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文檔簡介
少量DNA↓足量DNA怎么為烈士尋找親屬?DNA的復制第3節DNA的復制第3章基因的本質本節聚焦怎樣證明DNA是半保留復制的?DNA的復制過程是怎樣的?DNA的半保留復制對遺傳信息的穩定傳遞有什么意義?——DNA是如何復制的呢?
沃森和克里克在發表DNA雙螺旋結構的那篇著作短文的結尾處寫道:“值得注意的是,我們提出的這種堿基特異性配對方式,暗示著遺傳物質進行復制的一種可能的機制”。沃森、克里克一、對DNA復制的推測1、作出假說一、對DNA復制的推測DNA復制時,DNA雙螺旋解開,互補的堿基之間的氫鍵斷裂;解開的兩條單鏈分別作為復制的模板,游離的脫氧核苷酸依據堿基互補配對原則,
通過形成氫鍵,結合到作為模板的單鏈上;新合成的每個DNA分子中,都保留了原來DNA分子中的一條鏈,這種復制方式被稱做半保留復制。沃森和克里克——半保留復制2、作出假說一、對DNA復制的推測2、作出假說就像文件復制一樣,復制完成后親代DNA被完整的保留下來,即經過一次復制形成的兩個DNA分子,其中一個是親代DNA,子代DNA的雙鏈都是新合成的。不同觀點:有的科學家——全保留復制。親代DNA子代DNA一、對DNA復制的推測假說1半保留復制假說2全保留復制假說3分散復制或彌散復制1、這三種復制方式最關鍵的區別是?同位素標記技術2、如何區分母鏈(親代DNA)和子鏈(子代DNA)親代DNA的兩條鏈在子代DNA的分布——區分親代與子代DNA二、DNA半保留復制的實驗證據(一)科學家:梅塞爾森和斯塔爾(二)實驗材料:大腸桿菌(三)技術方法:1.同位素標記技術(分裂快,約20min分裂一次)C、H、O、N、P14N15N背景知識15N和14N是氮元素的兩種穩定同位素,這兩種同位素的相對原子質量不同,含15N的DNA比含14N的DNA密度大;利用離心技術可以在試管中區分含有不同氮元素的DNA;輕帶中帶重帶14N/14N-DNA15N/14N-DNA15N/15N-DNA2.密度梯度離心
(四)實驗過程提取DNA離心轉移到含14NH4Cl的培養液中提取DNA離心?提取DNA離心?細胞分裂一次第一代第二代(五)預期結果半保留復制第一代第二代親代DNA讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養液中生長若干代(實驗設計)3、演繹推理(四)實驗過程提取DNA離心轉移到含14NH4Cl的培養液中提取DNA離心?提取DNA離心?細胞分裂一次第一代第二代(五)預期結果全保留復制讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養液中生長若干代第一代第二代親代DNA(實驗設計)3、演繹推理(四)實驗過程提取DNA離心轉移到含14NH4Cl的培養液中提取DNA離心?提取DNA離心?細胞分裂一次第一代第二代(五)預期結果分散復制讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養液中生長若干代親代DNA第一代第二代(實驗設計)3、演繹推理(六)進行實驗15N/14N-DNA14N/14N-DNA15N/14N-DNA提取DNA離心15N/15N-DNA密度低高提取DNA離心提取DNA離心細胞分裂一次轉移到含14NH4CI中讓大腸桿菌在含15NH4Cl的培養液中生長若干代(七)得出結論:DNA的復制是以半保留的方式進行的。排除全保留復制排除分散復制4、實驗驗證,得出結論2.作出假說3.演繹推理4.實驗驗證
得出結論推測可能的復制方式。根據復制模式,預測實驗結果。DNA是如何復制的?1.提出問題假說——演繹法進行實驗、得出結論?!拘〗Y】(一)DNA分子數1.子代DNA總數2.含15N的DNA數3.含14N的DNA數4.只含15N的DNA數5.只含14N的DNA數相關計算親代DNA分子復制1次復制2次復制3次2n個222315N14N212個2n個0個(2n-2)個(二)DNA鏈數1.子代單鏈總數2.含15N的單鏈3.含14N的單鏈相關計算親代DNA分子復制1次復制2次復制3次2n+1條222315N14N212條(2n+1-2)條(三)消耗某種堿基數(假設親代DNA含有某種堿基的個數為m)相關計算親代DNA分子復制1次復制2次復制3次222315N14N21m·(2n-1)個1.經過n次復制,總共消耗游離的該堿基數為2.第n次復制時,共消耗游離的該堿基數為m·2n-1個練一練1.一個有15N標記的DNA分子放在沒有標記的環境中培養,復制5次后標記的DNA分子占DNA分子總數的(
)A.1/10B.1/5C.1/16D.1/322.1個DNA分子經過4次復制,形成16個DNA分子,其中不含親代母鏈的DNA分子為()A.2個B.8個C.14個D.32個
C
C3.一個DNA分子中有堿基A20個,占全部堿基的20%,若DNA連續復制2次,需要堿基C()A.20個B.30個C.90個D.120個4.某DNA分子有2000個脫氧核苷酸,已知它的一條單鏈上堿基A∶G∶T∶C=1∶2∶3∶4,若該分子復制一次,則需要腺嘌呤脫氧核苷酸的數量是()A.200個B.300個C.400個D.800個練一練
C
C三、DNA復制的過程閱讀P55—56的內容,思考并回答以下問題:(5min)1.DNA復制的概念?2.DNA復制的時期與場所?3.DNA復制的過程包括哪幾個主要環節?4.DNA復制的結果?5.DNA復制過程有何特點?需要哪些條件?6.DNA準確復制的原因和意義?三、DNA復制的過程(一)概念(二)場所(三)時間是指以親代DNA為模板合成子代DNA的過程細胞分裂前的間期細胞核(主要)、線粒體、葉綠體有絲分裂前的間期減數分裂Ⅰ前的間期真核生物:原核生物:病毒:細胞質宿主細胞體內DNA復制過程視頻(四)過程CGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATACGTATACGGCTAGCCGTA3'5'1.解旋:在細胞提供的能量的驅動下,解旋酶將DNA雙螺旋的兩條鏈解開。CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ATP解旋酶(使氫鍵斷裂)(ATP)2.合成子鏈:DNA聚合酶等以解開的每一條母鏈為模板,以細胞中游離的4種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補配對原則,各自合成與母鏈互補的一條子鏈。(形成磷酸二酯鍵)CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATATA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT(四)過程ACGCAAGCTAGTCATTA5'3'TATGCATGATCGAGCTT5'3'合成方向:子鏈的5'端→3'端3.形成子代DNA分子:每條新鏈與其對應的模板鏈盤繞成雙螺旋結構。(四)過程CCGTAGTATACGGCTAGCCGTATACGGCCGTATAGCCGATATCGATCGTATATAA3'5'ACGCAAGCTAGTCATTATATGCATGATCGAGCTT5'3'TAGCCGTATAGCCGATAT3'5'TTACGCGTATATATA5'3'解旋酶酶5'3'3'5'DNA聚合酶5'3'前導鏈5'3'岡崎片段DNA連接酶DNA聚合酶的底物:脫氧核苷酸DNA連接酶的底物:DNA片段后隨鏈前導鏈與后隨鏈(滯后鏈):互補配對拓展(五)過程分析能量(ATP)解旋酶解開母鏈脫氧核苷酸DNA聚合酶堿基互補配對雙螺旋結構催化形成磷酸二酯鍵斷開氫鍵形成___個與親代_________的DNA。兩完全相同(六)特點1.邊解旋邊復制2.半保留復制真核生物DNA復制(六)特點3.多起點雙向復制已知某DNA含48502個堿基對,而子鏈的延伸速度為105個堿基對/min
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