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文檔簡介
小結(jié)
1.1單位和負(fù)號
2.1分析不同處理氣孔開閉程度不同的原因.
2.2結(jié)果分析結(jié)論
葉綠體色素及其理化性質(zhì)葉綠素的定量測定實驗意義綠色植物的光合作用是在葉綠體中的葉綠體色素中進(jìn)行的,了解葉綠體色素的組成、性質(zhì)及測定對于理解光合作用的本質(zhì)很有幫助。實驗原理
1.1葉綠素:主要包括葉綠素a和b分子式:ChlaC55H72O5N4Mg
ChlbC55H70O6N4Mg結(jié)構(gòu)式:卟啉環(huán)化合物四個吡咯環(huán)與四個=CH-組成一個大環(huán),共軛雙鍵形成一個大π鍵,環(huán)中央有一個鎂原子,卟啉環(huán)決定葉綠素顏色,也是吸收可見光,并以誘導(dǎo)共振方式傳遞光能的根本所在,葉醇尾是由四個異戊二烯單位組成的雙萜脂溶性:難溶于水,僅溶于酒精、丙酮、已醚、已烷等有機溶劑卟啉環(huán)頭部呈極性,具親水性;葉醇尾部具親脂性
類胡蘿卜素胡蘿卜素橙黃色不溶于水
葉黃素鮮黃色溶于有機溶劑
與水混溶的有機溶劑:95%乙醇;80%丙酮CaCO3?石英砂?一、葉綠體色素的提取二、葉綠素的熒光現(xiàn)象葉綠素分子對光的吸收及能量的釋放示意圖葉綠素的熒光現(xiàn)象反射光(熒光)透射光記錄觀察到的現(xiàn)象并說明原因三、葉綠素的皂化作用C32H30ON4MgCOOCH3COOC20H39+2KOHC32H30ON4MgCOOKCOOK+C20H39OH+CH3OH四、葉綠素與類胡蘿卜素的吸收光譜1bChla2Chla(430,670)3Chlb(450,650)4Bilin5β-Car.5
類胡蘿卜素的吸收光譜葉綠素的吸收光譜說明原因五、氫和銅對葉綠素中鎂的取代鹽酸醋酸銅葉綠素中的鎂可以被氫離子所取代而成褐色的去鎂葉綠素。去鎂葉綠素遇銅則成為銅代葉綠素,銅代葉綠素很穩(wěn)定,在光下不易破壞,故常用此法制作綠色多汁植物的浸漬標(biāo)本。葉綠素去鎂葉綠素HClCu2+銅代葉綠素色素提取熒光皂化吸收代替方法與步驟結(jié)果說明現(xiàn)象;解釋原因;書后思考題。注意事項:所用試劑帶有強烈的氧化性和腐蝕性!!有顏色的試劑!!葉綠素的定量測定原理
根據(jù)郎伯-比爾定律,有色溶液在某一特定波長下的光密度D與其濃度C及液層厚度L成正比.
D=kCLk為比例系數(shù)。當(dāng)溶液濃度以重量百分濃度為單位,液層厚度為1cm時,k稱為比吸收系數(shù).葉綠素的定量測定2Chla3Chlb5葉綠素a、b在紅光區(qū)的最大吸收峰分別位于663nm和645nm。在葉綠素濃度為g/L時663nm下:Chla80%丙酮k為80.02
Chlb80%丙酮k為9.27645nm下:Chla80%丙酮k為16.75
Chlb80%丙酮k為45.6光密度具有加和性質(zhì),因此可寫出以下方程
D663=82.04Ca+9.27Cb
D645=16.75Ca+45.6Cb解方程得:Ca=12.7D663-2.59D645Cb=22.9D645-4.67D663注意:在此式中葉綠素濃度單位為mg/L。
CT=Ca+Cb=20.2D645+8.02D663葉綠素a、b在652nm處有相同的比吸收系數(shù)(34.5),也可在此波長下測定一次光密度D652,求出葉綠素a、b的總量。CT=D652X100034.5實驗步驟1.提取0.5g菠菜葉片80%丙酮碳酸鈣和石英砂定容至25ml2.稀釋
根據(jù)具體情況調(diào)整稀釋倍數(shù)。3.測定:倒入1cm比色杯中,在分光光度計上測定645nm,663nm和652nm下的光密度值.重復(fù)測定2次,取平均值.4.計算:根據(jù)上述計算公式計算葉綠素濃度.根據(jù)下式計算葉綠素在葉片中的含量:葉綠素含量(mg/g鮮重)=CT
×提取液總量×稀釋倍數(shù)樣品重(g)×1
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