1、第二章 組成細胞的分子 第1頁/共18頁 應用某些化學試劑能夠使生物組織中的有關應用某些化學試劑能夠使生物組織中的有關有機化合物產生有機化合物產生特定的顏色反應。特定的顏色反應。還原糖（還原糖（葡萄糖、果糖、麥芽糖葡萄糖、果糖、麥芽糖）+ +斐林試劑斐林試劑磚紅色沉淀磚紅色沉淀脂肪脂肪 + + 蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色 蘇丹蘇丹IVIV紅色紅色蛋白質蛋白質 + + 雙縮脲試劑雙縮脲試劑紫色絡合物紫色絡合物實質：實質：在堿性條件下，蛋白質與在堿性條件下，蛋白質與CuCu2+2+反應生成紫色或紫紅色絡合物。反應生成紫色或紫紅色絡合物。第2頁/共18頁選材選材樣液制備樣液制備加入試劑加入試劑顏色反應顏色

2、反應 觀察結果結論選材的原則選材的原則實驗現象明顯實驗現象明顯（富含檢測之物，避免干擾）；（富含檢測之物，避免干擾）；便于處理，易獲得；便于處理，易獲得；經濟節約；經濟節約；第3頁/共18頁1 1、選材：、選材： 含糖較高、顏色為白色或近于白色的含糖較高、顏色為白色或近于白色的 植物組織，蘋果、梨最好。植物組織，蘋果、梨最好。2 2、制樣：、制樣：蘋果切塊蘋果切塊研磨研磨過濾過濾濾液濾液4 4、檢測：、檢測：3 3、試劑：、試劑：甲液：甲液：0.1g/mL NaOH0.1g/mL NaOH 乙液：乙液：0.05g/mL CuSO0.05g/mL CuSO4 4 組織樣液組織樣液（2ml2ml）

3、 斐林試劑斐林試劑 （1ml1ml） 振蕩混勻振蕩混勻 5050 6565水浴加熱水浴加熱2min2min； 觀察試管中溶液顏色的變化觀察試管中溶液顏色的變化第4頁/共18頁第5頁/共18頁1.1.斐林試劑不穩定，斐林試劑不穩定， 需混勻后使用！需混勻后使用！2.2.本實驗對試管中的溶液進行加熱時，試管底本實驗對試管中的溶液進行加熱時，試管底 部不要接觸燒杯底部；部不要接觸燒杯底部；3.3.另外，試管口不要朝向實驗者，以免沸騰的另外，試管口不要朝向實驗者，以免沸騰的 溶液沖出試管，造成燙傷。溶液沖出試管，造成燙傷。第6頁/共18頁還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果第7頁/共18頁方法一：用方法一

4、：用蘇丹染液檢蘇丹染液檢測測組織樣液組織樣液方法二方法二：制作子葉：制作子葉臨時切片臨時切片，顯微，顯微 觀察子葉細胞的著色情況。觀察子葉細胞的著色情況。特別提醒特別提醒： 實驗用的花生種子需提前浸泡實驗用的花生種子需提前浸泡3-4h,3-4h,浸泡浸泡時間太短，不易切片時間太短，不易切片; ;浸泡時間太長，則組浸泡時間太長，則組織太軟，切下的薄片不易成形織太軟，切下的薄片不易成形。第8頁/共18頁取材：取材：花生種子花生種子( (浸泡浸泡3 34h4h），將子葉削成薄片），將子葉削成薄片制片制片取最理想的薄片取最理想的薄片在薄片上滴蘇丹在薄片上滴蘇丹染液（染液（2 23min3min）去浮色

5、（如何去浮色）去浮色（如何去浮色） 制成臨時裝片制成臨時裝片1-21-2滴體積分數為滴體積分數為50%50%的酒精溶液的酒精溶液觀察觀察低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒，然后用高倍鏡觀察然后用高倍鏡觀察結果及結論：結果及結論：圓形小顆粒呈橘黃色，說明有脂肪存在。圓形小顆粒呈橘黃色，說明有脂肪存在。第9頁/共18頁脂肪的檢測結果脂肪的檢測結果第10頁/共18頁1 1、選材：、選材：2 2、制樣：、制樣：4 4、檢測：、檢測：3 3、試劑：、試劑： 浸泡浸泡1-21-2天的黃豆種子（或用豆漿）天的黃豆種子（或用豆漿） 或用雞蛋蛋白或用雞蛋蛋白黃豆浸泡切片黃豆浸泡切

6、片 研磨研磨 過濾過濾 濾液濾液A A液：液：0.1g/mL NaOH0.1g/mL NaOH B B液：液：0.01g/mL CuSO0.01g/mL CuSO4 4 組織樣液（2ml） 雙縮脲試劑A （1ml） 雙縮脲試劑B （4滴 ）觀察溶液顏色 的變化第11頁/共18頁第12頁/共18頁1 1、如果用、如果用雞蛋清，雞蛋清，應應加以加以稀釋，若稀釋不夠，稀釋，若稀釋不夠，與雙縮脲試劑發生反應后會粘固在試管內壁上，與雙縮脲試劑發生反應后會粘固在試管內壁上，使反應不徹底，且試管不易洗干凈。使反應不徹底，且試管不易洗干凈。 2 2、鑒定之前、鑒定之前, ,可以留出一部分樣液，以便與鑒定可以留

7、出一部分樣液，以便與鑒定后的樣液的顏色變化作對比后的樣液的顏色變化作對比, ,這樣可以增強說服這樣可以增強說服力。力。作對照作對照第13頁/共18頁蛋白質的檢測結果蛋白質的檢測結果第14頁/共18頁還原糖還原糖蛋白質蛋白質淀粉淀粉脂肪脂肪來自那種生來自那種生物材料物材料A + + + - - - - -梨梨B - - + + + + + +黃豆黃豆C + + + + + + - -馬鈴薯馬鈴薯D - - + + + + + +花生花生成分待側樣品第15頁/共18頁1、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加34滴而不能過量？ 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與試劑會與試劑A A反應，使溶液反應

8、，使溶液呈藍色，而掩蓋生成的紫色。呈藍色，而掩蓋生成的紫色。2、為什么斐林試劑要現配現用，不能放置太久？ 時間太長，時間太長，Cu(OH)2Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。而無法參與反應。第16頁/共18頁比較斐林試劑與雙縮脲試劑不同比較斐林試劑與雙縮脲試劑不同點點斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑成分成分甲液甲液乙液乙液A A液液B B液液鑒定物質鑒定物質使用方法使用方法反應條件反應條件反應現象反應現象0.1g/mlNaOHNaOH蛋白質蛋白質等量混合，現配現用等量混合，現配現用先加先加A液液1ml,創造堿性環境，創造堿性環境，再加再加B液液4滴滴50