ICS65.020.30CCSB47中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T45293—2025桑蠶種母蛾檢驗(yàn)規(guī)程Codeofpracticeforbreedingfemalemothsinspectionofsilkworm(Bombyxmori.)2025-02-28發(fā)布2025-09-01實(shí)施國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)發(fā)布/GBT45293—2025前言本文件按照GBT1./1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出。本文件由全國(guó)桑蠶業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SACTC437/)歸口。本文件起草單位:江蘇科技大學(xué)、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)研究所、浙江省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心、四川省蠶業(yè)管理總站、廣東絲源集團(tuán)有限公司、廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站、重慶市蠶業(yè)總站、江蘇省蠶種所、四川省南充蠶種場(chǎng)、山東廣通蠶種集團(tuán)有限公司、湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所、江西省經(jīng)濟(jì)作物研究所、安徽省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳特色農(nóng)業(yè)管理站、湖南省蠶桑科學(xué)研究所、吉林省蠶業(yè)科學(xué)研究院。本文件主要起草人:陳濤、張美蓉、朱春群、胡文娟、樓霞、馬露蕓、彭麗紅、莫云霞、李洪元、王欣、杜國(guó)良、房德文、吳凡、唐斌、汪劍霞、李麗蓉、王先燕、姚曉慧、侯啟瑞、周影。Ⅰ/GBT45293—2025桑蠶種母蛾檢驗(yàn)規(guī)程范圍1本文件確立了桑蠶種母蛾的檢驗(yàn)程序,規(guī)定了桑蠶種母蛾的袋蛾、干燥、消毒清洗、結(jié)果判定和檢驗(yàn)報(bào)告,描述了相應(yīng)的檢驗(yàn)方法。本文件適用于生產(chǎn)桑蠶原種和桑蠶一代雜交種的母蛾檢驗(yàn)。規(guī)范性引用文件2下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。/GBT8170數(shù)值修約規(guī)則與極限數(shù)值的表示和判定術(shù)語(yǔ)和定義3下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.13.2母蛾breedingfemalemoths生產(chǎn)下代蠶種的雌蛾。母蛾微粒子病率rateofpebrinecontaminatedbreedingfemalemoths帶微粒子孢子的母蛾(集團(tuán))數(shù)占制種批(段)母蛾總數(shù)的百分比。注:簡(jiǎn)稱病蛾率。實(shí)際檢驗(yàn)中按照規(guī)定的要求對(duì)母蛾進(jìn)行檢驗(yàn),以檢出的微粒子病蛾集團(tuán)數(shù)來(lái)衡量。母蛾樣本袋蛾44.1原種母蛾4.1.1原種母蛾實(shí)行全數(shù)檢驗(yàn)。原種母蛾應(yīng)使用標(biāo)明序號(hào)的28格紙質(zhì)蛾盒對(duì)號(hào)袋蛾。蛾盒上應(yīng)標(biāo)明生產(chǎn)單位、品種名稱、批次、蛾盒號(hào)。蛾盒號(hào)應(yīng)與蠶種編號(hào)一致。一代雜交種母蛾檢驗(yàn)批的劃分4.1.24.1.2.1按制種批劃分,或在同一制種批下按制種日(戶)分段。抽樣袋蛾4.1.2.2一代雜交種母蛾實(shí)行抽樣檢驗(yàn)。散卵種按表1、平附種按表2規(guī)定的數(shù)量隨機(jī)抽取制種母蛾(含苗1/GBT45293—2025蛾、末蛾)樣本裝入蛾盒(袋)。蛾盒(袋)上標(biāo)明生產(chǎn)單位名稱、品種名稱、批次、段號(hào)、蛾盒號(hào)。表1桑蠶一代雜交種母蛾微粒子病檢驗(yàn)抽樣裝盒(袋)規(guī)定與判定標(biāo)準(zhǔn)(散卵種)允許病蛾集團(tuán)數(shù)制種批(段)個(gè)第1樣本盒(袋)第2樣本盒(袋)抽樣率%毛種數(shù)量張母蛾數(shù)量只第1樣本第1、2樣本C1C2≤25≤1000全部全部32100.0100.096.086.072.061.040.222.212.18.5026~501001~20002001~30003001~40004001~60006001~1000010001~2000020001~4000040001~6000060001~8000080001~100000251~75324301476~100436101~150151~250251~500501~10001001~15001501~20002001~250048481761612967672101112131415161718192021232628303234373974742818138585389896.732501~3000100001~1200003001~3500120001~1400003501~4000140001~1600004001~4500160001~1800004501~5000180001~2000005001~5500200001~2200005501~6000220001~2400006001~6500240001~2600006501~7000260001~2800007001~7500280001~3000007501~8000300001~3200008001~8500320001~3400008501~9000340001~3600009001~9500360001~3800009501~10000380001~40000094945.6498984.941021071111151201281401481571651741851931021071111151201281401481571651741851934.444.053.753.453.363.273.283.293.110111213143.13.13.13.0注1:按40蛾折合1盒毛種,每個(gè)蛾盒(袋)裝30只母蛾,檢驗(yàn)時(shí)1盒(袋)母蛾作為1個(gè)集團(tuán)。注2:毛種50張以下的批(段),根據(jù)實(shí)際的蠶種張數(shù)全部裝盒(袋)。注3:毛種50張以上的批(段),增加抽取5%的蛾盒(袋),作為備用蛾盒(袋)。注4:先檢第1樣本,檢出的病蛾集團(tuán)數(shù)≤C1為合格,>C2為不合格;病蛾集團(tuán)數(shù)>C1且≤C2時(shí)再檢第2本,第1和第2樣本合計(jì)檢出的病蛾集團(tuán)數(shù)≤C2為合格,>C2為不合格。樣2/GBT45293—2025表2桑蠶一代雜交種母蛾微粒子病檢驗(yàn)抽樣裝盒(袋)規(guī)定與判定標(biāo)準(zhǔn)(平附種)以%表示未檢出微粒子蠶種率病蛾率0未檢出微粒子蠶種率病蛾率0.740.790.840.890.940.991.041.091.141.201.251.311.361.421.471.531.59未檢出微粒子蠶種率病蛾率10099989796959493929190898887868584838281807978777675747372717069686766656463626160595857565554535251501.651.711.771.831.891.962.022.092.162.222.292.362.442.512.582.662.740.040.080.120.160.210.250.290.330.380.420.470.510.560.600.650.70注1:同一制種批內(nèi)分戶制種,采用逐大張(即4張平附種,約1600cm;以下相同)對(duì)號(hào)袋蛾,能準(zhǔn)確淘汰超毒2批和合格批中帶微粒子病的平附種適用本表。注2:以制種批(戶)為單位,按每1大張蠶種為抽樣單位抽取1盒(袋)母蛾;若制種數(shù)量不足30大張時(shí),抽足30盒(袋),同時(shí)記錄蛾盒(袋)數(shù)和相應(yīng)蠶種編號(hào)。注3:每個(gè)蛾盒(袋)裝25只母蛾(按梅花形5點(diǎn)分別抽取5只母蛾),檢驗(yàn)時(shí)25只母蛾作為1個(gè)集團(tuán)。注4:計(jì)算公式:未檢出率(%)=(總檢蛾盒數(shù)-檢出微粒子蛾盒數(shù))/總檢蛾盒數(shù)×100。注5:判別蠶種合格與否,以制種批(戶)為單位,若該批(戶)蠶種的病蛾率<1%,即無(wú)微粒子蠶種率≥78%,判為合格蠶種批,對(duì)號(hào)淘汰有微粒子病的整大張(4張)蠶種;若病蛾率≥1%,即無(wú)微粒子蠶種率<78%,該批蠶種判為不合格蠶種批,淘汰整批蠶種。干燥4.2袋蛾后應(yīng)及時(shí)干燥,烘蛾溫度不超過(guò)71℃,母蛾干燥程度以頭胸干燥、腹部癟軟為宜。烘干的母蛾要及時(shí)整理,妥善保管,及時(shí)檢驗(yàn)。驗(yàn)收4.3填寫送檢母蛾盒(袋)清單。嚴(yán)格查驗(yàn),有下列情形的,該批(段)蠶種作不合格種處理。a)蛾盒(袋)字跡無(wú)法辨認(rèn),批號(hào)、盒號(hào)錯(cuò)亂;b)批袋蛾盒(袋)數(shù)未達(dá)要求;c)發(fā)霉、蟲蛀、鼠咬、烘焦和其他不符合規(guī)定者。3/GBT45293—2025檢驗(yàn)程序5檢驗(yàn)程序如下:樣本編號(hào)→拆盒投蛾→注液磨碎→過(guò)濾校正→離心沉淀→振蕩制片→鏡檢→復(fù)檢→結(jié)果記錄。檢驗(yàn)方法樣本編號(hào)66.1原種母蛾按序編號(hào)。一代雜交種母蛾根據(jù)制種批(段)的蠶種數(shù)量,散卵種按表1的規(guī)定將蛾盒(袋)分成第1樣本(含苗蛾、末蛾)與第2樣本。檢驗(yàn)時(shí),先取第1樣本進(jìn)行編號(hào);平附種按表2的規(guī)定進(jìn)行編號(hào)。編號(hào)隨樣本傳遞。拆盒投蛾6.2拆開蛾盒(袋),檢查袋蛾情況。原種母蛾盒裝滿或空蛾數(shù)<3個(gè),則登記空蛾號(hào)并淘汰對(duì)應(yīng)卵圈,若空蛾數(shù)≥3個(gè),則該盒母蛾不予檢驗(yàn),也不計(jì)入母蛾總數(shù),其對(duì)應(yīng)的原種應(yīng)淘汰;若一代雜交種(散卵種)母蛾盒(袋)內(nèi)母蛾數(shù)量不足,則用備檢蛾盒(袋)替換并作記錄。按每盒(袋)母蛾為1個(gè)集團(tuán)全數(shù)投入磨蛾杯內(nèi)。注液磨碎6.3在磨蛾杯中注入0.5%碳酸鉀(鈉)溶液80mL~90mL,用磨蛾機(jī)(//,7000rmin~8000rmin20s~30s)磨碎。過(guò)濾校正6.46.56.6將蛾液過(guò)濾至離心管內(nèi),加水校正離心管液量。離心沉淀/3000rmin~3500rmin3min/離心,倒去上清液。振蕩制片在沉淀中可加入1%氫氧化鉀(鈉)溶液1mL,振蕩后分別從每管點(diǎn)取2個(gè)樣點(diǎn)在2塊載玻片上,蓋上蓋玻片。鏡檢6.76.86.9用600倍及以上顯微鏡2人對(duì)檢,每個(gè)樣點(diǎn)觀察視野原種不少于10個(gè),一代雜交種不少于5個(gè)。復(fù)檢初檢有微粒子孢子的樣本,應(yīng)復(fù)檢確認(rèn)。檢驗(yàn)過(guò)程中,復(fù)檢人員不定期隨機(jī)抽取樣本復(fù)檢。第2樣本檢驗(yàn)第1樣本檢驗(yàn)結(jié)束后,依據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果,對(duì)照表1的標(biāo)準(zhǔn)判定,需要檢驗(yàn)第2樣本時(shí),啟用第2樣本檢驗(yàn)。檢驗(yàn)方法同6.1~6.8。4/GBT45293—2025結(jié)果記錄6.10將檢驗(yàn)結(jié)果填入原始記錄表中。消毒清洗7檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)有微粒子孢子時(shí),應(yīng)用1%有效氯消毒液浸消被污染的用具30min,再用清水沖洗干凈。檢驗(yàn)室每天用含1%有效氯消毒液洗消用具及地面,每周定期對(duì)用具、門窗、地面及室外環(huán)境進(jìn)行清理、消毒。結(jié)果判定8原種病蛾率8.1計(jì)算公式8.1.1原種病蛾率按公式()1計(jì)算。ω=yx×100………………