1、1定量定量pcr檢測乙肝病毒檢測乙肝病毒-dna的臨床意義的臨床意義 金域醫(yī)學檢驗中心2一、流行病學一、流行病學 hbv感染呈世界性流行，但不同地區(qū)hbv感染的流行強度差異很大。據(jù)世界衛(wèi)生組織報道，全球約20億人曾感染過hbv，其中3.5億人為慢性hbv感染者，每年約有100 萬人死于hbv感染所致的肝衰竭、肝硬化和原發(fā)性肝細胞癌 (hcc) 3二、病原學二、病原學 乙型肝炎病毒 (hbv) 屬嗜肝dna 病毒科 (hepadnaviridae)，基因組長約3.2kb ，為部分雙鏈環(huán)狀dna。 hbv 含個部分重疊的開放讀碼框 (orf)，即前ss 區(qū)、前cc 區(qū)、p 區(qū)和x 區(qū)。前s/s 區(qū)

2、編碼大 (前s1、前s2 及s)、中 (前s2 及s)、小 (s) 3 種包膜蛋白；前c/c 區(qū)編碼hbeag 及hbcag；p 區(qū)編碼聚合酶；x 區(qū)編碼x 蛋白。 hbv由于基因序列的不同又可以分為a-h八種基因型.45三 乙型肝炎的發(fā)病機制 hbv是通過刺激宿主的免疫系統(tǒng)攻擊受感染肝細胞來間接地引起肝損傷。 受hbv感染的肝細胞在其表面表達病毒蛋白質，成為ctl攻擊的目標。 針對受染細胞的免疫反應引起炎癥和壞死。 壞死-炎癥活動持續(xù)存在導致肝纖維化。6四 實驗室檢測方法 一 傳統(tǒng)實驗室檢測方法 1.血清學檢測(兩對半檢測) hbsag抗-hbs hbeag 抗-hbe 抗-hbc 2.肝功

3、能檢測(alt,ast) 二新型實驗室檢測方法 1.乙肝病毒定量 2.賴藥性基因檢測 3.乙肝病毒基因分型7五 為什么要做乙肝病毒dna定量 1. 傳統(tǒng)檢測乙肝的方法為“乙肝兩對半”和“肝功能”檢測范圍有限.(不能測定乙肝病毒復制情況、傳染程度)2. 乙肝病毒定量是直接檢測乙肝病毒的核心成分乙肝病毒dna.(能夠直接了解病毒的載量,了解乙肝病毒復制情況、傳染程度)例如: 1 小三陽的病情判斷 2. hbsag陽性或單一的抗 hbc陽性病情判斷 3. 二對半5項全部陰性病情判斷 4. 抗一hbs陽性病情判斷8六 乙肝定量測定意義 1.定量方法使全程動態(tài)觀察病毒含量成為可能 2.選擇治療時機 3.

4、估計治療反應 5.治療后隨訪和檢測復發(fā) 6.確定耐藥株及選擇合適的治療方案 7.抗病毒藥物療效的評價和監(jiān)測 8.抗病毒新藥的研制 9.研究基因的表達情況,探討某些疾病的致病機理 10.圍產(chǎn)期保健9七 hbv-dna在什么水平需要治療 (1) hbv dna定量（乙肝病毒dna定量） 105 拷貝/m l (hbeag 陰性者為hbv dna定量104 拷貝/ml)； (2) alt（谷氨酸氨基轉移酶） 2uln（uln正常值上限）；如用干擾素治療，alt 應10uln，血總膽紅素水平應2uln； (3) 如alt 2 uln， 但肝組織學顯示knodell hai 4，或g2 炎癥壞死。具有(

5、1)并有(2) 或 (3) 的患者應進行抗病毒治療；對達不到上述治療標準者，應監(jiān)測病情變化，如持續(xù)hbv dna定量陽性，且alt 異常，也應考慮抗病毒治療。 10八八 治療方案治療方案 治療的總體目標治療的總體目標 慢性乙型肝炎治療的總體目標是：最大限度地長期抑制或消除hbv，減輕肝細胞炎癥壞死及肝纖維化，延緩和阻止疾病進展，減少和防止肝臟失代償、肝硬化、hcc 及其并發(fā)癥的發(fā)生，從而改善生活質量和延長存活時間。 慢性乙型肝炎治療主要包括抗病毒、免疫調節(jié)、抗炎保肝、抗纖維化和對癥治療，其中抗病毒治療是關鍵，只要有適應證，且條件允許，就應進行規(guī)范的抗病毒治療。11九 具體治療 1. 抗病毒治療抗病毒治療 干擾素治療干擾素治療 核苷（酸）類似物治療核苷（酸）類似物治療 (拉米夫定等 ) 免疫調節(jié)治