圍繞基因工程賦予生物新的遺傳特性大概念的原創題說題目錄命題依據命題思路命題立意試題分析01020304反思感悟05試題講評06命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評高考評價體系生物學課程標準“一核四層四翼”高考評價體系命制的試題要考查學生哪些知識、哪方面的素養和能力?如何選定素材、創設情境以落實立德樹人的根本任務?如何設計題干和問題對學生的素質達成進行評價?突顯“四層”承載“一核”緊貼“四翼”命題要求命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評命題原則

命題應以課程標準中的內容要求、學業質量標準為依據，指向生物學學科核心素養的發展水平。

試題素材應貼近學生生活實際，以真實問題情境組織命題，應注重考查學生綜合運用所學的知識和技能解決問題的能力。

試題的表述和指向要明確、清晰、直接，確保題目的公平性、科學性和規范性，要能夠區分出不同素養水平的學生。高考評價體系生物學課程標準命題要求命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評高考評價體系生物學課程標準命題要求

圍繞大概念:基因工程賦予生物新的遺傳特性組織教材相應章節內容，自行選擇素材進行命題。大概念重要概念次位概念概念5：基因工程賦予生物新的遺傳特性5.1基因工程是一種重組DNA技術5.1.1概述基因工程是在遺傳學、微生物學、生物化學和分子生物學等學科基礎上發展而來的5.1.2闡明DNA重組技術的實現需要利用限制性內切核酸酶、DNA連接酶和載體三種基本工具5.1.3闡明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的獲取、基因表達載體的構建、目的基因導入受體細胞和目的基因及其表達產物的檢測鑒定等步驟5.1.4舉例說明基因工程在農牧、食品及醫藥等行業的廣泛應用改善了人類的生活品質5.2蛋白質工程是基因工程的延伸5.2.1概述人們根據基因工程原理，進行蛋白質設計和改造，可以獲得性狀和功能更符合人類需求的蛋白質5.2.2舉例說明依據人類需要對原有蛋白質結構進行基因改造、生產目標蛋白的過程命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評必備知識素材收集及處理試題呈現

基因工程賦予生物新的遺傳特性大概念下學生要掌握的必備知識：基因工程的理論基礎、基因工程的基本工具（限制酶、DNA連接酶和載體）、DNA粗提取與鑒定、基因工程的基本操作程序（目的基因獲取、基因表達載體的構建、目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定）、DNA片段的擴增（PCR技術）和電泳技術、基因工程的應用、蛋白質工程的原理和應用。

基因表達載體的構建是基因工程的核心步驟，確定以其作為考查知識點。命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評必備知識素材收集及處理試題呈現查找論文，了解基因表達載體構建的方法：命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評查找論文，深入了解Gibsonassembly技術：必備知識素材收集及處理試題呈現命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評對論文中無縫克隆的原理圖進行簡化，得到試題圖1：必備知識素材收集及處理試題呈現命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評

繼續檢索論文，選擇合適的情境，最后確定以農業生產中利用無縫克隆技術培育多抗玉米品種的科研情境為試題載體：必備知識素材收集及處理試題呈現命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評無縫克隆的原理結合多抗玉米表達載體構建情境，得到試題圖2：必備知識素材收集及處理試題呈現命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評必備知識素材收集及處理試題呈現非選擇題（13分）無縫克隆技術是依賴于同源序列的基因克隆技術，利用同源的DNA序列能夠將任意DNA片段進行無縫連接在一起，過程如下圖1所示。我國某科研團隊利用無縫克隆技術構建了多基因表達載體，從而培育出了抗蟲抗除草劑的玉米，抗蟲抗除草劑玉米表達載體構建過程如圖2所示。（1）組成質粒GBI的基本單位是______。構建含抗除草劑基因和抗蟲基因的表達載體，傳統的方法是用______酶處理目的基因和質粒后得到重組質粒。（2）T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而圖1中T5核酸外切酶作用的溫度選擇為50℃，目的是______。（3）圖2中為了使Cry1Ac基因和GR79基因與線性化質粒進行無縫連接，需要對Cry1Ac基因和GR79基因進行PCR改造，改造所用的引物要加入額外的片段，增加的片段應與引物的______（填“3′”或“5′”）端連接。根據圖1無縫連接的原理，圖2中引物2和引物3所加的片段堿基序列應______。引物1和引物4所加片段應分別與線性化質粒中的______（從“a、b、c、d”中選填）片段序列相同。（4）結合圖1和圖2信息可以看出無縫克隆技術不依賴于任何限制酶，利用T5核酸外切酶可以將有同源序列的片段進行無縫連接。和傳統方法比，無縫克隆技術構建基因表達載體的優點是____。命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評必備知識素材收集及處理試題呈現【答案及評分標準】（1）脫氧核糖核苷酸（1分）；

限制酶和DNA連接（2分）

（2）降低酶活性，防止過度水解DNA（答到降低酶活性給1分，答到防止過度水解DNA給1分；2分）

（3）5＇（1分）；

互補（2分）；

b、d（2分）（4）構建基因表達載體時目的基因的插入位點不受限制酶識別序列限制，實現了目的基因在載體任意位點上的插入。（3分，意思相近即可）

命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評（1）組成質粒GBI的基本單位是______。構建含抗除草劑基因和抗蟲基因的表達載體，傳統的方法是用______酶處理目的基因和質粒后得到重組質粒。（2）T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而圖1中T5核酸外切酶作用的溫度選擇為50℃，目的是______。（3）圖2中為了使Cry1Ac基因和GR79基因與線性化質粒進行無縫連接，需要對Cry1Ac基因和GR79基因進行PCR改造，改造所用的引物要加入額外的片段，增加的片段應與引物的______（填“3′”或“5′”）端連接。根據圖1無縫連接的原理，圖2中引物2和引物3所加的片段堿基序列應______。引物1和引物4所加片段應分別與線性化質粒中的______（從“a、b、c、d”中選填）片段序列相同。（4）結合圖1和圖2信息可以看出無縫克隆技術不依賴于任何限制酶，利用T5核酸外切酶可以將有同源序列的片段進行無縫連接。和傳統方法比，無縫克隆技術構建基因表達載體的優點是______。必備知識質粒；基因表達載體的構建；酶的特性；PCR技術和無縫克隆技術關鍵能力理解能力、獲取信息能力、解決問題的能力和創新能力學科素養結構與功能觀等生命觀念；邏輯推理等科學思維；科學技術推動社會發展的責任擔當意識。命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評問題設計學生作答情況（1）組成質粒GBI的基本單位是______。構建含抗除草劑基因和抗蟲基因的表達載體，傳統的方法是用______酶處理目的基因和質粒后得到重組質粒。（2）T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而圖1中T5核酸外切酶作用的溫度選擇為50℃，目的是______。（3）圖2中為了使Cry1Ac基因和GR79基因與線性化質粒進行無縫連接，需要對Cry1Ac基因和GR79基因進行PCR改造，改造所用的引物要加入額外的片段，增加的片段應與引物的______（填“3′”或“5′”）端連接。根據圖1無縫連接的原理，圖2中引物2和引物3所加的片段堿基序列應______。引物1和引物4所加片段應分別與線性化質粒中的______（從“a、b、c、d”中選填）片段序列相同。（4）結合圖1和圖2信息可以看出無縫克隆技術不依賴于任何限制酶，利用T5核酸外切酶可以將有同源序列的片段進行無縫連接。和傳統方法比，無縫克隆技術構建基因表達載體的優點是______。基礎性基礎性、綜合性基礎性、綜合性、創新性綜合性、應用性命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評問題設計學生作答情況我校平行班層次（48人）的學生進行作答，答題情況如下：難度系數：0.45命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評題號知識內容情境考查要求難度系數（1）第一空質粒的基本單位學習生活實踐情境基礎性0.85第二空基因表達載體構建的工具酶0.65（2）酶的特性解釋無縫克隆酶的使用方法基礎性、綜合性0.40（3）第一空PCR引物添加堿基序列基礎性、綜合性、創新性0.56第二空無縫克隆中引物的設計0.50第三空無縫克隆中引物的選擇0.31（4）無縫克隆技術構建表達載體的優點綜合性、應用性0.15教學過程中對于一些抽象的概念可以放入真實的情境中，激發學生的學習欲和探索欲，提升教學效果；教師利用好教材資源或尋找素材創設情境，培養學生獲取信息的能力、運用所學知識解決問題的能力和創新能力。命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評非選擇題（13分）無縫克隆技術是依賴于同源序列的基因克隆技術，利用同源的DNA序列能夠將任意DNA片段進行無縫連接在一起，過程如下圖1所示。我國某科研團隊利用無縫克隆技術構建了多基因表達載體，從而培育出了抗蟲抗除草劑的玉米，抗蟲抗除草劑玉米表達載體構建過程如圖2所示。（1）組成質粒GBI的基本單位是______。構建含抗除草劑基因和抗蟲基因的表達載體，傳統的方法是用______酶處理目的基因和質粒后得到重組質粒。（2）T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而圖1中T5核酸外切酶作用的溫度選擇為50℃，目的是______。（3）圖2中為了使Cry1Ac基因和GR79基因與線性化質粒進行無縫連接，需要對Cry1Ac基因和GR79基因進行PCR改造，改造所用的引物要加入額外的片段，增加的片段應與引物的______（填“3′”或“5′”）端連接。根據圖1無縫連接的原理，圖2中引物2和引物3所加的片段堿基序列應______。引物1和引物4所加片段應分別與線性化質粒中的______（從“a、b、c、d”中選填）片段序列相同。（4）結合圖1和圖2信息可以看出無縫克隆技術不依賴于任何限制酶，利用T5核酸外切酶可以將有同源序列的片段進行無縫連接。和傳統方法比，無縫克隆技術構建基因表達載體的優點是______。命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評（1）組成質粒GBI的基本單位是______________。構建含抗除草劑基因和抗蟲基因的表達載體，傳統的方法是用___________________酶處理目的基因和質粒后得到重組質粒。非選擇題（13分）無縫克隆技術是依賴于同源序列的基因克隆技術，利用同源的DNA序列能夠將任意DNA片段進行無縫連接在一起，過程如下圖1所示。我國某科研團隊利用無縫克隆技術構建了多基因表達載體，從而培育出了抗蟲抗除草劑的玉米，抗蟲抗除草劑玉米表達載體構建過程如圖2所示。脫氧核糖核苷酸限制酶和DNA連接命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評（2）T5核酸外切酶催化的最適溫度為37℃，而圖1中T5核酸外切酶作用的溫度選擇為50℃，目的是____________________________________________。非選擇題（13分）無縫克隆技術是依賴于同源序列的基因克隆技術，利用同源的DNA序列能夠將任意DNA片段進行無縫連接在一起，過程如下圖1所示。我國某科研團隊利用無縫克隆技術構建了多基因表達載體，從而培育出了抗蟲抗除草劑的玉米，抗蟲抗除草劑玉米表達載體構建過程如圖2所示。降低酶活性，防止過度水解DNA溫度大于最適溫度酶的活性降低酶促反應速率減小更好控制反應進程防止反應過度命題依據命題思路命題立意試題分析反思感悟試題講評DNA模板鏈5＇3＇（3）圖2中為了使Cry1Ac基因和GR79基因與線性化質粒進行無縫連接，需要對Cry1Ac基因和GR79基因進行PCR改造，改造所用的引物要加入額外的片段，增加的片段應與引物的______（填“3′”或“5′”）端連