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文檔簡介
名詞解釋巴斯德效應:有氧條件下,發酵作用受抑制現象(或氧對發酵抑制現象)。酵母Ⅰ型發酵:酵母菌將葡萄糖經EMP路徑降解生成2分子終端產物丙酮酸,后丙酮酸脫羧生成乙醛,乙醛作為氫受體使NADH氧化生成NAD+,同時乙醛被還原生成乙醇(乙醇脫氫酶活性強,乙醛為氫受體,生成乙醇)。酵母Ⅱ型發酵:當環境中存在亞硫酸氫鈉時,亞硫酸氫鈉可與乙醛反應,生成難溶磺化羥基乙醛,該化合物失去了作為受氫體使NADH脫氫氧化性能,而不能形成乙醇,轉而使磷酸二羥丙酮替換乙醛作為受氫體,生成a-磷酸甘油,a-磷酸甘油深入水解脫磷酸生成甘油。(磷酸二羥丙酮為氫受體,生成甘油)。酵母Ⅲ型發酵:葡萄糖經EMP路徑生成丙酮酸,后脫羧生成乙醛,如處于弱堿性環境條件下(pH7.6),乙醛因得不到足夠氫而積累,2個乙醛分子間發生歧化反應,1分子乙醛作為氧化劑被還原成乙醇,另1個則作為還原劑被氧化為乙酸。而磷酸二羥丙酮作為NADH氫受體,使NAD+再生,產物為乙醇、乙酸和甘油(堿性條件,歧化反應,生成甘油、乙醇、乙酸和CO2)。分批培養:在一個密閉系統內一次性加入有限數量營養物質進行培養方法。補料分批培養:補料分批培養又稱半連續培養或半連續發酵,是指在分批培養過程中,間歇或連續地補加新鮮培養基培養方法。連續培養:又稱連續發酵,是在開放系統中進行,指以一定速率向發酵罐內添加新鮮培養基,同時以相同速度流出培養液,從而使發酵罐內液量維持恒定,使培養物再近似恒定狀態下生長培養方法。標準呼吸鏈:一個氧化時能產生ATP積累,會抑制PFK呼氣鏈。側呼吸鏈:對水楊酰異羥肟酸(SHAM)敏感,不產生ATP,不抑制PFK;缺氧造成側呼吸鏈不可逆失活,檸檬酸產率急劇下降。協同反饋抑制:在分支代謝路徑中,多個末端產物同時都過量,才對路徑中第一個酶含有抑制作用。若某一末端產物單獨過量則對路徑中第一個酶無抑制作用。代謝互鎖:是指從生物合成路徑分析,一個氨基酸合成受到另一個完全無關氨基酸控制,而且只有當該氨基酸濃度大大高于生理濃度時才能顯示抑制作用。優先合成路徑:在菌體內某種氨基酸合成份支路徑中,因為多種酶活性不一樣,造成合成路徑優先向酶活性較高方向進行代謝路徑。營養缺點型:因喪失合成一些生活必需物質能力,不能在基礎培養基上生長,突變型菌株。營養缺點型auxotroph指微生物等不能在無機鹽類和碳源組成合成培養基中增殖,必需補充一個或一個以上營養物質才能生長。代謝滲漏型:一類在菌體內合成份支路徑中,因為關鍵酶活性下降,而切弱了優先合成路徑,并使代謝優先向另外合成方向發生轉換突變型。抗結構類似物突變型:合作終產物抑制:同時添加多個屬于同類型嘌呤核苷酸,其抑制作用不超出同類核苷酸單獨抑制總和;但同時添加不一樣類型核苷酸,其抑制作用則以幾何倍數提升。臨界氧濃度:微生物好氧速率受發酵液中氧濃度影響,多種微生物對發酵液中溶氧濃度有一個最低要求,這一溶氧濃度叫做~。氧飽和度=發酵液中氧濃度/臨界溶氧溶度;所以對于微生物生長,只要控制發酵過程中氧飽和度>1。供氧阻力:空氣中氧氣從空氣泡里經過氣膜、氣液界面和液膜擴散到液體主流中。氧膜阻力1/k1。氣液界面阻力1/k2。液膜阻力1/k3。液流阻力1/k4。耗氧阻力:指氧分子自液體主流經過液膜、菌絲叢、細胞膜擴散到細胞內。細胞周圍液膜阻力1/k5。菌絲叢或團內擴散阻力1/k6。細胞膜阻力1/k7。細胞內反應阻力1/k8。填空選擇判定由葡萄糖(C6H12O6)生成檸檬酸(C6H8O7)路徑中,檸檬酸發酵對糖理論轉化率為:CA.50%B。100%C。106.7%D。都不對(理論轉化率:酒精=100%,乳酸<100%,檸檬酸>100%)哪些屬于糖嫌氣性發酵產物積累機制酒精;甘油;乳酸檸檬酸合成中黑曲霉對Mn2+要求是:缺乏時檸檬酸多A、過量B、適量C、亞適量D、無關核苷酸合成中,嘌呤核苷酸前體物是:BA、XMPB、IMPC、AMPD、GMP用營養缺點型菌株生產賴氨酸,培養基中蘇氨酸Thr含量過高會造成:AA、天冬氨酸激酶(AK)被協同反饋抑制B、高絲氨酸脫氫酶受反饋抑制C、賴氨酸合成相關酶系受抑制D、蘇氨酸合成相關酶系被抑制當黑曲霉在缺Mn2+產檸檬酸培養基中,菌體組成代謝(戊糖磷酸路徑、生成葡萄糖路徑)酶和三羧酸循環脫氫酶活力顯著降低。缺Mn2+時HMP和TCA循環酶水平低,生長久菌絲體蛋白質、核實和脂肪含量顯著降低,氨基酸和NH4+水平升高,丙酮酸和草酰乙酸水平升高。Mn2+效應時經過NH4+水平升高而降低檸檬酸對PFK抑制,NH4+水平升高是因為Mn2+缺乏使蛋白質和核實合成受阻。正常生理濃度范圍檸檬酸和ATP對調整酶(PFK)有抑制作用。綜合題簡述黃色短桿菌賴氨酸生物合成調整機制。賴氨酸生物合成調整機制:(1)只有一個天冬氨酸激酶(AK),而不是三種同功酶。(2)協同反饋抑制①AK是變構酶,含有兩個變構部位,能夠與終產物結合,受終產物影響;②當只有一個終產物(賴氨酸或蘇氨酸)與酶變構部位結合時,酶活性不受影響;③當有兩種終產物(賴氨酸和蘇氨酸)同時過量存在,即兩種終產物同時與酶兩個變構部位結合時,酶活性受到抑制,(3)分支點處代謝調整①第一個分支點:因為高絲氨酸脫氫酶活性比DDP合成酶約高15倍,所以代謝優先向合成高絲氨酸方向進行。分支路徑第一個酶(DDP合成酶)和第二個酶(DDP還原酶)均不受賴氨酸反饋抑制和阻遏。②第二個分支點:琥珀酸高絲氨酸合成酶活性>高絲氨酸激酶活性,優先合成蛋氨酸;當蛋氨酸過剩時,阻遏琥珀酸高絲氨酸合成酶合成,代謝流轉向合成蘇氨酸方向進行;當異亮氨酸過剩時,反饋抑制蘇氨酸脫氨酶,就積累蘇氨酸。因為蘇氨酸過剩,反饋抑制高絲氨酸脫氫酶,使代謝流轉向合成賴氨酸。賴氨酸和蘇氨酸同時過剩,協同反饋抑制天冬氨酸激酶,使整個路徑停止進行。嘌呤核苷酸全合成路徑分解代謝產物調整控制(1)葡萄糖效應:在有葡萄糖和第二種碳原培養基中,葡萄糖首先被利用,抑制抗生素生物合成,只有當葡萄糖耗盡時,利用第二種碳源酶開始形成,并同時解除對抗生素生物合成抑制。(2)分解代謝產物調整機制:①青霉素合成中:葡萄糖分解產物阻遏三肽酶合成,其效應物可能是一個葡萄糖磷酸化衍生物;頭孢菌素生物合成受葡萄糖顯著阻遏,使青霉素N不能轉化為頭孢素C;葡萄糖也阻遏青霉素環化酶,使它不能把ACV三肽轉化成青霉素C。②在放線菌素合成中:0.1%葡萄糖+1%半孔糖→30h葡萄糖用盡;20h內不合成氧化吩嗪酮合成酶,但20-36h該酶活力增加6倍,40h后為12倍;24h后檢出放線菌素合成;在半孔糖培養基中加入不一樣濃度葡萄糖,顯著抑制酶合成。(3)解除分解產物阻遏方法:①選育對葡萄糖類似物抗性突變型,來解除輕易利用碳分解調整②在培養過程中,避開分解產物阻遏,如使用利用緩慢碳源,或連續流加葡萄糖,保持低濃度;使用緩釋劑;溶氧限制解除方法1.了解菌體生長階段和代謝產物形成階段菌臨界氧濃度和達成最高發酵產物臨界氧濃度,即菌生長和發酵產物形成過程中最高需氧量;2.調整通風和攪拌,分別地合理地供氧;無須達成氧飽和,只要維持氧濃度在臨界氧濃度以上即可。溶解氧濃度對菌體生長和產物形成影響比耗氧速度或呼吸強度(QO2)臨界氧濃度(Ccr)氧飽和度=發酵液中氧濃度/臨界溶氧溶度;所以對于微生物生長,只要控制發酵過程中氧飽和度>1。Kla測定常見方法1、亞硫酸鹽法(冷膜)原理:亞硫酸根在銅或鎂離子作為觸媒時,被快速氧化而消耗溶液中氧,使溶液中氧濃度為零;再用碘量法測定未經氧化亞硫酸鈉,從而依據亞硫酸鈉消耗量求得氧溶解量。優點:氧溶解速度與亞硫酸鹽濃度無關;反應速度快;不需特殊儀器;缺點:正確性不如極譜法;不能在真實發酵條件下進行測定;只適合于表示4~80L發酵設備通氣效率優劣。2、取樣極譜法原理:當電解電壓為0.6~1.0V時,極譜儀擴散電流大小與液體中溶解氧濃度成正比。優點:可直接測定發酵條件下溶解氧;缺點:不能完全真實反應發酵罐中實際情況。3、復膜電極法——動態法原理:--氧透過性薄膜將電極系統與被測定溶液分隔開;--測定是氧從液相主體到陰極擴散速率,即氧從被測介質主體經過電極膜外側滯留液膜、電極膜和電解質抵達陰極表面;--氧從液相主體到陰極推進力為氧分壓差。特點:--此法避免了外界溶液性質及通風攪拌所引發湍動對測定產生影響。--應用此法時應維持氧總傳輸系數K值不變,即影響液膜厚度攪拌速度和影響液膜傳輸系數溫度都不變。Monod方程Monod方程表示式為μ=μm?C(s)Ks+C(s)pH對發酵影響
簡述pH值是怎樣影響微生物生長繁殖和代謝產物形成。①影響微生物細胞原生質膜電荷②直接影響酶活性③影響培養基中一些營養物質和中間代謝產物解離pH發酵影響pH影響酶活性pH值影響微生物細胞膜所帶電荷改變pH值影響培養基一些成份和中間代謝物解離pH影響代謝方向假如你是某發酵工廠技術人員,怎樣控制不一樣發酵時期染菌?(1)種子培養期染菌因為接種量較小,生產菌生長一開始不占優勢,而且培養液中幾乎沒有抗生素(產物)或只有極少抗生素(產物)。所以它防御雜菌能力低,輕易污染雜菌。如在此階段染菌,應將培養液全部廢棄。(2)發酵前期染菌染菌方法:能夠用降低培養溫度,調整補料量,用酸堿調pH值,縮短培養周期等方法給予補救。假如
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