廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》（征求意見稿）編制說明一、任務來源及起草單位根據廣西壯族自治區市場監督管理局《廣西壯族自治區市場監督管理局關于下達2020年第二批廣西地方標準制定項目計劃的通知》（桂市監函[2020]1832號）文件要求，我單位承擔的廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》（立項編號：2020-02107）已獲立項，本標準由廣西壯族自治區農業科學院提出，廣西壯族自治區農業科學院花卉研究所負責起草。二、制定標準的必要性杜鵑紅山茶（Camelliaazalea）又名假大頭茶、張氏紅山茶、四季紅山茶等，隸屬山茶科（Theaceae）山茶屬（Camellia），是我國特有種、稀有種，有著“植物界大熊貓”之稱。杜鵑紅山茶野生資源僅在我國廣東省陽春市鵝凰嶂省級自然保護區內有零星的自然分布，分布范圍小于100km2，且所處生境破碎化程度比較嚴重，由于資源保護力度不夠，不斷被人采挖，導致其野生種群不斷萎縮，現存野生植株僅1000余株，該種已被《中國紅色名錄》列為極危種（CR），杜鵑紅山茶種質資源急需保護、恢復和擴大。杜鵑紅山茶因其花似山茶葉像杜鵑而得名，為常綠灌木或小喬木，花期長，夏、秋2季為盛花期，在適宜的栽培條件下一年四季都可以開花，是世界上迄今為止發現的為數不多的能真正全年開花的山茶屬植物原種，彌補了山茶屬植物夏季和秋季不開花的空白，杜鵑紅山茶開花稠密、花朵大而艷紅，葉形奇特、葉厚革質，植株緊湊，病蟲害少，抗性及適應性強，新梢抽萌次數多，適應盆栽、地栽，非常適合用于室內綠化、路橋綠化、花壇綠化、假山盆景綠化等園林綠化中，在園林與觀賞園藝方面具有廣闊的應用前景。杜鵑紅山茶在廣東、廣西、浙江、福建、四川以及云南等各省區均有種植。廣西地理位置及自然氣候環境條件與杜鵑紅山茶原生地極其相似，適宜杜鵑紅山茶栽培種植，在廣西發展杜鵑紅山茶產業具有良好的氣候條件和地理優勢。根據實地調查發現，杜鵑紅山茶自然授粉的種子結實率極低，且大部分種子表現為敗育，種子質量較差，在自然狀態下種子萌發率極低，且種子苗后期死亡率較高，因此，杜鵑紅山茶通過種子繁育較為困難，這無疑在限制了杜鵑紅山茶野生種群的生存和發展的同時，也限制了其資源可持續利用。目前，國內、外部分學者對杜鵑紅山茶的繁殖方法進行研究，也取得了一定的成果。國內生產上，杜鵑紅山茶種苗繁育方法主要為嫁接繁殖和扦插繁殖，組織培養因消毒滅菌、誘導愈傷及增殖繼代等技術瓶頸未能有效打破而鮮見應用，而通過扦插繁殖獲得的杜鵑紅山茶種苗存在幼苗初期生長緩慢、苗木生長量較低的問題，對幼苗的栽植環境條件要求較高。因此，在杜鵑紅山茶種苗繁育方面，嫁接繁殖應用最為廣泛。嫁接是擴大和加速良種繁育的重要手段，利用親緣關系近、生活力強、根系發達的砧木進行嫁接，既可以保存良種特性，又可提高杜鵑紅山茶的環境適應性，嫁接苗的生長量能達到扦插苗10倍以上，同時嫁接繁殖可使植株提早開花，提升了觀賞價值，大大縮短了大規格苗木的成苗時間和成苗質量，快速達到綠化美化效果，符合當前園林綠化和觀賞園藝中對植物的要求。但是，嫁接的方法多樣，有靠接法、劈接法、插接法、切接法等；在嫁接砧木的選擇上也不盡相同，有老樁嫁接、小苗嫁接、芽苗砧嫁接等；不同的嫁接方法和不同的砧木選擇，針對不同物種起到的效果不一。目前，杜鵑紅山茶在生產上常用的嫁接方法以油茶老樁嫁接及油茶高干嫁接為主，此二種方法對于嫁接植株的快速成型及提早開花方面具有一定優勢。但是，此二種方法在生產上也存在以下問題：①半木質化接穗與木質化砧木親和性較低，②成年油茶砧木資源稀缺、成本極高，③油茶老樁移栽難成活，④繁殖系數低，⑤苗木株型不好控制，單純的依靠老樁嫁接，這無疑限制了杜鵑紅山茶的種苗繁育及產業發展，無法滿足杜鵑紅山茶種苗與日俱增的市場需求。杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術是芽苗砧嫁接與容器育苗相結合的一種育苗新技術，在能保持親本的優良特性的基礎上，兼具有繁殖系數大、繁育成本低廉、育苗周期短、苗木根系發達、移栽成活率高、中后期生長旺盛、開花時間早、株型美觀等優點，同時能更好的滿足杜鵑紅山茶良種實現規模化快繁和工廠化生產等諸多優勢。目前，杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接技術在國內應用不多，僅在廣東和廣西有部分應用，但在實際應用中存在以下問題：①芽苗砧選擇不正確，②嫁接方法不規范，③育苗基質不合理，④嫁接苗管理不規范，使杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接技術的優勢未得到很好提現，也影響了杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接苗的經濟效益。因此，出臺一套完整且合理的杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁育技術體系標準迫在眉睫。通過制定廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》，對規范廣西區內杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術，節約資源，實現杜鵑紅山茶嫁接苗生產標準化，提高杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接苗品質，進一步擴大杜鵑紅山茶可利用資源，滿足區內市場需求，為其推廣應用及產業化發展奠定基礎具有重要意義。三、標準的制定過程1.前期研究工作廣西農業科學院花卉研究所長期開展對山茶科植物的研究工作，從2014年起開始進行杜鵑紅山茶的研究，主要涉及的研究內容包括杜鵑紅山茶的引種栽培、無性繁殖、有性繁殖、培育技術、抗性脅迫、生理生化及分子生物學等方面，研究已經取得一定成效。杜鵑紅山茶相關研究先后獲得廣西科技基地和人才專項“珍稀瀕危植物杜鵑紅山茶高效繁育技術研究與應用”（桂科AD18281004）、廣西創新驅動發展專項“廣西特色花卉良種繁育及產業化關鍵技術研究與示范”（桂科AA17204026-1）、廣西農業科學院基本科研業務專項“杜鵑紅山茶快速繁殖及其幼苗栽培技術的研究”（桂農科2017YM47）、廣西農科院基本科研業務專項“花卉資源評價保存繁育及種質創新研究”（桂農科2015YT89）、廣西農科院基本科研業務專項“花卉栽培技術、開花技術及產業化集成技術研究”（桂農科2015YT91）及“花卉優良基因篩選、定位、克隆與分子輔助育種”（桂農科2015YT90）等十多項各級科研項目的支持。目前，已在廣西農業科學院花卉研究所觀賞植物研發與推廣中心、廣西農業科學院里建基地建立了面積超過500m2標準起草工作小組于2016-2019年連續三年不同季節對杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖進行研究，就芽苗砧培育、嫁接時間、嫁接方法、育苗營養土、育苗圃建設、苗期管理及病蟲害防治等方面進行了全面研究和探索。在杜鵑紅山茶的芽苗砧嫁接繁殖方面，摸索出了一套高效技術方法，成活率≥92%，成苗質量好。該技術方法已得到部分應用，在廣西農科院花卉所花卉觀賞植物研發與推廣中心、廣西農業科學院里建科研基地建立成了二個中試基地，育成包括杜鵑紅山茶在內的山茶實生苗近萬株。2021年在核心期刊《中國農學通報》發表了論文《杜鵑紅山茶砧木嫁接苗成活率及生長特性研究》，另有論文《4種油茶芽苗砧嫁接杜鵑紅山茶親和性生理研究》在投稿階段。前期的研究成果是本標準申報的依據與動力，也為本標準今后的順利實施提供了良好的科研工作基礎。2.標準征求意見稿的起草經過2020年9月，根據《廣西壯族自治區市場監督管理局關于下達2020年第二批廣西地方標準制定項目計劃的通知》（桂市監函[2020]1832號）要求，為做好廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》的編制工作，廣西農業科學院花卉研究所成立了以李先民為組長，李春牛、黃展文、卜朝陽、盧家仕、崔學強、蘇群等7人組成的標準起草工作小組，及時部署了制定標準的工作方案、進行小組成員分工及標準起草工作時間安排表，全面啟動了該地方標準的編制工作。2020年10月至2021年6月，標準起草工作小組成員在前期研究工作的基礎上，對杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術進行系統總結，并查閱了大量的文獻資料，確定了廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》的基本內容和思路，最終完成了該標準的基本框架。2021年7月至2021年10月，在基本構架的基礎上，經標準起草工作小組成員多次討論修改，最終完成了廣西地方標準《杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖技術規程》（征求意見稿）。四、標準編制原則及技術依據1.編制原則。規程編制遵循“科學、適度、可行”原則，結合廣西區內杜鵑紅山茶芽苗砧嫁接繁殖現狀，經過不同季節的全面重復試驗，對采穗圃、芽苗砧培育、嫁接、嫁接苗栽植、育苗圃、苗期管理、種苗出圃等進行了規范；通過充分聽取各方意見，確保規程科學性，生產上切實可行。2.規范性原則。規程嚴格按GB/T1.1-2020《標準化工作導則第一部分，標準的結構和編寫》規程規范要求編制，共引用國家標準1項、行業標準1項，包括：GB/T8321《農藥合理使用準則》、LY/T1589《花卉術語》，并根據前期研究成果及應用資料，確定標準的指標設置和各項指標要求。技術依據如下：（1）采穗圃杜鵑紅山茶接穗采穗圃母樹種植應符合相關要求。杜鵑紅山茶采穗圃母樹種植地應結合杜鵑紅山茶生長習性進行選擇并進行整地改良，選擇環境溫暖濕潤，排灌方便，地勢平緩，交通方便，水源、空氣無污染之處；土壤以紅壤或黃壤為宜，pH值為5.5～6.8。整地時要深耕細整，清除草根、石塊，施足底肥，平整土面；母樹定植方式依據母樹大小進行單行定植，株距60cm～80cm，行距80cm～100cm，每穴種植1株，每667m2種植800～1300株。結合實際觀測與實際操作，該采穗圃的建設方案，方便穗條剪取，同時合理利用土地資源，避免土地資源浪費。夏季采穗圃上部適當遮陰，促進杜鵑紅山茶水平方向的生長，增大冠幅，比不遮蔭條件下能剪制出更多接穗，同時，與不遮蔭相比，遮蔭條件下母樹平均葉面積增大，葉綠素含量高，枝條內含營養物質多，有助于嫁接繁殖。（2）芽苗砧培育催芽邊壁高25～30cm、長10m，寬1～1.2m，兩側保留50cm以上操作道，方便移栽作業，苗床底部鋪設5～8cm厚碎石塊。利于苗床底部透水不積水，防止細菌滋生減少嫁接苗病蟲害發生。（3）催芽嫁接前60d，適時澆水，以提高催芽床的濕度和溫度，使高州油茶種子發芽。（4）芽苗選擇為研究不同芽苗砧對杜鵑紅山茶嫁接苗的成活率及生長的影響，于2019年2月進行了芽苗砧嫁接試驗，選取廣西常見的5種油茶：普通油茶（C.oleifera）、高州油茶（C.gauchowensis）、廣寧紅花油茶（C.semiserrata）、岑軟2號（Cenruan2）、岑軟3號（Cenruan3）作為芽苗砧嫁接的砧木，以杜鵑紅山茶當年生半木質化枝條作為接穗。種子粒大飽滿、無破損、無病蟲害的種子，用0.4%高錳酸鉀溶液消毒處理1h，用清水洗凈后播種到厚12cm的沙床上，種子上方覆沙約10cm。播種后適時噴水，保持沙床濕潤。待砧木出土，出現1~2片真葉時，采用劈接法嫁接。將沙床培育的芽苗小心取出，洗凈沙土。在芽苗距種子2cm處切斷苗莖，然后從苗莖上端正中沿髓心劈開切口，切口深1~1.5cm。接穗選擇樹體外圍頂部當年生半木質化枝條，保留2~3張葉子，在最底端葉子的葉柄下方1~2mm處兩側，各削一個長約1cm、呈15°角的斜面，兩斜面呈楔形交于髓心。再將保留的葉片剪去一部分，保留1/3~1/2的長度。把削好的接穗插入砧木切口，葉柄一側皮層與砧木皮層對齊，然后用鋁箔片將砧木與接穗固定扎緊。嫁接后芽苗用規格為5×10cm種植袋裝袋定植，定植的基質選擇砂質黃泥，定植基質深度不超過嫁接鋁片。定植后將植株擺放于苗床上，澆透定根水，然后在苗床上蓋一個小拱棚。棚內溫度保持在25℃，濕度保持在80%左右。嫁接后每隔15d統計成活率（見表1），結果顯示，嫁接15d后，高州油茶芽苗砧成活率達16.67%，其它為0%，表明高州油茶芽苗砧嫁接抽梢最快。嫁接30d后，普通油茶芽苗砧的成活率仍為0%，抽梢最慢，但其他4種砧木都有一定的成活率，其中高州油茶已高達65.56%。嫁接60d后，不同油茶芽苗砧嫁接成活率高低順序為高州油茶（83.33%）＞岑軟3號（79.44%）＞岑軟2號（70.00%）＞普通油茶（63.33%）＞廣寧紅花油茶（50.00%），高州油茶芽苗砧成活率最高，與岑軟3號差異不顯著，但顯著高于其他3種油茶（p＜0.05），且極顯著高于普通油茶和廣寧紅花油茶（p＜0.01）；廣寧紅花油茶成活率最低，極顯著低于其他4種砧木嫁接的成活率（p＜0.01）。表1不同砧木對嫁接苗成活率的影響砧木種類嫁接時間/d排序15304560高州油茶16.67±3.3465.56±5.09aA73.33±3.34aA83.33±3.34aA1廣寧紅花油茶0.0016.67±3.34bB36.67±6.67cC50.00±5.77dD5普通油茶0.000.0040.00±5.77cC63.33±3.34cBC4岑軟2號0.0017.78±6.94bB53.34±5.77bB70.00±8.82bcAB3岑軟3號0.0020.00±3.33bB61.11±1.92bAB79.44±5.85abA2砧木與接穗親和性的差異，在芽苗砧嫁接中極易造成嫁接苗“大小腳”現象。實際生產中，通過嫁接苗結合口上下部位莖的直徑比來判斷嫁接親和性的強弱，比值越接近1，說明砧穗同步生長，親和性越好。在不同時間點測定接穗與砧木的直徑，并計算穗砧直徑比，結果如表2。嫁接30d后，各組合間穗砧直徑比在0.83~1.40之間，最大為岑軟2號，最小為廣寧紅花油茶，兩者差異達到極顯著水平（p＜0.01）；嫁接150d，穗砧比在0.92~1.10之間，最大為岑軟3號，最小為廣寧紅花油茶，兩者差異達到極顯著水平（p＜0.01）；各組合間穗砧直徑比隨著時間逐漸趨近于1。表2嫁接苗穗砧直徑比變化情況砧木種類嫁接時間/d306090150高州油茶1.24±0.11abA1.21±0.08abA1.16±0.04abA1.04±0.04abA廣寧紅花油茶0.83±0.02cB0.85±0.03cB0.90±0.05cB0.92±0.03cB普通油茶1.18±0.16bA1.09±0.09bA1.07±0.08bA1.03±0.01bA岑軟2號1.40±0.03aA1.26±0.11aA1.16±0.05abA1.08±0.03abA岑軟3號1.37±0.02aA1.28±0.03aA1.20±0.06aA1.10±0.05aA嫁接60d后，統計各組嫁接苗新梢生長形態指標，結果見表3。廣寧紅花油茶芽苗砧抽梢長度最長，其次為高州油茶和岑軟3號油茶芽苗砧，三者新梢長度在6.03~6.17cm之間，差異不顯著；新梢長度最短為岑軟2號，顯著短于前三者（p＜0.05）。新稍直徑最大的為廣寧紅花油茶芽苗砧（1.95mm），其次是高州油茶和岑軟2號，三者差異不顯著。新稍直徑最小為普通油茶（1.76mm），與廣寧紅花油茶新梢直徑差異達到顯著水平（p＜0.05），但與其他3種砧木之間差異不顯著；各組平均葉片數均達5~6張，不同砧木之間差異不顯著。表3杜鵑紅山茶嫁接苗生長指標的平均值、多重比較及排序砧木種類成活率/%新梢長度/cm新梢直徑/mm新梢葉片數/張新葉SPAD值主根長/cm側根數量/條最長側根長/cm隸屬函數均值排序高州油茶83.33±3.34aA6.03±0.55abA1.86±0.07abA5.83±0.76aA53.83±1.35bAB5.10±0.10aA32.00±4.58aA3.40±0.17bB0.751廣寧紅花油茶50.00±5.77dD6.17±0.71aA1.95±0.09aA5.67±0.58aA57.67±1.50aA3.40±0.23bC12.00±4.00cB4.46±0.22aA0.572普通油茶63.33±3.34cBC5.07±0.64bcAB1.76±0.10bA5.00±1.00aA51.43±1.66bcBC5.07±0.29aA29.00±3.61abA3.35±0.08bB0.414岑軟2號70.00±8.82bcAB4.40±0.20cB1.85±0.09abA5.67±0.58aA49.30±0.62cdC4.03±0.40bBC21.33±4.62bAB3.22±0.38bcB0.355岑軟3號79.44±5.85abA6.03±0.59abA1.79±0.06bA6.17±0.29aA48.30±2.01dC4.83±0.65aAB25.67±3.21abA2.80±0.26cB0.563綜上結果顯示，嫁接成活率由高到低排序為：高州油茶（83.33%）＞岑軟3號（79.44%）＞岑軟2號（70.00%）＞普通油茶（63.33%）＞廣寧紅花油茶（50.00%）；各組合間穗砧直徑比接近于1，同步生長性較好；對各指標綜合進行隸屬函數分析表明，嫁接苗生長指標由高到低排序為：高州油茶＞廣寧紅花油茶＞岑軟3號＞普通油茶＞岑軟2號。綜合分析結果認為，5種供試油茶與杜鵑紅山茶都具有一定的親和性，其中高州油茶與杜鵑紅山茶砧穗親和性最佳。（5）栽培基質配方試驗于2019年3月進行，嫁接180天后統計試驗結果。表4混合基質組分及比例基質號體積比泥炭珍珠巖椰糠樹皮黃心土T111110T210120T311200T412010T520211T621021T722102T810102CK00001表5基質種類對杜鵑紅山茶嫁接苗生長指標的影響基質種類株高(cm)地徑(cm)成活率(%)T115.82±2.510.33±0.0296.67T219.35±1.670.40±0.04100T322.48±2.360.42±0.04100T417.99±2.580.36±0.03100T520.68±2.760.43±0.04100T616.57±1.920.38±0.03100T718.92±2.490.37±0.0496.67T825.82±0.870.56±0.02100CK17.26±2.240.35±0.0393.33從表5看出，不同栽培基質中杜鵑紅山茶種子苗移栽的生長情況差異明顯。各基質中，基質（T8）由黃心土、泥炭、椰糠按體積比2:1:1混合均勻配置的栽培基質，嫁接苗的株高、地徑等指標均最高，均高于其他栽培基質。表明此栽培基質適合用于杜鵑紅山茶嫁接的種植。在此試驗結果的基礎上，并進行不同季節的重復試驗，試驗結果重復性高，結合實際情況來看，采用該基質，嫁接苗抽芽較快，后期生長較快。經土壤理化性質測定，此栽培基質的pH、通氣孔隙度、持水孔隙度、EC以及氮磷鉀等理化指標的含量有利于杜鵑紅山茶嫁接苗生長，該基質具有良好的孔隙結構和較強的保水能力，養分供應充足，能夠較長時間的緩慢釋放養分。綜上說明，該基質有利于杜鵑紅山茶嫁接苗的生長，可以應用于生產實踐中。經土壤理化性質測定，此栽培基質的pH、通氣孔隙度、持水孔隙度、EC以及氮磷鉀等理化指標的含量有利于杜鵑紅山茶嫁接苗生長，該基質具有良好的孔隙結構和較強的保水能力，養分供應充足，能夠較長時間的緩慢釋放養分。綜上說明，該基質有利于杜鵑紅山茶嫁接苗的生長，可以應用于生產實踐中。以發酵腐熟的廄肥或有機肥作為基肥，將基肥和配制好的栽培基質按體積比1：20的比例混合均勻。充分發酵腐熟的基肥可防止病蟲害滋生，該比例比例對杜鵑紅山茶幼苗生長較為合適，因幼苗根系較嫩，比例過高會對幼苗根系形成肥害。（6）幼苗栽培容器育苗容器采用軟質黑色塑料育苗袋或白色無紡布育苗袋，口徑6～10cm，高度10～12cm，此容積規格的育苗袋滿足了幼苗根系伸長，同時擺放不占空間。（7）不同施肥處理方式對杜鵑紅山茶苗木生長的影響試驗于2017年9月～2019年3月在廣西農業科學院花卉研究所觀賞園藝研發與推廣中心平頂網進行，測定時間為2019年3～4月。育苗容器為塑料雙色花盆，規格為盆口直徑24cm，袋高21cm，每盆一株。放置于露天區域，擺放區域地面鋪設防草地布，夏季用透光率70%的遮光網遮陰。試驗期間，所有參試苗木采用統一的管護措施。試驗處理方式見表7。表6不同施肥處理試驗處理施肥方式具體方法1（CK）不施肥澆與其他處理等量的水2一直施氮肥每30天澆施一次1000倍尿素水溶液3一直施磷鉀肥每30天澆施一次1000倍磷酸二氫鉀水溶液4一直施氮磷鉀肥每30天施用一次1000倍水溶性復合肥，N:P:K比例為15:15:1553～4月：每30d用1000倍水溶性肥澆灌根部一次，每30d用1500倍水溶性復合肥噴施葉面一次，該水溶性肥中N:P2O5:K2O的比例為30:10:10。5～8月：每20d用1000倍水溶性肥澆灌根部一次，每30d用1200倍水溶性復合肥噴施葉面一次，該水溶性肥中N:P2O5:K2O的比例為10:30:20。9～11月，每45d用800倍水溶性肥澆灌根部一次，每30d用1000倍水溶性復合肥噴施葉面一次，該水溶性肥中N:P2O5:K2O的比例為15:20:25。12～2月：每60d用1000倍水溶性肥澆灌根部一次，該水溶性肥中N:P2O5:K2O的比例為15:15:15。測定時間為2016年3～4月，測定株高、地徑、葉片SPAD值、分枝數以及成活率。4種施肥方式的各測定指標均高于對照，表明施肥在杜鵑紅山茶栽培育苗中的重要性。但不同的施肥方法對各測定指標的影響是不同的。株高生長在不同的施肥方式處理中表現為：5>4>2>3>1；地徑生長在不同的施肥方式處理中表現為：5>2>3>4>1；葉片SPAD值在不同的施肥方式處理中表現為：5>4>2>3>1；分枝數在不同的施肥方式處理中表現為：5>4>3>2>1；不施肥的處理苗木的成活率低于施肥處理。表7施肥方式對杜鵑紅山茶生長指標的影響施肥方式株高(cm)地徑(cm)分枝數(條)成活率(%)1（CK）18.53±3.420.36±0.032.2±0.793.33224.35±2.830.48±0.043.1±0.696.67327.48±1.9