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文檔簡介

廣西地方標準《百香果組培苗生產技術規程》

(征求意見稿)編制說明

一、任務來源、起草單位、主要起草人

根據《廣西壯族自治區市場監督管理局關于下達2022年廣西地

方標準制修訂項目計劃的通知》(桂市監函〔2022〕1903號)文件

精神,由廣西壯族自治區農業農村廳提出,廣西壯族自治區農業科學

院起草廣西地方標準《百香果組培苗生產技術規程》(項目編號:

2022-1058)。標準主要起草人員見下表:

參與編制標

姓名單位職稱

準分工情況

劉潔云廣西壯族自治區農業科學院副研究員主持編寫

牟海飛廣西壯族自治區農業科學院研究員參與編寫

張英俊廣西壯族自治區農業科學院農藝師參與編寫

黃偉華廣西壯族自治區農業科學院副研究員參與編寫

廣西壯族自治區中國科學院廣西

韋毅剛研究員參與編寫

植物研究所

田青蘭廣西壯族自治區農業科學院助理研究員參與編寫

吳艷艷廣西壯族自治區農業科學院副研究員參與編寫

韋紹龍廣西壯族自治區農業科學院研究員參與編寫

王舉兵廣西壯族自治區水果技術指導站正高級農藝師參與編寫

廣西壯族自治區中國科學院廣西

溫放研究員參與編寫

植物研究所

廣西壯族自治區中國科學院廣西

符龍飛副研究員參與編寫

植物研究所

廣西壯族自治區中國科學院廣西

辛子兵副研究員參與編寫

植物研究所

韋弟廣西壯族自治區農業科學院副研究員參與編寫

鄭吉祥廣西壯族自治區水果技術指導站高級農藝師參與編寫

廣西壯族自治區中國科學院廣西

廖庭助理研究員參與編寫

植物研究所

朱江廣西壯族自治區水果技術指導站助理農藝師參與編寫

二、制定標準的必要性和意義

百香果,又名雞蛋果、西番蓮果,因其果汁能散發出香蕉、草莓、

菠蘿等多種水果香味而得名,素有“果汁之王”的美譽。百香果原產于

美洲,現廣泛種植于熱帶、亞熱帶地區。近年來隨著我國消費者對百

香果的認可,鮮食市場、加工市場對百香果的需求量持續攀升,推動

著百香果種植面積的不斷擴大。百香果自1985年引進我區,發展至

今種植面積和產量均躍居全國第一,成為我區特色產業之一。

廣西地處亞熱帶地區,種植百香果氣候條件優越,自1985年初

次引種以來,經過政府引導和自發種植,于2012前后開始大規模發

展,至2019年種植面積躍居全國第一,達到30余萬畝,種植百香果

已成為廣西貧困地區農民脫貧致富的有效途徑。目前,制約廣西百香

果產業持續發展的首要問題是百香果病毒病和莖腐病,其中莖腐病可

以通過種植抗莖腐病的品種做砧木的嫁接苗來解決;而百香果病毒病

由于藥劑防治效果差,只能通過種植無病毒苗和建立有效的綜合防控

體系技術來解決。前人研究表明,可感染百香果的病毒近22種,其

中對生產危害較大的有6種,包括東亞百香果病毒、百香果斑紋病毒、

夜來香病毒、黃瓜花葉病毒、圣誕紅卷葉病毒和木瓜卷葉病毒。百香

果感染病毒后葉片會出現嵌紋或花斑,影響百香果植株生長,果實呈

現萎縮畸形硬化、果腔縮小和果汁減少,造成產量和品質下降,最終

導致產量低、質量差、收益減小,嚴重影響了廣西百香果產業的發展。

目前,百香果種苗的繁殖方式主要有3種:用種子播種繁殖;用

藤蔓扦插繁殖;用接穗嫁接繁殖。其中,種子播種繁殖,浪費果實、

生長周期長、用工量大,植株性狀分離;扦插繁殖,需要大量滕蔓、

易傳播病害、加快品種退化;嫁接繁殖,種苗質量好,但占地面積大、

成苗周期長、種苗價格高。3種繁殖方法均存在占地、耗時、周期長、

生長成本高等問題,若操作不當會加快品種退化、種苗帶毒、病害增

加,致使產量降低,這些問題影響和制約了百香果的產量及品質的形

成。利用組織培養方法對百香果進行種苗繁育,可以對百香果植株進

行脫毒,克服無性繁殖率低、繁殖速度慢的缺點,加上組織培養不受

季節和氣候等因素的制約,具有節約土地資源,速度快,質量高,技

術密集,便于集約化管理和工廠化生產的優點。近幾年廣西百香果生

產技術取得了階段性研究進展,形成了初步的配套技術,但距離標準

化、產業化的要求尚有較大差距,尚未形成一套行之有效的百香果安

全高效栽培技術體系,培育無毒種苗成為解決該問題的重要手段。目

前廣西各地的育苗以小散戶為主,大多數育苗場地條件落后,育苗技

術不規范,種苗質量難以保證,種苗攜帶病毒、病菌和線蟲等情況非

常普遍。農戶自行扦插繁殖苗木,種苗質量難以保證,掛果后果實偏

小,商品果率低,極大地降低了經濟效益。現階段,有關百香果組培

苗生產技術還未形成一套標準的防控措施,健康種苗的快速繁育已成

為制約廣西百香果高產優質生產的關鍵因素之一。制定團體標準《百

香果組培苗生產技術規程》是一種科學管理的有效手段,通過對育苗

環境及設施、生產管理、組織培養、移栽和出圃等階段進行規定,規

范指導百香果組培苗的生產,旨在獲得健康脫毒的百香果種苗,解決

當下脫毒百香果苗短缺問題,彌補當下百香果組培苗生產領域的空白,

促進廣西百香果產業的綠色可持續發展。

三、主要起草過程

(一)成立標準編制工作組

廣西地方標準《百香果組培苗生產技術規程》項目任務下達后,

成立了標準編制工作組,制定了標準編寫方案,明確任務職責,確定

工作技術路線,開展標準研制工作,具體標準編制工作由廣西壯族自

治區農業科學院等單位相關人員配合。

(二)收集整理文獻資料

目前國內關于百香果組培苗生產的相關國家標準、行業標準、地

方標準具體列出如下:

DB45/T2094-2019黃金百香果栽培技術規程

DB45/T2306-2021百香果無病毒健康種苗栽培技術規程

DB45/T1811-2018富硒百香果生產技術規程

(三)研討確定標準主體內容

標準編制工作組在對收集的資料進行整理研究后,召開了標準編

制會議,對標準的整體框架進行了研究,并對標準的關鍵性問題進行

了初步探討。經過研究,標準的主體內容包括術語和定義、場地要求、

外植體選擇與處理、組培苗培育、組培苗移栽。

(四)形成文本草案、征求意見稿、送審稿

2021年5月~2022年1月,標準起草工作小組進行了廣泛實地

調研工作,查閱了大量的國內外文獻資料,對百香果組培苗生產技術

進行系統總結,并于廣西南寧市、欽州市、玉林市、百色市等地建立

百香果生產的種植示范基地。經編制組反復討論,形成了標準的基本

構架,對主要內容進行了討論并對項目的工作進行了部署和安排。在

前期工作的基礎之上,通過理清邏輯脈絡,整合已有的參考資料中有

關百香果組培苗生產技術,并結合百香果生產實際要求的基礎上,按

照簡化、統一等原則編制完成廣西地方標準《百香果組培苗生產技術

規程》(草案)。

2022年8月~2023年4月,編制組再次深入南寧市、欽州市、

玉林市、百色市等百香果產區進行分組調研,并向百香果組培苗生產

科研單位、企業征求生產技術意見。針對百香果組培苗在栽培過程中

出現的不同公司生產組培苗的農藝性狀、產量和質量參差不齊等問題,

本課題組對外植體選擇與處理、組培苗培育、移栽等生產過程進行大

量試驗,以生根組培苗質量及移栽成活率為評價指標,取得階段性進

展,確立了百香果組培苗生產程序。根據反饋意見及試驗成果,標準

編制工作組多次召開會議,對標準草案進行反復修改和研究討論,形

成廣西地方標準《百香果組培苗生產技術規程》(征求意見稿)和(征

求意見稿)編制說明。

四、制定標準的原則和依據,與現行法律、法規的關系,與有關

國家標準、行業標準的協調情況

(一)制定標準的原則和依據

1.實用性原則

本文件是在充分收集相關資料和文獻,分析廣西百香果組培苗生

產特點,在現有國家、行業標準相關組培苗成產要求的基礎上,結合

多年實踐而總結起草的。符合當前百香果栽培的要求,有利于行業的

長遠發展,具有較強的實用性和可操作性。

2.協調性原則

本文件編寫過程中注意了與廣西百香果組培苗生產相關法律法

規的協調問題,在內容上與現行法律法規、標準協調一致。

3.規范性原則

本文件嚴格按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分:

標準的結構和編寫》的要求和規定編寫本標準的內容,保證標準的編

寫質量。

4.前瞻性原則

本文件根據當前廣西區內百香果生產單位,種苗質量參差不齊,

掛果后果實偏小,商品果率低、經濟效益差的現狀,同時考慮百香果

組培苗生產技術的需求,在標準中體現了個別特色性、前瞻性和先進

性條款,作為對百香果組培苗生產的指導。

(二)與現行法律、法規的關系

本標準的內容與現行的法律、法規及強制性標準無沖突,標準的

編寫符合GB/T1.1-2020的要求。

(三)與有關國家標準、行業標準的協調情況

經查閱,國內與百香果有關的國家、行業標準有:GB/T

40748-2021《百香果質量分級》、GH/T1342-2021《百香果冷鏈流通

技術規程》。以上標準并未涉及百香果組培苗的生產。

五、主要條款的說明,主要技術指標、參數、試驗驗證的論述

廣西地方標準《百香果組培苗生產技術規程》主要內容包括場地

要求、外植體選擇與處理、組培苗培育、組培苗移栽。

(一)術語和定義

變異率:形態特征顯著有別于原品種的變異株數與植株總數的比

率。(植物組織培養,陳世昌、徐明輝,2016)

(二)百香果組培苗生產

1.外植體的選擇是組培瓶苗培育的重要步驟,外植體品質的優

劣關系到組培瓶苗品質的優劣。在外植體選擇時,需要選取具有原品

種典型性狀健康植株的無病蟲害、新抽生3d~7d的枝條,以確保外

植體在培養基上的萌發率和組培苗的品質優良。

2.外植體清洗是百香果組培苗技術體系建立關鍵的第一步。首

先1%~2%的洗潔精或洗衣粉溶液浸泡20min~30min(清洗莖段表

面的灰塵和附著物),流水沖洗30min~40min,將枝條剪成3cm~8

cm含一個節的小段。(因為百香果品種多為雜交種,如果用種子作為

外植體后代會出行性狀分離,用莖段繁殖能確保后代的生物學特性和

親本保持一致)

3.外植體滅菌,在超凈工作臺上,將外植體利用升汞加

“Tween-80”表面活性劑滅菌6~8min,無菌水沖洗3~5次,再用無

菌紙吸干表面水分,污染率控制在20%以下。

4.培養條件

培養室溫度24℃~30℃,濕度低于50%,光照強度2000Lx~

3000Lx,每天光照時間10h~12h。不同的百香果品種對溫度的要

求存在差異,紫果種和黃金百香果適宜溫度為24℃~30℃,哥倫比

亞熱情果等喜冷涼的品種適宜溫度為20~24℃。適當增加光照強度

及時長有利于百香果組培苗生長,光照太弱、時長過短植株生長緩慢,

且易出現玻璃化植株。

5.初代培養

初代培養是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養。

因此,較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養,此時的細胞保持原有

細胞的基本性質。接種時應及時清除污染材料,避免污染整個培養瓶,

導致失敗。

6.繼代增殖培養

繼代增殖培養是組培苗生產的關鍵步驟,增殖系數大小直接決定

生產的成本高低,培養基中植物生長調節劑濃度配比和培養條件對組

培苗增殖系數起著決定性的作用。在超凈工作臺上,切割初代或繼代

培養誘導的幼芽,切割成含1~2個節的小段,轉接至增殖培養基上,

每瓶接種5~8段,培養20d~30d。

7、生根培養

生根培養是組培瓶苗培育的最后一個環節,也是組培瓶苗培育成

功與否的關鍵步驟,百香果經過壯苗后的芽在不同的培養基的根系大

小、根的數量、須根上是否有根毛等指標和生長情況都受培養基中的

植物生長調節劑影響。組培生根苗培養時間在25~40d,符合標準后

判定合格。

(三)初代培養

1.不同莖段處理:大田莖段、大棚內莖段、莖尖、不同成熟度

的莖段、不同莖段長度;

2.不同消毒時間處理:以0.1%HgCl2為消毒劑,設置了4、6、

8、10min時間處理。

3.不同初代培養基配方處理

經統計,試驗過的培養基配方有99種,激素包括:6-BA、NAA、

KT、IBA、CPPU、TDZ、IAA、AS、生物素D、GA3;培養基包括:

MS、1/2MS、3/2MS、2MS、MS改良;糖25g/L、30g/L,以及添

加谷氨酸、活性炭、瓊脂或者卡拉膠等。

4.試驗效果

1)將莖段材料扦插種植于大棚中用于組培外植體取材,這樣可

提高外植體潔凈度,減少污染及病毒攜帶。

2)目前外植體材料的處理步驟為:從大棚中選取健壯的莖段作

為外植體,以帶芽的為最佳,剪去葉片,在洗潔精溶液中浸泡15min,

流水沖洗30min,在超凈工作臺上剪成小段后,0.1%HgCl2中浸泡6~

8min,無菌水沖洗3~5遍后接入初代培養基。

3)接種要求

莖段的腋芽基部要與培養基接觸,有助于腋芽吸收培養基養分。

外植體盡量接長一點,一般在3~8cm,在芽沒辦法吸收培養基營養

之前,長莖段可為其提供更多營養。用250mL的三角瓶作為培養容

器,瓶口塞棉塞,包牛皮紙。或者帶透氣瓶蓋的廣口瓶。目前三角瓶

和廣口瓶都有用于材料培養,材料生長效果存在差異,生長效果依次

為三角瓶>帶透氣瓶蓋廣口瓶>帶不透氣瓶蓋廣口瓶。

(四)繼代增殖培養基篩選試驗

經試驗多種不同配方后,篩選出10個繼代增殖培養基配方進行

連續多代觀察,同時對比組培苗在不透氣廣口瓶、透氣廣口瓶、三角

瓶中的生長情況。

試驗效果:不同品種對激素濃度的要求存在差異,大黃金需6-BA、

IBA濃度高于臺農1號、小黃金、和砧木黃果,小黃金需6-BA、IBA

濃度最低,各品種增殖系數在2~4倍,苗莖段較粗壯,葉片翠綠。

繼代增殖過程中若激素濃度過高,組培苗會出現葉片卷曲,植株較矮

的癥狀,更嚴重的會出現玻璃化。

(五)生根培養基篩選

采用生長素IAA、NAA、IBA及其中兩者的組合開展生根試驗,

一共做了13個配方。

試驗效果:各處理的生根率在40-100%,MS+IBA0.5mg/L+糖

30g/L+瓊脂6g/L處理生根率100%。

圖1百香果組培苗生根情況

(六)生根苗移栽

移栽方法:從容器中取出組培苗,用清水洗去根部培養基,移栽

至裝滿椰糠的托盤中,移栽后淋一次1000倍噁霉靈,之后隔10d淋

一次上述溶液。30d后,植株長至5cm~7cm,將小苗移栽至盛有

珍珠巖:育苗基質比例為1:5的8cm×8cm的營養杯中,每個營養

杯種植1株,移栽后淋一次1000倍惡霉靈。將生根苗分為有根、無

根在不不同季節進行移栽。春季移栽成活率最高。春季移栽成活率見

表4。

表4百香果組培生根苗移栽成活情況

有根苗有根苗移栽無根苗無根苗移栽

品種存活數存活數

總數成活率(%)總數成活率(%)

小黃金433172.099

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