1、12.生物技術實踐（B）1. （2018 杭州學軍中學模擬）回答下列有關果膠、果汁和果膠酶等相關的問題：（1）果膠是植物細胞壁的主要成分， 起著將植物細胞 _在一起的作用。制作果汁時可加入果膠酶和 _ 以分解果膠，提高果汁出汁率和澄清度。果膠酶可從黑曲霉中提取，下列適于黑曲霉擴大培養的培養基是_（A.蛋白胨和酵母提取物培養基B.尿素固體培養基C.MS 培養基 D.添加蔗糖的豆芽汁培養基）。由于果膠酶溶于水，不利于重復使用，可通過物理或化學方法將果膠酶固定在某種介質上，使之成 為不溶于水而又有 _ 的制劑。（3）用果汁制作果酒，以果汁為原料，加入一定比例的蔗糖的目的是 _。最后倒入酵母懸液，混勻

2、，加蓋；發酵開始時，由于微生物的需氧呼吸會使發酵瓶內出現_，原因是_。答案（1）粘合果膠甲酯酶（2）D 酶活性（3）提高果酒的酒精和糖的含量負壓需氧呼吸消耗氧氣，產生的二氧化碳比氧氣易溶于水2. （2018 寧波鎮海中學期中）請回答與“大腸桿菌的培養與分離”實驗有關的問題：（1）_ 大腸桿菌是革蘭氏、 兼性厭氧的腸道桿菌， 一般對人無害。實驗室利用_ 培養基擴大培養大腸桿菌，培養后使用灼燒、冷卻后的 _進行劃線分離，這種_的分離是用于篩選高表達量菌株的最簡便方法之一。（2）_ 若要將大腸桿菌臨時保存，一般接種在上， 37C培養 24 h 后，置于 _ （A.20CB. 4CC.4CD.3 7C

3、）環境條件下保存。答案（1）陰性 LB 液體接種環單菌落（2）斜面 C2解析（1）大腸桿菌是革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌；在實驗室中擴大培養大腸桿菌時常用 LB 液體培養基；接種時需對接種環灼燒滅菌；采用劃線分離法篩選出高表達量單菌落。（2）若要將大腸桿菌臨時保存，一般接種在斜面培養基上，37C培養24 h 后，并置于 4C環境條件下保存。3. 在調查和分離湖水中耐鹽細菌的實驗中先將10 升湖水水樣濃縮至 10 毫升，然后各取濃縮水樣 1 毫升，涂布到多個培養皿中培養。請回答下列問題：(1) 可以通過提高培養基中 _ 的濃度，篩選被調查細菌，這種培養基被稱為 _培養基。(2) 要提高實驗結果

4、的可靠性，排除培養基未徹底滅菌的可能性，應該設置的對照組是_。為檢驗(1)中篩選方法的效果，可以設置的對照組是 _。(3) 在微生物的培養過程中，實驗室對培養基滅菌常用的方法是 _。為防止冷凝水影響細菌的生長需將培養皿 _培養。(4) 根據培養皿上菌落的平均數，可以計算湖水中該種細菌的密度，但計算的數據要比實際活菌的數目少，原因是_ 。答案(1)鹽(或 NaCI)選擇(2)未接種(或接種等量無菌水)的培養皿未加高濃度鹽的培養基培養(3)高壓蒸汽滅菌 倒置 (4)當兩個或多個細胞連在一起時，在平板上觀察到的是一個菌落4. (原創)釀酒、造醋是我國的傳統技藝，為了探究與改進制造工藝，進行了相關研究

5、。請回 答有關問題：(1) 目的菌株篩選后應該利用 _ 培養基進行擴大培養，_是消除污染雜菌的通用方法。(2) 制作葡萄酒過程中， 為了使酵母菌迅速發生作用， 可加少量 _混勻。將葡萄漿放入發酵瓶，裝量不超過 _ (A.1/2B.2/3C.3/4 D.100%)，當發酵瓶 _ 表示發酵完畢。(3) 醋的制作中發酵瓶中裝鋸末至 _，將適量的醋化醋桿菌培養物加在酒一水混合物中混勻，并調 pH 至_ 后，倒入發酵瓶。答案(1)液體單菌落的分離(2)蔗糖 B 停止出現氣泡(3)八分滿 7.05. 下圖為葡萄酒生產工藝流程簡圖，請據圖回答下面的問題：|而H卜而7H發胖日麗(1) 流程中“方框”處的內容依

6、次為 _、_。(2) 果酒釀造過程中如果果汁滅菌不合格，含有醋化醋桿菌，在酒精發酵旺盛時，醋化醋桿菌能否將果汁中的糖發酵為醋酸？說明理由： _。(3) 果酒制作離不開酵母菌，與醋化醋桿菌比，酵母菌在結構上的主要特點是_ (A.有細胞3壁 B.有細胞膜 C.有核糖體 D.有成形的細胞核)。(4) 若要提高果酒的產量，發酵過程中關鍵要控制好哪些條件？_ (至少填寫 2 項)。答案(1)沖洗 滅菌(2)不能。因醋化醋桿菌是好氧型細菌，而果酒發酵時是無氧環境D適宜的溫度、pH 通氣量6.尿素是一種高濃度氮肥，長期施用沒有不良影響，但尿素只有通過土壤中某些細菌分解為 氨后，才能被植物吸收利用。分解尿素的

7、細菌都能合成脲酶，脲酶能催化尿素水解。某同學 要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統計每克土壤樣品中活菌數目，培養基配方如下：KHPQNa2HPQMgSQ7H2Q蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂糖1.4 g2.1 g0.2 g1.0 g10.0 g1.0 g15.0 g根據培養基的成分判斷，該同學_(填“能”或“不能”)分離出土壤中分解尿素的細菌，原因是_。(2) 要統計每克土壤樣品中活菌數目，宜采用 _ 法接種。(3) 接種前要對培養基進行 _ 處理。在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在_條件下進行。(4) 某同學在純化土壤中的細菌時，發現培養基上的菌落連成一片，最可能的原因是_ ，應當怎樣操作才可避免

8、此種現象？ _。答案(1)不能 培養基中含蛋白胨，尿素不是唯一氮源(2)涂布分離(3)滅菌 無菌(4)菌液濃度過高對菌液進行梯度稀釋(加大稀釋倍數)7.請回答下列與微生物培養、發酵過程相關的問題：(1)_ 在“分離以尿素為氮源的微生物”的實驗中，配制好的尿素固體培養基加上封口膜后用_方法滅菌，冷卻后加入用 G6 玻璃砂漏斗過濾的尿素溶液。玻璃砂漏斗用后需 用浸泡，并抽濾去酸，再用 _沖洗，干燥后保存。在“果汁中的果膠和果膠酶”實驗中，可以用 _ (A.50%乙醇 B.70%乙醇 C.90%乙醇 D.95%乙醇)鑒別果膠。果膠酶可以從黑曲霉或 _ 中提取，配制這些微生物的培養基時需要將 pH 調

9、至_ 。(3)在“用果汁制作果酒”實驗中，為了增加果酒的含糖量，可以在發酵瓶中加入一定量的答案(1)高壓蒸汽滅菌1 mol/L 的 HCI 蒸餾水 (2)D蘋果青霉中性偏酸(3)蔗糖8.生活飲用水的微生物安全性日常檢測是很重要的。請回答下列問題：(1)_ 培養大腸桿菌所用的 LB 培養基一般用_法滅菌。檢驗大腸桿菌的含量時，通常用_將水樣進行一系列的梯度稀釋。將稀釋后的水樣分別用玻璃刮刀 _到 LB 固體培養基， _于恒溫培養箱，在4_ C 條件下進行培養。用該方法統計樣本菌落數時_(填“需要”或“不需 要”)設置對照組。(3)下圖表示培養和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關敘述正確的是_

10、。A.步驟倒平板操作時，倒好后應立即將其倒過來放置B.步驟接種環在火焰上灼燒后迅速蘸取菌液劃線C. 步驟多個方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養后出現單個菌落D. 步驟恒溫培養箱培養后可用來對大腸桿菌進行計數答案（1）高壓蒸汽滅菌無菌水（2）涂布倒置 37 需要（3）C9.請回答與“果汁中的果膠和果膠酶”實驗有關的問題：（1）果膠是細胞壁的重要組成成分， 其化學本質是（填寫如下選項），它在細胞壁形成過程中的主要作用是將相鄰的細胞 _ 在一起。A.蛋白質B.脂質C.核酸D.多糖（2）_制取果汁時，先用果膠酶將果膠分解成和半乳糖醛酸甲酯等物質，再用_酶處理，可得到比較澄清的果汁。用適量且濃度適宜的上述兩種酶處理時，果汁的 出汁率、澄清度與酶的 _高低成正相關。（3）由于果膠不溶于乙醇，故可用乙醇對果膠粗提取物（經酶處理后的混合物）進行_處理，從而得到干制品。答案（1）D 粘合（2）半乳糖醛酸果膠甲酯活性（3）脫水（沉淀）解析（1）果膠是由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯組成的，其化學本質屬于