生物制藥工藝流程知識題姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線--------------------------1.請首先在試卷的標(biāo)封處填寫您的姓名，身份證號和地址名稱。2.請仔細(xì)閱讀各種題目，在規(guī)定的位置填寫您的答案。一、選擇題1.生物制藥過程中，下列哪個步驟不屬于發(fā)酵階段？

A.污染監(jiān)測

B.細(xì)胞培養(yǎng)

C.蛋白質(zhì)表達(dá)

D.提純純化

2.在生物制藥的細(xì)胞培養(yǎng)過程中，哪個條件對于細(xì)胞生長？

A.溫度

B.pH值

C.氣壓

D.光照

3.生物反應(yīng)器的主要類型有哪些？

A.好氧生物反應(yīng)器

B.厭氧生物反應(yīng)器

C.真空生物反應(yīng)器

D.高壓生物反應(yīng)器

4.下述哪種生物制品在生物制藥領(lǐng)域中應(yīng)用最為廣泛？

A.酶類制品

B.抗體類藥物

C.重組蛋白藥物

D.核酸類藥物

5.以下哪項是蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)中的重組技術(shù)？

A.DNA重組技術(shù)

B.玻璃體細(xì)胞融合技術(shù)

C.克隆技術(shù)

D.酶切技術(shù)

6.下列哪個方法常用于蛋白質(zhì)的初步分離純化？

A.鹽析

B.等電聚焦

C.高壓液相色譜

D.透析

7.下列哪項技術(shù)不用于蛋白質(zhì)結(jié)晶？

A.溫度梯度

B.酶結(jié)晶法

C.靜電結(jié)晶法

D.線性梯度結(jié)晶法

8.以下哪項不屬于生物制藥過程中污染物的分類？

A.活性微生物

B.有害酶類

C.雜蛋白

D.色素

答案及解題思路：

1.答案：D

解題思路：發(fā)酵階段主要包括細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)表達(dá)和污染監(jiān)測等步驟。提純純化是發(fā)酵過程后的后續(xù)步驟，不屬于發(fā)酵階段。

2.答案：A

解題思路：溫度是細(xì)胞生長和代謝的關(guān)鍵因素，對細(xì)胞的生存和生長。

3.答案：A,B

解題思路：生物反應(yīng)器主要有好氧生物反應(yīng)器和厭氧生物反應(yīng)器，它們分別適用于需氧和厭氧生物過程。

4.答案：C

解題思路：重組蛋白藥物在生物制藥領(lǐng)域中應(yīng)用最為廣泛，包括治療性蛋白質(zhì)、疫苗和其他生物活性物質(zhì)。

5.答案：A

解題思路：DNA重組技術(shù)是蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)中的基礎(chǔ)和關(guān)鍵技術(shù)，用于構(gòu)建表達(dá)載體，將目的基因?qū)胨拗骷?xì)胞。

6.答案：A

解題思路：鹽析是一種常用的蛋白質(zhì)初步分離純化方法，通過改變?nèi)芤褐械碾x子強(qiáng)度來改變蛋白質(zhì)的溶解度。

7.答案：D

解題思路：線性梯度結(jié)晶法是一種蛋白質(zhì)結(jié)晶技術(shù)，而溫度梯度、酶結(jié)晶法和靜電結(jié)晶法都是蛋白質(zhì)結(jié)晶技術(shù)。

8.答案：D

解題思路：活性微生物、有害酶類和雜蛋白都是生物制藥過程中的污染物，而色素不屬于污染物分類。二、填空題1.生物制藥工藝流程中，細(xì)胞培養(yǎng)通常在_______進(jìn)行。

答案：生物反應(yīng)器

解題思路：在生物制藥中，細(xì)胞培養(yǎng)是一個重要的步驟，而這一過程通常是在能夠提供適宜生長條件和可控環(huán)境的生物反應(yīng)器中進(jìn)行的。

2.常見的生物反應(yīng)器有_______和_______。

答案：攪拌式反應(yīng)器、固定床反應(yīng)器

解題思路：生物反應(yīng)器是進(jìn)行生物合成的設(shè)備，攪拌式反應(yīng)器適用于需要較強(qiáng)混合的細(xì)胞培養(yǎng)過程，而固定床反應(yīng)器適用于酶促反應(yīng)等需要固定床層操作的情形。

3.重組蛋白質(zhì)藥物的制備過程包括_______、_______、_______等步驟。

答案：宿主細(xì)胞表達(dá)、發(fā)酵過程、下游加工

解題思路：重組蛋白質(zhì)藥物的生產(chǎn)涉及多個步驟，包括選擇宿主細(xì)胞、發(fā)酵培養(yǎng)宿主細(xì)胞以表達(dá)蛋白質(zhì)、以及后續(xù)的蛋白純化等。

4.蛋白質(zhì)結(jié)晶的主要目的是為了實現(xiàn)_______和_______。

答案：提高純度和易于分離

解題思路：蛋白質(zhì)結(jié)晶是純化過程中的關(guān)鍵步驟，通過結(jié)晶可以使蛋白質(zhì)從溶液中分離出來，這不僅提高了蛋白的純度，還便于后續(xù)的分離和收集過程。三、判斷題1.生物制藥的細(xì)胞培養(yǎng)過程可以不用進(jìn)行無菌操作。

答案：（×）

解題思路：生物制藥中的細(xì)胞培養(yǎng)是生產(chǎn)生物藥物的重要步驟，細(xì)胞容易受到外界的微生物污染，導(dǎo)致培養(yǎng)失敗或產(chǎn)生有害物質(zhì)。因此，細(xì)胞培養(yǎng)過程中必須進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，以保證生物藥品的安全性。

2.蛋白質(zhì)表達(dá)過程中，誘導(dǎo)劑的作用是提高蛋白質(zhì)產(chǎn)量。

答案：（√）

解題思路：在蛋白質(zhì)表達(dá)過程中，誘導(dǎo)劑被用于誘導(dǎo)細(xì)胞表達(dá)特定的蛋白質(zhì)。誘導(dǎo)劑可以促進(jìn)基因轉(zhuǎn)錄和翻譯，從而增加蛋白質(zhì)的產(chǎn)量，是實現(xiàn)高效表達(dá)的重要手段。

3.在蛋白質(zhì)分離純化過程中，親和層析比離子交換層析有更高的選擇性。

答案：（×）

解題思路：親和層析和離子交換層析都是常用的蛋白質(zhì)分離純化技術(shù)。親和層析是基于蛋白質(zhì)與其特異性配體的結(jié)合進(jìn)行分離，選擇性較高。而離子交換層析則基于蛋白質(zhì)表面電荷與層析介質(zhì)之間的靜電作用進(jìn)行分離，其選擇性通常不如親和層析。

4.蛋白質(zhì)結(jié)晶過程不需要優(yōu)化結(jié)晶條件。

答案：（×）

解題思路：蛋白質(zhì)結(jié)晶是獲得純化蛋白質(zhì)的重要步驟。結(jié)晶條件的優(yōu)化對于獲得高質(zhì)量、高純度的蛋白質(zhì)。不優(yōu)化結(jié)晶條件可能會導(dǎo)致蛋白質(zhì)結(jié)晶質(zhì)量差，難以進(jìn)行后續(xù)的純化和應(yīng)用。因此，結(jié)晶條件的優(yōu)化是必要的。四、簡答題1.簡述生物制藥中細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵因素。

a.培養(yǎng)基的選擇與優(yōu)化

b.培養(yǎng)基的成分與濃度

c.培養(yǎng)基的pH值與溫度控制

d.氧氣與二氧化碳的供應(yīng)

e.培養(yǎng)基的污染控制

f.細(xì)胞傳代與篩選

g.細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的維護(hù)與清潔

2.簡要介紹生物制藥中的發(fā)酵過程。

a.發(fā)酵過程的分類

b.發(fā)酵培養(yǎng)基的組成

c.發(fā)酵過程中的關(guān)鍵參數(shù)控制

d.發(fā)酵過程中的污染控制

e.發(fā)酵過程中的產(chǎn)物提取與純化

3.簡述蛋白質(zhì)分離純化中常用的方法。

a.離心分離法

b.沉淀法

c.凝膠過濾法

d.電泳法

e.膜分離法

f.色譜法

答案及解題思路：

1.答案：

a.培養(yǎng)基的選擇與優(yōu)化：選擇合適的培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵，需要根據(jù)細(xì)胞類型和生長需求進(jìn)行優(yōu)化。

b.培養(yǎng)基的成分與濃度：培養(yǎng)基中必須含有細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)，如氨基酸、維生素、激素等，并需控制其濃度以避免毒性。

c.培養(yǎng)基的pH值與溫度控制：維持適宜的pH值和溫度是細(xì)胞正常生長的必要條件。

d.氧氣與二氧化碳的供應(yīng)：細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要充足的氧氣和適當(dāng)?shù)亩趸紳舛取?/p>

e.培養(yǎng)基的污染控制：防止細(xì)菌、真菌和病毒等污染是細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。

f.細(xì)胞傳代與篩選：通過傳代和篩選，可以保持細(xì)胞的穩(wěn)定性和純度。

g.細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的維護(hù)與清潔：保持培養(yǎng)設(shè)備的清潔和功能正常是細(xì)胞培養(yǎng)的重要保障。

解題思路：首先明確細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵因素，然后針對每個因素進(jìn)行簡要闡述，結(jié)合實際操作中的注意事項。

2.答案：

a.發(fā)酵過程的分類：包括好氧發(fā)酵、厭氧發(fā)酵和固態(tài)發(fā)酵等。

b.發(fā)酵培養(yǎng)基的組成：包括碳源、氮源、生長因子、維生素等。

c.發(fā)酵過程中的關(guān)鍵參數(shù)控制：如溫度、pH值、溶解氧、攪拌速度等。

d.發(fā)酵過程中的污染控制：通過無菌操作、消毒和滅菌等方法防止污染。

e.發(fā)酵過程中的產(chǎn)物提取與純化：包括離心、過濾、結(jié)晶等步驟。

解題思路：首先介紹發(fā)酵過程的基本概念，然后分別闡述發(fā)酵培養(yǎng)基的組成、關(guān)鍵參數(shù)控制、污染控制以及產(chǎn)物提取與純化。

3.答案：

a.離心分離法：利用離心力將混合物中的顆粒按密度分離。

b.沉淀法：通過添加沉淀劑使蛋白質(zhì)沉淀，然后分離。

c.凝膠過濾法：利用凝膠的孔徑大小分離蛋白質(zhì)。

d.電泳法：根據(jù)蛋白質(zhì)的電荷和分子量差異進(jìn)行分離。

e.膜分離法：利用半透膜的選擇透過性分離蛋白質(zhì)。

f.色譜法：利用不同物質(zhì)在固定相和流動相中的分配系數(shù)差異進(jìn)行分離。

解題思路：首先列舉蛋白質(zhì)分離純化的常用方法，然后對每種方法進(jìn)行簡要說明，包括其原理和應(yīng)用。五、論述題1.結(jié)合實際，論述生物制藥中蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝的優(yōu)化。

(1)蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝概述

(2)蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝優(yōu)化策略

a.改善結(jié)晶條件

b.篩選合適的結(jié)晶方法

c.優(yōu)化結(jié)晶設(shè)備

d.調(diào)整結(jié)晶動力學(xué)

(3)實際案例分析

a.某生物制藥公司蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝優(yōu)化案例

b.優(yōu)化效果評估

2.分析生物制藥中污染防控的關(guān)鍵措施及其意義。

(1)生物制藥污染防控的重要性

(2)污染防控關(guān)鍵措施

a.環(huán)境監(jiān)測與風(fēng)險評估

b.設(shè)備與操作人員管理

c.生產(chǎn)流程優(yōu)化

d.清潔與消毒

(3)污染防控的意義

a.提高產(chǎn)品純度

b.降低生產(chǎn)成本

c.保障患者用藥安全

答案及解題思路：

1.答案：

(1)蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝概述：

蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝是將蛋白質(zhì)從溶液中析出形成晶體的過程，是生物制藥中重要的一步。

(2)蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝優(yōu)化策略：

a.改善結(jié)晶條件：包括溫度、pH、離子強(qiáng)度等；

b.篩選合適的結(jié)晶方法：如滴定法、蒸發(fā)法、凍干法等；

c.優(yōu)化結(jié)晶設(shè)備：提高結(jié)晶效率，降低能耗；

d.調(diào)整結(jié)晶動力學(xué)：通過改變結(jié)晶溫度、pH等，控制結(jié)晶速率。

(3)實際案例分析：

a.某生物制藥公司蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝優(yōu)化案例：該公司針對某蛋白質(zhì)結(jié)晶工藝進(jìn)行優(yōu)化，通過改善結(jié)晶條件、篩選合適的結(jié)晶方法等，提高結(jié)晶效率，降低生產(chǎn)成本。

b.優(yōu)化效果評估：通過比較優(yōu)化前后的結(jié)晶效果，評估優(yōu)化效果。

2.答案：

(1)生物制藥污染防控的重要性：

生物制藥污染防控對提高產(chǎn)品純度、保障患者用藥安全具有重要意義。

(2)污染防控關(guān)鍵措施：

a.環(huán)境監(jiān)測與風(fēng)險評估：對生產(chǎn)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測，評估污染風(fēng)險；

b.設(shè)備與操作人員管理：加強(qiáng)設(shè)備維護(hù)與操作人員培訓(xùn)；

c.生產(chǎn)流程優(yōu)化：合理設(shè)計生產(chǎn)流程，降低污染風(fēng)險；

d.清潔與消毒：嚴(yán)格執(zhí)行清潔與消毒規(guī)程。