樣本分析前的質量控制 2014 06 14 真空采血管的順序順序添加物測定標本試管類型1血培養基全血培養瓶2無或促凝劑血清紅色 黃色蓋3枸櫞酸鹽全血藍色蓋4肝素全血 血漿綠色5EDTA全血 血漿淡紫色蓋6血沉管全血黑色 真空靜脈采血標本溶血與凝固原因分析 采血過程中靜脈穿刺處消毒液 如碘伏或酒精 未干即開始采血采血時定位或進針不準確 針尖在靜脈中探來探去 造成血腫采血過程中止血帶使用時間過長或過緊 從而干擾血流速度和流向 破壞體液和血細胞間的平衡 造成局部血液濃縮或激活凝血系統采血管使用不當 1 未傾斜 2 采血管順序錯誤 3 未及時搖勻或用力過猛 采血量多少對檢驗結果的影響 血量少 凝血中的APTT會延長血常規血量多易造成凝固 血量少 血細胞處于高滲狀態 WBC RBC HGB PLT MCV 血球儀 生化管血量少 因為負壓作用 細胞破壞 溶血 分析前質量控制處理要求 一 患者的準備二 樣本采集及注意事項三 樣本的驗收四 特殊檢測項目樣本采集要求 一 患者的準備患者的準備是保證送檢樣本質量的內在條件及前提要求 而保證送檢樣本的質量是這一階段質量保證工作的核心 病人狀態檢驗結果的影響患者飲食對檢驗結果的影響藥物對檢驗結果的影響病人體位對檢驗結果的影響采樣時機對檢驗結果的影響樣本本身對檢驗結果的影響 一 病人狀態對檢驗結果的影響原則上患者應在平靜 休息狀態下采集樣本 特別是血液標本 患者在激動 興奮或恐懼狀態時 血紅蛋白 白細胞增高劇烈運動后體液丟失 呼吸劇烈可以造成體內多項指標的變化 如 谷丙轉氨酶 谷草轉氨酶 乳酸脫氫酶 肌酸激酶等一過性升高如ALT在停止運動1h后測定 其值仍可偏高30 50 二 患者飲食對檢驗結果的影響 1 進食進食后的一定時間內可以使血液中許多化學成分發生變化原則上要求患者空腹采血 空腹12小時左右 對進食有特殊約定的項目除外 大多數檢驗項目的臨床參考范圍是以空腹血液測定值為基礎的 建議 早晨空腹采血進食高脂肪食物 TG大幅增高 血液標本出現乳糜現象進食咖啡 AMY 促甲狀腺激素 TSH AIP ALT AST GLU增高進食高蛋白或高核酸食物 可以引起血中尿素氮 BUN 和尿酸 UA 的增高一頓標準餐 甘油三脂 TG 增高40 50 血糖增高15 20 二 患者飲食對檢驗結果的影響 2 長期素食者低密度脂蛋白 LDL 極低密度脂蛋白 VLDL 會降低膽固醇 甘油三脂一般只有雜食者的三分之二短期素食對各項指標影響不大 二 患者飲食對檢驗結果的影響 3 禁食過久對檢測結果的影響補體C3 白蛋白 轉鐵蛋白和血糖濃度會下降饑餓狀態下血清膽紅素濃度上升絕食狀態下脂肪酸和酮酸成為肌肉能量主要來源 因此血清中酮體 脂肪酸和甘油三脂增高 血清中尿酸鹽顯著增高身體處于饑餓狀態時 醛固酮分泌量增加 腎臟排鉀增加 使血鉀濃度下降 同時血液中鈣 鎂和磷酸鹽濃度也下降禁食剛開始時 血漿生長激素可能升高15倍 3 4天后基本恢復正常 二 患者飲食對檢驗結果的影響 4 咖啡因對檢驗結果的影響咖啡 可樂 茶等都含有咖啡因咖啡因能刺激腎上腺髓質 使兒茶酚胺分泌量增加 血糖輕微上升咖啡因刺激腎上腺皮質 使血漿皮質醇上升咖啡因是磷酸二脂酶的抑制物 可以使血漿三酸甘油脂 皮質醇 游離脂肪酸和總脂質增高 血清膽固醇濃度下降 二 患者飲食對檢驗結果的影響 5 乙醇對檢驗結果的影響飲酒后會使血糖立即上升 造成三酸甘油脂血癥中毒酒精量使血清肌酸激酶 CK 上升 ALT和AST上升長期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高 平均血細胞體積增加 谷氨酰轉肽酶亦較不飲酒的病人為高 二 患者飲食對檢驗結果的影響 6 抽煙對檢驗結果的影響香煙中的尼古丁會刺激腎上腺髓質和腎上腺皮質 使血液中腎上腺素升高 另外從尿中排出的兒茶酚胺及其代謝產物也升高抽煙者的皮質醇濃度 血糖濃度比不抽煙者高血液中生長激素對濃度對抽煙特別敏感 抽煙后30分鐘內生長激素可以升高10多倍生化指標如 脂蛋白 膽固醇 甘油三脂等高于不抽煙者 高密度脂蛋白低于不抽煙者抽煙者紅細胞數 血紅蛋白 白細胞數量高于不抽煙者 三 藥物對檢驗結果的影響藥物對檢驗的影響非常復雜 在采樣檢查之前 以暫停各種藥物為宜 如某種藥物不可停用 則應了解可能對檢驗結果產生的影響 1 藥理作用對檢驗結果的影響2 對檢驗項目的測定方法產生影響 三 藥物對檢驗結果的影響 1 藥理作用對檢驗結果的影響甲狀腺素藥 使血糖升高 膽固醇降低咖啡因 使血糖和膽固醇增高冠心平 使甘油三脂 乳酸脫氫酶降低慶大霉素 氨芐青霉素可使谷丙轉氨酶活性增高維生素C 使乳酸脫氫酶降低 總膽固醇 甘油三脂 高密度脂蛋白膽固醇 尿酸降低口服避孕藥 使甲狀腺結合球蛋白 纖溶酶原 轉鐵蛋白 血清鐵和甘油三脂升高 白蛋白和血清鋅降低某些藥物能夠造成肝 腎功能的損害 引起相關指標的變化 三 藥物對檢驗結果的影響 2 藥物對檢驗項目的測定方法產生影響對于用比色法檢測的項目 某些藥物的物理特性比例顏色會影響比色藥物參與檢測時的化學反應 如有還原性的藥物對于利用氧化還原法測定項目會有影響 某些藥物可以抑制酶的活性 對于測定酶活性的項目會使結果降低 四 病人體位對檢驗結果的影響體位影響血液循環 由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變 細胞成份和大分子物質的改變較為明顯由臥位改為立位 血漿ALB TP 酶 膽紅素 TCHol及TG等濃度增高 Hb HCT RBC等亦可增加 體位從立位到臥位時HGB下降4 Hct下降6 K 下降1 Ca2 下降4 ALT下降7 AST下降9 ALP下降9 TG下降6 五 采樣時機對檢驗結果的影響病人準備還應考慮病人的生物規律 特別是激素水平分析 如 女性生殖激素與月經周期密切相關 膽固醇則在經前期最高 排卵時最低 纖維蛋白原在經前期最高 血漿蛋白則在排卵時減少 血Ca往往在中午出現最低值 故采血應在相同時間進行 生長激素于入睡后會出現短時高峰 膽紅素 血清鐵以清晨最高 血漿蛋白在夜間降低 六 標本本身對檢驗結果的影響 1 標本溶血 疾病或采血過程中處置不當 光學干擾紅細胞內的某些物質與血清或血漿中的含量相差懸殊 如 鉀離子 鎂離子 磷離子 ALT AST 血清鐵 LDH等 膽紅素中的蛋白使血清總蛋白和白蛋白升高注 中度或重度溶血時必須重新采集標本 六 標本本身對檢驗結果的影響 2 脂血標本脂血造成的混濁會在比色測定時引起光線散射 導致吸光值假性增高脂血會造成電解質檢測錯誤脂血產生的原因 1 抽血前食入富含脂肪的食物 2 空腹患者有脂血現象 屬于病理因素 甘油三酯過高血漿或血清呈渾濁狀 膽固醇含量高 血清或血漿外觀沒有變化 有乳糜微粒會在血清液面浮上一層奶油狀物質 六 標本本身對檢驗結果的影響 3 黃疸標本光學干擾膽紅素中的蛋白使血清總蛋白和白蛋白升高注 血清中有過量膽紅素是患者體內的病理反應 請在檢驗單上注明有黃疸現象 二 樣本采集及注意事項 一 血液樣本1 全血樣本2 血清樣本3 末梢血樣本4 血液樣本采集注意事項二 尿液樣本1 尿液樣本的采集2 尿液樣本的保存3 尿液樣本收集的注意事項 三 糞便樣本1 糞便樣本的采集2 注意事項四 腦脊液 漿膜腔積液 關節液 滑膜液 1 樣本的收集2 注意事項 五 痰液1 痰液的收集六 尿道分泌物 陰道分泌物 宮頸分泌物1 樣本的采集2 注意事項七 其他樣本 如精液 前列腺液 胃液 十二指腸引流液 八 微生物樣本的采集1 基本原則2 樣本采集要求九 樣本的運送 一 血液樣本血液樣本主要分為 全血樣本 血清樣本和末梢血樣本 1 全血樣本全血樣本的采集 采用真空采血管靜脈采血 2 5ml 若血樣加入含有抗凝劑的試管中 立即輕輕顛倒混勻全血樣本的保存 抗凝全血應常溫 18 25 保存 低溫將影響部分測試項目的測定結果 如血小板減少 中性細胞和單核細胞的形態改變等 切忌冷凍全血樣本 易造成樣本溶血 2 血清樣本血清樣本的采集 采用真空采血管靜脈采血 3 5ml 血樣加入空白或帶有分離膠的試管中 室溫或置于37 水浴箱中 1小時左右分離血樣 最遲不超過2小時 否則影響測試結果 如 血糖 由于糖酵解 血糖濃度酶小時下降約5 而血清鉀 K 則隨著時間的延長而增高血清樣本的保存 對于分離好的血清樣本 為了防止樣本中水分的揮發 應移入帶塞的試管中 若不能及時送檢 應置冰箱 冷藏 2 8 保存 為保證血清中待測成分的穩定 基本能夠保存3天以上 GLU除外 冷凍保存 20 可保存更長時間 3 血液樣本采集注意事項1 微量元素血樣的采集 多用肝素抗凝 采血時盡量避免使用一次性橡膠手套 如需使用則需應用5 硝酸處理 以防橡膠中金屬元素的干擾 應用酒精消毒皮膚 避免使用碘伏2 對于全血樣本應正確使用測定相應的抗凝劑 并且應注意血液與抗凝劑的比例 真空采血管多標有具體的采血量 目前常用的抗凝劑有枸櫞酸鹽 EDTA鹽和肝素等3 血清樣本應避免溶血 對于嚴重溶血的樣本應拒收4 要特別注意采血不能在輸液的同側進行 更應杜絕在輸液管內采血 因輸液成分會影響檢測結果 使相應的結果偏高 如輸K GLU時 可使所測K GLU明顯升高 或使血液稀釋結果偏低 5 采集血樣做血液細菌培養 染色體檢查 PCR檢查時 要采用無菌技術 防止污染6 采集末梢血血樣時要避免血液凝固 讓血液自然流出并棄去第一滴血 不要擠壓 避免混入組織液而造成樣本的稀釋 故針刺要順利 二 尿液樣本1 尿液樣本的采集根據采集時間可分為清晨空腹尿 隨機尿 計時尿 2h 3h 12h 24h等 午后尿 餐后尿 癥狀典型時尿等 1 晨尿多為住院病人留尿的方法 早晨起床后收集第一次尿 可用于尿常規檢驗 直立性尿蛋白檢查 尿HCG檢查 細胞學研究等2 隨機尿多為門診就診病人的留尿檢驗方法 適用于常規和急診檢查3 餐后尿為收集進餐后2h尿 主要用于了解葡萄糖代謝情況 用以篩查隱性糖尿病或輕癥糖尿病 4 計時尿應于計時開始時排空尿液 收集一段時間內的尿液樣本 多用于腎功能和有形成分排出率的評估 亦用于計算淀粉酶或肌酐的排出率 2 尿液樣本的保存尿液易生長細菌 如不能計時送檢或需留大量樣本 如24小時尿 應置冰箱冷藏或加防腐劑 防腐劑應在收集第一次尿液時加入 并根據檢測項目選擇適當的防腐劑 1 甲苯 或二甲苯 適用于尿液生化檢測 如總氮 尿素 肌酐 尿酸 鉀 鈉 蛋白等 加入量為0 5 1 0ml甲苯 100ml尿液2 鹽酸 適用于測定尿17 羥皮質類固醇 17 酮類固醇 腎上腺素 去甲腎上腺素 香草扁桃酸 尿兒茶酚胺等試驗 加入量為0 5 1 0ml濃鹽酸 100ml尿液3 麝香草酚 常用于尿液濃縮結核菌檢查和尿沉渣Addis計數 不適合尿蛋白測定4 冰醋酸 適用于測定24小時尿醛固酮 加入量為0 5 1 0ml冰醋酸 100ml尿液5 甲醛 適用于尿液管型和細胞檢查 加入量為400g L甲醛0 5ml 100ml尿液 3 尿液樣本收集的注意事項1 容器上應貼上標記 不可貼在蓋子上 標記內容必須包括 病人的全名 可識別病人的樣本特異性編碼和樣本收集的時間2 尿液樣本應避免經血 白帶 精液 糞便等混入 此外 還應注意避免煙灰 糖紙等異物混入3 尿膽紅素和尿膽原等化學物質可因光分解或氧化而減弱 樣本送檢時應注意避光4 24小時尿液樣本 送檢前記錄尿液總量 混勻后取5ml送檢 三 糞便樣本1 糞便樣本的采集糞便樣本應選擇其中膿血黏液等病理成分送檢 若無病理成分 可多部位取材 糞便樣本應不污染容器外表 一般以無滲漏容器留取5 10g即可 檢查蟯蟲則不必送檢糞樣 而應于晨起時排便前用棉拭子擦拭肛門周圍 可得蟲卵 2 注意事項1 采取樣本后 應在1h內完成檢測 否則可因pH及消化酶等影響而使糞便細胞成分破壞分解2 隱血試驗 應囑患者于采集樣本前3天起禁食動物性食物 連續檢查3天 并選取外表及內層糞便 采集樣本后須迅速進行檢查 以免因長時間放置使隱血反應的敏感度降低3 糞膽原定量檢查應收集3天的糞便 混合稱量 從其中取出約20g送檢 查膽汁成分的糞便樣本不應在室溫中長時間放置 以免陽性率減低4 做原蟲阿米巴滋養體檢查應立即送檢 冬季需采取保溫措施 四 腦脊液 漿膜腔積液 關節液 滑膜液 均由臨床醫師穿刺采樣 實驗室應提供專用的各種試管或容器 及時送檢 1 樣本的收集1 腦脊液 分別收集于三個無菌試管 或小瓶 中 每管1 2ml 第一管做細菌培養 必須留于無菌小管中 第二管做化學或免疫學檢查 第三管做一般性狀檢查和顯微鏡檢查 腦脊液細胞計數管應避免樣本凝固 遇高蛋白樣本時 可用EDTA鹽抗凝 2 漿膜腔積液 3管 一管用于細菌培養 一管用于觀查標本的凝固性 一管用EDTA抗凝的用于細胞檢查 3 滑膜液 應用消毒注射器收集 正常時滑膜液量甚少 病理時則可多達3 10ml 因檢查項目不同 容器不同 故應事先準備有關容器 微生物培養應置于滅菌消毒試管 顯微鏡鏡檢應用肝素抗凝樣本 每毫升約用肝素鈉25單位 不可用肝素鋰 草酸鹽或EDTA干粉 以免人為形成晶體 干擾顯微鏡檢查 2 注意事項收到樣本后立即送檢 久置可致細胞破壞 影響細胞計數及分類檢查 葡萄糖含量降低 病原菌破壞或溶解 五 痰液1 痰液的收集1 痰液的一般檢查應收集新鮮痰 在醫生或護士直接監視下采集標本 讓患者反復漱口三次以上 祛除表面雜菌指導患者用力深咳 產生下呼吸道標本 勿混入唾液及鼻咽分泌物2 細胞學檢查用上午9 00 10 00點深咳的痰液及時送檢 清晨第一口痰在呼吸道停留時久 細胞變性結構不清 應盡量送含血的病理性痰液3 小兒取痰時 用壓舌板向后壓舌 將拭子伸入咽部 小兒經壓舌板刺激咳嗽時 可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢 幼兒還可用手指輕扣胸骨柄上方 以誘發咳痰 在咽后壁取材 拭子盡量避免接觸口腔 舌粘膜和唾液 六 尿道分泌物 陰道分泌物 宮頸分泌物1 樣本的采集1 男性尿道分泌物取材 用棉球沾無菌生理鹽水洗凈尿道口 細小棉拭子取尿道分泌物或伸入尿道約2 4cm 略捻拭子取分泌物 應略帶黏膜 收集于無菌試管內送檢2 女性宮頸分泌物取材 分泌物樣本采樣應在非月經期進行 采樣前3天內不使用陰道內藥物 不沖洗陰道 24小時內不應有性行為 用棉簽沾無菌生理鹽水洗去宮頸外分泌物 去除白帶 再用無菌棉拭子插入宮頸內 停5秒鐘后旋動棉拭子采取宮頸分泌物 收集于無菌試管內送檢3 陰道分泌物取材 棉拭子取材4 尖銳濕疣應采集疣體或組織液于無菌試管內送檢2 注意事項由臨床醫師采樣 及時送檢 檢查滴蟲 冬季應注意樣本保溫 七 其他樣本 如精液 前列腺液 胃液 十二指腸引流液 根據具體檢驗項目而定 臨床醫師在開申請單前 應同實驗室相關部門聯系 注明檢測要求 再采樣并及時送檢 八 樣本的運送1 抗凝全血 末梢血樣本應常溫 18 25 保存和運送 切忌和冰袋直接接觸 2 分離好的血清樣本應在 2 8 條件下運送 保溫箱中放入冰袋 3 尿液 糞便 痰液