菏澤一中高二下學(xué)期第一次月考生物試題一、單選題：（每題2分，共30分）1.藍(lán)莓果酒和藍(lán)莓果醋中含有大量的花青素、維生素和礦物質(zhì)，具有提高視力、抗氧化、抗衰老和美容養(yǎng)顏等功能，深受人們的喜愛(ài)。下列說(shuō)法正確的是（）A.缺少糖原時(shí)，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為乙酸B.酵母菌是好氧菌，利用其細(xì)胞呼吸產(chǎn)酒精來(lái)制作果酒C.家庭制作藍(lán)莓果酒、果醋時(shí)，發(fā)酵前都需要對(duì)原料進(jìn)行滅菌D.在藍(lán)莓果酒發(fā)酵基礎(chǔ)上進(jìn)行果醋制作，需升高溫度、增加通氣性2.大豆發(fā)酵食品豆瓣醬是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵美食，它能讓麻婆豆腐熱辣鮮香，也能讓回鍋肉滋味醇厚，好似舌尖上的時(shí)光膠囊，封存著先輩們代代相傳的生活智慧。豆瓣醬的制作流程如下圖所示，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.保溫發(fā)酵過(guò)程中，醬豆中有機(jī)物的種類增加，有機(jī)物含量減少B.米曲霉發(fā)酵過(guò)程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源C.米曲霉發(fā)酵時(shí)需不斷翻醬，由此推測(cè)米曲霉屬于需氧型微生物D.后期發(fā)酵中乳酸菌產(chǎn)生乳酸，能抑制雜菌生長(zhǎng)并賦予豆瓣醬獨(dú)特酸味3.將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。M培養(yǎng)基可用于真菌a的篩選，某同學(xué)將獲得的真菌a利用如圖的方式進(jìn)行稀釋，統(tǒng)計(jì)甲、乙，丙三個(gè)平板中的菌落數(shù)分別是110、140和149。下列分析正確的是（）A.若真菌a為酵母菌，通常采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.若在培養(yǎng)真菌a的培養(yǎng)基中添加一定量的青霉素，可抑制細(xì)菌的繁殖C.選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是排除無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾D.根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為1.33×107個(gè)/mL4.植物甲抗旱、抗病性強(qiáng)，植物乙分蘗能力強(qiáng)、結(jié)實(shí)性好。科研人員通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過(guò)程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程①中酶處理的時(shí)間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異B.過(guò)程②中常采用滅活的仙臺(tái)病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.過(guò)程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素D.可通過(guò)分析植物丙的染色體，來(lái)鑒定其是否為雜種植株5.蘭州百合栽培過(guò)程中易受病毒侵染，造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如下圖。下列敘述正確的是（）A.①為脫分化過(guò)程，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊B.②為再分化過(guò)程，愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C.3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值大于1D.百合分生區(qū)附近病毒極少，甚至無(wú)病毒，可以作為該研究中的外植體6.科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛，利用其乳腺生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素，為加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆，過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)前，可采用酶解法將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞B重組胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)之前不需要進(jìn)行性別鑒定C.可采用電融合法使供體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合D.將重組胚胎移到雌性奶牛體內(nèi)，需要注射免疫抑制劑降低免疫排斥7.通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)，可以利用患者自身的細(xì)胞在體外誘導(dǎo)發(fā)育成特定的組織器官，然后再移植回患者體內(nèi)。圖1和圖2表示利用自身細(xì)胞進(jìn)行器官移植的兩種方法，其中誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）類似于人類的胚胎干細(xì)胞。下列敘述正確的是（）A.兩種方法都需要運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，需要將細(xì)胞置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中B.利用兩種方法所獲得的組織器官的遺傳物質(zhì)均與患者的完全相同，因此移植后不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或顯微注射法將Oct3/4基因、Sox基因、c-Myc基因和Klf基因?qū)氤衫w維細(xì)胞D.圖2中卵母細(xì)胞去核實(shí)際去除的是紡錘體—染色體復(fù)合物，核移植時(shí)供體細(xì)胞不用去核，可整個(gè)注入去核的卵母細(xì)胞中8.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的說(shuō)法，不正確的有幾項(xiàng)？（）①通過(guò)PEG融合法、電融合法等方法可以誘導(dǎo)兩個(gè)動(dòng)物細(xì)胞相互識(shí)別而融合為一個(gè)細(xì)胞②動(dòng)物細(xì)胞和癌細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象③滅活的病毒失去了其抗原結(jié)構(gòu)，但保留其感染能力，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合④現(xiàn)階段，體細(xì)胞核移植技術(shù)成功率非常低，而且絕大多數(shù)動(dòng)物存在健康問(wèn)題⑤小鼠骨髓瘤細(xì)胞染色體數(shù)為40條，其B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為40條，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞DNA分子數(shù)為80個(gè)⑥動(dòng)植物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個(gè)細(xì)胞后才能進(jìn)行培養(yǎng)⑦動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織或細(xì)胞具有更高的全能性A4項(xiàng) B.5項(xiàng) C.6項(xiàng) D.7項(xiàng)9.關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”、“瓊脂糖凝膠電泳”、“PCR擴(kuò)增”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法正確的是（）A.將洋蔥切碎、研磨、過(guò)濾，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中B.鑒定過(guò)程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變C.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察D對(duì)2個(gè)雙鏈DNA分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，第n次循環(huán)共需引物2n+1個(gè)10.實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入攜帶熒光基團(tuán)的探針，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)進(jìn)程的技術(shù)，可用于檢測(cè)RNA病毒。提取病毒RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，然后進(jìn)行PCR，反應(yīng)原理如下圖所示。CT值表示PCR過(guò)程中熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)所需的循環(huán)次數(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.探針與cDNA單鏈的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B.耐高溫的DNA聚合酶具有催化探針?biāo)獾淖饔肅.CT值越小，意味著提取到的病毒RNA含量越低D.若病毒發(fā)生單個(gè)堿基突變，可能不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果11.在DNA復(fù)制時(shí)，雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP，包含ddATP、ddGTP、ddTTP、ddCTP）會(huì)與脫氧核苷三磷酸（dNTP，包含dATP、dGTP、dTTP、dCTP）競(jìng)爭(zhēng)子鏈延伸的位點(diǎn)，ddNTP也遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。若子鏈連接上的是ddNTP，則延伸終止；若子鏈連接上的是dNTP，則延伸繼續(xù)。研究者在4支試管中各加入4種dNTP和1種ddNTP進(jìn)行PCR，對(duì)產(chǎn)物DNA單鏈片段進(jìn)行電泳，過(guò)程如圖。通過(guò)該方法可測(cè)序未知DNA序列，則圖示未知序列是（）A.B.C.D.12.由于某目的基因酶切后的末端為平末端，載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點(diǎn)，需借助中間載體P將目的基因接入載體E。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）A.通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因是基因工程的核心工作B.為了便于該目的基因接入載體E，可用限制酶EcoRV或SmaI切割載體PC.載體P不能作為基因表達(dá)載體，是因?yàn)槠錄](méi)有表達(dá)該目的基因的啟動(dòng)子與終止子D.若受體細(xì)胞表現(xiàn)出抗性基因的相應(yīng)性狀，表明重組載體成功導(dǎo)入受體細(xì)胞13.雙向啟動(dòng)子可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)聚合酶來(lái)驅(qū)動(dòng)下游基因的表達(dá)，研究人員構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，以檢測(cè)雙向啟動(dòng)子作用效果。下列分析不正確的是（）注：?jiǎn)?dòng)子終止子基因編碼熒光素酶，可催化底物產(chǎn)生熒光基因編碼葡萄糖苷酶，催化底物生成藍(lán)色物質(zhì)A.可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞B.為連入基因，需用和酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及基因的質(zhì)粒C.在培養(yǎng)基中添加壯觀霉素可篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的微生物受體細(xì)胞D.可通過(guò)觀察是否出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)確認(rèn)雙向啟動(dòng)子的作用14.科學(xué)家將鼠抗人大腸癌單克隆抗體基因（ND-1）與酵母胞嘧啶脫氨酶基因（CD）融合，在大腸桿菌中成功地表達(dá)了單鏈抗體與酶的融合蛋白，這類蛋白的療法稱為由抗體介導(dǎo)的酶解前藥療法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的構(gòu)建方法如圖所示。下列有關(guān)敘述不合理的是（）A.圖中兩條雜交鏈的獲得至少需要經(jīng)過(guò)2次擴(kuò)增循環(huán)B.圖中雜交鏈延伸生成ND-1——CD融合基因的過(guò)程應(yīng)不用加入引物C.獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達(dá)載體后可直接被正常狀態(tài)的大腸桿菌吸收D.該融合蛋白應(yīng)是利用抗體部分特異性的識(shí)別人大腸癌細(xì)胞并將酶帶到靶部位15.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花分子遺傳改良創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)成功將甜菜紅素在棉花纖維中富集，創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，下圖是利用基因工程培育粉紅色棉花的示意圖，下列有關(guān)該研究說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.通過(guò)基因工程創(chuàng)制出彩色纖維棉可有效減少化學(xué)染料使用量B.過(guò)程①→②完成需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與C.在⑤的植株中檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因，就代表粉紅色棉花培育成功D.過(guò)程④→⑤依據(jù)了植物體細(xì)胞全能性的原理二、不定項(xiàng)選擇：（每題3分，漏選1分，錯(cuò)選0分，共15分）16.慶大霉素（GM）能抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)。研究人員為了探究LPC（用MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)植物乳桿菌后獲得的上清液）對(duì)沙門氏菌生長(zhǎng)的影響及作用機(jī)制，在接種沙門氏菌的平板上做了五組不同處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（）A.需將含沙門氏菌的菌液稀釋到適宜濃度后用平板劃線法接種B.設(shè)置MRS是為了排除MRS培養(yǎng)基成分對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響C.Heat-LPC與LPC對(duì)比結(jié)果說(shuō)明LPC的熱穩(wěn)定性比較強(qiáng)D.LPC抑制沙門氏菌的機(jī)制可能是因?yàn)長(zhǎng)PC含有酸性物質(zhì)17.我國(guó)中科院的研究團(tuán)隊(duì)利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)，成功培育出世界上首例只有雙母親來(lái)源的孤雌小鼠和雙父親來(lái)源的孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的同性繁殖。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，下列敘述不正確的是（）A.卵細(xì)胞轉(zhuǎn)化成phESC相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的脫分化過(guò)程B.將精子和具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC同時(shí)注入去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚來(lái)培育孤雄小鼠C.不考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為XX，XYD.利用胚胎分割的方法對(duì)甲進(jìn)行處理得到了多只孤雌小鼠遺傳物質(zhì)不同18.某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S（含有多個(gè)不同的抗原決定基，每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體）。為了建立一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體（如圖）。下列說(shuō)法正確的是（）A.利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白19.圖甲為某種棉花的酶D基因及擬南芥葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，圖乙為Ti質(zhì)粒。為增加油菜種子的含油量，可將酶D基因與轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜葉片細(xì)胞并獲得高產(chǎn)轉(zhuǎn)基因油菜品種。下列敘述不正確的是（）A.用限制酶ClaI和DNA連接酶處理圖甲兩種基因后，可使A、D端相連B.圖乙的Ti質(zhì)粒被限制酶切割一次后，會(huì)產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)C.將目的基因插入圖乙T-DNA中構(gòu)建重組質(zhì)粒，其可能在農(nóng)桿菌中表達(dá)D.將農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到的即為高產(chǎn)轉(zhuǎn)基因油菜20.光敏色素基因在調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)發(fā)育中具有重要作用。為探討玉米中光敏色素基因A（含大約256個(gè)堿基對(duì)）在棉花種質(zhì)資源創(chuàng)制中的利用價(jià)值，研究人員將A基因轉(zhuǎn)入到棉花中，利用對(duì)棉花受體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，并通過(guò)電泳技術(shù)分析結(jié)果。該過(guò)程所用質(zhì)粒與含光敏色素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖甲、乙所示，電泳檢測(cè)結(jié)果如圖丙。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.操作過(guò)程中需要用到的工具有限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和載體B.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BamHI和HindⅢ這兩種限制酶C.PCR反應(yīng)過(guò)程中每次循環(huán)都要經(jīng)歷目的各不相同的兩次升溫和一次降溫D.由圖丙電泳結(jié)果可知，1、2、3、4號(hào)轉(zhuǎn)基因棉花均培育成功三、非選擇題：（共55分）21.啤酒是以大麥芽、啤酒花、水為主要原料，經(jīng)酵母發(fā)酵作用釀制而成的飽含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在體內(nèi)產(chǎn)生大量的熱量，被稱為“液體面包”。圖1是啤酒生產(chǎn)工藝流程簡(jiǎn)圖。（1）圖中焙烤的目的是降低麥芽水分，并________，然后去根制成成品麥芽。將粉碎的麥芽等原料用溫水分別在糊化罐、糖化罐中混合，調(diào)節(jié)溫度以制造麥汁，加水糊化之前粉碎成品麥芽的目的是________。（2）發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。麥汁冷卻后再加入啤酒酵母使其發(fā)酵，冷卻的目的是________。在發(fā)酵過(guò)程中，要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程；并及時(shí)添加必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組分，其目的是________；還要嚴(yán)格控制________等發(fā)酵條件（至少寫(xiě)出3個(gè)），以獲得所需的發(fā)酵產(chǎn)物。（3）現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐均具有計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)，能使發(fā)酵全過(guò)程處于最佳狀態(tài)，圖2為發(fā)酵罐示意簡(jiǎn)圖。發(fā)酵過(guò)程有機(jī)物分解釋放的能量會(huì)引起發(fā)酵罐溫度升高，常用冷卻水對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行溫度的調(diào)節(jié)，冷卻水進(jìn)入口和排出口分別是________（填圖2中的標(biāo)號(hào)，下同）。酵母菌酒精發(fā)酵過(guò)程中要“先通氣后密封”，通過(guò)空氣入口________來(lái)控制溶解氧。22.傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和種子繁殖。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們開(kāi)始采用“組織培養(yǎng)繁殖蘭花”，如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）分別以該株蘭花的綠色葉片和紅色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原因是___。（2）外植體被誘導(dǎo)形成了愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是___，甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，目的是___。（3）在誘導(dǎo)脫分化和再分過(guò)程中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用比例有所差異，圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，在誘導(dǎo)B的過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的激素是___（填一種激素）。（4）若該蘭花是雜合體，能否采用花粉粒作為外植體，通過(guò)植物組織培養(yǎng)的方法快速獲得與原植株基因型和表型都相同的花卉，為什么？___。23.人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的_____________，以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是_____________。（2）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的______。為了防止有害代謝物的積累，可采用_____________的方法，以便清除代謝物。（3）每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是________。最后一次免疫后第3天，取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。（4）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是________，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得_____________。（5）酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，具體原理如圖所示：據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是____________，可通過(guò)測(cè)定____________來(lái)判斷待測(cè)抗原量。（6）單克隆抗體的制備技術(shù)是在動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)上發(fā)展起來(lái)的，與常規(guī)的血清抗體相比，單克隆抗體最大的優(yōu)點(diǎn)在于_____________。24.MLM型結(jié)構(gòu)脂是一類新型油脂產(chǎn)品，該產(chǎn)品具有產(chǎn)能快、易吸收等特點(diǎn)。某研究團(tuán)隊(duì)通過(guò)構(gòu)建基因工程菌的方法，將MLM型結(jié)構(gòu)脂合成所需的關(guān)鍵基因（酰基轉(zhuǎn)移酶基因CnGPAT9）導(dǎo)入大腸桿菌，從而構(gòu)建MLM型結(jié)構(gòu)脂合成途徑。（1）在基因工程中常以大腸桿菌為受體細(xì)胞，原因是________（答出2點(diǎn)即可）。圖中PO片段的作用是________。（2）設(shè)計(jì)引物時(shí)往往需要添加限制酶識(shí)別序列，已知CnGPAT9左端①處的堿基序列為-CCTTTCAGCTCA-，欲通過(guò)PCR擴(kuò)增獲得CnGPAT9，則其中一種引物設(shè)計(jì)的序列是5'-________-3'。（3）已知LacZ基因編碼的β-半乳糖苷酶可以分解無(wú)色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。據(jù)此推斷，篩選具有MLM型結(jié)構(gòu)脂合成途徑工程菌的基本過(guò)程是，將大腸桿菌與重組質(zhì)粒混合培養(yǎng)一段時(shí)間后，再將大腸桿菌接種到添加了________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，篩選出________色的菌落即可。25.隨著基因組編輯技術(shù)的發(fā)展，科學(xué)家可以通過(guò)基因敲除、插入等手段有目的地改造特定基因。影響小鼠內(nèi)耳形態(tài)的基因A突變會(huì)導(dǎo)致遺傳性耳聾，研究人員嘗試對(duì)該病進(jìn)行基因治療。相關(guān)信息如圖所示。（1）圖1表示CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)，該系統(tǒng)由sgRNA及Cas9蛋白組成。sgRNA與目標(biāo)DNA結(jié)合需遵循________原則，結(jié)合后sgRNA引導(dǎo)Cas9蛋白切割靶序列的雙鏈DNA，導(dǎo)致________鍵斷裂。（2）同源重組是指在DNA斷裂的情況下，含有同源區(qū)段的DNA之間發(fā)生的重組。科研人員嘗試?yán)猛粗亟M原理對(duì)耳聾小鼠進(jìn)行基因治療。①利用________技術(shù)擴(kuò)增野生型小鼠的基因A，該技術(shù)體系需要添加引物，引物的作用是________。擴(kuò)增基因A后，需將其插入到載體，載體需要具備的條件有________（答出兩點(diǎn)即可）。科研人員嘗試?yán)迷摶虮磉_(dá)載體與耳聾小鼠的DNA進(jìn)行同源重組，效果不佳。②在上述基礎(chǔ)上，科研人員構(gòu)建出如圖2所示的腺病毒表達(dá)載體。該表達(dá)載體中引入sgRNA基因、Cas9基因和sgRNA識(shí)別序列的目的是________菏澤一中高二下學(xué)期第一次月考生物試題一、單選題：（每題2分，共30分）1.藍(lán)莓果酒和藍(lán)莓果醋中含有大量的花青素、維生素和礦物質(zhì)，具有提高視力、抗氧化、抗衰老和美容養(yǎng)顏等功能，深受人們的喜愛(ài)。下列說(shuō)法正確的是（）A.缺少糖原時(shí)，醋酸菌可將乙醇直接轉(zhuǎn)化為乙酸B.酵母菌是好氧菌，利用其細(xì)胞呼吸產(chǎn)酒精來(lái)制作果酒C.家庭制作藍(lán)莓果酒、果醋時(shí)，發(fā)酵前都需要對(duì)原料進(jìn)行滅菌D.在藍(lán)莓果酒發(fā)酵基礎(chǔ)上進(jìn)行果醋制作，需升高溫度、增加通氣性【答案】D【解析】【分析】參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：醋酸菌是一種好氧性細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)；當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿帷！驹斀狻緼、缺少糖原時(shí)，醋酸菌可將乙醇轉(zhuǎn)化乙醛，再轉(zhuǎn)化為乙酸，A錯(cuò)誤；B、酵母菌是兼性厭氧型微生物，利用其細(xì)胞呼吸產(chǎn)酒精來(lái)制作果酒，B錯(cuò)誤；C、家庭制作藍(lán)莓果酒、果醋時(shí)，利用的是原材料上附著的天然微生物，因此發(fā)酵前都不需要對(duì)原料進(jìn)行滅菌，C錯(cuò)誤；D、果酒發(fā)酵的適宜溫度是18～30℃，而果醋發(fā)酵的適宜溫度為是30～35℃，果醋是需氧微生物，需要提供氧氣，因此在藍(lán)莓果酒發(fā)酵基礎(chǔ)上進(jìn)行果醋制作，需升高溫度、增加通氣性，D正確。故選D。2.大豆發(fā)酵食品豆瓣醬是我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵美食，它能讓麻婆豆腐熱辣鮮香，也能讓回鍋肉滋味醇厚，好似舌尖上的時(shí)光膠囊，封存著先輩們代代相傳的生活智慧。豆瓣醬的制作流程如下圖所示，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.保溫發(fā)酵過(guò)程中，醬豆中有機(jī)物的種類增加，有機(jī)物含量減少B.米曲霉發(fā)酵過(guò)程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長(zhǎng)提供氮源C.米曲霉發(fā)酵時(shí)需不斷翻醬，由此推測(cè)米曲霉屬于需氧型微生物D.后期發(fā)酵中乳酸菌產(chǎn)生乳酸，能抑制雜菌生長(zhǎng)并賦予豆瓣醬獨(dú)特酸味【答案】B【解析】【分析】蠶豆中含有大量蛋白質(zhì)，主要為微生物的生長(zhǎng)提供碳源（提供碳元素）和氮源（提供氮元素）類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)；加入的蠶豆經(jīng)蒸熟、冷卻后使用，這樣既可以對(duì)蠶豆進(jìn)行消毒，消滅蠶豆表面的雜菌，又能防止蠶豆溫度過(guò)高導(dǎo)致接種的微生物死亡。【詳解】A、在保溫發(fā)酵過(guò)程中，米曲霉等微生物會(huì)分泌多種酶來(lái)分解有機(jī)物。在分解過(guò)程中，復(fù)雜的有機(jī)物會(huì)被逐步分解成小分子有機(jī)物，所以有機(jī)物的種類會(huì)增加。同時(shí)，微生物的呼吸作用會(huì)消耗有機(jī)物來(lái)獲取能量，導(dǎo)致有機(jī)物含量減少，A正確；B、在米曲霉發(fā)酵過(guò)程中，添加面粉主要是為米曲霉的生長(zhǎng)提供碳源，而不是氮源，B錯(cuò)誤；C、米曲霉發(fā)酵時(shí)需不斷翻醬的目的是為了讓米曲霉接觸到充足的氧氣,由此推斷米曲霉是需氧型微生物，C正確；D、后期發(fā)酵中乳酸菌會(huì)進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)生乳酸，乳酸可以降低環(huán)境的pH值，很多雜菌在酸性環(huán)境中生長(zhǎng)會(huì)受到抑制，同時(shí)乳酸也能賦予豆瓣醬獨(dú)特的酸味，D正確。故選B。3.將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。M培養(yǎng)基可用于真菌a的篩選，某同學(xué)將獲得的真菌a利用如圖的方式進(jìn)行稀釋，統(tǒng)計(jì)甲、乙，丙三個(gè)平板中的菌落數(shù)分別是110、140和149。下列分析正確的是（）A.若真菌a為酵母菌，通常采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)活菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.若在培養(yǎng)真菌a的培養(yǎng)基中添加一定量的青霉素，可抑制細(xì)菌的繁殖C.選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是排除無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)的干擾D.根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為1.33×107個(gè)/mL【答案】B【解析】【分析】血球計(jì)數(shù)板可以用于人體內(nèi)紅、白血球計(jì)數(shù)之用，也用于計(jì)算一些細(xì)菌、真菌、酵母等微生物的數(shù)量，因此若測(cè)定培養(yǎng)液中的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)，也可稀釋涂布平板，根據(jù)菌落數(shù)計(jì)算活菌數(shù)目。【詳解】A、酵母菌相對(duì)較大，可采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)，但該方法統(tǒng)計(jì)的是活菌數(shù)和死菌數(shù)的總和，A錯(cuò)誤；B、青霉素可抑制細(xì)菌的繁殖，避免細(xì)菌對(duì)真菌a的干擾，B正確；C、選取甲、乙、丙三個(gè)培養(yǎng)基的目的是減小實(shí)驗(yàn)誤差，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)三個(gè)平板中的菌落數(shù)可推算培養(yǎng)液中真菌a的密度為（110+140+149）÷3÷0.1×105=1.33×108個(gè)/mL，D錯(cuò)誤。故選B。4.植物甲抗旱、抗病性強(qiáng)，植物乙分蘗能力強(qiáng)、結(jié)實(shí)性好。科研人員通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過(guò)程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.過(guò)程①中酶處理的時(shí)間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異B.過(guò)程②中常采用滅活仙臺(tái)病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.過(guò)程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素D.可通過(guò)分析植物丙的染色體，來(lái)鑒定其是否為雜種植株【答案】B【解析】【分析】1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)將來(lái)自兩個(gè)不同植物的體細(xì)胞融合成一個(gè)雜種細(xì)胞（植物體細(xì)胞雜交技術(shù)），把雜種細(xì)胞培育成植株（植物組織培養(yǎng)技術(shù)）。其原理是植物細(xì)胞具有全能性和細(xì)胞膜具有流動(dòng)性。雜種細(xì)胞再生出新的細(xì)胞壁是體細(xì)胞融合完成的標(biāo)志，細(xì)胞壁的形成與細(xì)胞內(nèi)高爾基體有重要的關(guān)系。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可以克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙、培育作物新品種方面所取得的重大突破。2、分析題圖：圖示為甲、乙兩種植物細(xì)胞融合并培育新植株的過(guò)程，其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過(guò)程；②③表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合以及再生出新細(xì)胞壁的過(guò)程；④表示脫分化形成愈傷組織；⑤表示再分化以及個(gè)體發(fā)育形成植株丙的過(guò)程。【詳解】A、酶解是為了去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，過(guò)程①中酶處理的時(shí)間不同，說(shuō)明兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異，A正確；B、過(guò)程②為原生質(zhì)體的融合，常用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，滅活的仙臺(tái)病毒可誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合，不能用于植物，B錯(cuò)誤；C、過(guò)程④脫分化和⑤再分化的培養(yǎng)基中均需要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，但在兩個(gè)過(guò)程中比例不同，C正確；D、植物丙是植物甲和植物乙體細(xì)胞雜交形成的個(gè)體，應(yīng)具備兩者的遺傳物質(zhì)，因此可通過(guò)分析植物丙的染色體，來(lái)鑒定其是否為雜種植株，D正確。故選B。5.蘭州百合栽培過(guò)程中易受病毒侵染，造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，操作流程如下圖。下列敘述正確的是（）A.①為脫分化過(guò)程，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊B.②為再分化過(guò)程，愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組C.3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值大于1D.百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無(wú)病毒，可以作為該研究中的外植體【答案】D【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。【詳解】A、在脫分化過(guò)程中，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列不規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊，A錯(cuò)誤；B、愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變，但基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中，而愈傷組織細(xì)胞分化過(guò)程是有絲分裂，所以不會(huì)發(fā)生基因重組，B錯(cuò)誤。C、3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值應(yīng)該小于1，C錯(cuò)誤；D、百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無(wú)病毒，因此可以作為該研究中的外植體，D正確；故選D。6.科學(xué)家通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得了含有人生長(zhǎng)激素基因的奶牛，利用其乳腺生產(chǎn)人生長(zhǎng)激素，為加速轉(zhuǎn)基因奶牛的繁育，對(duì)此轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆，過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.細(xì)胞培養(yǎng)前，可采用酶解法將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞B.重組胚胎移植到代孕母牛體內(nèi)之前不需要進(jìn)行性別鑒定C.可采用電融合法使供體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合D.將重組胚胎移到雌性奶牛體內(nèi)，需要注射免疫抑制劑降低免疫排斥【答案】D【解析】【分析】胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。胚胎工程的許多技術(shù)，實(shí)際是在體外條件下，對(duì)動(dòng)物自然受精和早期胚胎發(fā)育條件進(jìn)行的模擬操作。【詳解】A、在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，取材的動(dòng)物組織可以用機(jī)械法或胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞，A正確；B、對(duì)轉(zhuǎn)基因奶牛進(jìn)行克隆，供核奶牛細(xì)胞來(lái)自雌性奶牛，所以重組胚胎是雌性，不需要進(jìn)行性別鑒定，B正確；C、可采用電融合法使供體細(xì)胞和去核卵母細(xì)胞融合，供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，C正確；D、在胚胎移植過(guò)程中，供體牛的早期胚胎被植入代孕牛體內(nèi)，代孕牛通常不會(huì)對(duì)移植的胚胎產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，因此一般不需要對(duì)代孕牛注射免疫抑制劑，D錯(cuò)誤。故選D。7.通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)，可以利用患者自身的細(xì)胞在體外誘導(dǎo)發(fā)育成特定的組織器官，然后再移植回患者體內(nèi)。圖1和圖2表示利用自身細(xì)胞進(jìn)行器官移植的兩種方法，其中誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）類似于人類的胚胎干細(xì)胞。下列敘述正確的是（）A.兩種方法都需要運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，需要將細(xì)胞置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中B.利用兩種方法所獲得的組織器官的遺傳物質(zhì)均與患者的完全相同，因此移植后不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.可利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法或顯微注射法將Oct3/4基因、Sox基因、c-Myc基因和Klf基因?qū)氤衫w維細(xì)胞D.圖2中卵母細(xì)胞去核實(shí)際去除的是紡錘體—染色體復(fù)合物，核移植時(shí)供體細(xì)胞不用去核，可整個(gè)注入去核的卵母細(xì)胞中【答案】D【解析】【分析】1、細(xì)胞工程是應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的理論和方法，按照人們的設(shè)計(jì)藍(lán)圖，進(jìn)行在細(xì)胞水平上的遺傳操作及進(jìn)行大規(guī)模的細(xì)胞和組織培養(yǎng)；2、基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)，是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來(lái)源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品；3、胚胎工程是指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。【詳解】A、兩種方法都需要運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，需要將細(xì)胞置于含有

95%空氣和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中，A錯(cuò)誤；B、圖1所示方法導(dǎo)入了

Oct3/4

基因、Sox基因、c-Myc

基因和Klf

基因，圖2中提供質(zhì)遺傳物質(zhì)的卵母細(xì)胞的來(lái)源未知，因此兩種方法所獲得的組織器官的遺傳物質(zhì)均可能和患者的不完全相同，B錯(cuò)誤；C、將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法，農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法，C錯(cuò)誤；D、核移植的過(guò)程中，卵母細(xì)胞去核實(shí)際去除的是紡錘體—染色體復(fù)合物，核移植時(shí)供體細(xì)胞不用去核，可將整個(gè)供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，D正確。故選D。8.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的說(shuō)法，不正確的有幾項(xiàng)？（）①通過(guò)PEG融合法、電融合法等方法可以誘導(dǎo)兩個(gè)動(dòng)物細(xì)胞相互識(shí)別而融合為一個(gè)細(xì)胞②動(dòng)物細(xì)胞和癌細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中均會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象③滅活的病毒失去了其抗原結(jié)構(gòu)，但保留其感染能力，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合④現(xiàn)階段，體細(xì)胞核移植技術(shù)成功率非常低，而且絕大多數(shù)動(dòng)物存在健康問(wèn)題⑤小鼠骨髓瘤細(xì)胞染色體數(shù)為40條，其B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為40條，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞DNA分子數(shù)為80個(gè)⑥動(dòng)植物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個(gè)細(xì)胞后才能進(jìn)行培養(yǎng)⑦動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織或細(xì)胞具有更高的全能性A.4項(xiàng) B.5項(xiàng) C.6項(xiàng) D.7項(xiàng)【答案】C【解析】【分析】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用誘導(dǎo)因素有PEG、滅活病毒、電激等。滅活病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開(kāi)，細(xì)胞發(fā)生融合。【詳解】①通過(guò)PEG融合法、電融合法等方法可以誘導(dǎo)兩個(gè)動(dòng)物細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞，但沒(méi)有涉及相互識(shí)別，①錯(cuò)誤；②正常體細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)接觸抑制和貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，但癌細(xì)胞能無(wú)限增殖，故在培養(yǎng)過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象，②錯(cuò)誤；③滅活是指用物理或化學(xué)的手段使病毒失去感染能力，但沒(méi)有破壞抗原結(jié)構(gòu)，③錯(cuò)誤；④現(xiàn)階段，體細(xì)胞核移植技術(shù)成功率非常低，而且絕大多數(shù)動(dòng)物存在健康問(wèn)題，許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷，如體型過(guò)大、異常肥胖、發(fā)育困難、臟器缺陷和免疫失調(diào)等，④正確；⑤小鼠骨髓瘤細(xì)胞染色體數(shù)為40條，其B淋巴細(xì)胞的染色體數(shù)為40條，融合后形成的雜交瘤細(xì)胞的核DNA分子數(shù)為80個(gè)，此外在細(xì)胞質(zhì)中還有少量的DNA分子，⑤錯(cuò)誤；⑥動(dòng)物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個(gè)細(xì)胞后才能進(jìn)行培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)時(shí)不需要用酶處理，⑥錯(cuò)誤；⑦動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)材料大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織，其主要原因是這樣的組織或細(xì)胞的分裂能力強(qiáng)，⑦錯(cuò)誤。綜上所述，①②③⑤⑥⑦錯(cuò)誤，④正確，ABD錯(cuò)誤，C正確。故選C。9.關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”、“瓊脂糖凝膠電泳”、“PCR擴(kuò)增”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法正確的是（）A.將洋蔥切碎、研磨、過(guò)濾，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于沉淀物中B.鑒定過(guò)程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變C.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察D.對(duì)2個(gè)雙鏈DNA分子進(jìn)行PCR擴(kuò)增，第n次循環(huán)共需引物2n+1個(gè)【答案】D【解析】【分析】DNA粗提取和鑒定的原理：（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精。（2）DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。【詳解】A、將洋蔥切碎加研磨液研磨、過(guò)濾后，濾液放置4℃冰箱中靜置幾分鐘后，DNA存在于上清液中，A錯(cuò)誤；B、在DNA鑒定過(guò)程中，常用二苯胺在沸水浴條件下與DNA反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色來(lái)鑒定DNA。在這個(gè)過(guò)程中，鑒定過(guò)程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)會(huì)解旋，B錯(cuò)誤；C、DNA分子在凝膠載樣緩沖液中帶正電荷或負(fù)電荷，可用于電泳；電泳緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下可以被檢測(cè)出來(lái)，凝膠載樣緩沖液中加入的是指示劑，C錯(cuò)誤；D、PCR技術(shù)中，DNA復(fù)制遵循半保留復(fù)制原則。一個(gè)雙鏈DNA分子經(jīng)過(guò)n次循環(huán)后得到2?個(gè)DNA分子，需要的引物數(shù)量為（2??1-2）×2個(gè)（因?yàn)樽畛醯?個(gè)DNA分子各有2條模板鏈，不需要引物）。n-1次循環(huán)共需引物（2?-2）×2，第n次循環(huán)共需引物2n+1個(gè)，D正確。故選D。10.實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入攜帶熒光基團(tuán)的探針，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)進(jìn)程的技術(shù)，可用于檢測(cè)RNA病毒。提取病毒RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，然后進(jìn)行PCR，反應(yīng)原理如下圖所示。CT值表示PCR過(guò)程中熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)所需的循環(huán)次數(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.探針與cDNA單鏈的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則B.耐高溫的DNA聚合酶具有催化探針?biāo)獾淖饔肅.CT值越小，意味著提取到的病毒RNA含量越低D.若病毒發(fā)生單個(gè)堿基的突變，可能不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果【答案】C【解析】【分析】PCR原理：在高溫作用下，打開(kāi)DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開(kāi)始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過(guò)程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。PCR反應(yīng)過(guò)程是：變性→復(fù)性→延伸。【詳解】A、探針中攜帶熒光基因，因而探針與cDNA單鏈的結(jié)合遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，A正確；B、結(jié)合題意可知，隨著子鏈的延伸，探針與模板鏈的結(jié)合被破壞，進(jìn)而發(fā)出熒光，因而推測(cè)，耐高溫的DNA聚合酶具有催化探針?biāo)獾淖饔茫珺正確；C、CT值表示PCR過(guò)程中熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)所需的循環(huán)次數(shù)，CT值越小，說(shuō)明達(dá)到設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)需要的循環(huán)次數(shù)越小，因而意味著提取到的病毒RNA含量越高，C錯(cuò)誤；D、若病毒發(fā)生單個(gè)堿基的突變，可能不會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，因?yàn)閱蝹€(gè)堿基沒(méi)有發(fā)生配對(duì)不會(huì)影響PCR進(jìn)程，D正確。故選C。11.在DNA復(fù)制時(shí)，雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP，包含ddATP、ddGTP、ddTTP、ddCTP）會(huì)與脫氧核苷三磷酸（dNTP，包含dATP、dGTP、dTTP、dCTP）競(jìng)爭(zhēng)子鏈延伸的位點(diǎn)，ddNTP也遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。若子鏈連接上的是ddNTP，則延伸終止；若子鏈連接上的是dNTP，則延伸繼續(xù)。研究者在4支試管中各加入4種dNTP和1種ddNTP進(jìn)行PCR，對(duì)產(chǎn)物DNA單鏈片段進(jìn)行電泳，過(guò)程如圖。通過(guò)該方法可測(cè)序未知DNA序列，則圖示未知序列是（）A.B.C.D.【答案】C【解析】【分析】PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。其原理為DNA復(fù)制。PCR的前提條件為：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。PCR需要的物質(zhì)有：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。PCR過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【詳解】據(jù)電泳圖譜可知，引物后所連接的核苷酸序列即形成的子鏈堿基序列依次為：5′?GATTCGAGCTGA?3′，引物與模板鏈互補(bǔ)，因此未知序列的堿基序列為：3′?CTAAGCTCGACT?5′，C正確，ABD錯(cuò)誤。故選C。12.由于某目的基因酶切后的末端為平末端，載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點(diǎn)，需借助中間載體P將目的基因接入載體E。據(jù)圖分析，下列敘述正確的是（）A.通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因是基因工程的核心工作B.為了便于該目的基因接入載體E，可用限制酶EcoRV或SmaI切割載體PC.載體P不能作為基因表達(dá)載體，是因?yàn)槠錄](méi)有表達(dá)該目的基因的啟動(dòng)子與終止子D.若受體細(xì)胞表現(xiàn)出抗性基因的相應(yīng)性狀，表明重組載體成功導(dǎo)入受體細(xì)胞【答案】C【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳解】A、基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，不是通過(guò)PCR擴(kuò)增獲取目的基因，A錯(cuò)誤；B、要使中間載體P接入載體E，同時(shí)防止載體E自身環(huán)化，需要用兩種限制酶分別切割載體E和中間載體P，由于載體E只有產(chǎn)生黏性末端的酶切位點(diǎn)，而EcoRV切割后的末端是平末端，無(wú)法完成上述過(guò)程，B錯(cuò)誤；C、由圖可知，載體P是中間質(zhì)粒，不含有表達(dá)MT基因的啟動(dòng)子和終止子，C正確；D、受體細(xì)胞表現(xiàn)出抗性基因的相應(yīng)性狀，可能是導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，也可能只導(dǎo)入了空質(zhì)粒（不含目的基因的質(zhì)粒），D錯(cuò)誤。故選C。13.雙向啟動(dòng)子可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)聚合酶來(lái)驅(qū)動(dòng)下游基因的表達(dá)，研究人員構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，以檢測(cè)雙向啟動(dòng)子作用效果。下列分析不正確的是（）注：?jiǎn)?dòng)子終止子基因編碼熒光素酶，可催化底物產(chǎn)生熒光基因編碼葡萄糖苷酶，催化底物生成藍(lán)色物質(zhì)A.可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將構(gòu)建好的表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞B.為連入基因，需用和酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及基因的質(zhì)粒C.在培養(yǎng)基中添加壯觀霉素可篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的微生物受體細(xì)胞D.可通過(guò)觀察是否出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)確認(rèn)雙向啟動(dòng)子的作用【答案】B【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】A、將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，A正確；B、如果用SphI酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒時(shí)就會(huì)破壞LUC基因，B錯(cuò)誤；C、如果成功導(dǎo)入含有壯觀霉素抗性基因的基因表達(dá)載體，受體細(xì)胞就具有抗壯觀霉素的能力，在含有壯觀霉素的培養(yǎng)基上能生存，因此可以篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的微生物受體細(xì)胞，C正確；D、雙向啟動(dòng)子如果正常表達(dá)，就會(huì)合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光或生成藍(lán)色物質(zhì)，從而確定雙向啟動(dòng)子的作用，D正確。故選B。14.科學(xué)家將鼠抗人大腸癌單克隆抗體基因（ND-1）與酵母胞嘧啶脫氨酶基因（CD）融合，在大腸桿菌中成功地表達(dá)了單鏈抗體與酶的融合蛋白，這類蛋白的療法稱為由抗體介導(dǎo)的酶解前藥療法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的構(gòu)建方法如圖所示。下列有關(guān)敘述不合理的是（）A.圖中兩條雜交鏈的獲得至少需要經(jīng)過(guò)2次擴(kuò)增循環(huán)B.圖中雜交鏈延伸生成ND-1——CD融合基因的過(guò)程應(yīng)不用加入引物C.獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達(dá)載體后可直接被正常狀態(tài)的大腸桿菌吸收D.該融合蛋白應(yīng)是利用抗體部分特異性的識(shí)別人大腸癌細(xì)胞并將酶帶到靶部位【答案】C【解析】【分析】PCR技術(shù)：（1）定義：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；（2）原理：DNA復(fù)制；（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物；（4）條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、能量；（5）過(guò)程：高溫變性，DNA雙鏈解旋；低溫復(fù)性，引物與互補(bǔ)鏈DNA結(jié)合；中溫延伸，在耐高溫的DNA聚合酶作用下合成子鏈。【詳解】A、經(jīng)過(guò)一次循環(huán)得到的雜交鏈，引物2端和引物3端都為相應(yīng)鏈的5?'端，不可直接延伸子鏈，為了使雜交鏈順利延伸子鏈，至少需要經(jīng)過(guò)2次循環(huán)才能得到如圖所示的引物2端和引物3端都為相應(yīng)鏈的3?'端雜交鏈，A正確；B、雜交鏈延伸生成ND-1——CD

融合基因的過(guò)程中，不需要加入引物，兩條母鏈的起始位置的堿基序列即為引物，可以作為子鏈合成的引物，為DNA聚合酶提供3'端，B正確；C、需要利用氯化鈣處理大腸桿菌獲得感受態(tài)細(xì)胞，獲得的融合基因在構(gòu)建好基因表達(dá)載體才能更好的被大腸桿菌吸收，C錯(cuò)誤；D、抗體可以特異性識(shí)別抗原成分，故該融合蛋白應(yīng)是利用抗體部分特異性的識(shí)別人大腸癌細(xì)胞并將酶帶到靶部位，D正確。故選C。15.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所棉花分子遺傳改良創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)成功將甜菜紅素在棉花纖維中富集，創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，下圖是利用基因工程培育粉紅色棉花的示意圖，下列有關(guān)該研究說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.通過(guò)基因工程創(chuàng)制出彩色纖維棉可有效減少化學(xué)染料使用量B.過(guò)程①→②完成需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與C.在⑤的植株中檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因，就代表粉紅色棉花培育成功D.過(guò)程④→⑤依據(jù)了植物體細(xì)胞全能性的原理【答案】C【解析】【分析】過(guò)程①→②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過(guò)程②→③→④為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法），過(guò)程④→⑤為植物組織培養(yǎng)。【詳解】A、通過(guò)基因工程將甜菜紅素在棉花纖維中富集，創(chuàng)制出纖維呈粉紅色的棉花，可有效減少化學(xué)染料使用量，A正確；B、過(guò)程①→②為基因表達(dá)載體構(gòu)建，完成該過(guò)程需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與，B正確；C、在⑤的植株中檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因，該基因不一定能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，故檢測(cè)到甜菜紅素合成相關(guān)的基因粉紅色棉花不一定能培育成功，C錯(cuò)誤；D、過(guò)程④→⑤為植物組織培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)的原理是植物體細(xì)胞具有全能性，D正確。故選C。二、不定項(xiàng)選擇：（每題3分，漏選1分，錯(cuò)選0分，共15分）16.慶大霉素（GM）能抑制沙門氏菌的生長(zhǎng)。研究人員為了探究LPC（用MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)植物乳桿菌后獲得的上清液）對(duì)沙門氏菌生長(zhǎng)的影響及作用機(jī)制，在接種沙門氏菌的平板上做了五組不同處理，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。下列說(shuō)法正確的是（）A.需將含沙門氏菌的菌液稀釋到適宜濃度后用平板劃線法接種B.設(shè)置MRS是為了排除MRS培養(yǎng)基成分對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響C.Heat-LPC與LPC對(duì)比結(jié)果說(shuō)明LPC的熱穩(wěn)定性比較強(qiáng)D.LPC抑制沙門氏菌的機(jī)制可能是因?yàn)長(zhǎng)PC含有酸性物質(zhì)【答案】BCD【解析】【分析】培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；根據(jù)物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物種和氧氣的要求。【詳解】A、本實(shí)驗(yàn)需在培養(yǎng)基上形成均勻分布的沙門氏菌的菌落，是用稀釋涂布平板法獲得的結(jié)果，A錯(cuò)誤；B、MRS培養(yǎng)基中的成分可能對(duì)該實(shí)驗(yàn)造成干擾，設(shè)置MRS是為了排除無(wú)關(guān)變量的影響，B正確；C、Heat-LPC經(jīng)過(guò)了高溫處理，但是該組的抑菌圈與LPC組的基本相同，說(shuō)明加熱不影響LPC，進(jìn)而說(shuō)明其熱穩(wěn)定性強(qiáng)，C正確；D、NaOH-LPC組沒(méi)有抑菌圈，與MRS組相同，該組在LPC中加入了NaOH后調(diào)節(jié)到了中性，加入的NaOH與LPC中的酸性物質(zhì)反應(yīng)，使其失去了抑菌的作用，因而推測(cè)LPC抑菌是因?yàn)槠浜兴嵝晕镔|(zhì)，D正確。故選BCD。17.我國(guó)中科院的研究團(tuán)隊(duì)利用細(xì)胞工程和基因編輯技術(shù)，成功培育出世界上首例只有雙母親來(lái)源的孤雌小鼠和雙父親來(lái)源的孤雄小鼠，實(shí)現(xiàn)了哺乳動(dòng)物的同性繁殖。實(shí)驗(yàn)流程如圖所示，下列敘述不正確的是（）A.卵細(xì)胞轉(zhuǎn)化成phESC相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的脫分化過(guò)程B.將精子和具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC同時(shí)注入去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚來(lái)培育孤雄小鼠C.不考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為XX，XYD.利用胚胎分割的方法對(duì)甲進(jìn)行處理得到了多只孤雌小鼠遺傳物質(zhì)不同【答案】CD【解析】【分析】1、卵細(xì)胞激活轉(zhuǎn)化成phFSC，通過(guò)基因編輯技術(shù)獲得具精子細(xì)胞核特點(diǎn)的phESC，獲得甲，從而得到孤雌小鼠。2、精子激活轉(zhuǎn)化成ahFSC，通過(guò)基因編輯技術(shù)獲得具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC，獲得乙，從而得到孤雄小鼠。【詳解】A、卵細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，轉(zhuǎn)化為孤雌胚胎干細(xì)胞phFSC，相當(dāng)于植物組織培養(yǎng)中的脫分化階段，A正確；B、據(jù)圖可知，要培育孤雄小鼠需要將精子和具卵細(xì)胞細(xì)胞核特點(diǎn)的ahESC同時(shí)注入去核的卵母細(xì)胞形成重構(gòu)胚，需將去核卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期，B正確；C、不考慮致死，孤雄小鼠的染色體來(lái)源于兩只雄鼠產(chǎn)生的精子，精子的性染色體為X或Y，所以其性染色體可能是XX、XY或YY，C錯(cuò)誤；D、利用胚胎分割的方法對(duì)甲進(jìn)行處理得到了多只孤雌小鼠遺傳物質(zhì)一般相同，D錯(cuò)誤。故選CD。18.某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S（含有多個(gè)不同的抗原決定基，每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體）。為了建立一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗-S單克隆抗體（如圖）。下列說(shuō)法正確的是（）A.利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B是相同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白【答案】AD【解析】【分析】單克隆抗體的制備：用特定的抗原對(duì)小鼠進(jìn)行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，將多種B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。對(duì)上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。將抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。【詳解】A、膠原蛋白酶可以催化分解細(xì)胞外的膠原蛋白，因此利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞，A正確；B、由于蛋白S含有多個(gè)不同的抗原決定基，每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，單克隆抗體A和單克隆抗體B來(lái)自不同的雜交瘤細(xì)胞，因此制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B不是相同的單克隆抗體，B錯(cuò)誤；C、用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，也可以冷凍保存，C錯(cuò)誤；D、單克隆抗體A和單克隆抗體B都來(lái)自篩選出的雜交瘤細(xì)胞，因此都能夠特異性識(shí)別S蛋白上的抗原決定簇，D正確。故選AD。19.圖甲為某種棉花的酶D基因及擬南芥葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，圖乙為Ti質(zhì)粒。為增加油菜種子的含油量，可將酶D基因與轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜葉片細(xì)胞并獲得高產(chǎn)轉(zhuǎn)基因油菜品種。下列敘述不正確的是（）A.用限制酶ClaI和DNA連接酶處理圖甲兩種基因后，可使A、D端相連B.圖乙的Ti質(zhì)粒被限制酶切割一次后，會(huì)產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)C.將目的基因插入圖乙T-DNA中構(gòu)建重組質(zhì)粒，其可能在農(nóng)桿菌中表達(dá)D.將農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到的即為高產(chǎn)轉(zhuǎn)基因油菜【答案】D【解析】【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲取；(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳解】A、用限制酶ClaI切割圖甲兩種基因后，會(huì)使A、D端產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶可使A、D端相連，A正確；B、圖乙的Ti質(zhì)粒被限制酶切割一次后，會(huì)產(chǎn)生2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，B正確；C、將目的基因插入圖乙T-DNA中構(gòu)建重組質(zhì)粒，其可能在農(nóng)桿菌中表達(dá)，C正確；D、普通的質(zhì)粒也含有四環(huán)素抗性基因，故將農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到的不一定為高產(chǎn)轉(zhuǎn)基因油菜，D錯(cuò)誤。故選D。20.光敏色素基因在調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)發(fā)育中具有重要作用。為探討玉米中光敏色素基因A（含大約256個(gè)堿基對(duì)）在棉花種質(zhì)資源創(chuàng)制中的利用價(jià)值，研究人員將A基因轉(zhuǎn)入到棉花中，利用對(duì)棉花受體細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，并通過(guò)電泳技術(shù)分析結(jié)果。該過(guò)程所用質(zhì)粒與含光敏色素基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖甲、乙所示，電泳檢測(cè)結(jié)果如圖丙。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.操作過(guò)程中需要用到的工具有限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和載體B構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)應(yīng)選用BamHI和HindⅢ這兩種限制酶C.PCR反應(yīng)過(guò)程中每次循環(huán)都要經(jīng)歷目的各不相同的兩次升溫和一次降溫D.由圖丙電泳結(jié)果可知，1、2、3、4號(hào)轉(zhuǎn)基因棉花均培育成功【答案】BD【解析】【分析】基因工程的基本操作程序是：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳解】A、該操作需借助基因工程才能實(shí)現(xiàn)，因此操作過(guò)程中需要用到的工具有限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和載體，A正確；B、由圖可知：構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)選用BclⅠ和HindⅢ這兩種限制酶，若用BamHⅠ，則目的基會(huì)因?yàn)楫a(chǎn)生相同的末端而出現(xiàn)自身環(huán)化的現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、PCR反應(yīng)過(guò)程中每次循環(huán)都要經(jīng)歷目的各不相同的兩次升溫（第一次使目的基因變性，第二次使目的基因延伸）和一次降溫（使目的基因復(fù)性），C正確；D、光敏色素基因A含大約256個(gè)堿基對(duì)，由圖丙電泳結(jié)果可知，1、2、3、4號(hào)均導(dǎo)入光敏色素基因A成功，但轉(zhuǎn)基因棉花是否培育成功還需要進(jìn)行生物個(gè)體水平上的鑒定，D錯(cuò)誤。故選BD。三、非選擇題：（共55分）21.啤酒是以大麥芽、啤酒花、水為主要原料，經(jīng)酵母發(fā)酵作用釀制而成的飽含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在體內(nèi)產(chǎn)生大量的熱量，被稱為“液體面包”。圖1是啤酒生產(chǎn)工藝流程簡(jiǎn)圖。（1）圖中焙烤的目的是降低麥芽水分，并________，然后去根制成成品麥芽。將粉碎的麥芽等原料用溫水分別在糊化罐、糖化罐中混合，調(diào)節(jié)溫度以制造麥汁，加水糊化之前粉碎成品麥芽的目的是________。（2）發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。麥汁冷卻后再加入啤酒酵母使其發(fā)酵，冷卻的目的是________。在發(fā)酵過(guò)程中，要隨時(shí)檢測(cè)培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程；并及時(shí)添加必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組分，其目的是________；還要嚴(yán)格控制________等發(fā)酵條件（至少寫(xiě)出3個(gè)），以獲得所需的發(fā)酵產(chǎn)物。（3）現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐均具有計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)，能使發(fā)酵全過(guò)程處于最佳狀態(tài)，圖2為發(fā)酵罐示意簡(jiǎn)圖。發(fā)酵過(guò)程有機(jī)物分解釋放的能量會(huì)引起發(fā)酵罐溫度升高，常用冷卻水對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行溫度的調(diào)節(jié)，冷卻水進(jìn)入口和排出口分別是________（填圖2中的標(biāo)號(hào)，下同）。酵母菌酒精發(fā)酵過(guò)程中要“先通氣后密封”，通過(guò)空氣入口________來(lái)控制溶解氧。【答案】（1）①.加熱殺死大麥種子胚但不使淀粉酶失活②.破碎有利于淀粉酶與淀粉充分接觸，提升反應(yīng)速率（2）①.防止接種時(shí)酵母菌被殺死②.延長(zhǎng)菌體生長(zhǎng)穩(wěn)定期的時(shí)間，以得到更多的發(fā)酵產(chǎn)物③.溫度、pH、溶解氧、通氣量與攪拌（3）①.③④②.⑤【解析】【分析】發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，環(huán)境條件不僅會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，還會(huì)影響微生物代謝物的形成，因此在發(fā)酵過(guò)程中，要隨時(shí)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等以了解發(fā)酵進(jìn)程，還要及時(shí)添加必需的營(yíng)養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶氧量等發(fā)酵條件。【小問(wèn)1詳解】大麥發(fā)芽后焙烤，焙烤溫度較高，除了可以降低麥芽水分，還可以殺死大麥種子胚阻止其進(jìn)一步萌發(fā)，同時(shí)還可以保留淀粉酶活性，以便后續(xù)進(jìn)行糖化操作。進(jìn)行糖化之前，對(duì)麥芽進(jìn)行粉碎，因?yàn)辂溠科扑楹螅欣诘矸勖概c其中淀粉充分接觸，加速酶促反應(yīng)速率，提高糖化效率。【小問(wèn)2詳解】糖化后獲得的麥汁組要冷卻降溫才能加入啤酒酵母，否則溫度過(guò)高容易殺死菌種。發(fā)酵過(guò)程中，由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不斷消耗，需要添加必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組分，以延長(zhǎng)菌體生長(zhǎng)穩(wěn)定期的時(shí)間，得到更多的發(fā)酵產(chǎn)物。溫度、pH、溶解氧和通氣量等均會(huì)影響發(fā)酵的進(jìn)程，因此除了補(bǔ)充必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組分外，還要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶解氧、通氣量和攪拌等發(fā)酵條件。【小問(wèn)3詳解】用冷卻水對(duì)發(fā)酵罐進(jìn)行溫度的調(diào)節(jié)，下口進(jìn)水，上口出水，遵循逆流原理，冷凝效果更好，因此冷卻水進(jìn)入口和排出口分別是③④。酒精發(fā)酵前期通氣，利于酵母菌繁殖，后期密封，利于酒精發(fā)酵，因此需要通過(guò)空氣入口⑤來(lái)控制溶解氧。22.傳統(tǒng)的人工繁殖蘭花的方法是分株繁殖和種子繁殖。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，人們開(kāi)始采用“組織培養(yǎng)繁殖蘭花”，如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：（1）分別以該株蘭花的綠色葉片和紅色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原因是___。（2）外植體被誘導(dǎo)形成了愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是___，甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，目的是___。（3）在誘導(dǎo)脫分化和再分過(guò)程中，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的使用比例有所差異，圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，在誘導(dǎo)B的過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的激素是___（填一種激素）。（4）若該蘭花是雜合體，能否采用花粉粒作為外植體，通過(guò)植物組織培養(yǎng)的方法快速獲得與原植株基因型和表型都相同的花卉，為什么？___。【答案】（1）綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整的植株（2）①.具有分生能力、高度液泡化的薄壁細(xì)胞②.提供營(yíng)養(yǎng)、調(diào)節(jié)滲透壓（3）細(xì)胞分裂素（4）不能

對(duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō)，其體細(xì)胞的基因型相同，而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株【解析】【分析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無(wú)規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。【小問(wèn)1詳解】綠色葉片和紅色花瓣是細(xì)胞分化的結(jié)果，遺傳物質(zhì)并沒(méi)有改變，所以以該植物的綠色葉片和紅色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是綠色葉片和紅色花瓣的細(xì)胞具有全能性。【小問(wèn)2詳解】已經(jīng)分化的細(xì)胞可以經(jīng)過(guò)脫分化失去特有的結(jié)構(gòu)和功能，轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織，稱為愈傷組織，愈傷組織的特點(diǎn)是具有分生能力、高度液泡化的薄壁細(xì)胞；再生出新的細(xì)胞壁是雜種細(xì)胞形成的標(biāo)志。甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，目的是提供營(yíng)養(yǎng)、調(diào)節(jié)滲透壓。【小問(wèn)3詳解】圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，出現(xiàn)這種情況的主要原因是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，誘導(dǎo)B即誘導(dǎo)叢芽的形成，該過(guò)程中細(xì)胞分裂素占比較高，是發(fā)揮關(guān)鍵作用的激素。【小問(wèn)4詳解】若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，在培養(yǎng)時(shí)，不能采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是對(duì)雜合體的植株來(lái)說(shuō)，其體細(xì)胞的基因型相同，通過(guò)減數(shù)分裂形成花粉粒，可以導(dǎo)致等位基因分離，非同源染色體上的非等位基因自由組合等，花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，后代會(huì)出現(xiàn)性狀分離，用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到花卉基因型不同于原植株。23.人體心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三種結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（cTnC），其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答下列問(wèn)題：（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸等必要的營(yíng)養(yǎng)成分外，往往還需加入一定量的_____________，以滿足動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)需要。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是_____________。（2）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的______。為了防止有害代謝物的積累，可采用_____________的方法，以便清除代謝物。（3）每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是________。最后一次免疫后第3天，取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合。（4）甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是________，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，其目的是篩選獲得_____________。（5）酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法，具體原理如圖所示：據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中，酶標(biāo)抗體的作用是____________，可通過(guò)測(cè)定____________來(lái)判斷待測(cè)抗原量。（6）單克隆抗體的制備技術(shù)是在動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)上發(fā)展起來(lái)的，與常規(guī)的血清抗體相比，單克隆抗體最大的優(yōu)點(diǎn)在于_____________。【答案】（1）①.動(dòng)物血清②.維持培養(yǎng)液的pH（2）①.抗生素②.定期更換培養(yǎng)液（3）加強(qiáng)免疫，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞（4）①.乙和丙②.能產(chǎn)生抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞（5）①.與待測(cè)抗原結(jié)合，并催化檢測(cè)底物生成產(chǎn)物②.酶催化特定底物反應(yīng)（酶促反應(yīng)的）產(chǎn)物量（6）能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備【解析】【分析】1、單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無(wú)性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。2、單克隆抗體的制備過(guò)程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過(guò)程中的兩次篩選：第一次篩選：利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞，即AB型細(xì)胞（A為B淋巴細(xì)胞，B為骨髓瘤細(xì)胞），不需要A、B、AA、BB型細(xì)胞。第二次篩選：利用多孔板法和抗原-抗體雜交法篩選，獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。②用于治療疾病和運(yùn)載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導(dǎo)彈”。【小問(wèn)1詳解】人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需加入血清、血漿等一些天然成分。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的氣體環(huán)境：95%空氣＋5%CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，形成類似于細(xì)胞生存的內(nèi)環(huán)境的pH。【小問(wèn)2詳解】抗生素能抑制細(xì)菌的增殖，對(duì)真核細(xì)胞的培養(yǎng)沒(méi)有影響，因此為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素。根據(jù)制作流程要求，細(xì)胞培養(yǎng)中，為防止有害代謝物的積累，需要定期更換培養(yǎng)液。【小問(wèn)3詳解】為了提高淋巴細(xì)胞的免疫能力，刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的漿細(xì)胞（能產(chǎn)生更多的抗體），一般通過(guò)多次注射相應(yīng)抗原實(shí)現(xiàn)。【小問(wèn)4詳解】看圖可知：雜交瘤細(xì)胞需要對(duì)甲篩選后得到，因此乙和丙應(yīng)該是篩選得到的雜交瘤細(xì)胞；其中①代表用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè)，之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè)，并多次重復(fù)上述操作，就能獲得足夠數(shù)量的能分泌抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。【小問(wèn)5詳解】分析圖中過(guò)程，兩種抗體與檢測(cè)的抗原均能結(jié)合，但結(jié)合部位是不同的，而酶標(biāo)抗體可以與待