ICS65.080CCSB1012天津市地方標準DB12/T1270—2023土壤中堿解氮的測定Determinationofsoilalkali-hydrolyzednitrogen天津市市場監督管理委員會發布DB12/T1270—2023前言本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規則》的規定起草。本文件由天津市農業農村委員會提出并歸口。本文件起草單位：天津市農業發展服務中心，天津市農業科學院。本文件主要起草人：于美榮，陳秋生，張鑫，辛勍，殷萍，張強，孫瑞，歐陽小雪，王震，程禹。IDB12/T1270—2023土壤中堿解氮的測定1范圍本文件規定了凱氏定氮法測定土壤中堿解氮的方法原理、試劑和材料、儀器和設備、分析步驟、結果計算及允許偏差。本文件適用于天津市區域內各類土壤堿解氮含量的測定。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法34術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。土壤堿解氮包括無機態氮（銨態氮、硝態氮）及易水解的有機態氮（氨基酸、酰銨和易水解蛋白質），在堿性條件下水解，轉化為銨態氮，蒸餾出的氨由硼酸溶液定量吸收后以鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸的消耗量計算堿解氮含量。5除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純。實驗用水應符合GB/T6682中三級水的要求。5.1氫氧化鈉溶液，1.0mol/L：稱取40.0g氫氧化鈉，加水溶解，冷卻，稀釋至1000mL。5.2定氮混合指示劑：分別稱取0.066g甲基紅和0.099g溴甲酚綠于瑪瑙研缽中，加人少量95%乙醇，研磨至指示劑全部溶解后，加95%乙醇至100mL。5.3硼酸溶液，20g/L：稱取硼酸20.00g，用熱水（約60℃）溶解，稀釋至950mL，冷卻后，加入混合指示劑20mL，混勻，并用稀鹽酸或稀堿調節至紫紅色（pH約5），加水稀釋至1L混勻備用。此試劑宜現配。5.4鹽酸標準滴定溶液[c(HC1)=0.0100mol/L]：配制與標定見GB/T601規定。5.5鋅一硫酸亞鐵粉還原劑：將50.0g硫酸亞鐵磨細，通過0.25mm孔徑篩，與10.0g鋅粉混勻，貯于1DB12/T1270—2023棕色瓶中。或使用市售定氮催化片。5.6液體石蠟。6儀器與設備6.1土壤篩：2mm孔徑篩。6.2分析天平：感量為0.01g。6.3半微量酸式滴定管：5mL。6.4半自動定氮儀或全自動定氮儀。7分析步驟7.1試樣制備7.1.1風干在風干室將土樣放置于盛樣器皿中，除去土壤中混雜的動植物殘體等，攤成2~3cm的薄層，置于陰涼處自然風干，嚴禁暴曬或烘烤。風干過程中，適時翻動，用木錘敲碎（或用兩個木鏟搓碎）土樣，進一步清理土壤中的動植物殘體等雜物。翻動過程要注意防止樣品間交叉污染。對于黏性土壤，在土壤樣品半干時，戴一次性丁腈或聚乙烯等無污染材質手套將大塊土捏碎，以免完全干后結成硬塊。將風干樣品置于有機玻璃板（或硬質木板或無色聚乙烯薄板）上，用木錘輕輕敲碎，再用木棍或有機玻璃棒再次壓碎，細小已斷的植物須根采用靜電吸附的方法清除。將檢測樣品手工研磨后，過孔徑2mm尼龍篩，去除2mm以上的石礫，大于2mm的土團要反復研磨、過篩，直至全部通過。研磨過程中不可隨意遺棄樣品，應及時填寫樣品制備原始記錄。稱取過2mm孔徑篩的試樣5g，精確至0.01g，置于250mL消化管中，加入1.25g鋅-硫酸亞鐵粉還原劑，加入50mL水、40mL氫氧化鈉溶液，最后加液體石蠟1mL，將消化管置于凱氏定氮儀上。另準備250mL三角瓶，加15mL硼酸吸收液，加5-6滴定氮混合指示劑，置于定氮儀冷凝管下端，管口插入硼酸溶液中，以免吸收不完全。進行蒸餾，蒸餾時間3.5分鐘，停止蒸餾。用0.0100mol/L鹽酸標準溶液滴定餾出液，由藍綠色剛變為紫紅色且30秒不褪色時為終點。記錄所用鹽酸標準溶液的體積（mL）。同時做空白試驗，空白測定所用酸標準溶液的體積不得超多0.4mL。2DB12/T1270—2023稱取過2mm孔徑篩的試樣5g，精確至0.01g，置于250mL消化管中，加入1.25g鋅-硫酸亞鐵粉還原劑，液體石蠟1mL。將消化管置于凱氏定氮儀上（設定水、氫氧化鈉溶液、硼酸-指示劑溶液加液體積分別為50mL、40mL、15mL）實現自動加液、蒸餾，滴定。同時先做空白試驗，儀器自動扣除空白值，自動計算和記錄樣品含氮量。8結果計算半自動定氮儀法測定土壤中堿解氮含量的計算見公式（1）。wVV0c141000（1）m式中：w——堿解氮含量，mg/kg；V——滴定土樣