艾滋病診斷標準與方法一、艾滋病的定義及背景概述艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（AcquiredImmunodeficiencySyndrome，AIDS），是由人類免疫缺陷病毒（HumanImmunodeficiencyVirus，HIV）感染引起的一種嚴重傳染性疾病。HIV主要攻擊人體免疫系統中的CD4+T淋巴細胞，導致機體免疫功能逐漸受損，使得患者容易發生各種機會性感染和腫瘤。自1981年首次報告以來，艾滋病已在全球范圍內廣泛流行，成為嚴重威脅人類健康和社會發展的公共衛生問題。二、艾滋病診斷的重要性準確及時的艾滋病診斷對于患者的治療和管理、疾病的防控以及公共衛生決策都具有至關重要的意義。對于患者而言，早期診斷可以使他們盡早接受抗病毒治療，延緩疾病進展，提高生活質量，延長生存期。對于公共衛生而言，及時發現感染者并采取有效的防控措施，可以減少病毒的傳播，控制疫情的蔓延。三、HIV感染的自然史HIV感染的自然史通常可分為以下幾個階段：1.急性期：通常發生在初次感染HIV后的24周。部分患者可出現發熱、咽痛、盜汗、嘔吐、腹瀉、皮疹等癥狀，這些癥狀一般持續13周后自行緩解。此階段HIV在體內大量復制，CD4+T淋巴細胞計數可短期內迅速下降。2.無癥狀期：此階段可從急性期進入，也可無明顯的急性期癥狀而直接進入。持續時間一般為68年，其時間長短與感染病毒的數量、型別，感染途徑，機體免疫狀況等多種因素有關。在無癥狀期，HIV在體內持續復制，免疫系統逐漸受損，但患者可無明顯臨床癥狀。3.艾滋病期：為感染HIV后的最終階段。患者CD4+T淋巴細胞計數明顯下降，低于200/μl，出現各種機會性感染和腫瘤，如肺孢子菌肺炎、卡波西肉瘤等，臨床表現復雜多樣。四、艾滋病診斷標準（一）HIV抗體篩查試驗陽性HIV抗體篩查試驗是艾滋病診斷的第一步，常用的方法包括酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、化學發光或免疫熒光試驗、快速檢測（如膠體金法）等。這些方法具有較高的敏感性，但特異性相對較低，可能會出現假陽性結果。因此，篩查試驗陽性者需要進一步進行確證試驗。（二）HIV抗體確證試驗陽性確證試驗常用的方法是免疫印跡法（WesternBlot，WB）。該方法能夠檢測HIV的不同抗原成分，如p24、gp41、gp120/gp160等。如果免疫印跡法結果顯示至少兩條env帶（gp41、gp120/gp160）或至少一條env帶和p24帶同時出現，則為陽性；如果無病毒特異帶出現，則為陰性；如果出現不典型帶型，則為不確定結果。對于不確定結果，需要在48周后進行隨訪檢測，必要時可進行核酸檢測以明確診斷。（三）HIV核酸檢測陽性HIV核酸檢測包括定性和定量檢測。定性檢測主要用于早期診斷，特別是在HIV抗體窗口期內的診斷。定量檢測則主要用于監測HIV病毒載量，評估疾病進展和抗病毒治療效果。當HIV核酸檢測結果陽性，且有流行病學史及相關臨床表現時，即使HIV抗體篩查試驗和確證試驗結果為陰性，也可診斷為HIV感染。（四）艾滋病期診斷標準成人及15歲（含15歲）以上青少年，符合下列一項者即可診斷為艾滋病期：1.艾滋病病毒抗體陽性，CD4+T淋巴細胞計數＜200/μl。2.艾滋病病毒抗體陽性，伴有以下至少一項艾滋病指征性疾病：肺孢子菌肺炎食管念珠菌病嚴重的細菌性感染（如反復發生的肺炎、敗血癥等）活動性結核巨細胞病毒視網膜炎卡波西肉瘤伯基特淋巴瘤腦弓形蟲病等15歲以下兒童，符合下列一項者即可診斷為艾滋病期：1.艾滋病病毒抗體陽性，CD4+T淋巴細胞百分比＜15%（＜12月齡），或＜12%（1235月齡），或＜10%（3659月齡），或CD4+T淋巴細胞計數＜200/μl（≥5歲）。2.艾滋病病毒抗體陽性，伴有至少一項艾滋病指征性疾病。五、艾滋病診斷方法（一）實驗室診斷方法1.HIV抗體檢測酶聯免疫吸附試驗（ELISA）：是最常用的HIV抗體篩查方法之一。其原理是將HIV抗原包被在微孔板上，加入待檢血清，若血清中含有HIV抗體，則會與包被抗原結合，再加入酶標記的抗人免疫球蛋白抗體，最后加入底物顯色。根據吸光度值判斷結果。該方法具有靈敏度高、操作相對簡便、可批量檢測等優點，但存在一定的假陽性和假陰性率。化學發光或免疫熒光試驗：利用化學發光或免疫熒光技術檢測HIV抗體。與ELISA相比，具有更高的靈敏度和特異性，檢測速度更快，自動化程度高，適用于大規模篩查。快速檢測：包括膠體金法、乳膠凝集法等。其原理是將HIV抗原標記在膠體金或乳膠顆粒上，當待檢血清中含有HIV抗體時，會形成抗原抗體復合物，在檢測區出現顯色條帶。快速檢測具有操作簡便、出結果快（一般1530分鐘）等優點，適用于現場檢測、急診檢測等，但靈敏度相對較低。免疫印跡法（WB）：是HIV抗體確證試驗的“金標準”。先將HIV抗原進行電泳分離，然后轉移到硝酸纖維素膜上，加入待檢血清，若血清中含有HIV抗體，則會與膜上的相應抗原結合，再加入酶標記的抗人免疫球蛋白抗體，最后加入底物顯色，根據膜上出現的條帶判斷結果。2.HIV核酸檢測逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR）：是最常用的HIV核酸檢測方法之一。其原理是先將HIV的RNA逆轉錄為cDNA，然后通過PCR技術進行擴增，最后通過檢測擴增產物來判斷HIV核酸的存在。RTPCR具有靈敏度高、特異性強等優點，可用于HIV感染的早期診斷、病毒載量監測等。核酸序列依賴性擴增（NASBA）：是一種等溫核酸擴增技術，不需要高溫變性步驟，具有反應速度快、特異性強等優點。主要用于HIVRNA的定量檢測。轉錄介導的擴增（TMA）：也是一種等溫核酸擴增技術，具有靈敏度高、檢測時間短等優點，可用于HIV感染的早期診斷和病毒載量監測。3.CD4+T淋巴細胞計數檢測流式細胞術：是檢測CD4+T淋巴細胞計數的常用方法。其原理是利用熒光標記的抗CD4和抗CD3單克隆抗體與外周血中的淋巴細胞結合，然后通過流式細胞儀檢測熒光信號，根據細胞表面抗原的表達情況對淋巴細胞進行分類和計數。流式細胞術具有準確性高、重復性好等優點，是評估HIV感染者免疫功能的重要指標。（二）臨床診斷方法1.病史采集流行病學史：詳細詢問患者是否有不安全性行為史（包括同性、異性或雙性性接觸）、靜脈注射毒品史、輸入未經抗HIV檢測的血液或血液制品史、HIV抗體陽性者所生子女等。了解患者的流行病學史對于艾滋病的診斷具有重要的提示作用。現病史：詢問患者是否有發熱、盜汗、腹瀉、體重減輕等全身癥狀，以及是否有咳嗽、咳痰、呼吸困難等呼吸道癥狀，口腔潰瘍、吞咽困難等消化道癥狀，皮疹、瘙癢等皮膚癥狀等。了解患者的現病史有助于判斷患者是否處于艾滋病期以及是否合并有機會性感染和腫瘤。既往史：詢問患者既往是否有其他性傳播疾病、肝炎、結核等傳染病史，以及是否有輸血、手術、外傷等史。了解患者的既往史有助于評估患者的免疫狀態和感染風險。2.體格檢查一般檢查：包括體溫、脈搏、呼吸、血壓等生命體征的檢查，以及身高、體重的測量。觀察患者的營養狀況、精神狀態等。皮膚黏膜檢查：檢查患者的皮膚是否有皮疹、潰瘍、結節等病變，口腔黏膜是否有白斑、潰瘍等病變，生殖器部位是否有皰疹、潰瘍、贅生物等病變。淋巴結檢查：檢查患者的淺表淋巴結是否腫大，包括頸部、腋窩、腹股溝等部位。注意淋巴結的大小、質地、活動度、有無壓痛等。胸部檢查：檢查患者的胸廓是否對稱，呼吸運動是否正常，肺部是否有啰音、哮鳴音等異常呼吸音。腹部檢查：檢查患者的腹部是否有壓痛、反跳痛、肌緊張等體征，肝臟、脾臟是否腫大等。六、艾滋病診斷中的特殊情況及處理（一）窗口期從HIV感染人體到感染者血清中的HIV抗體、抗原或核酸等感染標志物能被檢測出之前的時期稱為窗口期。在窗口期內，HIV抗體檢測可能為陰性，但患者已經具有傳染性。因此，對于有高危行為的人群，即使HIV抗體檢測陰性，也不能排除HIV感染，需要在窗口期后進行復查。一般來說，HIV抗體窗口期為212周，核酸檢測窗口期為14周。（二）嬰幼兒艾滋病診斷由于嬰幼兒體內存在從母體獲得的被動抗體，HIV抗體檢測結果不能作為確診依據。對于18月齡以下的嬰幼兒，主要采用HIV核酸檢測進行早期診斷。如果兩次不同時間的HIV核酸檢測結果均為陽性，則可診斷為HIV感染；如果兩次檢測結果均為陰性，則可排除HIV感染。對于18月齡及以上的兒童，HIV抗體檢測方法與成人相同。（三）合并其他疾病的艾滋病診斷HIV感染者可能合并其他疾病，如肝炎、結核等，這些疾病可能會影響艾滋病的診斷和治療。在診斷艾滋病時，需要綜合考慮患者的臨床表現、實驗室檢查結果等，排除其他疾病的干擾。同時，對于合并其他疾病的艾滋病患者，需要制定個體化的治療方案，兼顧艾滋病和其他疾病的治療。（四）不確定結果的處理當HIV抗體確證試驗結果為不確定時，需要在48周后進行隨訪檢測。在隨訪期間，患者應避免高危行為，同時可根據情況進行HIV核酸檢測以明確診斷。如果隨訪檢測結果仍為不確定，或核酸檢測結果為陰性，但患者仍有高危行為或臨床表現高度懷疑HIV感染，可繼續隨訪觀察，必要時請專家會診。七、艾滋病診斷的質量控制（一）實驗室質量控制1.人員培訓：實驗室工作人員應接受專業的培訓，掌握艾滋病檢測技術和質量控制知識，熟悉檢測操作規程和生物安全防護要求。2.儀器設備管理：定期對檢測儀器設備進行校準、維護和保養，確保儀器設備的正常運行和檢測結果的準確性。3.試劑管理：選用經國家食品藥品監督管理總局批準的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書的要求保存和使用試劑，定期對試劑進行質量評估。4.室內質量控制：在每次檢測時，應使用內部質量控制品進行檢測，監控檢測過程的準確性和穩定性。當質量控制結果超出控制范圍時，應及時查找原因并采取糾正措施。5.室間質量評價：參加國家或省級臨床檢驗中心組織的室間質量評價活動，評估實驗室的檢測能力和水平。對于室間質量評價結果不合格的項目，應及時分析原因并進行整改。（二）臨床診斷質量控制1.病史采集和體格檢查的規范：臨床醫生應嚴格按照規范的流程進行病史采集和體格檢查，確保獲取的信息準確、全面。2.診斷標準的遵循：臨床醫生應嚴格遵循艾滋病診斷標準進行診斷，避免誤診和漏診。3.多學科協作：對于艾滋病的診斷和治療，應建立多學科協作機制，包括感染科醫生、皮膚科醫生、口腔科醫生、眼科醫生等，共同參與患者的診斷和治療，提高診斷的準確性和治療效果。八、艾滋病診斷相關的60題問答1.什么是艾滋病？艾滋病即獲得性免疫缺陷綜合征，是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的嚴重傳染性疾病，主要攻擊人體免疫系統中的CD4+T淋巴細胞，導致免疫功能受損，引發各種機會性感染和腫瘤。2.HIV感染的主要途徑有哪些？主要途徑包括性傳播（同性、異性或雙性性接觸）、血液傳播（如靜脈注射毒品共用針具、輸入未經抗HIV檢測的血液或血液制品等）、母嬰傳播（包括宮內感染、分娩過程感染和母乳喂養感染）。3.艾滋病診斷的第一步是什么？艾滋病診斷的第一步是進行HIV抗體篩查試驗，常用方法有酶聯免疫吸附試驗、化學發光或免疫熒光試驗、快速檢測等。4.HIV抗體篩查試驗陽性后需要做什么？HIV抗體篩查試驗陽性者需要進一步進行確證試驗，常用的確證試驗方法是免疫印跡法。5.免疫印跡法結果如何判斷？如果免疫印跡法結果顯示至少兩條env帶（gp41、gp120/gp160）或至少一條env帶和p24帶同時出現，則為陽性；如果無病毒特異帶出現，則為陰性；如果出現不典型帶型，則為不確定結果。6.對于免疫印跡法不確定結果怎么辦？對于不確定結果，需要在48周后進行隨訪檢測，必要時可進行核酸檢測以明確診斷。7.HIV核酸檢測有什么作用？HIV核酸檢測包括定性和定量檢測。定性檢測用于早期診斷，特別是在HIV抗體窗口期內的診斷；定量檢測用于監測HIV病毒載量，評估疾病進展和抗病毒治療效果。8.成人及15歲（含15歲）以上青少年艾滋病期的診斷標準是什么？符合下列一項者即可診斷為艾滋病期：一是艾滋病病毒抗體陽性，CD4+T淋巴細胞計數＜200/μl；二是艾滋病病毒抗體陽性，伴有至少一項艾滋病指征性疾病，如肺孢子菌肺炎、食管念珠菌病等。9.15歲以下兒童艾滋病期的診斷標準是什么？符合下列一項者即可診斷為艾滋病期：一是艾滋病病毒抗體陽性，CD4+T淋巴細胞百分比＜15%（＜12月齡），或＜12%（1235月齡），或＜10%（3659月齡），或CD4+T淋巴細胞計數＜200/μl（≥5歲）；二是艾滋病病毒抗體陽性，伴有至少一項艾滋病指征性疾病。10.酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測HIV抗體的原理是什么？將HIV抗原包被在微孔板上，加入待檢血清，若血清中含有HIV抗體，則會與包被抗原結合，再加入酶標記的抗人免疫球蛋白抗體，最后加入底物顯色，根據吸光度值判斷結果。11.化學發光或免疫熒光試驗檢測HIV抗體有什么優點？與ELISA相比，具有更高的靈敏度和特異性，檢測速度更快，自動化程度高，適用于大規模篩查。12.快速檢測HIV抗體的方法有哪些？包括膠體金法、乳膠凝集法等，具有操作簡便、出結果快（一般1530分鐘）等優點，適用于現場檢測、急診檢測等。13.免疫印跡法（WB）為什么是HIV抗體確證試驗的“金標準”？因為它能夠檢測HIV的不同抗原成分，如p24、gp41、gp120/gp160等，通過檢測這些抗原成分的條帶情況來準確判斷是否感染HIV，具有較高的特異性和準確性。14.逆轉錄聚合酶鏈反應（RTPCR）檢測HIV核酸的原理是什么？先將HIV的RNA逆轉錄為cDNA，然后通過PCR技術進行擴增，最后通過檢測擴增產物來判斷HIV核酸的存在。15.核酸序列依賴性擴增（NASBA）檢測HIV核酸有什么特點？是一種等溫核酸擴增技術，不需要高溫變性步驟，具有反應速度快、特異性強等優點，主要用于HIVRNA的定量檢測。16.轉錄介導的擴增（TMA）檢測HIV核酸的優勢是什么？具有靈敏度高、檢測時間短等優點，可用于HIV感染的早期診斷和病毒載量監測。17.流式細胞術檢測CD4+T淋巴細胞計數的原理是什么？利用熒光標記的抗CD4和抗CD3單克隆抗體與外周血中的淋巴細胞結合，然后通過流式細胞儀檢測熒光信號，根據細胞表面抗原的表達情況對淋巴細胞進行分類和計數。18.艾滋病診斷中病史采集的流行病學史包括哪些內容？包括是否有不安全性行為史（同性、異性或雙性性接觸）、靜脈注射毒品史、輸入未經抗HIV檢測的血液或血液制品史、HIV抗體陽性者所生子女等。19.現病史對于艾滋病診斷有什么意義？了解患者是否有發熱、盜汗、腹瀉、體重減輕等全身癥狀，以及呼吸道、消化道、皮膚等部位的癥狀，有助于判斷患者是否處于艾滋病期以及是否合并有機會性感染和腫瘤。20.既往史在艾滋病診斷中有什么作用？詢問患者既往是否有其他性傳播疾病、肝炎、結核等傳染病史，以及輸血、手術、外傷等史，有助于評估患者的免疫狀態和感染風險。21.艾滋病患者體格檢查時皮膚黏膜檢查主要關注哪些方面？檢查皮膚是否有皮疹、潰瘍、結節等病變，口腔黏膜是否有白斑、潰瘍等病變，生殖器部位是否有皰疹、潰瘍、贅生物等病變。22.為什么要檢查艾滋病患者的淺表淋巴結？艾滋病患者可能會出現淺表淋巴結腫大，檢查淺表淋巴結的大小、質地、活動度、有無壓痛等情況，有助于輔助診斷和判斷病情。23.胸部檢查對于艾滋病患者有什么重要性？艾滋病患者容易發生肺部機會性感染，如肺孢子菌肺炎等，胸部檢查可以了解胸廓、呼吸運動以及肺部是否有啰音、哮鳴音等異常呼吸音，有助于發現肺部病變。24.腹部檢查在艾滋病診斷中的意義是什么？可以檢查腹部是否有壓痛、反跳痛、肌緊張等體征，肝臟、脾臟是否腫大等，有助于發現腹部臟器的病變，如肝脾腫大可能與艾滋病相關的感染或腫瘤有關。25.什么是艾滋病窗口期？從HIV感染人體到感染者血清中的HIV抗體、抗原或核酸等感染標志物能被檢測出之前的時期稱為窗口期。26.窗口期內HIV抗體檢測結果如何？窗口期內HIV抗體檢測可能為陰性，但患者已經具有傳染性。27.窗口期一般有多長時間？HIV抗體窗口期為212周，核酸檢測窗口期為14周。28.對于有高危行為且HIV抗體檢測陰性的人群應該怎么做？需要在窗口期后進行復查，以排除HIV感染的可能。29.為什么嬰幼兒艾滋病診斷不能單純依靠HIV抗體檢測？因為嬰幼兒體內存在從母體獲得的被動抗體，HIV抗體檢測結果不能準確反映嬰幼兒是否感染HIV。30.18月齡以下嬰幼兒艾滋病的主要診斷方法是什么？主要采用HIV核酸檢測進行早期診斷，如果兩次不同時間的HIV核酸檢測結果均為陽性，則可診斷為HIV感染；如果兩次檢測結果均為陰性，則可排除HIV感染。31.18月齡及以上兒童艾滋病的診斷方法與成人有何不同？18月齡及以上兒童HIV抗體檢測方法與成人相同。32.艾滋病患者合并肝炎會對診斷和治療產生什么影響？合并肝炎可能會影響艾滋病的診斷，因為肝炎的癥狀可能與艾滋病的癥狀相似，干擾診斷。在治療方面，需要考慮抗病毒藥物與治療肝炎藥物之間的相互作用，制定個體化的治療方案。33.艾滋病患者合并結核時診斷需要注意什么？需要綜合考慮患者的臨床表現、實驗室檢查結果等，排除其他疾病的干擾。由于結核和艾滋病相互影響，診斷時要注意鑒別是單純結核還是艾滋病合并結核，同時要關注患者的免疫狀態。34.當HIV抗體確證試驗結果為不確定時，隨訪檢測期間患者應注意什么？患者應避免高危行為，同時可根據情況進行HIV核酸檢測以明確診斷。35.如果隨訪檢測結果仍為不確定怎么辦？如果隨訪檢測結果仍為不確定，或核酸檢測結果為陰性，但患者仍有高危行為或臨床表現高度懷疑HIV感染，可繼續隨訪觀察，必要時請專家會診。36.艾滋病診斷實驗室質量控制中人員培訓的重要性是什么？實驗室工作人員掌握專業的檢測技術和質量控制知識，熟悉檢測操作規程和生物安全防護要求，才能保證檢測結果的準確性和可靠性，避免因操作不當導致誤診或漏診。37.儀器設備管理在艾滋病診斷實驗室質量控制中有什么作用？定期對檢測儀器設備進行校準、維護和保養，可確保儀器設備的正常運行，保證檢測結果的準確性和穩定性，減少因儀器故障導致的檢測誤差。38.試劑管理在艾滋病診斷實驗室質量控制中應注意什么？選用經國家食品藥品監督管理總局批準的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書的要求保存和使用試劑，定期對試劑進行質量評估，以保證試劑的有效性和可靠性。39.室內質量控制在艾滋病診斷實驗室中有什么意義？在每次檢測時使用內部質量控制品進行檢測，可監控檢測過程的準確性和穩定性。當質量控制結果超出控制范圍時，能及時查找原因并采取糾正措施，保證檢測結果的可靠性。40.室間質量評價對艾滋病診斷實驗室有什么作用？參加國家或省級臨床檢驗中心組織的室間質量評價活動，可評估實驗室的檢測能力和水平。對于室間質量評價結果不合格的項目，及時分析原因并進行整改，有助于提高實驗室的檢測質量。41.臨床診斷中病史采集和體格檢查規范的重要性是什么？規范的病史采集和體格檢查能確保獲取的信息準確、全面，為艾滋病的診斷提供可靠的依據，避免因信息不準確或不完整導致誤診或漏診。42.臨床醫生為什么要嚴格遵循艾滋病診斷標準進行診斷？嚴格遵循診斷標準可以保證診斷的準確性和一致性，避免主觀隨意性，確保患者得到正確的診斷和治療，同時也有利于疾病的防控和管理。43.多學科協作在艾滋病診斷和治療中有什么優勢？艾滋病的臨床表現復雜多樣，涉及多個系統和器官。多學科協作機制，包括感染科醫生、皮膚科醫生、口腔科醫生、眼科醫生等共同參與，能從不同專業角度對患者進行全面評估和診斷，制定更合理、更有效的治療方案，提高治療效果。44.酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測HIV抗體有哪些優缺點？優點是靈敏度高、操作相對簡便、可批量檢測；缺點是存在一定的假陽性和假陰性率。45.快速檢測HIV抗體的方法靈敏度如何？快速檢測方法的靈敏度相對較低，但具有操作簡便、出結果快等優點，適用于特定場景的初步篩查。46.HIV核酸檢測的準確性如何？HIV核酸檢測具有較高的準確性，特別是在早期診斷和病毒載量監測方面具有重要價值，但也可能受到樣本采集、保存和檢測方法等因素的影響。47.CD4+T淋巴細胞計數檢測對于艾滋病診斷有什么重要性？CD4+T淋巴細胞計數是評估HIV感染者免疫功能的重要指標，對于判斷患者是否進入艾滋病期以及制定治療方案具有重要意義。48.艾滋病患者的癥狀一定很典型嗎？不一定，艾滋病患者的癥狀在不同階段表現各異，且個體差異較大。在無癥狀期可能無明顯癥狀，在艾滋病期癥狀也可能因合并的機會性感染和腫瘤不同而表現多樣，并非都具有典型特征。49.艾滋病診斷后患者的心理狀態對治療有什么影響？患者可能會出現焦慮、抑郁、恐懼等不良心理狀態，這些心理狀態可能會影響患者的治療依從性和生活質量，進而影響治療效果。因此，在治療過程中需要關注患者的心理狀態，給予心理支持和疏導。50.艾滋病診斷后患者的社會支持系統重要嗎？非常重要。良好的社會支持系統，包括家人、朋友的關心和理解，以及社會的接納和支持，有助于患者樹立治療信心，提高治療依從性，改善生活質量，促進疾病的康復。51.艾滋病診斷后患者的生活方式需要注意什么？