1、1會(huì)計(jì)學(xué)smad在馬兜鈴酸腎病中的作用機(jī)制在馬兜鈴酸腎病中的作用機(jī)制SmadsSmads蛋白是蛋白是TGF-/ SmadTGF-/ Smad信號(hào)通路中信號(hào)通路中細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的中的中介分子。介分子。Smad2、smad3Smad1、smad5smad8、smad9smad4Smad6、smad7紅色標(biāo)記者為參與紅色標(biāo)記者為參與TGF-TGF-信號(hào)傳導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)的smadsmad蛋白。蛋白。信號(hào)通路在傳導(dǎo)中的信號(hào)通路在傳導(dǎo)中的3 3個(gè)主要步驟個(gè)主要步驟1 1、TGF-TGF-與細(xì)胞表面受體結(jié)合，形成異源三聚體與細(xì)胞表面受體結(jié)合，形成異源三聚體2 2、異源三聚體通過激活、異源三聚體通

2、過激活R-smadR-smad蛋白，將信號(hào)傳導(dǎo)蛋白，將信號(hào)傳導(dǎo)至胞漿內(nèi)至胞漿內(nèi)3 3、R-smadR-smad與與Co-smadCo-smad結(jié)合后，轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，與結(jié)合后，轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核，與靶基因結(jié)合，調(diào)節(jié)蛋白合成靶基因結(jié)合，調(diào)節(jié)蛋白合成IHC、RT-PCRT-IHC、western blot 、RT-PCRIHC、RT-PCRTGF-I，P-Smad2/3-SMA 和E-cadCol.I和Col.III腎功能檢測建立smad3 WT/KO CAAN模型血清肌酐試劑盒考馬斯-尿蛋白結(jié)果結(jié)果B：4周后，smad WT小鼠Scr含量升高顯著，smad3 KO升高減弱。C：整體水平上smad3KO小

3、鼠蛋白尿量增加不明顯。說明smad3KO對(duì)腎損 傷有保護(hù)作用Smad3 WT Col1和3大量積聚，Smad3 KO未出現(xiàn)積聚現(xiàn)象。E-cad和-SMAA和B:smad3 WT腹腔注射4周 C:Smad3 KO腹腔注射4周A.B.D:-SMA（肌成纖維細(xì)胞）大量蓄積C.D:蓄積程度減弱。WT型-SMA表達(dá)顯著增加，KO型沒有出現(xiàn)增加顯著現(xiàn)象。細(xì)胞試驗(yàn)細(xì)胞試驗(yàn)AAAA處理處理RETCRETCAA處理導(dǎo)入siRNA后的RETCTGF-1、Col.I、-SMA、E-cad以上細(xì)胞外實(shí)驗(yàn)說明AA對(duì)腎小管上皮細(xì)胞有較嚴(yán)重的損傷作用，導(dǎo)致Col.I、-SMA、TGF-1大量蓄積，E-cad表達(dá)量下降。A表示smad2的siRNA不影響smad3的表達(dá)，smad3的siRNA不影響smad2的表達(dá)然后進(jìn)行B實(shí)驗(yàn)B表示添加AA和S3-siRNA的細(xì)胞中，-SMA下降，E-鈣粘蛋白升高；添加AA和S3-siRNA的細(xì)胞中，-SMA和E-鈣粘蛋白都有上升趨勢(shì)。smad3 siRNA：本該升高的降低了，smad2 siRNA：原來升高的現(xiàn)在還是升高。請(qǐng)批評(píng)指正請(qǐng)批評(píng)指正謝謝 謝謝! !IHC、RT-PCRT-IHC、western blot 、RT-PCRIHC、RT-PCRTGF-I，P-Smad2/3-SMA 和E-cadCol.I和Col.III腎功能檢測建立smad3