工作人員一同工作3 個月，才能獲得獨立進行實驗室操作的正式資格。三、 人 員健康監護制度1. 目的規范實驗室相關人員的健康監護2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3、人員健康監護制度2.1 工作人員從事工作前必須進行HIV 抗體和甲肝、 乙肝、 丙肝等肝炎病毒標記物的檢測，每半年進行一次HIV抗體復檢，并保留血樣一年以上。3.2 工作人員應每年進行一次體檢，便判斷生物安全危害是否發生。并將可能涉及生物安全危害的體檢結果存檔， 以3.3 實驗室應建立人員健康監護檔案，檔案內容包括既往病史、檢測結果、免疫接種史等，以便對從事涉及生物安全危害人員

10、的健康狀況進行跟蹤。3.4 實驗室工作人員的適合工作狀態實驗室工作人員必須在身體狀況良好的情況下，才能進入實驗室工作。出現下列情況，不應進入實驗室：身體出現開放性損傷；患發熱性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他導致抵抗力下降的狀況：妊娠、在實驗室內連續工作 4 小時以上或其他原因造成的疲勞狀態。4、 生 物安全檢查制度1. 目的規范實驗室生物安全，保證設備正常運行。2. 適用范圍適用于生物安全涉及的儀器設備（比如生物安全柜等）3. 生物安全檢查制度實驗室內，每2 個月以細菌培養的方式進行安全性檢測。生物安全柜內放置平板培養基 2 個，實驗室 4 角和中間各放置1 個，半污染區放置2 個。將平皿敞開

11、5 分鐘，然后蓋上，每平板菌落數平均不得超過2 個，超過標準，需要對實驗室或污染部位進行甲醛熏蒸消毒。5、 實驗室人員生物安全行為規范1. 目的規范實驗室人員的生物安全行為規范2. 適用范圍適用于生物安全涉及的所有工作人員3. 生物安全組織管理與行為規范3.1 組織框架圖單位法人 或授權 負責人J實驗室負責人J生物安全員J實驗室工作人員3.2 各類人員相應行為規范（ 1）負責組織生物安全實驗室的立項、選址，施工隊的資質驗證。（ 2）負責成立生物安全委員會負責生物安全，制定管理制度，監督有關法規和操作規程的執行情況。（ 3）負責組織對造成外環境污染、實驗室污染、人身傷害事故的調查與處理。（ 1）

12、組織制定安全手冊、操作規程等文件。（ 2）按照上述文件要求組織實驗室的各項工作，保證實驗室運行的安全和實驗室工作質量的準確可靠。（ 3）組織進入生物安全二級實驗室的人員進行業務培訓，保證工作人員熟知微生物的操作規程和技術，掌握實驗室設備的特殊要求并熟練操作，對培訓的結果進行考核，決定進入實驗室工作人員的資格。（ 1）對技術方法、化學品、材料與設備定期進行內部安全檢查，確保其符合國家和地方的有關安全與衛生政策與標準。一旦發現不安全因素，立即停止工作并上報實 驗室負責人。（ 2）與有關人員討論研究安全政策的問題。（ 3）確認所有工作人員都具有進入實驗室工作的資格。（ 4）為所有人員提供連續性的安全

13、要教育與指導。（ 5）針對操作程序、技術方法和各種條件要求的變更，以及新設備的引進，為全體 工作人員提供最新的安全文獻和信息資料。（ 6）定期檢查實驗室的各項技術參數，組織對實驗室裝備的常規保養。（ 7）所有可能涉及潛在傳染性或有毒物質泄露的意外事件與事故，即使沒有人員受傷或暴露，也要予以調查，并向實驗室負責人員和安全委員會報告調查結果和提出建議。（ 8）當任何實驗室工作人員的疾病或缺勤與工作有關，并被記錄為可能的實驗室獲得性感染時，協助隨訪調查其疾病或缺勤情況。（ 9）確保在發生傳染性物質濺灑其他事件時，監督消毒凈化程序得到正確執行；并 對這類意外事件和事故進行詳細的書面記錄。（ 10）確保

14、任何需要修理和維護的儀器設備在消毒與凈化之后方可運出實驗室。生物安全員由主管檢驗師以上的人員承擔，必須具備如下資質：具有實際工作的經驗；對操作的微生物有全面、完整的了解；具有組織實驗室工作的能力；對工作有高度的責任心。（ 1）生物安全二級實驗室，只允許進行實驗室目的規定的操作，與此無關的活動一律不得進行。（ 2）必須按規定進行個人防護，方得進入實驗室。（ 3）保持實驗室環境的整潔，每項工作完成之后，必須清理和清潔臺面，離開實驗室（ 4）注意個人的健康狀況，出現身體不適情況，應及時向實驗室負責人報告。（ 5）實驗室內禁止飲食、吸煙、訪客和喧嘩。實驗室工作人員的技術要求（ 1）必須了解實驗室安全原

15、理，熟悉本手冊的各項規定，熟記緊急情況下的正確應對措施。（ 2）掌握病原微生物操作的基本要求，正確、安全地實用標本，避免污染，以獲得準確、可靠的實驗結果。（ 3）必須熟悉相關實驗的國家標準，能夠完成標準所規定的任務。（ 4）一旦發生意外，立即向生物安全員匯報。4、個人防護程序4.1 個人防護用品的使用要求4.2 個人防護用品的穿戴順序4.3 個人防護用品脫卸順序六、 事件、傷害、事故和職業性疾病報告制度1、目的糾正檢驗工作中的差錯，及時處理責任事故，吸取事故的教訓，確保檢驗設備和人員的安全。2、范圍適用于檢驗工作中出現的事故分析報告、調查和處理。3、職責3.1 事故責任部門負責人填寫事故報告單

16、，報告事故發生的原因及采取的措施。3.2 業務質量管理科和有關科室負責人協助中心負責人做好事故的調查處理工作。4、工作程序4.1 事故分類凡違反各項規定所造成的事故均為責任事故，按其經濟損失和人身傷害和大小分為 以下幾種：大小事故界限表損失情況小事故一般事故大事故重大事故經濟損失w 100 元1001000元100010000元A 10000元人身傷亡受工 人休,一 一血<:一一人受傷，休 工3日以上兩人受傷或一人 受傷，休工1-6個 月三人以上受傷， 休工一年以上， 或一人致殘或死 亡。4.2 事故的處理4.2.1 事故發生后，應立即采取有效措施，防止事態擴大，搶救受傷人員和儀器設備,

17、 報告上級領導。4.2.2 事故發生3日內，事故責任人寫出事故發生原因、經過及教訓、責任，并由 發生事故科室填寫事故報告單，報業務質量管理科和行政管理科。4.2.3 事故發生后5日內，由業務質量管理科和行政管理科協助中心負責人主持召 開事故分析會，對事故進行分析并對事故責任人作出處理。事故責任科室采取糾正 措施，防止類似事故再發生。4.2.4 重大事故發生后一周內，由檢驗科負責人向上級主管部門送交事故處理專題 報告。4.2.5 事故報告處理單等記錄材料由業務質量管理科歸檔保存。大事故和重大事故 記入事故責任人技術檔案。7、 實驗室生物危險標識使用規定1. 目的規范生物安全二級實驗室的使用和管理

18、。2. 適用范圍適用于生物安全二級實驗室。3. 具體要求：3.1 在具有生物安全二級實驗室門口加貼專門的生物安全警示標識， 以避免無關人員 進入相關區域，造成感染的危險。3.2 在有可能對人員造成威脅的生物標本儲存處加貼生物安全警示標識， 以防無關人 員將危險標本帶入安全區域對人員造成威脅。8、 實驗室內務管理制度1. 目的確保生物安全二級實驗室的正常運行、實驗人員、物品和環境的安全2. 適應范圍適應于生物安全二級實驗室。3. 職責進入生物安全二級實驗室工作的所有工作人員嚴格遵照本管理制度執行。4. 基本制度4.1 在主實驗室設置清潔區、半污染區和污染區。入口處貼有醒目的生物危險標志。4.2

19、非實驗室有關人員和物品不得進入。4.3 實驗室內不得進食和飲水，或者進行其他與實驗無關的活動。4.4 實驗室工作人員、 外來合作者、 進修和學習人員在進入實驗室及其崗位之前必須經過實驗室負責人的批準。4.5 實驗過程中，嚴格按有關操作程序操作，降低剪除和氣溶膠的產生。4.6 用移液器吸取液體，嚴禁口吸。4.7 實驗室的工作人員必須是經受過專業培訓的技術人員。 在獨立進行工作前還需在中高級實驗室技術人員指導下進行上崗培訓，達到合格標準，方可開始工作。4.8 實驗室的工作人員必須被告知實驗室工作的潛在危險并接受實驗室安全教育， 自愿從事實驗室工作。4.9 實驗室的工作人員必須遵守實驗室的所有制度、

20、規定和操作規程。4.10 實驗室的工作人員在開始工作前必須留本底血清進行有關的檢測，以后定期復檢。如有疫苗必須進行免疫注射。4.11 所有培養物、廢棄物在運出實驗室前必須經可行的消毒方法進行消毒。4.12 工作前應消毒，活性物質濺出后要隨時消毒。5. 實驗室特殊管理制度5.1 進行感染性實驗室時， 應禁止他人進入實驗室， 或必須經實驗室負責人同意方可入內，免疫耐受或正在使用免疫抑制劑的人員不許進入實驗室，或必須經實驗室負責同意方可入內。5.2 實驗室人員進入實驗室前必須進行有效的培養和模擬訓練。 掌握預防暴露和暴露后的消毒處理程序。5.3 實驗室人員應接受必要的免疫接種和相應的抗體水品測定。5

21、.4 實驗室事故處理：工作人員在操作過程中發生意外，如針刺和切傷、皮膚污染、感染性標本濺及體表和口鼻眼內、衣物污染實驗臺面等均視為安全事故，應視事故類型的不同情況，立即進行緊急處理。具體措施按實驗室應急處置預案執行。5.5 填寫意外情況登記與處理記錄表，并按規定報告給有關部門。5.6 處特殊情況外，禁止在實驗室內使用銳器。5.7 剩余的標本應密封后置于適當條件下保存。5.8 實驗過程中應使用鑒定合格的二級生物安全柜。5.9 實驗設備在運出修理或維修前必須嚴格消毒，方可運出。9、 實驗室菌（毒）種和生物樣本安全保管和檔案管理制度1、 目的規范 實驗室菌（毒）種 和生物樣本的保管和檔案管理2、 適

22、用范圍實驗室菌（毒）種 和生物樣本的處理和檔案管理3、 實驗室菌（毒）種 和生物樣本的保管3.1 按國家規定可以保存的菌（毒）種，由指定的專人負責登記、保存和管理。按期傳代、鑒定，必須在無菌室或接種罩內進行，并做好有關記錄。在保存過程中發現菌（毒）種變異或死亡，應及時上報科長和中心主任。3.2 本區檢出的地方菌（毒）株應及時上報，因工作需要暫時保留的菌（毒）株也應按上級規定的時間進行銷毀處理。新發現的菌（毒）株，要做好原始記錄，并上報主管部門復核確認。3.3 菌（毒）種必須每種設一記錄卡，其內容包括：名稱、編號、來源、分離日期、引進日期、鑒定日期、鑒定結果、鑒定者、審核者、傳代情況、所用培養基

23、、保存方法、溫度、使用轉移及銷毀情況、保存者、部門負責人等。3.4 向上級主管部門申請索取菌（毒）種和向下級有關部門發放菌（毒）種時，應有2 人參加辦理，嚴格執行國家有關規定，手續要完備，并認真做好記錄備查。3.5 一、二類菌（毒）種，應派專人向提供單位領取，不得郵寄；三類菌（毒）種的郵寄必須持有郵寄單位證明，并按照菌（毒）種郵寄與包裝的有關規定辦理。3.6 未經上級批準，任何單位及個人不得以工作之便，進行國際間各類菌（毒）種交流，做好菌（毒）種安全防范工作。4、 檔案管理制度4.1 、非實驗室人員不得隨意查看實驗室記錄4.2 、實驗室人員負責妥善保存各種樣品登記本、報告單及實驗室原始記錄，不

24、得擅自修改和銷毀4.3 、專人負責保管感染者檔案4.4 、未經領導批準不得向無關人員或單位提供任何實驗室及感染者信息4.5 、 HIV 抗體初篩實驗室檢測的陽性結果不是最終結果，須進一步確認，確認前不得出具陽性報告及告知受檢者本人或有關單位十、 實驗室廢棄物管理制度1. 目的規范廢棄物處理2. 適用范圍尖銳器具和其他廢棄物的處理。3. 具體方法：3.1 尖銳器具的處理3.2 廢棄物的處理十一、實驗室消毒隔離制度1. 目的規范微生物實驗室和生物安全二級實驗室的消毒隔離工作。2. 適用范圍微生物實驗室和生物安全二級實驗室。3. 職責所有工作人員都必須遵從本規程。4. 具體步驟4.1 實驗室基本要求

25、4.2 消毒方法高壓消毒30 分鐘。其他器材方入有效氯為 2000mg/L 的含氯消毒液內浸泡 1 小時以上。處理時應避免皮膚損傷。高壓消毒30 分鐘。 防護鏡浸泡在75乙醇或有效氯為1000mg/L 的含氯消毒劑中，作用 30-60 分鐘。A1.5W,距紫外燈1米處照射強度A 70W限。高壓消毒30 分鐘，消毒后的廢棄物集中收集、焚燒處理。5. 實驗室高壓消毒安全操作5.1 使用前應了解并掌握高壓鍋的原理及操作規則， 以及不正確使用而導致的災難性后果。5.2 按照操作規程使用高壓鍋“編集”鍵，然后按上下鍵調節到滅菌所需溫度，然后按“實行”鍵，把所設溫度存進程序。“編集”鍵，然后按上下鍵調節到

26、滅菌所需時間，然后按“實行”鍵，把所設時間存進程序。“實行”鍵執行滅菌程序，此時“滅菌”燈閃爍。5.3 高壓鍋操作人員在使用高壓鍋時不得離開崗位； 在日常使用過程中，必須嚴格按照操作規程執行，并按照規定進行設備的維護。每 1 年保養一次，每月檢測一次消毒效果。5.4 高壓鍋的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物品后，高壓鍋的蓋子或門必須擰緊。5.5 定期檢查高壓鍋，以確保其正常工作，防止意外事故發生，保證消毒滅局效果。5.6 高壓滅菌安全操作步驟 30 分鐘，時間和溫度不得超過設定值，否則滅菌袋會融化，清理困難。十二、實驗室應急處置預案1目的規范緊急情況的處理工作。2適用范圍

27、微生物實驗室和微生物安全二級實驗室。3職責遇有緊急情況所有工作人員嚴格按此規程處理。4具體要求：4.1 造成或可能造成實驗室污染， 但未造成人身傷害的實驗室事故， 由實驗室負責人處理。例如實驗過程中，由于標本、試劑溢出濺落造成操作臺或地面的污染等，應立即噴灑消毒液并覆蓋浸透消毒液的紙巾，等消毒液徹底浸泡30 分鐘后，對污染的 物品進行處理。清理后的物品高壓滅菌。并填寫生物安全二級實驗室意外情況登記與處理記錄表，實驗室負責人應指導這些處理行動，并檢查處理效果。4.2 在沒有強毒微生物時，再實驗室內受到意外傷害，例如割傷、燒傷、燙傷等，由實驗室負責人處理。令受到傷害的人員立即停止工作，用消毒液清洗

28、未破損的皮膚表面，傷口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反復沖洗。有在同一實驗室內工作人員或派人迅速著裝進入實驗室，清除造成傷害的原因，清理實驗材料，幫助受傷人員緊急處理并撤離實驗室。受到傷害的人員應立即就醫，并將受傷原因及接觸微生物的情況通報負責人。對其進行恰當而完整的病史記錄。在其身體狀況未恢復之前，不得重新進入實驗室工作。實驗室在經過整理，消除了造成傷害的故障之后，方可重新使用。4.3 傷害事故可能導致被強毒微生物感染，例如針頭刺破、銳器割傷、粘膜暴露等途徑接觸到感染性液體，首先進行局部處理，用肥皂和水清洗污染的皮膚，擠壓傷口盡可能擠出損傷處的血液，用肥皂或清水沖洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎

29、傷口。在操作過程中發生培養物、污染材料濺落身體表面等情況，首先使用噴淋裝置，盡快將污染物沖洗掉，然后再進行局部處理。暴露的粘膜應盡快用生理鹽水或清水沖洗干凈。實驗室負責人應向上級部門報告，對受傷害者進行隔離觀察，同時根據情況預防性用藥，并寫出職業暴露后預防感染的評價和處理方案。4.4 實驗室事故可能造成氣溶膠污染，如壓力容器或管道破裂等，立即關閉實驗室，疏散現場的所有人員，對所有暴露人員提出相應的醫學建議。立即通知實驗室負責人及生物安全員。至少在1 小時內，任何人員不得進入現場，以便氣溶膠的消散記空氣中較重微粒的沉降。張貼禁止入內的警示標志。在生物安全員的監督下進行消毒、凈化處理；執行這項工作

30、時應當穿戴合適的防護服及呼吸防護用具。實驗室負責人員除立即采取對應措施外，應向上級部門報告，填寫意外情況登記與處理記錄被傳染性物質物質污染的小玻璃瓶及其他容器破碎時，用布或紙巾覆蓋，爾后將消毒劑傾倒其上，放置30 分鐘。其后即可清除掉，玻璃碎片應當用鑷子清理。污染區域應當用消毒劑清洗。破碎物品清理時如果使用了簸箕，應將其進行高壓滅菌或用有效的消毒劑浸泡 24 小時。清理使用過的布、紙巾、抹布及拖把，放入污染廢棄物容器中。上述步驟均應佩戴手套。4.6 如果實驗室的紀錄表格、 其他印刷品或書面材料遭到污染， 在妥善轉抄后或烤后，應當將其棄入污染廢棄物容器。4.7 試管破碎于密閉式安全離心杯中所有密

31、閉式安全離心杯在生物安全過程中裝載和卸載。如果懷疑發生了破損，應當將其蓋子擰松；爾后，將整個離心杯高壓滅菌。4.8 蓄意破壞堅固、厚重的門、牢靠的鎖具以及限制出入，都是合適的防范措施。發現蓄意破壞情況后報告實驗室負責人及生物安全員，視破壞種類按照上述方法進行處理，并詳細填寫意外情況登記與處理記錄表。十三、實驗活動生物安全標準操作規程（一）艾滋病初篩檢測實驗操作規程1. 目的保證艾滋病病毒抗體ELISA實驗的準確性。2. 適用范圍艾滋病病毒抗體ELISA實驗。3. 具體要求3.1 樣品采集 樣品采集安試劑盒要求采集。采血時注意安全，用一次性注射器謹慎操作，防止發生刺傷和造成外界污染。血樣如即時用

32、可存于普通冰箱，如要長期保存，分離血清置于 -20 及以下。同時做好記錄。3.2 樣品運送樣品轉送，除特殊需要外，必須是血清或血漿，置于帶有蓋帽的試管內，或將塑料試管用酒精燈封死，防止樣品流出。試管上標明姓名、時間、編號，將試管放入專門帶蓋的容器內，容器的材料要易于消毒處理，在所放試管周圍上下墊有軟性物質，以免碰碎，容器外標有HIV 檢測專用字樣和生物危害標志。路途較遠或氣候炎熱時，容器應置于4 以下運送。這樣同時附送檢單。3.3 樣品登記和處理冰箱中，如要貯存，置于 -20 冰箱。3.4 實驗準備3.5 加樣和稀釋根據樣品數量將合適數量的酶標板條固定在板架上，為了不損壞洗扳機，每道上的酶標板

33、條必須保持完整不足部分可用廢棄的微孔添充 ，檢查加樣器加樣刻度是否與試劑盒要求的加樣量相符，按照原始記錄表表明的位置加入各種質控品和檢測樣品，注意：空白只加標本稀釋液。加樣量和稀釋度嚴格按照試劑盒說明書規定的操作，一般先加樣品稀釋液后再加入樣品。加樣要準確，小心不要使吸頭碰著酶標板空上是包被抗原。為保證加樣的準確，最好使用多孔道加樣器，使用時注意防止吸頭間的交叉污染。3.6 溫育 貼好封板膜， 按照試劑盒要求的溫度和時間進行溫育， 最好選擇濕育方法。3.7 洗板開啟洗板機前，先檢查洗板機廢液瓶是否已排空，開啟后先用蒸餾水沖洗管道，再換上洗液瓶。按照試劑盒的要求，選擇、修改洗扳方式、洗滌次數和浸

34、泡時間，根據所用酶標板的條數確定洗板道數，根據酶標板的位置調節洗頭的位置，然后開始洗板，洗板結束后用蒸餾水沖洗管道。3.8 加酶結合物對于二步法ELISA 實驗需加酶結合物，按試劑盒要求完成。3.9 加底物洗好板后應立即加底物，需加自配的底物應現配現用。3.10 終止反應 在規定的時間內用試劑盒中的或根據要求自行配置的終止液終止反應。3.11 酶標儀讀物 按照試劑盒的要求選擇濾光片， 確定空白孔位置， 選擇合適達的打印報告格式，讀數并打印結果。3.12 所用儀器在使用后及時填寫使用記錄。3.13 結果判斷計算± 10%的標本為灰色帶反應。陽性及灰色反應區標本，用原有的試劑盒另一種試劑

35、重復試驗。3.14 結果登記和報告將試驗結果登記在記錄本和標本試劑記錄本上，將OD直打印結果貼在原始記錄表上，檢查原始記錄表是否填寫完整，操作者，復核者簽字。陰性結果出具HIV 抗體篩查報告陰性，陽性或疑問結果填寫 HIV 抗體篩查陽性送檢單，由專入送疾控中心進行確認。3.15標本留存轉送 陰性標本收集血清冷凍保存一年。并填寫陰性血清保存記錄表，陽性標本收集血清封口包好，冷藏運送送確認實驗室。4. 支持性文件全國艾滋病監測工作規范艾滋病實驗室安全操作及防護措施（二） 、結核桿菌實驗室生物安全規程1. 實驗室管理制度（ 1）實驗室入口處必須貼上生物危險標志，注明危險因子，生物安全級別，試驗室負責

36、人和相關負責人姓名和電話。（ 2）實驗室應有明顯的區域劃分，清潔區，辦污染區和污染區。（ 3）無論進入實驗室時間長短，必須填寫工作日志。要嚴格遵守實驗室的一切操作規程。（ 4）進行結核菌操作時，需有兩名工作人員同時進入實驗室，盡量避免單獨工作。（ 5）在對大批量的痰標本和菌株進行分離培養和藥敏試驗前，英語中心新主任和實驗室主任討論，必要時加強預防措施。（ 6）試驗室人員應做結核菌素試驗，試驗結果為陰性時，應接種卡介苗，并做好登記記錄。 （ 7）外來進修，參觀人員必須學習實驗室的一切規章制度和有關操作規程，經試驗室主任批準方可進入實驗室。2. 標本采集人員安全要求（ 1） 標本采集人員的防護：痰

37、標本有病人自行留取，采集咽拭子等特殊標本，采集人員應穿防護服，戴一次性口罩，帽子，戴醫用手術手套。2）采集標本污染器材的處理：采集標本的痰盒，試管等污染器材均需高壓滅菌處理。3. 標本運送安全要求痰標本需留置在特制的痰盒內（直徑4cmi高2cm的光口蓋密閉的塑料盒），并放置在專用的痰標本運送箱內 , 運送過程中切勿倒置, 嚴防痰液外溢。由有專人送至痰檢實驗室 , 標本送達后痰標本運送箱及時用乙醇或是碳酸等化學消毒劑或高壓的辦法徹底消毒。4. 實驗操作安全要求（ 1）結核病細菌學實驗室要求結核病細菌學實驗室應為生物安全田級實驗室，用于臨床診斷，教學，屬中度危險.應具備安全設備, 緩沖間實驗室條件

38、應滿足工作任務的要求, 有完善的試驗設施, 試驗室的環境應清潔, 衛生 , 安靜 , 無污染 , 試驗室內的管線設置應整齊, 要有安全管理措施和報警, 應積及急救設施, 房間數量不少于七間 , 包括實驗室準備室 , 培養機制備室 , 顯微鏡檢查室 , 圖片檢查室 , 接種室 , 培養室高壓消毒室等。具備完善的質量保證體系中應有明確的分級責任制度, 以確保檢驗的工作質量保證檢驗 , 復核 , 科研結果等各項報告的準確可靠性。（ 2）實驗室儀器設備及功能的要求結核菌素檢查時必須在二級生物安全柜內進行, 無菌操作內禁放雜物 ,并應制定地面, 門窗 , 墻壁 , 設施等的定期清潔, 滅菌規程 , 操作間沒有紫外線燈 ; 實驗室內應光線明亮