第二章第2節動物細胞工程第1課時：動物細胞培養從社會中來謝曉暉，1977年出生，福建農林大學畢業。畢業后毫不猶豫地選擇了入伍，最后也是被分配到了福建三明市的永安消防大隊。在部隊里謝曉暉表現良好，先后被任命為排長、作戰參謀，并被授予了中尉軍銜。2004年7月26日，一家中型民辦蚊香廠突發火災，救災過程中導致謝曉暉重度燒傷，燒傷面積高達75%。在治療大面積燒傷時，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進行自體移植。但對這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且會產生免疫排斥反應。思考：如何用自體皮膚的單個細胞培養出可供移植的皮膚？1.概念：2.原理：從動物體中取出相關的組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術。細胞分裂（增殖）3.目的：獲得細胞或細胞產物；不能獲得完整動物個體一、動物細胞培養的概述動物細胞培養實際上是在體外模擬體內的生理條件進行的培養，你認為體外培養動物細胞需要滿足哪些條件?糖類氨基酸無機鹽維生素無菌、無毒環境適宜的溫度、PH、滲透壓適宜的氣體環境動物細胞培養的條件營養條件其他條件二、動物細胞培養的條件【自主學習】閱讀教材P43—44，思考并回答相關問題：任務一1、根據動物細胞培養的概念初步構建動物細胞培養的流程2、在進行動物細胞培養時，你會選擇胚胎或幼齡動物組織的細胞還是老齡動物組織的細胞作為培養材料？為什么？培養前為什么要將動物組織分散成單個細胞？3、常用胰蛋白酶分散細胞，這說明細胞間的物質主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？4、體外培養動物細胞有哪些類型?5、細胞培養一段時間，分裂會受阻，這是為什么?怎樣解決這一問題?6、接觸抑制、原代培養、傳代培養的概念？7、傳代培養如何收集細胞？8、胰蛋白酶兩次處理的目的？

閱讀教材“動物細胞培養的過程”，思考、回答下列問題：二、動物細胞培養過程【合作探究】任務二分瓶取動物組織分散成單個細胞制成細胞懸液原代培養傳代培養傳代培養放入CO2培養箱中培養三、動物細胞培養過程取動物組織制成細胞懸液轉入培養液進行原代培養放入CO2培養箱中培養一般取材于動物胚胎或幼齡動物的組織、器官。其細胞生命力旺盛，分化程度低，分裂能力強。取動物組織分散成單個細胞制成細胞懸液原代培養傳代培養用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理分散成單個細胞便于從培養液中獲得營養，排出代謝廢物，利于繼續培養。細胞間的組要成分是蛋白質.胃蛋白酶不可以，pH不適宜2.在進行動物細胞培養時，你會選擇胚胎或幼齡動物組織的細胞還是老齡動物組織的細胞作為培養材料？為什么？培養前為什么要將動物組織分散成單個細胞？3、常用胰蛋白酶分散細胞，這說明細胞間的物質主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？制細胞懸液培養取動物組織分散成單個細胞制成細胞懸液原代培養傳代培養用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理加培養液4、體外培養動物細胞有哪些類型?①懸浮生長類：能夠懸浮在培養液中生長增殖。②貼壁生長類：需要貼附于某些基質表面才能生長增殖（細胞貼壁），大多數細胞屬于此類。細胞分裂受阻懸浮生長貼壁生長原因原因密度過大、有害代謝物積累和營養物質缺乏等接觸抑制解決辦法在培養皿或培養瓶中5、細胞培養一段時間，分裂會受阻，這是為什么?怎樣解決這一問題?密度過大、有害代謝物積累和營養物質缺乏等，貼壁生長增殖還會出現接觸抑制現象。傳代培養判斷依據：是否分瓶！6、原代培養：傳代培養：指動物組織經處理后的初次培養分瓶后的細胞培養。5、接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞通常會停止分裂二者如何區分？7、傳代培養如何收集細胞？收集細胞①懸浮培養的細胞:②貼壁細胞:直接用離心法收集用胰蛋白酶處理使細胞從瓶壁上脫離下來，再用離心法收集取動物組織分散成單個細胞制成細胞懸液原代培養傳代培養用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理加培養液細胞分裂受阻懸浮生長原因密度過大、有害代謝物積累和營養物質缺乏等接觸抑制解決辦法在培養皿或培養瓶中

8、胰蛋白酶兩次處理的目的？

第一次：將組織細胞分散成單個細胞；第二次：使細胞從瓶壁上脫離下來，分散成單個細胞。便于分瓶后繼續培養假如你是醫生，請你為“最美逆行者”利用自體皮膚的單個細胞培養出可供移植的皮膚設計一個方案，以便幫助他們恢復往日的容貌。取動物組織分散成單個細胞制成細胞懸液原代培養傳代培養用機械的方法，或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶處理加培養液細胞分裂受阻懸浮生長原因密度過大、有害代謝物積累和營養物質缺乏等接觸抑制解決辦法在培養皿或培養瓶中無菌、無毒營養溫度、pH和滲透壓氣體環境制備細胞懸液原代培養傳代培養動物細胞培養的條件動物細胞培養的過程本節小結動物細胞培養的概念從動