1、冠狀動脈支架植入術對急性冠脈綜合征患者血漿Syndecan?4 水平的影響    作者：張建興，歐陽平，賴文巖，貝偉劍，左琦， 王峰，許頂立 【摘要】  目的 觀察冠狀動脈支架植入術對急性冠狀動脈綜合征患者血漿Syndecan?4 蛋白水平的影響。方法 經冠狀動脈造影確診為急性冠狀動脈綜合征并行冠狀動脈支架植入術的患者共43例，分別在術前、術后1 h和術后24 h收集血樣本，并設立對照組進行比較，采用ELISA法分別測定兩組患者血漿中Syndecan?4 蛋白水平。結果 急性冠狀動脈綜合征支架植入組術后1 h，血漿Syndecan?4 蛋白水平

2、明顯升高，與術前水平比較差異有顯著性（P<0.05），支架植入組術后24 h，血漿Syndecan?4 蛋白水平明顯下降，與術后1 h及術前比較差異均有顯著性 (P<0.05)。對照組冠狀動脈造影術前、術后1 h、術后24 h三個時間點的血漿Syndecan?4 蛋白水平比較差異無顯著性 (P>0.05)。急性冠狀動脈綜合征支架植入組術前、術后24 h兩時間點的血漿Syndecan?4 蛋白水平與對照組比較差異無顯著性;術后1 h血漿Syndecan?4 蛋白水平顯著高于同時間點的對照組(P<0.05)。結論 冠狀動脈支架植入術能夠明顯提高急性冠狀動脈綜合征患者血漿中S

3、yndecan?4 蛋白水平,提示Syndecan?4 作為一種生物學調節因子在血管急性機械損傷的修復及早期血管炎癥反應中發揮著重要的作用。 【關鍵詞】  Syndecan?4 ；經皮冠狀動脈介入治療；急性冠脈綜合征；炎癥 Abstract:Objective  To observe the effects of coronary stent implantation (CSI) on plasma levels of Syndecan?4  protein in patients with acute coronary syndrome. Methods

4、0; A total of 43 patients were angiographically confirmed acute coronary syndrome and underwent successfully coronary stent implantation. Blood samples were collected pre?stenting and post?stenting at 1 hour and 24 hours respectively, and 11 patients with normal angiography as the control group. The

5、 plasma levels of Syndecan?4  protein in patients were measured by enzymelinked immunosorbent assay(ELISA). Results  The plasma concentrations of Syndecan?4  protein in the CSI group increased significantly at 1 hour after stenting (P<0.05),the plasma levels of Syndecan?4  dec

6、reased significantly at 24 hours after stenting (P<0.05).There were no statistical differences in plasma levels of Syndecan?4  protein in the control group at three different time points (P>0.05). The plasma levels of Syndecan?4  protein in the CSI group at 1 hour after stenting were

7、 significantly higher than that of the control group at 1 hour after angiography (P<0.05). However, statistical differences in plasma levels of Syndecan?4  protein were not observed between the two groups at both pre?operation and at 24 hours of post?operation. Conclusion  Coronary sten

8、t implantation could significantly increase plasma levels of Syndecan?4  protein in patients with acute coronary syndrome. It was suggested that Syndecan?4  might play an important role as a biological mediator in the mechanical damage repair and early inflammation in vascular wall.  

9、   Key words:Syndecan?4 ; percutaneous coronary intervention; acute coronary syndrome; inflammation      最近研究表明，炎癥反應在冠狀動脈支架植入術（coronary stent implantation，CSI）后再狹窄的發生發展中扮演著重要的角色1，球囊損傷和支架植入后即出現早期快速活躍的炎癥反應，單核細胞、血小板和淋巴細胞黏附到血管壁，釋放一系列細胞因子和生長因子，與特異性受體結合后轉導影響血管平滑肌細胞表型和生長信號，因此促

10、進了晚期纖維增殖病變的發生2。Syndecan?4 是硫酸乙酰肝素(heparan sulfate,HS)類的跨膜轉運蛋白多糖syndecans家族的成員之一3。Syndecan?4 作為一種與生長因子結合的共受體(co?receptor),調控著多種細胞生物學效應，在細胞伸展、識別、黏附、遷移和增殖控制中扮演著重要的角色，同時也介導炎癥反應3-5。但目前對冠狀動脈支架植入術與Syndecan?4 間的關系尚未見報道，本研究觀察了冠狀動脈支架植入術對急性冠脈綜合征患者血漿中Syndecan?4 蛋白水平的影響。 1  資料與方法     1.1 

11、; 研究對象     臨床標本均采自南方醫科大學附屬南方醫院2007 年10月至2008年10月入院經冠狀動脈造影確診急性冠狀動脈綜合征并行冠狀動脈支架植入術的部分患者43例(CSI組)，經冠狀動脈造影除外冠心病的部分患者11例(對照組)。CSI組男33例，女10例，平均年齡為(56.19±9.06)歲，其中合并高血壓病22例，陳舊性心梗4例，2型糖尿病7 例，高脂血癥8例。對照組男7例，女4例，平均年齡為（58.27±5.98）歲，其中高血壓病4例，糖尿病3例，主動脈硬化2例，心肌橋2例。本研究經本院倫理委員會批準。CSI組病例入選條件:經冠

12、狀動脈造影確診為急性冠狀動脈綜合征并行冠狀動脈支架植入術治療的患者。包括既往曾行介入治療再次行冠狀動脈支架植入術治療的病人；臨床病史由患者本人提供并且資料完整。排除標準：有嚴重感染患者；有嚴重肝腎功能損害者；有惡性腫瘤患者；有全身免疫系統疾病、結締組織疾病者；有各種全身炎癥性疾病者。兩組患者的一般情況、血壓、血糖和血脂情況經統計學處理，差異無顯著性，具有可比性。急性冠狀動脈綜合征患者均接受阿司匹林、ACEI類、受體阻滯劑、氯吡格雷、低分子肝素及降脂治療。對照組患者也接受相關的阿司匹林、降壓及降脂治療。     1.2  血標本采集   

13、;  冠狀動脈支架植入術組：在患者行PCI手術前、術后1 h和術后24 h分別從肘靜脈采血3 mL，置于EDTA的試管中，4 h內處理標本，2 000 r/min ，20 離心10 min，取上層淡黃色血漿，置于-50 低溫冰箱保存待測。對照組：在行冠狀動脈造影術前、術后1 h和術后24 h從肘靜脈采血3 mL，血樣處理與CSI組相同。     1.3  Syndecan?4 測定     采用ELISA法測定患者血漿Syndecan?4 水平。檢測試劑盒為德國IBL公司生產的Human Syndecan?4

14、60; Assay Kit(Code No.27188)。具體實驗按該試劑盒所配說明書進行操作，在Bio?Rad 550型酶標儀上以450 nm測定各孔吸光度(A)值。以A值對Syndecan?4 標準品濃度(pg/mL)作標準曲線(見圖1)，待測標本Syndecan?4 含量可從標準曲線上查出。     1.4  統計分析     所有實驗數據以±s表示，采用SPSS 13.0軟件包進行統計分析，CSI組與對照組內連續變量資料比較用重復測量方差分析，CSI組與對照組間相同時間點資料比較用兩獨立樣本t檢驗，P<

15、;0.05為差異有顯著性。     2  結 果     急性冠狀動脈綜合征患者行冠狀動脈支架植入術后1 h，血漿Syndecan?4 蛋白水平明顯升高，與術前水平比較差異有顯著性 (P<0.05)；冠狀動脈支架植入術后24 h，血漿Syndecan?4 蛋白水平出現明顯下降，與術后1 h及術前比較差異均有顯著性 (P<0.05)。對照組術前、術后1 h、術后24 h三個時間點的血漿Syndecan?4 蛋白水平差異無顯著性（P>0.05）。表明單純的冠狀動脈造影術對血漿Syndecan?4 蛋白水平無明顯

16、影響。急性冠狀動脈綜合征組術后1 h血漿Syndecan?4 蛋白水平明顯高于同時間點的對照組(P<0.05)。而急性冠狀動脈綜合征組術前、術后24 h兩時間點的血漿Syndecan?4 蛋白水平與對照組比較差異無顯著性 (P>0.05)，見表1。表1  冠狀動脈支架植入術對急性冠狀動脈綜合征患者血漿Syndecan?4 蛋白水平的影響     3  討 論     炎癥是宿主對可能引起組織損傷的內源性或外源性因子的自然反應。這種反應包括各種分子和細胞間復雜的協同作用。冠狀動脈內支架的植入導致動脈壁的損

17、傷，出現炎癥反應，尤其是在植入的早期，當支架植入伴隨血管中膜損傷時，炎癥反應遂變得更為明顯，從而造成損傷早期大量的單核細胞和粒細胞由血管管腔內浸潤至血栓和血管壁中6。Farb等通過對尸體解剖中血管再狹窄組織的分析研究，證實了炎癥成分在動脈壁對支架植入后所作出的反應中的重要角色7。Farb等8在支架置入術后90 d患者支架部位病理學研究中發現，血管內膜撕裂引起的炎癥反應與支架內再狹窄的發生密切相關。    Syndecan?4 作為一種與生長因子結合的共受體（co?receptor）在調節組織急性損傷后組織修復和調節炎癥反應中扮演著重要的角色3-5。Li等

18、報告了在大鼠頸動脈球囊損傷模型中，血管新生內膜和外膜中均有Syndecan?4 蛋白的表達持續上調9，其研究發現，球囊損傷大鼠頸動脈2 h到第5天，血管外膜的成纖維細胞中有大量的Syndecan?4 蛋白的表達。同時，在損傷后即刻到5 d內血管中層平滑肌細胞均有Syndecan?4 蛋白的表達。Kojima研究小組的臨床觀察發現急性心肌梗死病人的血中Syndecan?4 蛋白水平明顯增加，高峰持續23周10。Wang等報告了血管內皮細胞表達的Syndecan?4 參與了炎癥反應過程中L?選擇素和化學因子介導的中性粒細胞的聚集11，炎癥的一個重要標志是粒細胞從循環中迅速補充至組織損傷部位。粒細胞

19、聚集是一個多步驟過程，受L?選擇素、P?選擇素、E?選擇素及其配體的調節。首先是損傷部位的促炎因子(例如TNF和IL?1)激活內皮細胞。然后，白細胞通過P選擇素?PSGL?1和L?選擇素?sialyl Lewis X (sLeX)的相互作用滾動黏附至激活的內皮細胞。Syndecan?4 在粒細胞滾動過程中的主要作用是調節L?選擇素3。Rauch 12等報導了凝血酶通過誘導Sydnecan?4蛋白的表達上調，從而激活p44/42 MAPK。 Syndecan?4 是凝血酶誘導人血管平滑肌細胞增殖反應中所必需的成分；Houston13等報導了氧化型亞油酸能夠刺激大鼠和人的血管平滑肌細胞增殖并上調

20、Syndecan?4 的表達，本課題組在先前的研究中發現腫瘤壞死因子?能明顯增加血管平滑肌細胞和人臍靜脈樣內皮細胞Syndecan?4 蛋白的表達14，15，說明Syndecan?4 與血管損傷后的炎癥反應密切相關。     本研究發現，冠狀動脈支架植入術后1 h急性冠狀動脈綜合征患者血漿中Syndecan?4 蛋白水平明顯增加，推測可能與球囊擴張及支架植入時對血管壁內皮細胞和血管平滑肌細胞的機械牽拉作用有關，由于球囊及支架對血管壁的急性損傷，造成內皮細胞、血管平滑肌細胞及血小板表達Syndecan?4 蛋白增加，導致血漿Syndecan?4 蛋白水平的升高。其次

21、，支架作為一種異物也會刺激血管壁的各種細胞產生一系列炎癥反應，使Syndecan?4 蛋白的表達增加，最終導致血漿Syndecan?4 蛋白水平的增加。至于支架植入術后24 h Syndecan?4 蛋白水平顯著下降，考慮與Syndecan?4 外功能區的大量脫落促使血管壁細胞分泌許多組織損傷介質(例如細胞因子、生長因子、細胞黏附分子等)有關。另外Nicole等16研究表明抗纖維蛋白酶具有與Syndecan?4 結合并抑制其外功能區脫落的能力。支架植入所造成的早期急性炎癥反應和血栓形成均導致抗纖維蛋白酶的大量消耗，從而促使Syndecan?4 外功能區的大量脫落。目前研究表明，Syndecan

22、?4 外功能區的脫落是一個具有高度可調節的過程。在體外，一些炎癥因子能刺激這一過程的發生，而在體內則只有特定的因子能刺激這一過程。Syndecan?4 脫落激動劑包括EGF家族生長因子、凝血酶、趨化因子(RANTES)等。這些激動劑在細胞內通過特定的信號轉導通路發揮作用，增強了 Syndecan?4 胞外功能區的脫落3。Julien MA等報告在機械應力的作用下，血管平滑肌細胞表達Syndecan?4 蛋白明顯增加，但隨著作用時間的延長，Syndecan?4 的胞外功能區大量脫落，生長因子、細胞因子、蛋白酶和相關配體的活性可能通過與脫落的Syndecan?4 的相互作用而被改變，從而調控細胞的

23、行為17。     綜上所述，冠狀動脈支架植入術能夠明顯增加急性冠狀動脈綜合征患者血漿中Syndecan?4 的水平, 提示Syndecan?4 作為一種生物學調節因子在血管急性機械損傷的修復及早期血管炎癥反應中發揮著重要的作用。     （本研究實驗數據的統計處理得到了南方醫科大學統計教研室譚旭輝老師的大力協助，特此致謝。） 【參考文獻】  1 WELT F G,ROGERS C.Inflammation and restenosis in the stent eraJ.Arterioscler Thromb Vasc B

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