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DB35DB35/T1938—2020飼料中沙門菌和沙雷菌二重實時熒光PCR檢測方法Duplexreal-timePCRassayforSalmonellaandSerratiainfeeds2020-09-29發布2020-12-29實施福建省市場監督管理局發布I 1 1 1 1 2 2 2 2 4 51本標準規定了飼料中沙門菌和沙雷菌二重實時熒光PCR檢測方法有關的檢測原理、主要儀器、GB/T6682分析實驗室用水規Real-timePCR:熒光PCR(Real-timePolymeraseChaDNA:脫氧核糖核酸(Deoxyrib將4.1中的培養物接種到亞硒酸鹽胱氨酸培養基和氯化鎂-孔雀綠培養基中,分別于36℃±1℃、數擴增,在反應過程中沙門菌特異的熒光探針跟靶核酸雜交,同時被25.1恒溫培養箱:36℃±1℃,42℃±1℃。3取8.1中的前增菌培養物1mL,接種于裝有10mLRV(6.3)的試管中,于42℃±1℃培養24h。應在檢測區進行。將8.3.3中加樣后的PCR管放入熒光PCR儀內,記錄相應樣品擺放順序。設定采集4陰性對照無Ct值顯示或Ct值為40,陽性對照Ct值≤30.0,并且出現典檢測樣品Ct值≤35.0且有典型S型擴增曲線時,報告沙門菌或居檢測樣品Ct值為零或Ct值>35.0時,報告沙門菌或居泉沙5培養液的配制A.1.1成分A.1.2制備A.2.1.1成分A.2.1.2制備A.2.2.1成分A.2.2.2制備6A.2.3溶液CA.2.3.1成分A.2.3.2制備A.2.4完全培養基A.2.4.1成分A.2.4.2制備A.3.1基礎液A.3.1.1成分A.3.1.2制備A.3.2.1成分
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