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文檔簡(jiǎn)介
1.思考題
第一章細(xì)胞概述
1.胡克和列文虎克發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的動(dòng)機(jī)是不同的,你對(duì)?此有何感想?
答:胡克當(dāng)時(shí)的目的只是想弄清楚為什么軟木塞吸水后能夠膨脹,并且能夠堵塞住暖水瓶中的氣體溢出而
保溫。列文虎克是為了保證售出的布匹質(zhì)量,用顯微鏡檢查布匹是否發(fā)霉。正是由于他們的觀察力和對(duì)自
然現(xiàn)象的好奇心,以及對(duì)事業(yè)的責(zé)任感才導(dǎo)致細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)。
2.證明最早的遺傳物質(zhì)是RNA而不是DNA的證據(jù)是什么?
答:核酶的發(fā)現(xiàn)。所謂核醇就是具有催化活性的RNA分廣。
3.舉例說(shuō)明細(xì)胞的形態(tài)與功能相適應(yīng)。
答:細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能的相關(guān)性叮一致性是很多細(xì)胞的共同特點(diǎn)。如紅細(xì)胞呈扁圓形的結(jié)構(gòu),有利于
口和C0?的交換;高等動(dòng)物的黑細(xì)胞和精細(xì)胞不僅在形態(tài)、而且在大小方面都是截然不同的,這種不同與它
們各自的功能相適應(yīng)。卵細(xì)胞之所以既大又圓,是因?yàn)槁鸭?xì)胞受精之后,要為受精卵提供早期發(fā)育所需的
信息和相應(yīng)的物質(zhì),這樣,卵細(xì)胞除了帶有?套完整的基因組外,還有很多預(yù)先合成的mR、A和蛋白質(zhì),所
以體積就大;而圓形的表面是便于與精細(xì)胞結(jié)合。精細(xì)胞的形態(tài)是既細(xì)又長(zhǎng),這也是與它的功能相適應(yīng)的。
精細(xì)胞對(duì)后代的南仟僅是提供一套基因組,所以它顯得很輕裝:至于精細(xì)胞的細(xì)尾巴則是為了運(yùn)動(dòng)3靶,
尖尖的頭部,是為了更容易將它攜帶的遺傳物質(zhì)注入卵細(xì)胞。
4.真核細(xì)胞的體積一般是原核細(xì)胞的1000倍,真核細(xì)胞如何解決細(xì)胞內(nèi)重要分子的濃度問(wèn)題?
答:出現(xiàn)了特化的內(nèi)膜系統(tǒng),這樣,體積增大了,表面積也大大增加,并使細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)區(qū)室化,一些重
要分子的濃度并沒(méi)有被稀釋。
5.相鄰水分子間的關(guān)系是靠氫鍵維系的,這種氫鍵賦予水分子哪些獨(dú)特的性質(zhì),對(duì)于生活細(xì)胞有什么重要
性?
答:首先,氫鍵能夠吸收較多的熱能,將氫鍵打斷需要較高的溫度,所以氫健可維持細(xì)胞溫度的相對(duì)穩(wěn)定。
第二是相鄰水分子間形成的氫鍵使水分子具有一定的粘性,這樣使水具有較高的表面密度。第三,水分子
間的氫鍵可以提高水的沸點(diǎn),這樣使它不易從細(xì)胞中揮發(fā)掉。
8.蛋白質(zhì)的糖基化對(duì)蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)有哪些影響?
答:①溶解度。糖基化往往使蛋白質(zhì)在水中的溶解度增大。但是,若糖鏈增長(zhǎng)到一定程度,由于相對(duì)分子
質(zhì)量增大和形成高級(jí)結(jié)構(gòu),亦會(huì)出現(xiàn)憎水性增加的現(xiàn)象。②電荷,氨基糖解離后,應(yīng)帶正電荷。但是,天
然存在的氨基糖的氨基都被N-乙酰基取代,實(shí)際上相當(dāng)于中性糖。許多糖鏈上有唾液酸,或糖醛酸,解離
后帶負(fù)電荷。所以,糖基化可能使蛋白質(zhì)增加許多負(fù)電荷。
9.組成蛋白質(zhì)的基本構(gòu)件只是20種氨基酸。為什么蛋白質(zhì)卻具有如此廣泛的功能?
答:根本原因是蛋白質(zhì)具有幾乎無(wú)限的形態(tài)結(jié)構(gòu),因此蛋白質(zhì)僅僅是一類(lèi)分子的總稱(chēng)。換句話說(shuō),蛋白質(zhì)
之所以有如此廣泛的作用,是因?yàn)榈鞍踪|(zhì)具有各種不同的結(jié)構(gòu),特別是在蛋白質(zhì)高級(jí)結(jié)構(gòu)中具有不同的結(jié)
構(gòu)域,而這種不問(wèn)的空間構(gòu)型使得蛋白質(zhì)能夠有.選擇地同其它分子進(jìn)行相互作用,這就是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)決定
功能的特異性。正是由于蛋白質(zhì)具有如此廣泛不同特異性才維持了生命的高度有序性和復(fù)雜性。
10.為什么解決生命科學(xué)的問(wèn)題不能僅靠分子生物學(xué)而要靠細(xì)胞生物學(xué)?
答:在生命活動(dòng)中,隨著細(xì)胞周期的進(jìn)行和細(xì)胞代謝狀態(tài)的不同,各種反應(yīng)復(fù)合物,包括細(xì)胞曙乃至整個(gè)
細(xì)胞要不斷進(jìn)行組裝和去組裝。因此,細(xì)胞生命活動(dòng)的基礎(chǔ)是細(xì)胞組裝活動(dòng),而這些組裝活動(dòng)又不能簡(jiǎn)單
地歸結(jié)于分廣水平的活動(dòng),這就是為什么不能僅靠分f生物學(xué)而要靠細(xì)胞生物學(xué)解決生命科學(xué)問(wèn)題的名彖由。
11.請(qǐng)簡(jiǎn)述病毒的生活史。
答:病毒的生活史分為5個(gè)基本過(guò)程:吸附(absorption):病毒對(duì)細(xì)胞的感染起始于病毒蛋白外殼同宿主細(xì)
胞表面特殊的受體結(jié)合,受體分子必宿主細(xì)胞膜或細(xì)胞壁的正常成分。因此,病毒的感染具有特異性。
侵入(penetration):病毒吸附到宿主細(xì)胞表面之后,將它的核酸注入到宿主細(xì)胞內(nèi)。病毒感染細(xì)菌時(shí),用
酶將細(xì)菌的細(xì)胞壁穿孔后注入病毒核酸:對(duì)動(dòng)物細(xì)胞的感染,則是通過(guò)胞吞作用,病毒完全被吞入。
復(fù)制(replication):病毒核酸進(jìn)入細(xì)胞后有兩種去向,一是病毒的遺傳物質(zhì)整合到宿主的基因組中,形成
溶原性病毒;第:種情況是病毒DNA(或RNA)利用宿主的酶系進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)。
成熟(maturation):一旦病毒的基因進(jìn)行表達(dá)就可合成病毒裝配所需的外殼蛋白,并將病毒的遺傳物質(zhì)包
裹起來(lái),形成成熟的病毒顆粒。
釋放(release):病毒顆粒裝配之后,它們就可從被感染的細(xì)胞中杼放出來(lái)進(jìn)入細(xì)胞外,并感染新的細(xì)胞。
有些病毒釋放時(shí)要將被感染的細(xì)胞裂解,有些則是通過(guò)分泌的方式進(jìn)入到細(xì)胞外。
12.我國(guó)細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展戰(zhàn)略的主要內(nèi)容是什么?
答:主要包括以下13個(gè)方面:
1)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與機(jī)能
研究?jī)?nèi)容包括細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、過(guò)氧化物膈體、線粒體等細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的研究,側(cè)
重于信號(hào)的跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)、蛋白質(zhì)通道和穿膜機(jī)制、大分子的修飾、分選、定向運(yùn)輸、內(nèi)吞、外吐的機(jī)理、核
孔復(fù)合物如何調(diào)節(jié)核-質(zhì)之間的運(yùn)輸?shù)取?/p>
2)染色體的結(jié)構(gòu)及其基因表達(dá)調(diào)控
研究?jī)?nèi)容包括人類(lèi)及水稻基因組計(jì)劃,這對(duì)優(yōu)良品種的選育、基因工程、人類(lèi)遺傳病的基因診斷及治療有重
要意義。染色體蛋白質(zhì)與染色體骨架、染色體結(jié)構(gòu)與基因表達(dá)調(diào)控之間的關(guān)系。染色體的構(gòu)建及其行級(jí)結(jié)
構(gòu)。染色體步移發(fā)制、染色體的特化區(qū)域(如動(dòng)粒、端粒、著絲粒、核仁組織者區(qū)等)的結(jié)構(gòu)q功能。
3)細(xì)胞骨架及核骨架系統(tǒng)
細(xì)胞骨架的研究?jī)?nèi)容包括:微管、微管結(jié)合蛋白及馬達(dá)分子的機(jī)能:微絲、微絲結(jié)合蛋白及其與信號(hào)傳遞、
物質(zhì)傳送、蛋白質(zhì)合成的關(guān)系:中間纖維的結(jié)構(gòu)、功能及其與細(xì)胞分化及進(jìn)化的關(guān)系:細(xì)胞核骨架側(cè)重研
究核基質(zhì)與核纖層、MAR與核骨架結(jié)合蛋白的機(jī)能:染色體骨架與染色體包裝和功能的關(guān)系等。
4)胞外基質(zhì)
研究作為細(xì)胞外基質(zhì)支架的膠原與彈性蛋白及其與某些膠原性疾病和衰老間的關(guān)系。非膠原糖蛋白在細(xì)胞
增殖、分化、癌轉(zhuǎn)移等方面的咋用。氨基聚糖和蛋白聚糖是膜的整合成份與輔助受體,它們與心血管病及老
年病的關(guān)系。細(xì)胞外基質(zhì)受體的活化與信號(hào)識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的關(guān)系等.
5)細(xì)胞周期調(diào)控
這是近年來(lái)發(fā)展迅速的領(lǐng)域之,包括對(duì)己克隆的周期蛋白依賴(lài)性蛋白激酶及周期蛋白的功能研究、克隆這
兩個(gè)基因家族新成員并確定其功能、研究其調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),包括對(duì)癌基因、抑癌基因及CK[的研究與細(xì)胞衰老、
凋亡和癌變的關(guān)系,以及泛素、PKC、PKA、C『、MAPK與細(xì)胞周期調(diào)控的關(guān)系等。
6)細(xì)胞分化、衰老、死亡及相關(guān)基因的研究
研究的重點(diǎn)是分離細(xì)胞分化的關(guān)鍵基因;研究分化與癌變的關(guān)系;p53與細(xì)胞增殖、分化、癌變、逆轉(zhuǎn)的
關(guān)系;同源異型基因的研究:分化中基因群的相互作用;細(xì)胞衰老與原癌基因、抑癌基因及衰老相關(guān)基因;
端粒與衰老的關(guān)系等。
7)細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
細(xì)胞與細(xì)胞之間的信息傳遞機(jī)制是相當(dāng)復(fù)雜的,細(xì)胞因子、激素與受體以及細(xì)胞內(nèi)第二信使共同組成傳遞
信息的網(wǎng)絡(luò),并依此對(duì)細(xì)胞周同環(huán)境發(fā)生應(yīng)答。這實(shí)際上是?種細(xì)胞調(diào)節(jié),如果這種調(diào)節(jié)失常,就會(huì)造成疾
病。研究重點(diǎn)是信號(hào)分子的結(jié)構(gòu)與機(jī)能、信號(hào)分子與受體相互作用機(jī)理、受體與原初反應(yīng)。
8)細(xì)胞社會(huì)學(xué)(cellsociolcgy)
細(xì)胞社會(huì)學(xué)是從系統(tǒng)論的觀點(diǎn)出發(fā),研究細(xì)胞整體和細(xì)胞群體中細(xì)胞間的社會(huì)行為(包括細(xì)胞間識(shí)別、通訊、
集合和相互作用等),以及整體和細(xì)胞群對(duì)細(xì)胞的牛.長(zhǎng)、分化和死亡等活動(dòng)的調(diào)節(jié)控制。胚胎發(fā)育中的許多
問(wèn)題(如圖式形成、胚層分化、形態(tài)發(fā)生運(yùn)動(dòng)、組織分化、器官形成和再生等)都需要從細(xì)胞群的特性和
社會(huì)行為方面進(jìn)行研究。細(xì)胞社會(huì)學(xué)就是在體外研究細(xì)胞的社會(huì)行為,用人工的細(xì)胞組合研究不同發(fā)育時(shí)
期的相同細(xì)胞或不同細(xì)胞的行為;研窕細(xì)胞之間的識(shí)別、粘連、通訊以及由此產(chǎn)生的相互作用、作用本質(zhì)、
以及對(duì)?形態(tài)發(fā)生的膨響等。
9)細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系的組裝及細(xì)胞工程
主要研究生物大分子如何逐級(jí)組裝并最終形成賴(lài)以進(jìn)行生命活動(dòng)的細(xì)胞結(jié)構(gòu)體系。細(xì)胞是一個(gè)高度有組織
有秩序而又瞬息萬(wàn)變的體系,應(yīng)用分析與綜合的思維方法,人為拆卸、組裝不同層次的細(xì)胞結(jié)構(gòu),研究其機(jī)
能,將為細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展起到巨大的推動(dòng)作用。
10)生殖有關(guān)的細(xì)胞生物學(xué)問(wèn)題
生班是生物世代交替的中心環(huán)節(jié)。生殖生物學(xué)對(duì)促進(jìn)生物的繁殖、野生瀕危動(dòng)、植物的挽救和控制人口膨
脹及優(yōu)生優(yōu)育方面均有重要意義.優(yōu)先發(fā)展領(lǐng)域側(cè)重于精子發(fā)生過(guò)程中與增殖、分化、變態(tài)有關(guān)的基因表
達(dá)、基因克隆及其功能的研究。精子頂體反應(yīng)的分子機(jī)理、精卵一級(jí)識(shí)別和二級(jí)識(shí)別的體外受精機(jī)理。胚
胎植入啟動(dòng)分r機(jī)理及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。細(xì)胞粘附、遷移和侵入與著床進(jìn)程中粘附因廣、細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)和金
屬蛋白旃之間的相互作用等。
11)腫瘤的細(xì)胞生物學(xué)
癌是一種分子病,是通過(guò)體外物理、化學(xué)、生物因素的影響及機(jī)體本身遺傳基礎(chǔ),原癌基因的激活、過(guò)表達(dá),
抑癌基因的缺失、突變及調(diào)控異常等多種因素所誘發(fā)的。腫瘤細(xì)胞生物學(xué)的研究應(yīng)集中于以下領(lǐng)域:腫瘤細(xì)
胞結(jié)構(gòu)、顯微及亞顯微結(jié)構(gòu)水平及分子水平的癌的早期診斷。細(xì)胞周期因子的調(diào)節(jié)失控、細(xì)胞凋亡的失控、
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的障礙、腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移的機(jī)理、腫瘤細(xì)胞標(biāo)志的確定、基因治療、腫痛病因及癌變
機(jī)理的研究。
12)進(jìn)化細(xì)胞生物學(xué)
進(jìn)化細(xì)胞牛.物學(xué)是介于進(jìn)化生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、分子生物學(xué)、原生生物學(xué)與物種生物學(xué)之間的一門(mén)新興
交叉學(xué)科。在弄清真核細(xì)胞的起源與進(jìn)化的基礎(chǔ)上從進(jìn)化的角度考察細(xì)胞生物學(xué)中一切重要的問(wèn)題,側(cè)重于
從進(jìn)化細(xì)胞生物學(xué)的角度進(jìn)一步探討結(jié)構(gòu)與生命活動(dòng)的進(jìn)化關(guān)系,還包括新的有代表性生物的發(fā)現(xiàn)與冊(cè)究,
有關(guān)基因序列測(cè)定和比較研究等。
13)植物細(xì)胞工程(cellengineering)
植物細(xì)胞工程是植物生物技術(shù)的重要組成部分。在資源缺乏的新世紀(jì)中將發(fā)揮極為重要的作用,如對(duì)作物遺
傳性的改良、植物細(xì)胞體外培養(yǎng)生產(chǎn)貴重的代謝產(chǎn)物等。同時(shí)應(yīng)對(duì)一些重要的基礎(chǔ)問(wèn)題應(yīng)進(jìn)行深入的研究,
如分化過(guò)程中特異基因時(shí)空協(xié)同表達(dá)調(diào)拴。克隆有關(guān)的更要基因并研究其表達(dá)及植物細(xì)胞工程關(guān)鍵高新技
術(shù)問(wèn)題。
第二章細(xì)胞生物學(xué)研究方法
1.舉例(3?5個(gè))說(shuō)明研究方法的突破對(duì)細(xì)胞生物學(xué)發(fā)展的推動(dòng)作用。
答:①細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),…
②離心分離技術(shù),…
③流式細(xì)胞分離技術(shù),…
④基因敲除技術(shù),…
⑤干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),…
(6).........
2.為什么說(shuō)細(xì)胞培養(yǎng)是細(xì)胞與物學(xué)研究的最基本技術(shù)之一?
3.用什么方法追蹤活細(xì)胞中曾白質(zhì)合成與分泌過(guò)程?包括哪幾個(gè)步驟?
答:追蹤活細(xì)胞中某種蛋白質(zhì)合成與分泌的過(guò)程一般采用同位素示蹤技術(shù)。其基本步驟是:①將放射性同
位素標(biāo)記的氨基酸(七一亮氨聯(lián))加到細(xì)胞培養(yǎng)基中,在很短時(shí)間內(nèi)使這些與未標(biāo)記的相應(yīng)氨基酸化學(xué)性質(zhì)
相同的標(biāo)記分子進(jìn)入細(xì)胞(稱(chēng)為脈沖標(biāo)記);②除去培養(yǎng)液并洗滌細(xì)胞,再換以未標(biāo)記獲基酸的培養(yǎng)基培養(yǎng)
細(xì)胞,已進(jìn)入細(xì)胞的標(biāo)記氨基酸將被蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)作為原料加以利用,摻入到某種新合成的蛋白質(zhì)中:
③每隔一定時(shí)間取出一定數(shù)量的細(xì)胞,利用電鏡放射自顯影技術(shù)探查被標(biāo)記的特定蛋白質(zhì)在不同時(shí)間所處
的位置。通過(guò)比較不同時(shí)間細(xì)胞取樣的電鏡照片就可以r解細(xì)胞中蛋白質(zhì)合成及分泌的動(dòng)態(tài)過(guò)程。
4.圖2-3的解釋。
答:兩個(gè)兒童共同振動(dòng)一根繩廣產(chǎn)生的波動(dòng)類(lèi)似于光子光子和電r形成的波,以此說(shuō)明物體的大小對(duì)波的
干擾。(a)兩個(gè)兒童振動(dòng)繩子產(chǎn)生的特征波長(zhǎng);(b)向繩子波中扔進(jìn)一個(gè)球或一個(gè)物體,如果扔進(jìn)物體的直徑
與繩子波長(zhǎng)相近,就會(huì)干擾繩子波的移動(dòng);(3)如果扔進(jìn)一個(gè)壘球或其他物體比繩子波長(zhǎng)小得多,對(duì)繩子波
的移動(dòng)只有很小或沒(méi)有干擾;(d)如果將繩子快速振動(dòng),波長(zhǎng)就會(huì)大大縮短;(e)此時(shí)扔進(jìn)壘球就會(huì)干擾繩子
波的移動(dòng)。
5.為什么電子顯微鏡需要真空系統(tǒng)(vacuumsystem)?
答:由于電子在空氣中行進(jìn)的速度很慢,所以必須由真空系統(tǒng)保持電鏡的真空度,否則,空氣中的分子會(huì)
阻撓電r束的發(fā)射而不能成像。用兩種類(lèi)型的真空泵串連起來(lái)獲得電廣顯微鏡鏡筒中的真空,當(dāng)電/顯微
鏡啟動(dòng)時(shí),第一級(jí)旋轉(zhuǎn)式真空泵(rotarypump)獲得低真空,作為二級(jí)泵的預(yù)真空:第二級(jí)采用油擴(kuò)散泵(oil
diffusionpump)獲得高真空。
6.什么是相位和相差?
答:所謂相位是光波在前進(jìn)時(shí),電振動(dòng)呈現(xiàn)的交替的波形變化。由于光是電磁波,其電振動(dòng)與磁振動(dòng)垂直,
又與波的傳播方向垂直,導(dǎo)致了傳播時(shí)波形的變化。同一種光波通過(guò)折射率不同的物質(zhì)時(shí),光的相位就會(huì)
發(fā)生變化,波長(zhǎng)和振幅也會(huì)發(fā)生變化。所謂相差是指兩束光波在某一位置時(shí),由于波峰和波谷不一致,即
存在著相位上的差異,叫和差。同一種光通過(guò)細(xì)胞時(shí),由于細(xì)胞不同部分的折射率不同,通過(guò)細(xì)胞的光線
比未通過(guò)細(xì)胞的光線相位落后,而通過(guò)細(xì)胞核的光線比通過(guò)細(xì)胞其他部位的相位落后,這就是相位差。
7.與光鏡相比,用于電子顯微鏡的組織固定有什么特殊的要求?
答:比光鏡的要求更高。首先是樣品要薄,這是因?yàn)殡娮拥拇┩改芰κ钟邢蓿词故?00?200kV高壓,
電子穿透厚度僅為1umo通常把樣品制成50?100nm厚的薄片(一個(gè)細(xì)胞切成100?200片),稱(chēng)超薄切片
(ultrathinsection)?其次是要求很好地保持樣品的精細(xì)結(jié)構(gòu),特別是在組織固定時(shí)要求既要終止細(xì)胞生
命,又不破壞細(xì)胞的結(jié)構(gòu)。第三是要求樣品要具有一定的反差。電子顯微鏡的樣品切片最后被放置在載網(wǎng)
上而不是玻片.匕
8.什么是細(xì)胞分選?基本原理是什么?
答:用流式細(xì)胞計(jì)將特定的細(xì)胞分選分選出米的技術(shù),分選前,細(xì)胞要破戴上特殊的標(biāo)記。所用的標(biāo)記
細(xì)胞的探針是能夠同待分選細(xì)胞表面特征性蛋白(抗原)結(jié)合的抗體,而這種抗體又能夠同某種熒光染料結(jié)
合。當(dāng)結(jié)合有熒光染料的探針叮細(xì)胞群溫育時(shí),探針就會(huì)同具有特異表面抗原的細(xì)胞緊緊結(jié)合,由于抗體
的結(jié)合,被結(jié)合的細(xì)胞帶上了熒光標(biāo)記。細(xì)胞被標(biāo)記之后,除去游離的抗體,并將細(xì)胞進(jìn)行稀釋。當(dāng)稀釋
的細(xì)胞進(jìn)入超聲波振蕩器時(shí),極稀的細(xì)胞懸浮液形成很小的液滴,一個(gè)液滴中只含有一個(gè)細(xì)胞。液滴一旦
形成并通過(guò)激光束時(shí),激光束激發(fā)結(jié)合在細(xì)胞表面抗體分子成為?種標(biāo)簽。當(dāng)液滴逐個(gè)通過(guò)激光束時(shí),受
到兩種檢測(cè)器的檢測(cè):如果液湎中含有細(xì)胞就會(huì)激活干涉檢測(cè)器(interferencedetector),只有帶有熒光
標(biāo)記細(xì)胞的液滴才會(huì)激活熒光檢測(cè)器(fluorescencedetector)。當(dāng)帶有熒光標(biāo)記的液滴通過(guò)激光束時(shí),將
兩種檢測(cè)器同時(shí)激活,引起液滴充電信號(hào)使鞘液帶上負(fù)電荷。山F液滴帶有負(fù)電荷,移動(dòng)時(shí)就會(huì)向正極移
動(dòng),進(jìn)入到熒光標(biāo)記細(xì)胞收集器中。如果是含有非熒光標(biāo)記細(xì)胞的液滴進(jìn)入激光束,只會(huì)被干涉檢測(cè)器檢
測(cè)到,結(jié)果使充電信號(hào)將液滴的鞘液帶上正電荷,從而在移動(dòng)時(shí)偏向負(fù)極,被非熒光標(biāo)記細(xì)胞收集器所收
集。如果是不含有細(xì)胞的液滴進(jìn)入激光束,則不會(huì)被任何檢測(cè)器所檢測(cè),因而不會(huì)產(chǎn)生充電信號(hào),液滴的
鞘液不會(huì)帶上任何電荷,所以在移動(dòng)時(shí)不受任何影響直接進(jìn)入非檢測(cè)的收集器。
9.什么是細(xì)胞培養(yǎng),應(yīng)注意哪些問(wèn)題?
答:在體外模擬體內(nèi)的生理環(huán)境,培養(yǎng)從機(jī)體中取出的細(xì)胞,并使之生存和生長(zhǎng)的技術(shù)為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中最有價(jià)值的技術(shù),通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)可以獲得大量的細(xì)胞,也可通過(guò)細(xì)
胞培養(yǎng)研究細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞的信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝等。細(xì)胞培養(yǎng)的突出特點(diǎn)是在離體條件下觀察
和研究細(xì)胞生命活動(dòng)的規(guī)律。培養(yǎng)中的細(xì)胞不受體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境的影響,人為改變培養(yǎng)條件(如物理、化學(xué)、
生物等外界因素的變化)即可進(jìn)一步觀察細(xì)胞在單因素或多因素的影響下的生理功能變化。然而,細(xì)胞在體
外環(huán)境的局限性,又使細(xì)胞的形態(tài)與功能不能與體內(nèi)的同類(lèi)細(xì)胞完全等同。體外培養(yǎng)細(xì)胞必需注意三個(gè)環(huán)
節(jié):物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)、生存環(huán)境和廢物的排除.體外培養(yǎng)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)是由培養(yǎng)基提供的。培養(yǎng)基通常含有細(xì)
胞生長(zhǎng)所需的氨基酸、維生素和微量元素。一般培養(yǎng)細(xì)胞所用的培養(yǎng)基是合成培養(yǎng)基,它含有細(xì)胞生長(zhǎng)必
需的營(yíng)養(yǎng)成分,但是在使用合成培養(yǎng)基時(shí)需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清為主。
這是因?yàn)檠逯泻卸喾N促細(xì)胞生長(zhǎng)因子和一些生物活性物質(zhì)。由于血清中含有一些不明成分,對(duì)于特殊
目的細(xì)胞培養(yǎng)是不利的。為此,研究人員正在探索無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞的條件,并已經(jīng)取得一些進(jìn)展。由于機(jī)
體內(nèi)的細(xì)胞生長(zhǎng)通常需要不同的細(xì)胞因子進(jìn)行調(diào)節(jié),所以在無(wú)血清培養(yǎng)時(shí)仍然需要添加必要的因子,包括:
促細(xì)胞生長(zhǎng)因子(如EGF)、促貼附物(加層粘連蛋白)和其它活性物質(zhì)(如轉(zhuǎn)鐵蛋白).無(wú)血清培養(yǎng)排除了有
血清培養(yǎng)時(shí)血清中不明因素的干擾,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加可靠。體外細(xì)胞培養(yǎng)必需模擬體內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境。
環(huán)境因素主要是指:無(wú)菌環(huán)境、合適的溫度、一定的滲透壓和氣體環(huán)境。氣體主要有兩種:02和C02。后
者對(duì)于維持細(xì)胞培養(yǎng)液的酸堿度十分重要。活體內(nèi)生長(zhǎng)的細(xì)胞所產(chǎn)生的代謝物和廢物通過(guò)一定的系統(tǒng)進(jìn)行
利用和排除。體外培養(yǎng)細(xì)胞產(chǎn)牛?的代謝物和廢物積累在培養(yǎng)液中,所以定期更換培養(yǎng)液,對(duì)于體外組胞培
養(yǎng)也是至關(guān)重要的。
10.什么是細(xì)胞系和細(xì)胞株?
答:原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即為細(xì)胞系(cellline),由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組
成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱(chēng)為有限細(xì)胞系(『inilecellline),如可以連續(xù)培養(yǎng),
則稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系(continuouscellline),培養(yǎng)50代以.上并無(wú)限培養(yǎng)下去。從一個(gè)經(jīng)過(guò)生物學(xué)鑒定的
細(xì)胞系由單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群稱(chēng)細(xì)胞株(cellstrain)0所以細(xì)胞
株是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代
數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。
11.動(dòng)物體細(xì)胞克隆布.什么意義?
答:動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)的成功對(duì)生命科學(xué)的發(fā)展具有重要的推動(dòng)作用,不僅證明了動(dòng)物的體細(xì)胞具有全
能性,而且有巨大的應(yīng)用前景。例如結(jié)合轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)藥物。現(xiàn)在很多藥物如胰島素、生長(zhǎng)激素、表皮
生長(zhǎng)因子等都是動(dòng)物細(xì)胞體內(nèi)正常的代謝物,某些病人由于產(chǎn)生這些物質(zhì)的功能發(fā)生缺陷,導(dǎo)致r相應(yīng)疾
病的發(fā)生,目前的治療方法就是給這些病人注射這類(lèi)藥物。由于這類(lèi)藥物本身是來(lái)自動(dòng)物的某些臟器,制
備這種藥物就需要大量的動(dòng)物提供臟器,因此成本就很高,如果通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)把相應(yīng)的基因轉(zhuǎn)入到哺乳
動(dòng)物,讓動(dòng)物的乳汁生產(chǎn)具有療效的蛋白質(zhì)就會(huì)降低成本,再結(jié)合動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù),將這種轉(zhuǎn)基因動(dòng)
物大量無(wú)性繁殖克隆,就可以大大提高產(chǎn)量,大幅度降低成本,同時(shí)也保證了所轉(zhuǎn)基因的穩(wěn)定。該項(xiàng)技術(shù)
也可以生產(chǎn)供動(dòng)物本身和人類(lèi)器官移植的動(dòng)物,解決器官捐贈(zèng)長(zhǎng)期缺乏的問(wèn)題。另外,動(dòng)物體細(xì)胞克隆技
術(shù)在基因結(jié)構(gòu)和功能、基因治療、遺傳病及人類(lèi)衰老等的研究方面都具有巨大的潛力。
12.蔗糖、甘油和氯化鈉都是密度離心分離中的介質(zhì),它們?cè)谛再|(zhì)上和使用上有什么不同?
答:CsCl可自行形成密度梯度,所以不必特別制備密度梯度,只要將待分離的樣品與之混勻即可。在離心
的過(guò)程中,具有不同密度的顆粒隨CsCl密度梯度的形成重新分配;而蔗糖和甘油要人工置備密度梯度。蔗
糖和甘油的最大密度為L(zhǎng)3g/cm3,所以只能用于分離密度在1.3g/cm3以下的細(xì)胞器或細(xì)胞結(jié)構(gòu);而氯化
艷的最大密度可達(dá)1.9g/cm3以上,可用于分離密度大于1.3g/cm3的DNA分子。在原理上,由于具有不同
密度的顆粒隨CsCl密度梯度的形成重新分配,所以又稱(chēng)為浮力密度離心(buoyantdensity
cenirifugalion);而蔗糖和甘油則是在被離心的物質(zhì)在下降的過(guò)程中由于密度的不同而被阻止在不司的
部位,故是重力密度離心。
13.離子交換層析的原理是什么?
答:離子交換層析是根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷的差異進(jìn)行分離純化的一種方法。蛋白質(zhì)的帶電性是由蛋白質(zhì)多
肽中帶電氨基酸決定的。由于蛋白質(zhì)中氨基酸的電性又取決于介質(zhì)中的pH,所以蛋白質(zhì)的帶電性也就依賴(lài)
于介質(zhì)的川。當(dāng)川較低時(shí),負(fù)電基團(tuán)被中和,而正電基團(tuán)就很多;在川較高時(shí),蛋白質(zhì)的電性與低詡
時(shí)相反。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)所處的pH,使蛋白質(zhì)的正負(fù)電荷相等,此時(shí)的pH稱(chēng)為等電點(diǎn)。離子交換層析所用的交
換劑是經(jīng)酯化、氧化等化學(xué)反應(yīng)引入陽(yáng)性或陰性離子基團(tuán)制成的,可與帶相反電荷的蛋白質(zhì)進(jìn)行交換吸附。
帶有陽(yáng)離子基團(tuán)的交換劑可置換吸附帶負(fù)電荷的物質(zhì),稱(chēng)為陰離子?交換劑,如DEAE-纖維素樹(shù)脂;反之稱(chēng)為
陽(yáng)離子交換劑,如CM-纖維素樹(shù)脂。不同的蛋白質(zhì)有不同的等電點(diǎn),在一定的條件卜解離后所帶的電荷種
類(lèi)和電荷量都不同,因而可與不同的離f交換劑以不同的親和力相互交換吸附。當(dāng)緩沖液中的離子基團(tuán)與
結(jié)合在離子交換劑上的蛋白質(zhì)相競(jìng)爭(zhēng)時(shí),親和力小的蛋白質(zhì)分子首先被解吸附而洗脫,而親和力大的蛋白
質(zhì)則后被解吸附和洗脫。因此,可通過(guò)增加緩沖液的離子強(qiáng)度和/或改變酸堿度,便可改變蛋白質(zhì)的吸附狀
況,使不同親和力的蛋白質(zhì)得以分離。
14.何謂乳腺生物反應(yīng)帑,匕的出現(xiàn)有什么意義?
答:乳腺生物反應(yīng)器是根據(jù)細(xì)胞生物學(xué)中蛋白質(zhì)合成與分選的機(jī)理,結(jié)合基因工程技術(shù)、動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)
等,利用動(dòng)物的乳腺分泌某些具有重要價(jià)值的基因產(chǎn)物。乳腺生物反應(yīng)器是一項(xiàng)綜合技術(shù),發(fā)展乳腺生物
反應(yīng)器不僅需要基因工程技術(shù),也需要?jiǎng)游锱咛ゼ夹g(shù),轉(zhuǎn)基因技術(shù),蛋白質(zhì)提純技術(shù)和常規(guī)帝牧技術(shù)。乳
腺生物反應(yīng)器有特殊優(yōu)點(diǎn)。乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)藥品,基本上是一個(gè)畜牧業(yè)過(guò)程。
第三章細(xì)胞質(zhì)膜與跨膜運(yùn)輸
1.請(qǐng)比較質(zhì)膜、內(nèi)膜和生物膜在概念上的異同。
答:細(xì)胞質(zhì)膜(plasmamembrane)是指包圍在細(xì)胞表面的一層極薄的膜,主要由膜脂和膜蛋白所組成。質(zhì)膜
的基本作用是維護(hù)細(xì)胞內(nèi)微環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定,并參,同外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換、能量和信息傳遞。另外,
在細(xì)胞的生存、生長(zhǎng)、分裂、分化中起重要作用。真核生物除了具有細(xì)胞表面膜外,細(xì)胞質(zhì)中還有訪多山
膜分隔成的各種細(xì)胞器,這些細(xì)胞器的膜結(jié)構(gòu)與質(zhì)膜相似,但功能有所不同,這些膜稱(chēng)為內(nèi)膜(internal
membrane),或胞質(zhì)膜(cytoplasmicmembrane)。內(nèi)膜包括細(xì)胞核摸、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜、高爾基體膜等。由于細(xì)菌
沒(méi)有內(nèi)膜,所以細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)膜代行胞質(zhì)膜的作用。生物膜(bionembrane,orbiologicalmembrane)是細(xì)
胞內(nèi)膜和質(zhì)膜的總稱(chēng)。生物膜是細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu),它不僅具有界膜的功能,還參與細(xì)胞的全部生命活動(dòng)。
2.如何理解細(xì)胞膜作為界膜對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)所起的作用?答:界腋的涵義包括兩個(gè)方面:細(xì)胞界膜和內(nèi)膜結(jié)
構(gòu)的界膜,作為界膜的膜結(jié)構(gòu)對(duì)于細(xì)胞生命的進(jìn)化具有重要意義,這種界膜不僅使生命進(jìn)化到細(xì)胞的生命
形式,也保證了細(xì)胞生命的正常進(jìn)行,它使遺傳物質(zhì)和其他參與生命活動(dòng)的生物大分子相對(duì)集中在一個(gè)安
全的微環(huán)境中,有利于細(xì)胞的物質(zhì)和能量代謝。細(xì)胞內(nèi)空間的區(qū)型化,不僅力,大了表面積,還使細(xì)胞的生
命活動(dòng)更加高效和有序。
3.簡(jiǎn)述細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的基本功能及對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的影響。
答:細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的型本功能包括以下幾個(gè)方面:界膜和區(qū)室化(delineationandcompartmentalization)細(xì)
胞膜最重要的作用就是勾劃了細(xì)胞的邊界,并且在細(xì)胞質(zhì)中劃分了許多以膜包被的區(qū)室。調(diào)節(jié)運(yùn)輸
(regulationoftransport)膜為兩側(cè)的分子交換提供了一個(gè)屏障,一方面可以讓某些物質(zhì)"自由通透”,
另一方面又作為某些物質(zhì)出入細(xì)胞的障礙。功能區(qū)室化細(xì)胞膜的另一個(gè)重要的功能就是通過(guò)形成膜結(jié)合細(xì)
胞器,使細(xì)胞內(nèi)的功能區(qū)室化。例如細(xì)胞質(zhì)中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等膜結(jié)合細(xì)胞器的基本功能是參與蛋白
質(zhì)的合成、加工和運(yùn)輸;而溶酶體的功能是起消化作用,與分解相關(guān)的酶主要集中在溶酶體。又如線粒體
的內(nèi)膜主要功能是進(jìn)行氧化磷酸化,與該功能有關(guān)的葡和蛋白第合體集中排列在線粒體內(nèi)膜上。另一個(gè)細(xì)
胞借葉綠體的類(lèi)囊體是光合作用的光反應(yīng)場(chǎng)所,所以在類(lèi)囊體膜中聚集著與光能捕獲、電子傳遞和光合磷
酸化相關(guān)的功能蛋白和酶。信號(hào)的檢測(cè)與傳遞(detectionandtransmissionofsignals)細(xì)胞通常用質(zhì)
膜中的受體蛋白從環(huán)境中接收化學(xué)和電信號(hào)。細(xì)胞質(zhì)膜中具有各種不同的受體,能夠識(shí)別并結(jié)合特異的配
體,產(chǎn)生一種新的信號(hào)激活或抑制細(xì)胞內(nèi)的某些反應(yīng)。如細(xì)胞通過(guò)質(zhì)膜受體接收的信號(hào)決定對(duì)糖原的合成
或分解。膜受體接收的某些信號(hào)則與細(xì)胞分裂有關(guān)。參叮細(xì)胞間的相互作用(inlcrccllularinlcraclion)
在多細(xì)胞的生物中,細(xì)胞通過(guò)質(zhì)膜進(jìn)行多種細(xì)胞間的相互作用,包拈細(xì)胞識(shí)別、細(xì)胞粘著、細(xì)胞連接等。
如動(dòng)物細(xì)胞可通過(guò)間隙連接,植物細(xì)胞則通過(guò)胞間連絲進(jìn)行相鄰細(xì)胞間的通訊,這種通訊包括代謝偶聯(lián)和
電偶聯(lián)。能量轉(zhuǎn)換(energytransduction)細(xì)胞膜的另?個(gè)重要功能是參與細(xì)胞的能量轉(zhuǎn)換。例如葉綠體
利用類(lèi)囊體膜上的結(jié)合蛋白進(jìn)行光能的捕獲和轉(zhuǎn)換,最后將光能轉(zhuǎn)換成化學(xué)能儲(chǔ)存在碳水化合物中。同樣,
膜也能夠?qū)⒒瘜W(xué)能轉(zhuǎn)換成可直接利用的高能化合物ATP,這是線粒體的主要功能。細(xì)胞膜的這些基本功能
也是生命活動(dòng)的基本特征,沒(méi)有膜的這些功能,細(xì)胞不能形成,細(xì)胞的生命活動(dòng)就會(huì)停止。
4.有人說(shuō)紅細(xì)胞是研究膜結(jié)構(gòu)的最好材料,你能說(shuō)說(shuō)理由嗎?
答:首先是紅細(xì)胞數(shù)量大,取材容易(體內(nèi)的血庫(kù)),極少有其它類(lèi)型的細(xì)胞污染;其次成熟的哺乳心物的
紅細(xì)胞中沒(méi)有細(xì)胞核和線粒體等膜相細(xì)胞器,細(xì)胞膜是它的惟一膜結(jié)構(gòu),所以分離后不存在其它膜污染的
問(wèn)題。
5.紅細(xì)胞如何進(jìn)行02和C02的運(yùn)輸作用?
答:紅細(xì)胞對(duì)02和CO2的運(yùn)輸與膜的性質(zhì)有關(guān).氧是一?種小分子,它能夠自由擴(kuò)散通過(guò)紅細(xì)胞膜進(jìn)入紅細(xì)
胞內(nèi),并被血紅蛋白結(jié)合。紅刑胞膜的這種性質(zhì)使得紅細(xì)胞能夠從肺中攝取氧,因?yàn)樵诜蚊?xì)管中02的壓
力高,02就很容易透過(guò)紅細(xì)泡膜進(jìn)入紅細(xì)胞;又由于肺毛細(xì)管中C02的壓力很低,紅細(xì)胞中的C02就會(huì)
釋放出來(lái)。紅細(xì)胞從肺組織中獲得02后通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)進(jìn)入體毛細(xì)管,在體毛細(xì)管中由于02的壓力低、C02
壓力高,02就會(huì)從紅細(xì)胞中釋放出來(lái),而C02則會(huì)進(jìn)入紅細(xì)胞。由于氣體C02難溶于水溶液,進(jìn)入紅細(xì)胞
后就難以溶解到紅細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。這要依賴(lài)于紅細(xì)胞質(zhì)中的碳酸酎酶(carbonicanhydrase),它可珞C02
轉(zhuǎn)變成水溶性的碳酸氫根陰離子(HC03-)。水溶性的碳酸氫根陰離子通過(guò)紅細(xì)胞膜中的帶3蛋白,同C1-離
/進(jìn)行交換排出紅細(xì)胞,所以將帶3蛋白稱(chēng)為陰離「交換蛋白。
6.請(qǐng)簡(jiǎn)述紅細(xì)胞膜骨架的裝配過(guò)程。
答:分為二步;
①首先是血影蛋白與4.1蛋白、肌動(dòng)蛋白的相互作用:血影蛋白的a和8亞基形成二聚體,在紅細(xì)胞膜內(nèi),
血影蛋白多以4聚體形式存在(也有6聚體、8聚體)。血影蛋白4聚體在4.1蛋白的幫助下同肌動(dòng)蛋白真
聚體結(jié)合組成骨架的基本網(wǎng)絡(luò)。一?般認(rèn)為,12?17個(gè)肌動(dòng)蛋白寡聚體及4.9蛋白和原肌球蛋白組成一個(gè)基
本結(jié)構(gòu)蛋白,這種結(jié)構(gòu)蛋白再結(jié)合到血影蛋白和4.1蛋白復(fù)合體上。4.9蛋白和原肌球蛋白可穩(wěn)定肌動(dòng)蛋
白寡聚體。
②4.1蛋白同血型糖蛋白相互作用:4.1蛋白的N端,35000的區(qū)域在生理狀態(tài)卜.帶正電荷,而血型糖蛋白
帶負(fù)電荷,所以4.1蛋白能夠以靜電穩(wěn)定性同血型糖蛋白結(jié)合。
③錨定蛋白與血影蛋白、帶3蛋白的相互作用:錨定蛋白N端90)0()區(qū)可與帶3蛋白結(jié)合,而7200C區(qū)可
與血影蚤白結(jié)合,由于帶3蚤曰是膜整合蛋白、血影蛋白是膜骨架蛋白,所以錨定蛋白起媒介作用將骨架
蛋白與質(zhì)膜相連。
7.有人說(shuō)膜脂的功能僅作為膜的骨架,并作為非脂溶性物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的障礙,你認(rèn)為此說(shuō)有何不妥?
答:膜脂的主要功能是構(gòu)成膜的基本骨架。去除膜脂,則使膜解體。另外膜脂也是膜蛋白的溶劑,?些蛋
白通過(guò)疏水端同膜脂作用,使蛋白鑲嵌在膜上得以執(zhí)行特殊的功能。有研究表明,膜脂為某些膜蛋白(酹)
維持構(gòu)象、表現(xiàn)活性提供環(huán)境,一股情況下,膜脂本身不參與反應(yīng)(細(xì)菌的膜脂參與反應(yīng))。膜上有很多的
的活性依賴(lài)于膜脂的存在。如果去掉脂類(lèi),酶蛋白即失去活性,加上脂類(lèi),又可使活性恢復(fù)。有些膜蛋白
只有在特異的磷脂頭部基團(tuán)存在時(shí)才有功能。
8.糖脂是如何決定血型的?
答:ABO血型是由ABO血型抗原決定的,稱(chēng)為ABO血型決定子(delerminanl),它是一種糖脂,其分糖部
分具有決定抗原特異性的作用。ABO血型決定子是短的、分支寡穗鏈,如A血型的人具有?種醉,這種醐
能夠?qū)-乙酰半乳糖胺添加到糖鏈的末端:B血型的人具有在糖能末端添加半乳糖的防,AB血型的人具有
上述兩種酣:。血型的人則缺少上述兩種隈,在抗原的末端既無(wú)卜乙酰氨基半乳糖,又無(wú)半乳糖。也就是
說(shuō)人的血型是A型、B型、AB型還是0型,是由紅細(xì)胞膜脂或膜蛋白中的糖基決定的。A血型的人紅細(xì)胞
膜脂寡穗鏈的末端是2乙酰半乳糖胺(GalNAc),B血型的人紅細(xì)胞膜脂黑糖鏈的末端是半乳糖(Gal),0型
則沒(méi)有這兩種糖基,而AB型的人則在末端同時(shí)具有這兩種糖。
9.十二烷基磺酸鈉(SDS)和TriionX700都是去垢劑,哪一種可用于分離行生物功能的膜蛋白?(答案)
答:去垢劑可分為離子型和非離子型兩種。十二烷基磺酸鈉(SDS)是常用的離子型去垢劑,它不僅可使細(xì)胞
膜崩潰,并與膜蛋白的疏水部分結(jié)合使其分離,而且還破壞膜蛋白內(nèi)部的非共價(jià)鍵,使蛋白變性,所以不
宜用于分離有功能的膜蛋白。TritonK-100是溫和性去垢劑,它可以使膜脂溶解,又不使蛋白變性,可分
離到有生物功能的膜蛋白。
10.膜結(jié)構(gòu)不對(duì)稱(chēng)性的意義是什么?
答:膜脂、膜蛋白及膜糖分布的不對(duì)稱(chēng)性導(dǎo)致了膜功能的不對(duì)稱(chēng)性和方向性。保證了牛?命活動(dòng)的高度有序
性。膜脂在膜中的分布是不對(duì)稱(chēng)的,雖然這種不對(duì)稱(chēng)性的生物學(xué)作用還了解得很少,但已經(jīng)取得了不少進(jìn)
展。如犍脂是位于脂雙層的外側(cè),其作用可能作為細(xì)胞外配體(Hgand)的受體。磷脂酰絲雙基主要集中在
脂雙層的內(nèi)葉.在生理山下帶負(fù)電荷.這種帶電性使得它能夠同帶正電的物質(zhì)結(jié)合,如同血型糖蛋白A跨
膜。螺旋鄰近的賴(lài)氨酸、精氨酸結(jié)合。磷脂酰膽堿出現(xiàn)在衰老的淋巴細(xì)胞外表面,作為讓吞噬細(xì)胞吞噬的
信號(hào)。磷脂酷膽堿也出現(xiàn)在血小板的外表面,此時(shí)作為血凝固的信號(hào)。磷脂酰肌醇主要集中在內(nèi)葉,它們
在將細(xì)胞質(zhì)膜的刺激向細(xì)胞質(zhì)傳遞中起關(guān)鍵作用。膜不僅內(nèi)外兩仰J的功能不同,分布的區(qū)域?qū)δ芤灿杏?/p>
響。造成這種功能上的差異,主要是膜蛋白、膜脂和膜糖分布不對(duì)稱(chēng)引起的。細(xì)胞間的識(shí)別、運(yùn)動(dòng)、物質(zhì)
運(yùn)輸、信號(hào)傳遞等都具有方向性。這些方向性的維持就是靠分布不對(duì)稱(chēng)的膜蛋白、膜脂和膜糖來(lái)提供。
11.孔蛋白只存在于雙層膜的外膜中,為什么?
答:由于孔蛋白的孔徑大,所以只能存在于外膜,而不能存在于內(nèi)膜。內(nèi)膜有界膜的作用,如果有孔蛋白,
則失去界膜的功能。
12.在陶法標(biāo)記測(cè)定膜蛋白的定向?qū)嶒?yàn)中若是要標(biāo)記膜內(nèi)側(cè)的蛋白,該如何處理?
答:將人工脂質(zhì)體放入低滲溶液中,這樣,乳過(guò)氧化物酶就能進(jìn)入脂質(zhì)體進(jìn)行內(nèi)側(cè)蛋白質(zhì)標(biāo)記(Q3T)。
圖Q3-1乳過(guò)氧化物酶就能進(jìn)入脂質(zhì)體進(jìn)行內(nèi)側(cè)蛋白質(zhì)標(biāo)記
13.請(qǐng)說(shuō)明磷脂酹處理法研究紅細(xì)胞膜脂在脂雙層中定位的原理:
答:由于紅細(xì)胞具有血影現(xiàn)象,只要將紅細(xì)胞置于低離子濃度的溶液中,紅細(xì)胞就會(huì)發(fā)生滲漏釋放出內(nèi)含
物,得到只有紅細(xì)胞膜的空殼。然后調(diào)整溶液中的+離子濃度,改變紅細(xì)胞小泡的狀態(tài)。若是從溶液中
除去Mg2+,則形成外翻的小泡,若是加入Mg2+則是正常方向的小泡,然后用脂酣分別處理這兩種紅細(xì)胞
膜。常用的脂胸是磷脂酣(phospholipase),這種徜也是因?yàn)橄鄬?duì)分子質(zhì)量大而不通過(guò)細(xì)胞膜,所以磷脂超
只能附著在膜泡的外表面,能夠被磷脂酶水解的就是位于?外表面的磷脂,然后再根據(jù)它原來(lái)的狀態(tài),確定
在紅細(xì)胞膜脂中的定向。
14.膜的流動(dòng)性的生理意義何在?
答:①細(xì)胞質(zhì)膜適宜的流動(dòng)性是生物膜正常功能的必要條件。
②酶活性與流動(dòng)性有極大的關(guān)系,流動(dòng)性大活性高。
③如果沒(méi)有膜的流動(dòng)性,細(xì)胞外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)法進(jìn)入,細(xì)胞內(nèi)合成的胞外物質(zhì)及細(xì)胞廢物也不能運(yùn)到細(xì)胞
外,這樣細(xì)胞就要停止新陳代謝而死亡。
④膜流動(dòng)性與信息傳遞有著極大的關(guān)系。
⑤如果沒(méi)有流動(dòng)性,能量轉(zhuǎn)換是不可能的。
⑥膜的流動(dòng)性與發(fā)育和衰老過(guò)程都有相當(dāng)大的關(guān)系。
15.請(qǐng)從起始條件、運(yùn)輸方式、產(chǎn)生的結(jié)果等三個(gè)方面進(jìn)行主動(dòng)運(yùn)輸和被動(dòng)運(yùn)輸?shù)谋容^。
答:將比較結(jié)果列于表Q3T口:
表Q3T被動(dòng)運(yùn)輸與主動(dòng)運(yùn)輸在起始條件、運(yùn)輸方式和產(chǎn)生的結(jié)果的比較
被動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸
細(xì)胞外被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)的濃
細(xì)胞外被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)濃度
起始條件度可能高于、也可能低于
大大高于細(xì)胞內(nèi)的濃度
細(xì)胞內(nèi)的濃度
運(yùn)輸方式通過(guò)擴(kuò)散或運(yùn)輸?shù)鞍仔纬赏ㄟ^(guò)具有酶活性的運(yùn)輸?shù)?/p>
的通道進(jìn)入細(xì)胞白(泵),在能量的驅(qū)動(dòng)下
進(jìn)出細(xì)胞
最后使細(xì)胞內(nèi)外的濃度達(dá)最后細(xì)胞內(nèi)外的濃度處于
產(chǎn)生的結(jié)果
到平衡穩(wěn)定,建立了濃度梯度
16.如何根據(jù)細(xì)胞的滲透現(xiàn)象解釋植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離(plasmolysis)?
答:由于細(xì)胞的滲透現(xiàn)象,使得細(xì)胞在不同濃度的溶液中,會(huì)發(fā)生膨脹(swell)或收縮(shrink)。實(shí)際上這
種現(xiàn)象取決于溶液中的溶質(zhì)和細(xì)胞中該物質(zhì)的濃度。若將動(dòng)物細(xì)胞置于高滲溶液中,水則會(huì)從細(xì)胞中滲出,
細(xì)胞發(fā)生收縮。細(xì)胞在低滲溶液中會(huì)吸水膨張和破裂。若將植物細(xì)胞置于高滲溶液中,細(xì)胞脫水發(fā)生質(zhì)壁
分離(plasmolysis)。若是在低滲溶液中,植物的細(xì)胞壁保護(hù)細(xì)胞防止過(guò)度膨脹而破裂,此時(shí)由于水的進(jìn)入,
細(xì)胞內(nèi)的壓力升高,使細(xì)胞變得堅(jiān)硬(圖Q3-2)o
圖Q3-2動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞在不同濃度的蔗糖溶液中的行為
17.為什么所有帶電荷的分子(離子),不管它多小,都不能自由擴(kuò)散?
答:帶電的物質(zhì)通常同水結(jié)合形成一個(gè)水合的外殼,這不僅增加了它們的分子體積,同時(shí)也大大降低了脂
溶性。因此說(shuō),所有帶電荷的分子(離子),不管它多小,都不能自由擴(kuò)散。
18.如何理解."被動(dòng)運(yùn)輸是減少細(xì)胞與周?chē)h(huán)境的差別,而主動(dòng)運(yùn)輸則是努力創(chuàng)造差別,維持生命的活力”?
答:主要是從創(chuàng)造差異對(duì)細(xì)胞生命活動(dòng)的意義方面來(lái)理解這?說(shuō)法。主動(dòng)運(yùn)輸涉及物質(zhì)輸入和輸出細(xì)胞和
細(xì)胞器,并且能夠逆濃度梯度或電化學(xué)梯度。這種運(yùn)輸對(duì)于維持細(xì)胞和細(xì)胞器的正常功能來(lái)說(shuō)起三個(gè)重要
作用:①保證了細(xì)胞或細(xì)胞器從周?chē)h(huán)境中或表面攝取必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),即使這些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在周?chē)h(huán)境中
或表面的濃度很低;②能夠?qū)⒓?xì)胞內(nèi)的各種物質(zhì),如分泌物、代謝廢物以及一些離子排到細(xì)胞外,即使這
些物質(zhì)在細(xì)胞外的濃度比細(xì)胞內(nèi)的濃度高得多;③能夠維持一些無(wú)機(jī)離子在細(xì)胞內(nèi)恒定和最適的濃度,特
別是K+、Ca2+和H+的濃度。概括地說(shuō),主動(dòng)運(yùn)輸主要是維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,以及在各種不同生理?xiàng)l件
下細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的快速調(diào)整,這對(duì)細(xì)胞的生命活動(dòng)來(lái)說(shuō)是非常重要的。
19.四種運(yùn)輸ATPase在結(jié)構(gòu)、存在部位和功能上有什么不同?
答:四種運(yùn)輸ATPase的差異列于表Q3-2中。
表Q3-2四類(lèi)ATP驅(qū)動(dòng)的離廣和小分廣運(yùn)輸泵的比較
類(lèi)型運(yùn)輸物質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)存在的部位
P型H+,Na+,通常有大小兩個(gè)亞基,大亞H+泵:存在于植物、真菌和細(xì)
K+,Ca2+基被磷酸化,小亞基調(diào)節(jié)運(yùn)菌的質(zhì)膜;Na+/K+:動(dòng)物細(xì)
輸。胞的質(zhì)膜:H+/K+泵:哺乳動(dòng)
物胃細(xì)胞表層質(zhì)膜;Ca2+泵:
所有真核生物的質(zhì)膜;肌細(xì)
胞的肌質(zhì)網(wǎng)膜。
F型只是E+有多個(gè)跨膜亞基,建立H+的細(xì)菌的質(zhì)膜、線粒體內(nèi)膜、
電化學(xué)梯度,合成ATP。葉綠體的類(lèi)囊體膜。
V型只是卅多個(gè)跨膜亞基,亞基的細(xì)胞①植物、酵母和其它真菌的
質(zhì)部分可將ATP水解-并利液泡膜;②動(dòng)物細(xì)胞的溶福
用釋放的能量將H+運(yùn)輸?shù)侥殷w和內(nèi)體的膜;③某些分泌
泡中,使之成為酸性環(huán)境。酸性物偵的動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)膜
(如破骨細(xì)胞和腎管狀細(xì)
胞)。
ABC型離子和各兩個(gè)膜結(jié)構(gòu)域形成水性通①細(xì)菌質(zhì)膜(運(yùn)輸氨基酸、糖
種小分子道,兩個(gè)細(xì)胞質(zhì)ATP結(jié)合結(jié)和肽);②哺乳動(dòng)物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜
構(gòu)域VATP水解及物質(zhì)運(yùn)輸(運(yùn)輸與MHC蛋白相關(guān)的抗
相偶聯(lián)。不同結(jié)構(gòu)域可以位原肽);③哺乳動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)膜
于同一個(gè)亞基,也可位于不(運(yùn)輸小分子、磷脂、小的
同的亞基。類(lèi)脂分子)
20.簡(jiǎn)述Na+/K+泵(Na+/K+pump,Na+/K+ATPase)的結(jié)構(gòu)和作用機(jī)制。
答:Na+/K+泵是動(dòng)物細(xì)胞中由ATP驅(qū)動(dòng)的將Na+輸出到細(xì)胞外同時(shí)將K+輸入細(xì)胞內(nèi)的運(yùn)輸泵,乂稱(chēng)Na+泵
或Na+/K+交換泵。實(shí)際上是一種Na+/K+ATPase。Na+/K+ATPase是由兩個(gè)大亞基(a亞基)和兩個(gè)小亞
基(13亞基)組成。。亞基是跨膜蛋白,在膜的內(nèi)側(cè)有ATP結(jié)合位點(diǎn),細(xì)胞外側(cè)和烏本甘(ouabain)結(jié)合位點(diǎn);
在a亞基上有Na+和K+結(jié)合位點(diǎn)。
Na+/K+ATPase運(yùn)輸分為六個(gè)過(guò)程:①在靜息狀態(tài),Na+/K+泵的構(gòu)型使得Na+結(jié)合位點(diǎn)暴露在膜內(nèi)側(cè)。當(dāng)
細(xì)胞內(nèi)Na+濃度升高時(shí),3個(gè)Na+與該位點(diǎn)結(jié)合;②由于Na+的結(jié)合,激活了ATP酹的活性,使ATP分解,
粹放ADP,a亞基被磷酸化;③由于亞基被磷酸化,引起筋發(fā)生構(gòu)型變化,于是與Na+結(jié)合的剖位轉(zhuǎn)
向膜外側(cè),并向胞外釋放3個(gè)Na+;④膜外的兩個(gè)K+同a亞基結(jié)合;⑤K+與磷酸化的\a+/K+ATPase結(jié)
合后,促使酶去磷酸化;⑥云磷酸化后的酶恢復(fù)原構(gòu)型,于是將結(jié)合的K+釋放到細(xì)胞內(nèi)。每水解?個(gè)
ATP,運(yùn)出3個(gè)Na+,輸入2個(gè)K+。Na+/K+泵工作的結(jié)果,使細(xì)胞內(nèi)的Na+濃度比細(xì)胞外低10?30倍,
而細(xì)胞內(nèi)的K+濃度比細(xì)胞外高10?30倍。由于細(xì)胞外的Na+濃度高,且Na+是帶正電的,所以Na+/K+泵
使細(xì)胞外帶上正電荷。
意義:\a+/K+泵具有三個(gè)重要作用,一是維持了細(xì)胞Na+離子的平衡,抵消了Na+離子的滲透作用;二是
在建立細(xì)胞質(zhì)膜兩側(cè)Na+離子濃度梯度的同時(shí),為簡(jiǎn)萄糖協(xié)同運(yùn)輸泵提供了驅(qū)動(dòng)力;三是Na一泵建立的細(xì)胞
外電位,為神經(jīng)和肌肉電脈沖傳導(dǎo)提供了基礎(chǔ)。
21.簡(jiǎn)述Ca2+泵(Ca2+pump,Ca2+ATPase)的結(jié)構(gòu)和作用機(jī)理。
答:Ca2+-ATPase有10個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,在細(xì)胞膜內(nèi)惻有兩個(gè)大的擁胞質(zhì)環(huán)狀結(jié)構(gòu),第一個(gè)環(huán)位于跨膜結(jié)構(gòu)
域2和3之間,第二個(gè)環(huán)位于跨膜結(jié)構(gòu)域4和5之間。在第-■個(gè)環(huán)上有Ca2+離子結(jié)合位點(diǎn);在第二個(gè)環(huán)上
有激活位點(diǎn),包括ATP的結(jié)合位點(diǎn)。Ca2+-ATPase的氨基端和按基端都在細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè),按基端含有抑制
區(qū)域。在靜息狀態(tài),諭基端的抑制區(qū)域同環(huán)2的激活位點(diǎn)結(jié)合,使泵失去功能,這就是自我抑制。
Ca2+-ATPase泵有兩種激活機(jī)制,一種是受激活的Ca2+/鈣調(diào)蛋白(CaM)復(fù)合物的激活,另一種是被蛋白激
酶C激活。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高時(shí),Ca2+同鈣調(diào)蛋白結(jié)合,形成激活的Ca2+/鈣調(diào)蛋白梵合物,該旦合
物同抑制區(qū)結(jié)合,釋放激活位點(diǎn),泵開(kāi)始工作。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度下降時(shí),CaM同抑制區(qū)脫離,抑制區(qū)又
同激活位點(diǎn)結(jié)合,使泵處于靜息狀態(tài)。在另一種情況下,蛋白激府C使抑制區(qū)磷酸化,從而失去抑制作用;
當(dāng)磷酸施使抑制區(qū)脫磷酸,抑制區(qū)又同激活位點(diǎn)結(jié)合,起抑制作用。
Ca2+泵的工作原理類(lèi)似于Na-/K+ATPase。在細(xì)胞質(zhì)膜的一側(cè)有同Ca2+結(jié)合的位點(diǎn),一次可以結(jié)合兩個(gè)
Ca2+,Ca2+結(jié)合后使陶激活,并結(jié)合上一分子ATP,伴隨ATP的水解和的被磷酸化,Ca2+泵構(gòu)型發(fā)生改變,
結(jié)合Ca2+的一面轉(zhuǎn)到細(xì)胞外側(cè),山于結(jié)合親和力低Ca2+離子被糅放,此時(shí)酶發(fā)生去磷酸化,構(gòu)型恢復(fù)到
原始的靜息狀態(tài)。Ca2+-ATPase每水解一個(gè)ATP將兩個(gè)Ca2+離子從胞質(zhì)溶膠輸出到細(xì)胞外。
22.請(qǐng)簡(jiǎn)述細(xì)菌細(xì)胞中葡萄糖的磷酸化運(yùn)輸機(jī)理。
答:細(xì)菌細(xì)胞中葡萄糖的磷酸化運(yùn)輸過(guò)程是:首先將供體磷酸烯解式丙酮酸的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞質(zhì)的雨
KE-I),然后將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移給HPr蛋白,起始步驟對(duì)于各種糖的運(yùn)輸都是相同的。第二步要根據(jù)被轉(zhuǎn)運(yùn)
的糖而定,如運(yùn)輸?shù)氖瞧咸烟?HPr蛋白要將磷酸基轉(zhuǎn)給酶in(E-HI),再轉(zhuǎn)給位于質(zhì)膜中的酶H(ETI),
但對(duì)于甘露糖的轉(zhuǎn)運(yùn)則不需的山的參與,所以可直接將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)給位于質(zhì)膜中的瞅II(E-H);最后由前
H將磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)給被運(yùn)輸?shù)奶恰C窰和酶IH對(duì)于不同的糖具有特異性。該運(yùn)輸方式中,被轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)到組胞中
的糖濃度,從形式上看沒(méi)有提高,但實(shí)質(zhì)上是提高了,只不過(guò)通過(guò)磷酸化作用進(jìn)行了修飾。
23.什么是細(xì)菌視紫紅質(zhì)質(zhì)子泵(bacleriorhodopsinprotonpunp)?如何工作?答:嗜鹽的厭氧菌
halobacteriumhalobium生活在陽(yáng)光充足的鹽水池中。在進(jìn)化過(guò)程中,這種菌的細(xì)胞質(zhì)膜上出現(xiàn)/多種能
被光線激活的蛋白質(zhì),“紫膜”是該菌質(zhì)膜上一些特化的區(qū)域(斑塊),上面只含一種蛋白質(zhì),就是組菌視
紫紅質(zhì)(bacteriorhodopsin)。該蛋白含有七個(gè)a螺旋,每個(gè)螺旋長(zhǎng)3-4nm,在蛋白的中部有幾個(gè)能夠吸收
光的視黃醛基團(tuán),又稱(chēng)發(fā)色基團(tuán):當(dāng)該基團(tuán)被一個(gè)光量子激活時(shí),就能引起整個(gè)分子的構(gòu)型發(fā)生變化,導(dǎo)
致兩個(gè)H+從細(xì)胞內(nèi)運(yùn)送到細(xì)胞外。結(jié)果造成了細(xì)胞內(nèi)外的質(zhì)子濃度差:細(xì)胞外部高內(nèi)部低,這種濃度梯度
可被另一種膜蛋白用于ATP的合成。在這個(gè)系統(tǒng)中,H+的運(yùn)輸是由光提供能量。
24.簡(jiǎn)述說(shuō)明ABC運(yùn)輸?shù)鞍讓?duì)甘露糖運(yùn)輸?shù)臋C(jī)理。
答:甘露糖先通過(guò)外膜的選擇性孔蛋白進(jìn)入膜間腔.然后被一種結(jié)合蛋白(周質(zhì)結(jié)合蛋白)所結(jié)合.縮合蛋
白有兩個(gè)結(jié)構(gòu)域,一個(gè)同甘露糖結(jié)合,該結(jié)構(gòu)域與甘露糖等物質(zhì)結(jié)合后,會(huì)引起另一個(gè)結(jié)構(gòu)域發(fā)生構(gòu)型變
化并同ABC運(yùn)輸?shù)鞍捉Y(jié)合。這樣,被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)就得以同ABC運(yùn)輸?shù)鞍捉Y(jié)合,在水解ATP供能的情況下,
ABC運(yùn)輸?shù)皩⑻堑冗\(yùn)入細(xì)胞內(nèi).
25.請(qǐng)比較動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞主動(dòng)運(yùn)輸?shù)牟町?
答:動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞不僅結(jié)構(gòu)有所差別,載體蛋白也有所不同。動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)膜上有Na+-K+ATPase,
并通過(guò)對(duì)Na+、K卜的運(yùn)輸建立細(xì)胞的電化學(xué)梯度:但是在植物細(xì)胞(包括細(xì)菌細(xì)胞)的質(zhì)膜中沒(méi)有
Na+-K+ATPase,代之的是H+-ATP的,并通過(guò)對(duì)H+的運(yùn)輸建立細(xì)胞的電化學(xué)梯度,使細(xì)胞外H+的濃度比細(xì)
胞內(nèi)高;與此同時(shí)H+泵在周?chē)h(huán)境中創(chuàng)建了酸性pH,然后通過(guò)I什質(zhì)子梯度驅(qū)動(dòng)的同向運(yùn)輸,將糖和氨基
酸等輸入植物的細(xì)胞內(nèi)。在動(dòng)物細(xì)胞溶的體膜和植物細(xì)胞的液泡膜上都有WATP的,它們作用都一樣,保
持這些細(xì)胞器的酸性。
第四章細(xì)胞環(huán)境與互作
1.細(xì)胞外基質(zhì)的化學(xué)組成和主要功能是什么?
答:細(xì)胞外基質(zhì)的化學(xué)組成包括3類(lèi):氨基聚糖和蛋白聚糖、膠原和彈性蛋白以及纖連蛋白和層粘連蛋白。
主要功能表現(xiàn)在:對(duì)細(xì)胞組輟支持、保護(hù)、提供營(yíng)養(yǎng),以及胚胎發(fā)育形態(tài)建成、細(xì)胞分裂、細(xì)胞分化、
細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移、細(xì)胞識(shí)別、細(xì)胞黏著和通信聯(lián)絡(luò)等方面。
2.膠原的分子組成和結(jié)構(gòu)有何特點(diǎn)?如何裝配?有何功能?
答:膠原分子由3條a螺旋肽掛組成,每條肽鏈包含約1000個(gè)氨基酸殘基,氨基酸組成規(guī)則的Gly-X-Y(X
為Pro,Y為Hypro或Hylys)三肽重復(fù)序列。三肽相互交聯(lián)。膠原在合成時(shí)首先合成前膠原,分泌到細(xì)胞
外基質(zhì)中,有前肽醇切去前肽形成直徑L5nm,長(zhǎng)300nm的膠原分子。膠原分子按照相鄰分子相錯(cuò)1/4長(zhǎng)
度,前后分子首尾相隔35nm的距離,進(jìn)行自我裝配,形成直徑1)?30nm明暗相間的膠原纖維。膠原纖維
在細(xì)胞外基質(zhì)中常聚集成束。功能:膠原在不同的組織中呈不同形態(tài)結(jié)構(gòu),與其功能(抗張性、強(qiáng)韌性、抗
拉性、支持保護(hù)、形成基膜等)相適應(yīng):膠原通過(guò)與細(xì)胞外基質(zhì)中各種成分結(jié)合,將細(xì)胞外基質(zhì)組織起來(lái),
同時(shí)與細(xì)胞表面受體結(jié)合,連成組織和器官;膠原通過(guò)細(xì)胞表面受體介導(dǎo)與細(xì)胞內(nèi)骨架相互作用,影響細(xì)
胞的形態(tài)與運(yùn)動(dòng):膠原有刺激上皮細(xì)胞分化,維持上皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用,并作為細(xì)胞相互作用的支架和細(xì)
胞遷移的基質(zhì),引導(dǎo)細(xì)胞遷移。
3.纖連蛋白的結(jié)構(gòu)如何?為什么說(shuō)纖連蛋白是?種多功能分子?
答:纖連蛋白由2個(gè)相似的亞單位形成二聚體,含糖5%,每條肽儲(chǔ)約2500個(gè)氨基酸殘基,肽鏈中折登成
各種球狀結(jié)構(gòu)域,每個(gè)結(jié)構(gòu)域能選擇性的與細(xì)胞外基質(zhì)中的各種大分子(膠原、氨基聚糖、蛋白聚糖等)和
細(xì)胞表面纖連蛋白受體結(jié)合行使各種功能。兩條肽鏈C端通過(guò)二流鍵共價(jià)結(jié)合構(gòu)成V型分子。功能:纖連
蛋白是一種多功能分子,能使細(xì)胞錨定在底物上靜止不動(dòng),也能誘導(dǎo)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)遷移,在組織分化、組胞黏
著和遷移時(shí)起重要作用:在成纖維細(xì)胞表面纖連蛋白形成纖維束與細(xì)胞內(nèi)張力纖維走向一致,有細(xì)胞表面
受體介導(dǎo)通過(guò)連接蛋白與微絲束相互作用形成黏著斑;血漿纖連蛋白能促進(jìn)血液凝固和創(chuàng)傷面修復(fù):創(chuàng)
傷一一與血漿纖連蛋白結(jié)合一一吸引成纖維細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞一一形成肉芽一一形成瘢痕一一
刺激上皮細(xì)胞生長(zhǎng)一一修復(fù):胚胎發(fā)育初期大量分泌纖連蛋白啟動(dòng)細(xì)胞沿著一定途徑遷移:纖連蛋白合成
分泌減少使腫瘤細(xì)胞黏著能力下降并遷移。
4.植物細(xì)胞被的主要成分有哪些?各起什么作用?
答:主要成分包括:纖維素、厚纖維素、果膠、木質(zhì)素和糖蛋白。纖維素是由葡萄糖構(gòu)成的,在細(xì)胞壁中,
由50?60個(gè)纖維素分子形成一束,并且相互平行排列,形成長(zhǎng)的、堅(jiān)硬的微纖維。纖維素則相當(dāng)于動(dòng)物細(xì)
胞外基質(zhì)中的膠原。半纖維素是由幾種不同類(lèi)型的單糖構(gòu)成的異質(zhì)多聚體,這些糖是五碳糖和六碳糖,包
括木糖、阿伯糖、甘露糖和半乳糖等。半纖維素木聚糖在木質(zhì)組織中占總量的50%,它結(jié)合在纖維索微纖
維的表面,并且相互連接,這些纖維構(gòu)成了堅(jiān)硬的細(xì)胞相互連接的網(wǎng)絡(luò)。果膠(peclin)是由半乳糖能酸和
它的衍生物組成的多聚體.類(lèi)似動(dòng)物細(xì)胞的粘名融.很容易形成水合膠.果膠在細(xì)胞壁中的作用主要是連
接相鄰細(xì)胞壁,并且形成細(xì)胞外基質(zhì),將
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