實(shí)木地板億牌地板白沙洲地板 QQ-2516685143 烽火村青菱鄉(xiāng)合富金生萬(wàn)科紅霞 地板翻新實(shí)木地板武漢南湖地板高性價(jià)比地板 對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉（ Cyprinus carpio）的 急性毒性試驗(yàn) 沈洪艷 1, 2，甄芳芳 2，任洪強(qiáng) 3，宋存義 1 1. 北京科技大學(xué)土木與環(huán)境學(xué)院，北京 100083； 2. 河北科技大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，河北 石家莊 050018； 3. 南京大學(xué)環(huán)境學(xué)院，江蘇 南京 210093 摘要： 采用靜態(tài)式致毒 法進(jìn) 行了化學(xué)污染物對(duì)氯硝基苯（ p-chloronitrobenzene, P-NCB）對(duì)錦鯉（ Cyprinus carpio）的急性毒性試驗(yàn)， 旨在確定水環(huán)境中低質(zhì)量濃度對(duì)氯硝基苯對(duì)水生生物的急性毒性效應(yīng)， 為水質(zhì)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的完善和生態(tài)安全評(píng)價(jià)提供依據(jù)。 當(dāng)錦鯉暴露于對(duì)氯硝基苯試液中 96 h， 24 h 100%死亡質(zhì)量濃度（ 24 h LC100）和 96 h 無(wú)死亡質(zhì)量濃度（ 96 h LC0）分別為 40 mgL-1 和 5 mgL-1，此時(shí)測(cè)得試液中 COD 值分別為 29.77 mgL-1 和 28.24 mgL-1。在 2527 下， 24、 48、 72、 96 h的 LC50 分別為 30.83、 28.84、 23.60、 22.13 mgL-1。該研究結(jié)果表明，對(duì)氯硝基苯屬于高毒物質(zhì)，水環(huán)境中對(duì)氯硝基苯質(zhì)量濃度與 TOC（ total organic carbon）成正相關(guān)，但其對(duì)常規(guī)水質(zhì)監(jiān)測(cè)指標(biāo) COD（ chemical oxygen demand）貢獻(xiàn)很小， COD不能反映水環(huán)境中低質(zhì)量濃度有機(jī)毒物對(duì)水生生物的毒性影響。 關(guān)鍵詞： 對(duì)氯硝基苯；急性毒性；錦鯉；半數(shù)致死質(zhì)量濃度 中圖分類號(hào)： X171.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A 文章編號(hào)： 1672-2175（ 2007） 02-0407-03對(duì)氯硝基苯作為重要的化工原料，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、農(nóng)藥、合成材料、機(jī)械和木材防腐等領(lǐng)域。由于該化學(xué)品在生產(chǎn)和使用過(guò)程中導(dǎo)致的水體污染必 然危及水生生物。 20 世紀(jì) 90 年代以來(lái)國(guó)內(nèi)外報(bào)道了硝基芳烴類化合物對(duì)藻類、蚤類、發(fā)光菌等的急性毒性數(shù)據(jù) 1-13，但是對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉（ Cyprinus carpio）的研究報(bào)道尚未見到。本文通過(guò)對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉的急性毒性研究，旨在確定其對(duì)水生生物的急性毒性效應(yīng)以及低質(zhì)量濃度對(duì)氯硝基苯與水質(zhì)指標(biāo) TOC 和 COD 的關(guān)系，為水質(zhì)監(jiān)測(cè)指標(biāo)的完善和生態(tài)安全評(píng)價(jià)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。 1 材料和方法 1.1 試驗(yàn)生物 選用 1 齡錦鯉（ Cyprinus carpio）為受試生物，由石家莊水產(chǎn)養(yǎng)殖基地提供，體長(zhǎng)為 6.610.84 cm，體 質(zhì)量 為 5.781.32 g，魚苗經(jīng) w=5%食鹽水消毒后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，用 24 h 曝氣的脫氯自來(lái)水在實(shí)驗(yàn)室暫養(yǎng) 7 d 用于實(shí)驗(yàn)，試驗(yàn)水質(zhì)符合漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。 1.2 受試有毒化學(xué)品 對(duì)氯硝基苯：淺黃色單斜楞形晶體，苦杏仁氣味，熔點(diǎn) 83.5 ，沸點(diǎn) 242 ，閃點(diǎn) 127 。不溶于水，易溶于乙醇、乙醚、丙酮、二硫化碳等有機(jī)溶劑。易燃，具有爆炸性。受熱分解時(shí)生成氧化氮及氯化物等氣體。對(duì)氯硝基苯為分析純，購(gòu)自上海化學(xué)試劑廠。 1.3 試驗(yàn)用儀器設(shè)備 TOC 測(cè)定儀（ Apollo9000），溶解氧測(cè)定儀（ inoLab 臺(tái)式溶解氧儀），酸度計(jì)（ pHS-2C），微型溫度計(jì)，電子分析天平（ AB204-N），水硬度計(jì)（ WAD-TH）等。 1.4 試驗(yàn)條件 水質(zhì)為 24 h 曝氣的自來(lái)水； pH 值為 6.0 8.5；總硬度為 10 250 mgL-1（以 CaCO3 計(jì)），試驗(yàn)溫度為 25 27 ；溶解氧不低于 4 mgL-1；自然光照；試驗(yàn)周期 96 h；試驗(yàn)方式為靜態(tài)。 1.5 試驗(yàn)方法 預(yù)試驗(yàn)方法：在 50 cm20 cm25 cm 的玻璃水族缸中，盛放 20L 試液，按 40 mgL-1、 30 mgL-1、20 mgL-1、 10 mgL-1、 5 mgL-1 設(shè) 5 個(gè)試驗(yàn)質(zhì)量濃度組，不設(shè)平行，不更換試液，每個(gè)質(zhì)量濃度放入5 尾魚，連續(xù)實(shí)驗(yàn) 96 h，篩選 24 h 100%死亡質(zhì)量濃度（ 24 h LC100）和 96 h 0%死亡質(zhì)量濃度（ 96 h LC0）。在預(yù)實(shí)驗(yàn)中，測(cè)定了試液的 TOC 值，目的是了解受試毒物質(zhì)量濃度對(duì)試液 TOC 的影響。 急性毒性試驗(yàn)方法：根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，按等對(duì)數(shù)間距設(shè)置 40 mgL-1、 23.71 mgL-1、 14.13 mgL-1、 8.41 mgL-1、 5 mgL-1 5 個(gè)試驗(yàn)質(zhì)量濃度組，設(shè)置 2 個(gè) 平行，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照和助溶劑對(duì)照，試驗(yàn)終點(diǎn)以魚類 96 h 半數(shù)致死質(zhì)量濃度（ LC50）表示。每個(gè)質(zhì)量濃度組隨機(jī)放入 10 尾魚。開始暴露前，試驗(yàn)魚逐條測(cè)量全長(zhǎng)和體質(zhì)量 ，各組之間試驗(yàn)魚的全長(zhǎng)和體重均無(wú)顯著性差異。以乙醇作為助溶劑。采用自然光照，對(duì)照組、染毒組同時(shí)進(jìn)行試驗(yàn)。在急性毒性試驗(yàn)過(guò)程中測(cè)定 COD 的值，以了解對(duì)實(shí)木地板億牌地板白沙洲地板 QQ-2516685143 烽火村青菱鄉(xiāng)合富金生萬(wàn)科紅霞 地板翻新實(shí)木地板武漢南湖地板高性價(jià)比地板 氯硝基苯對(duì) COD 的影響。 1.6 數(shù)據(jù)處理 LC50 采用寇氏法 14計(jì)算。 如果試驗(yàn)數(shù)據(jù)不適用寇氏法計(jì)算，則用無(wú)死亡的最大質(zhì)量濃度和全部死亡的最小質(zhì)量濃度估算LC50 的估計(jì)值，即這 2 種 質(zhì)量濃度的幾何 平均值。 2 試驗(yàn)結(jié)果 2.1 試驗(yàn)質(zhì)量控制 方法 15-16中規(guī)定了水生生物急性毒性試驗(yàn)的質(zhì)量控制要求為：在試驗(yàn)整個(gè)過(guò)程中對(duì)照組死亡率10%；試驗(yàn)液中溶解氧含量 60%飽和值；試驗(yàn)最少設(shè)置 5 個(gè)質(zhì)量濃度組，并以幾何級(jí)數(shù)排布，質(zhì)量濃度間隔系數(shù) 2.2；受試毒物在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的損失20%；試驗(yàn)期間，盡可能維持恒定條件；對(duì)于難溶于水的受試物，應(yīng)設(shè)助溶劑對(duì)照組，但助溶劑在水中的 質(zhì)量質(zhì)量濃度 應(yīng)不超過(guò) 0.1 mLL-1。 試驗(yàn)用魚均為石家莊水產(chǎn)養(yǎng)殖基地清潔飼養(yǎng)和繁殖的后代，從而保證了試驗(yàn)生物的背景清楚，生物體 健康無(wú)污染。試驗(yàn)前試驗(yàn)用魚在與試驗(yàn)相同的環(huán)境條件下馴養(yǎng) 7 d，馴養(yǎng)期間魚死亡率為 0。試驗(yàn)期間，試驗(yàn)生物的空白對(duì)照組和助溶劑對(duì)照組均表現(xiàn)正常，未出現(xiàn)死亡或中毒反應(yīng)；在試驗(yàn)過(guò)程中，對(duì)試驗(yàn)溶液的水溫、硬度、 pH 值、有機(jī)物含量、溶解氧含量進(jìn)行了定期監(jiān)測(cè)，結(jié)果表明試驗(yàn)溶液的溶解氧含量均在 4 mgL-1 以上，其他條件均滿足水生生物急性毒性試驗(yàn)的要求。 2.2 試驗(yàn)結(jié)果 2.2.1 預(yù)試驗(yàn)結(jié)果 受試毒物對(duì)錦鯉的預(yù)試驗(yàn)設(shè)了 40 mgL-1、 30 mgL-1、 20 mgL-1、 10 mgL-1、 5 mgL-1 5 個(gè)質(zhì)量濃度組，實(shí)驗(yàn)持續(xù) 96 h，得到 24 h 100%死亡質(zhì)量濃度（ 24 h LC100）和 96 h 0%死亡質(zhì)量濃度（ 96 h LC0）分別為 40 mgL-1 和 5 mgL-1。在預(yù)試驗(yàn)過(guò)程中測(cè)定了各質(zhì)量濃度組的 TOC 值，見表 1。 上述數(shù)據(jù)變化規(guī)律見圖 1。 由預(yù)試驗(yàn)測(cè) 得的 TOC 結(jié)果可以看出，試液中對(duì)氯硝基苯質(zhì)量濃度的變化在 TOC 值上都有所反應(yīng)，即 TOC 值與試液中對(duì)氯硝基苯的質(zhì)量濃度呈正相關(guān)，并且隨著試驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)， TOC 值呈降低的趨勢(shì)。 2.2.2 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果 在試驗(yàn)過(guò)程中，試驗(yàn)魚投入試驗(yàn)液后都出現(xiàn)急速游動(dòng)，向上跳躍，呼吸頻率加快的現(xiàn)象， 5 min后， 14.13 mgL-1、 8.41 mgL-1、 5 mgL-1 3 個(gè)組的魚已基本適應(yīng)環(huán)境，并能正常游動(dòng)，而 40 mgL-1、23.71 mgL-1 2 個(gè)組的魚除有上述表現(xiàn)外，還逐漸失去平衡，喪失游泳能力，最后 出現(xiàn)麻痹狀態(tài)，側(cè)臥于水面，并且隨著試液中毒物質(zhì)量濃度的增大，出現(xiàn)上述癥狀的魚數(shù)量增多。對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉的急性毒性結(jié)果見表 2。 根據(jù)染毒錦鯉的死亡率，采用寇氏法計(jì)算得到對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉 96 h LC50 為 22.13 mgL-1。 2.2.3 COD 測(cè)定結(jié)果 COD 測(cè)定采用重鉻酸鉀法 17，分別對(duì)最高試液質(zhì)量濃度 40 mgL-1和最低試液質(zhì)量濃度 5 mgL-1進(jìn)行了測(cè)定，試液質(zhì)量濃度為 40 mgL-1 和 5 mgL-1時(shí) COD 值分別為 29.77 mgL-1 和 28.24 mgL-1。 3 結(jié)論 上述試驗(yàn)結(jié)果反應(yīng)了受試毒物對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉具有急性毒性，由表 2 可見 ,對(duì)氯硝基苯的 96 h LC50 值小于 100 mgL-1，依據(jù)魚類急性毒性實(shí)驗(yàn)的051015202530350 5 10 15 20 25 30 35 40 45 / ( m g L-1)TOC值24h48h72h96h 圖 1 預(yù)試驗(yàn)各濃度組 TOC 的值 Fig. 1 The value of TOC 表 1 預(yù)試驗(yàn)各質(zhì)量濃度組 TOC 的值 Table 1 The value of TOC /(mgL-1) 時(shí)間 /h 40 30 20 10 5 0 24 31.4165 28.6560 17.6137 8.0178 5.4559 0.6574 48 25.2629 20.4863 12.1330 6.5876 4.0943 0.6831 72 18.7963 15.1467 8.1841 4.2181 3.7101 0.5476 96 12.0392 7.5352 6.0488 4.9248 2.9933 0.5891 注：空白為重蒸餾水測(cè)定結(jié)果 表 2 對(duì)氯硝基苯對(duì)錦鯉的急性毒性 Table 2 The acute toxicity of P-NCB to Cyprinus carpio 接觸時(shí)間 /h LC50 /(mgL-1) 95%置信限 24 30.830.08 30.91 30.75 48 28.840.07 28.91 28.77 72 23.600.12 23.72 23.48 96 22.130.13 22.26 22.00 實(shí)木地板億牌地板白沙洲地板 QQ-2516685143 烽火 村青菱鄉(xiāng)合富金生萬(wàn)科紅霞 地板翻新實(shí)木地板武漢南湖地板高性價(jià)比地板 毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn) 16，對(duì)氯硝基苯屬于高毒物質(zhì)，對(duì)水生生物的危害應(yīng)引起高度重視。 采用重鉻酸鉀法測(cè)得試液質(zhì)量濃度為 40 mgL-1 和 5 mgL-1 時(shí) COD 值分別為 29.77 mgL-1和 28.24 mgL-1，兩者非常相近，這說(shuō)明水中對(duì)氯硝基苯質(zhì)量濃度 40 mgL-1 的狀況下，其對(duì)水環(huán)境中 COD 值的貢獻(xiàn)很小。但水中毒物已經(jīng)對(duì)水生生物產(chǎn)生了急性毒性作用，因此常規(guī)的水質(zhì)監(jiān)測(cè)指標(biāo)COD 不能充分說(shuō)明水體中有機(jī)毒物對(duì)水生生物的毒性大小，有必 要補(bǔ)充地表水水質(zhì)監(jiān)測(cè)指標(biāo)，并進(jìn)一步開展水環(huán)境中低質(zhì)量濃度有機(jī)毒物對(duì)水生生物的毒理影響研究。 參考文獻(xiàn)： 1 張鳳民 ,胡煒 . 十三種硝基苯類化合物對(duì)大型蚤急性毒性的實(shí)驗(yàn) J. 黑龍江環(huán)境通報(bào) , 1998, 22（ 3）： 43-45. 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School of Civil and Environmental Engineering, University of Science and Technology Beijing, Beijing 100083, China； 2. College of Environmental Science and Engineering, Hebei University of Science and Technology, Shijiazhuang 050018, China； 3. School of Environment, Nanjing University, Nanjing 210093, China Abstract: The acute toxicity of P-NCB in water environment as contaminant was measured using Brocarded carp with a static test method. This study aimed to determ