體外放射配基結合分析及臨床應用盧漢平中山大學基礎醫學院實驗核醫學教研室E-mail:體外放射配基結合分析及臨床應用受體放射配基結合分析

RadioligandBindingAssayofReceptor,RBA

用放射性核素標記配基與相應的受體行特異性結合反應從而對受體進行定性和定量的方法。

分離配基受體復合物放射配基+受體分子分析受體數量和親和力體外放射配基結合分析及臨床應用RBA的分類定性RBA：通過反應的量效關系及某些參數的變化等來判斷受體的類型、單位點或多位點系統、受體與配基相互作用的特點(可逆或不可逆，受體間的合作作用)。定量RBA：在已知反應性質的基礎上，通過結合反應分析組織或細胞中受體數目（bindingsite,結合位點數）。

體外放射配基結合分析及臨床應用受體的免疫組織化學Immunohistochemistry優點：強特異性（單個氨基酸水平）高敏感性高分辨力缺點：半定量無法測定親和力體外放射配基結合分析及臨床應用RBA相關的基本慨念

受體(receptor,R)

配基(ligand,L)：激動劑、激動劑、內源性配基體外放射配基結合分析及臨床應用

受體與配基結合反應的質量作用定律

K1V1[R]+[L][RL]EK2V2KD:平衡解離常數

[RT]:受體初始濃度(總濃度)[LT]:配基初始濃度

[RL]2-[RL][RT+LT+Kd]+[RT][LT]=0(Goldstein)體外放射配基結合分析及臨床應用

受體與配基結合反應的主要特點：可飽和性(Saturability)

可逆性(Reversibility)特異性(Specifity)與生理效應一致性。體外放射配基結合分析及臨床應用受體的分類

四級分類：類(class)亞類（subclass）型

(type)亞型

(subtype)

體外放射配基結合分析及臨床應用

四大類膜受體示意圖體外放射配基結合分析及臨床應用五類受體的名稱12345配基門控離子通道受體

G蛋白偶聯7次跨膜受體

有酶結構的單次跨膜受體無酶結構的單次跨膜受體核受體體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用RBA的基本原理

體外放射配基結合分析及臨床應用飽和曲線體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用受體最大結合容量的表示方式體外放射配基結合分析及臨床應用RBA的基本方法體外放射配基結合分析及臨床應用配基的選擇標記配基：高親和力、高特異性高比活度高放化純度（98%）化學穩定性。非標記配基高親和力高濃度體外放射配基結合分析及臨床應用受體顯像配基基本要求半衰期適中、發射正電子或單光子、SA〉3.7TBq/mmol易穿透生物屏障代謝行為和作用機制清楚特異性高親和力高選擇性強標記后具完整的生物活性和藥理活性動態顯像時用生理數學模型可作受體密度的模擬定量分析體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用受體在醫學研究中的應用

疾病時受體的變化：受體數目的變化受體親和力的變化受體特異性的變化受體的自身抗體受體-效應器偶聯機理異常體外放射配基結合分析及臨床應用受體理論在疾病研究中的應用探討疾病的發病機理受體的變化尋找疾病的病因根據受體測定結果選擇治療方案受體變化作為疾病預后指標尋找防治措施

體外放射配基結合分析及臨床應用選擇治療方案

344例乳腺癌內分泌治療效果與ＥＲ、ＰＲ的關系___________________________________________________________受體狀態治療例數有效例數有效率%____________________________________________________________ER+、PR-911213.2ER-、PR+10330.0ER+、PR-1253729.6ER-、PR+1188975.4____________________________________________________________體外放射配基結合分析及臨床應用

ＥＲ和ＰＲ與乳腺癌化療效果的關系(136例)____________________________________________________________受體狀態治療例數有效例數有效率%____________________________________________________________ER+25312.0PR+800ER-453475.6PR-342264.7ER+、PR+242187.5____________________________________________________________體外放射配基結合分析及臨床應用

32例乳腺癌ER狀態與激素治療關系____________________________________________________________cytosol/nuclear治療例數反應例數無反應例數____________________________________________________________

＋／＋22184

－／－615

＋／－303

－／＋101____________________________________________________________體外放射配基結合分析及臨床應用

乳腺癌胞漿ＥＲ不同水平與激素治療的關系____________________________________________________________

ER含量(fmol/mg.Pro)有效率%____________________________________________________________

＞100813～10045

＜30____________________________________________________________

體外放射配基結合分析及臨床應用

乳腺癌ＥＲ狀態與內分泌治療效果的關系____________________________________________________________

有效例數/治療例數藥物----------------------ER+ER-____________________________________________________________Tamoxifen32/671/5Nafoxidene7/100/8Stilboostrol9/121/17Dophrectomy28/432/74Adrenalectomy15/221/9Androgens10/282/22Glucocorticoids15/320/19Hypophsectomy9/141/12------------------------------------------------------------

總有效率128/235(54.5%)7/176(4%)____________________________________________________________

體外放射配基結合分析及臨床應用Degenshein根據乳腺癌受體表達情況和癌轉移情況，提出如下治療方案，并得到臨床廣泛采用

ＥＲ＋，腋下淋巴結無轉移，手術治療外可不用內分泌治療，要作定期復查；ＥＲ＋、腋下淋巴結有轉移，要加激素治療或預防性去勢ＥＲ－、腋下淋巴結無轉移、絕經前患者，術后加化療晚期癌或復發癌，ＥＲ＋ＰＲ＋，內臟無轉移者，用激素治療；內臟有轉移者，用激素治療再加化療。體外放射配基結合分析及臨床應用ER表達與內分泌治療不相符：腫瘤異質性腫瘤組織類固醇代謝酶的滅活作用受體本身缺陷內存激素變化的影響雌抑素(estrocolyone)失活受體陽性的標準不準確和不一致檢測受體的標本的不均一性和代表性。腫瘤的病因的復雜性或多元體外放射配基結合分析及臨床應用神經系統疾病與受體帕金森氏病亨廷頓氏病癲癇憂郁精神分裂癥體外放射配基結合分析及臨床應用體外放射配基結合分析及臨床應用帕金森氏病

帕金森氏病患者腦中受體的變化受體的種類紋狀體黑質多巴胺D1受體↑／＝多巴胺D2受體未治療例↑左旋多巴治療↓／＝

mACh受體↑／↓

5-HT受體＝

GABA受體＝↓腦啡肽受體↓（只有被殼↑）阿片(納洛酮)受體↓神經加壓索受體↓體外放射配基結合分析及臨床應用亨廷頓氏病

亨廷頓氏病患者死后腦中受體的變化大腦皮質尾狀核被殼蒼白球黑質GABA-R＝↓↓↓↑↑BDZ-R＝/↑↓↓↑DA-R＝↓↓D1-R↓↓D2-R↓＝mACh-R＝↓↓↓↓↓Glu-R＝↓↓↓↓↓

↓↓～↓↓：明顯減少，↓：減少，＝：不變，↑：增加GABA-R=Γ-氨基丁酸受體，BDZ-R=苯二氯卓受體，DA-R＝多巴胺受體，D1＝D1受體，D2＝D2受體，mACh-R＝蕈毒堿樣乙酰膽堿受體，Glu-R＝谷氨酸受體體外放射配基結合分析及臨床應用癲癇癲癇患者的病灶組織、脊髓液中神經遞質及受體的變化病灶組織脊髓液

多巴胺(DA)↓

高香草酸(HVA)↓＝去甲腎上腺素(NA)↑↑

神3-甲氧基-4-羥基苯乙二醇(MHPG)＝

5-羥基吲哚醋酸(5-HIAA)↑↓＝經乙酰膽堿(Ach)↑y-氨基丁酸(GABA)↑↓＝↓＝遞谷氨酸脫羧酶(GAD)↓＝

GABA轉氨酶＝質牛磺酸↓＝甘氨酸↑生長激素抑制素＝

[3H]GABA受體↓受α1-腎上腺素受體↓體苯二氮卓受體＝PET研究苯二氮卓受體↓↓：減少，↑：增加，＝：不變。PET＝電子發射斷層掃描體外放射配基結合分析及臨床應用憂郁體外放射配基結合分析及臨床應用精神分裂癥精神分裂癥患者死后腦內多巴胺受體的變化配體配體濃度腦部位癥例數置換濃度結果[3H]-螺環O.8nM尾狀核19丁克嗎↑哌丁苯(其中不服藥5)(1uM)

被殼↑側坐核↑

O.5nM側坐核26ADTN*→(10uM)

肉桂硫胺→

(1uM)O.5nM尾狀核服藥21丁克嗎Bmax↑，Kd↑

不服藥7(1uM)Bmax→，Kd↑

側坐核服藥13ADTNBmax↑，Kd↑

不服藥4(10uM)Bmax→，Kd→

尾狀核服藥12丁克嗎Bmax↑，Kd↑

不服藥4(1uM)Bmax→，Kd↑

側坐核服藥9ADTNBmax↑，Kd↑

不服藥13(10uM)Bmax→，Kd→

體外放射配基結合分析及臨床應用

精神分裂癥患者死后腦內多巴胺受體的變化配體配體濃度腦部位癥例數置換濃度結果

0.1nM尾狀核11丁克嗎↑被殼(1uM)Bmax↑，Kd→

顳皮質↑

O.1nM尾狀核6丁克嗎→被殼5(1uM)Bmax→，Kd→

前部扣帶圓6→1nM尾狀核9丁克嗎↑被殼(1uM)↑1nM尾狀核27丁克嗎↑