河南省鄭州市十校聯考2022-2023學年高二下學期期中生物試題姓名：__________班級：__________考號：__________題號一二三四總分評分一、單選題1．紹興是黃酒之鄉，“麥曲酶長，酵米復芳；白梅酒娘，伴淋寒香；壓濾瓊漿，煎煮陳藏”是對紹興黃酒精致復雜釀造工藝的描述。在黃酒的主要發酵過程中，“開耙”（攪拌）是極為關鍵的一步。下列相關敘述錯誤的是（）A．接種麥曲有利于淀粉水解為小分子糖，有利于“酒娘”菌種發酵B．煎煮的目的是除去發酵產品中的酵母菌等微生物，利于儲藏C．發酵過程中“開耙”可適當提供O2，活化酵母D．黃酒釀制過程中需定期檢測亞硝酸鹽含量是否超標2．《齊民要術》記載了一種稱為“動酒酢（“酢”同“醋”）法”的釀醋工藝：“大率酒一斗，用水三斗，合甕盛，置日中曝之。七日后當臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移動，撓攪之。數十日，醋成”。下列有關敘述錯誤的是（）A．制作醋的過程中發酵液的pH會降低，制作酒的過程中發酵液的pH也會降低B．加水的目的是對酒進行稀釋，避免酒精濃度過高殺死醋酸菌C．“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的D．撓攪有利于酒精與醋酸菌充分接觸，還可以增加溶液中的溶解氧3．下列關于腐乳制作的敘述，錯誤的是（）A．毛霉可利用其體內的酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸B．吃腐乳時，腐乳外部的“皮”是細菌繁殖形成的C．用鹽腌制腐乳的過程中，要控制鹽的用量，鹽的濃度過高會影響口味，過低則不足以抑制雜菌的生長，導致豆腐腐敗D．其制作過程可以表示為讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制4．家庭制作泡菜的方法：新鮮的蔬菜經過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”，密封后置于溫度適宜的地方。下列與此過程相關的敘述不正確的是（）A．用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒B．腌制泡菜時，為了縮短發酵的時間可以加入一些原來的陳泡菜水C．制作泡菜時腌制時間過長會引起細菌大量繁殖D．若制作的泡菜咸而不酸，可能的原因是加入食鹽過多，抑制了乳酸菌的發酵5．滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是（）A．為了防止雜菌污染，應將配制好的選擇培養基分裝到培養皿中再進行高壓蒸汽滅菌B．配制培養基、倒平板、接種均需要在酒精燈火焰旁進行C．為防止蛋白質變性，不能用高壓蒸汽滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養基進行滅菌D．可用高壓蒸汽滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養瓶等進行滅菌6．如下圖所示，科研人員利用誘變方式選育可高產β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負菌，未突變菌不能在含有β-紫羅酮的培養基上生長。隨β-胡蘿卜素含量增加，菌體顏色從黃色加深至橙紅色。圖甲表示選育菌種及獲得β-胡蘿卜素的流程，以下相關說法錯誤的是（）A．經過①紫外線照射后，可能有少數三孢布拉霉負菌能在含β-紫羅酮的培養基上生長B．進行③操作時，應選擇橙紅色區域較小的菌落中的菌株繼續接種培養C．要得到圖乙所示的菌落，可用稀釋涂布平板法進行②操作接種后再培養D．含β-紫羅酮的培養基屬于選擇培養基7．下列與“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”探究實踐相關的敘述，正確的是（）A．若要判斷選擇培養基是否起到選擇作用，需要設置未接種的牛肉膏蛋白胨培養基作為對照B．將土樣進行10倍稀釋后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸餾水的試管中依次等比稀釋C．將涂布器在火焰上灼燒，待其上的酒精燃盡后，必須先冷卻再進行涂布平板操作D．待長成的菌落穩定后，要在無菌條件下進行尿素分解菌菌落的觀察和計數8．剛果紅能與纖維素形成紅色復合物，但對纖維素水解后形成的纖維二糖和葡萄糖無作用，纖維素被纖維素分解菌分解后，培養基中會出現以這些菌為中心的透明圈。某同學利用剛果紅配制選擇培養基，分離土壤中能水解纖維素的微生物并觀察菌落數。下列敘述正確的是（）A．劃線接種后統計平板上的菌落數，統計值比活菌實際數高B．選擇培養基中應以剛果紅作為唯一碳源，并加入瓊脂糖作凝固劑C．應選擇菌落直徑與周圍透明圈直徑比值大的菌落進行純化D．可以把濾紙埋在土壤中，經過一段時間后，再從已腐爛的濾紙上篩選目的菌9．與傳統發酵技術相比，發酵工程的產品種類更加豐富，產量和質量明顯提高。下列說法錯誤的是（）A．分離、提純獲得微生物細胞本身或其代謝產物是發酵工程的中心環節B．發酵工程可用誘變育種、基因工程等方法選育出性狀優良的工程菌并進行擴大培養C．在發酵工程的發酵環節中，發酵條件變化不僅會影響微生物的生長繁殖，也會影響微生物的代謝途徑D．通過發酵工程獲得的單細胞蛋白可作為食品添加劑，也可制成微生物飼料10．傳統啤酒釀造過程中，發酵在敞開式發酵池中進行，麥芽汁中接入釀酒酵母后通入大量無菌空氣，之后會產生大量氣體翻騰逸出，在麥芽汁表面形成25～30cm厚的泡蓋（氣泡層），然后停止通氣，進入靜止發酵階段。一段時間后可得啤酒。下列說法正確的是（）A．靜止發酵階段酵母菌可直接將淀粉轉化為酒精和CO2B．用脫落酸溶液浸泡大麥種子可以增加麥芽汁中可發酵糖的含量C．泡蓋的形成是由于酵母菌有氧呼吸產生大量CO2，能將麥芽汁與空氣隔絕D．可以用平板劃線法調查發酵液中酵母菌的數量11．通過植物細胞工程技術，可利用甲（高產不耐鹽）、乙（低產耐鹽）兩種二倍體植物培育高產耐鹽的雜種植株。實驗流程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A．目的植株相對于甲、乙而言發生了染色體數目變異導致植株不可育B．由④到目的植株需進一步篩選的原因是④中含有高產不耐鹽品種C．①過程應用了酶的專一性和細胞膜具有流動性原理D．為提高纖維素酶和果膠酶的處理效果①過程可將植物細胞置于適當濃度的高滲溶液中12．青蒿素是從植物黃花蒿的葉片中所提取的一種代謝產物，而莖及其他部位中的青蒿素含量極其微小，下列關于利用植物組織培養生產青蒿素的敘述中錯誤的是（）A．在黃花蒿組織培養過程中的一定階段必須給予光照B．培養基中添加的生長素和細胞分裂素是影響細胞分裂、分化的重要激素C．愈傷組織是一團有特定結構和功能的薄壁細胞D．可大規模栽培組織培養苗以獲取藥用成分13．科學家發現，蝸牛消化道提取液可用來處理植物細胞的細胞壁，從而得到原生質體便于進行植物體細胞雜交等操作。下列有關說法錯誤的是（）A．蝸牛消化道提取液含有纖維素酶和果膠酶，可以去除植物的細胞壁B．處理后獲得的原生質體可用秋水仙素進行誘導融合C．誘導原生質體融合后，只考慮兩兩融合，會產生三種融合細胞D．原生質體融合體現了細胞膜的流動性14．模型構建是生物學教學、研究和學習的一種重要方法。對下圖所示生物學概念模型的理解或分析錯誤的是（）A．若該模型表示核移植技術，則C→D過程一定與胚胎分割和胚胎移植技術有關B．若此圖表示植物體細胞雜交過程，則從A、B到C的過程可以用電融合法誘導C．若此圖為試管牛生產的流程圖，則A、B其中之一表示獲能的精子D．若A、B表示培養液和胚胎干細胞，則C→D的傳代培養過程中有可能出現分化現象15．植物細胞工程在農業、醫藥工業方面有著廣泛的應用，下列有關敘述錯誤的是（）A．采用莖尖組織培養技術得到脫毒苗的過程中需要多次更換培養基B．細胞產物的工廠化生產提高了單個細胞中次生代謝物的含量C．可以利用植物組織培養過程中產生的突變體培育新品種D．利用微型繁殖技術可以保持優良品種的遺傳特性16．下列在細胞工程的應用中，不需要進行檢測與篩選的是（）A．對植物的愈傷組織進行誘變處理，培育作物新品種B．將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，制備單克隆抗體C．利用植物體細胞雜交技術培育“蘿卜-甘藍”雜種植物D．利用植物的快速繁殖技術獲得大量試管苗17．2018年《Cell》雜志報道，我國科學家以一只雌性獼猴胎兒成纖維細胞為核供體成功克隆出兩只獼猴，成為全球首例體細胞克隆靈長類動物。其中幾個關鍵的技術創新與突破有：①在將供體細胞注入去核的卵母細胞前用滅活的病毒短暫處理；②通過反復試驗，可以在10秒之內對卵母細胞進行去核操作，在15秒之內將供體細胞注入到去核的卵母細胞里；③將組蛋白去甲基化酶的mRNA和組蛋白脫乙酰酶抑制劑注入重構胚。以下相關敘述錯誤的是（）A．用滅活的病毒處理供體細胞的目的是促進兩細胞融合B．克隆猴與人類遺傳背景更接近，以其為模型研發藥物可有效縮短藥物研發進程C．用蛋白酶合成抑制劑激活重構胚可使其發育成完整個體D．胚胎移植時進行同期發情處理，目的是降低代孕母猴對克隆猴的免疫排斥反應18．非洲豬瘟病毒（ASFV）是一種具有包膜的雙鏈DNA病毒，病毒蛋白p30位于病毒的包膜上，在病毒DNA合成開始之前就已經產生并持續表達至病毒生命周期的結束，在病毒進入宿主細胞時期具有重要作用。我國利用已免疫的小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞雜交，成功研制出針對p30的單克隆抗體。下列敘述正確的是（）A．針對p30的單克隆抗體可用于ASFV早期診斷試劑盒的研發B．經p30反復免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞只能用化學方法促融，如PEG促融法C．小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞用PEG誘導融合后即為雜交瘤細胞D．克隆化培養易體現出細胞的全能性，故雜交瘤細胞不能進行克隆化培養19．小鼠的某種上皮細胞與某種淋巴細胞體外培養時，上皮細胞呈現扁平不規則多角形，且粘附在培養瓶內壁上，而淋巴細胞則常常懸浮在培養液中。下列敘述錯誤的是（）A．培養消化道上皮細胞更易觀察判斷細胞是否具有接觸抑制現象B．恒溫培養箱中的CO2濃度維持在5%左右，以維持培養液的pH值C．培養基內加入適量的抗生素可以形成無菌、無毒的培養環境D．出現接觸抑制時，用胰蛋白酶處理，再用離心法收集細胞分瓶培養20．北大鄧宏魁團隊利用化學小分子成功地將已高度分化的小鼠體細胞誘導成為了可以重新分化發育為各種組織器官類型的“多潛能性”細胞，并將其命名為“化學誘導的多潛能干細胞（CiPS細胞）”，開辟了一條全新的體細胞“重編程”途徑。下列相關敘述錯誤的是（）A．小鼠體細胞誘導成CiPS細胞是形態、結構和遺傳物質發生穩定性差異的過程B．與小鼠體細胞相比，誘導形成的CiPS細胞全能性較高C．體細胞經誘導轉化為CiPS細胞的過程類似于植物細胞的脫分化過程D．體細胞轉化成CiPS細胞時，細胞內部分不表達的基因可能會重新表達21．如下圖所示，a表示現代生物工程技術，b表示其結果，下面說法正確的是（）A．如果a是核移植技術，b的產生說明了動物細胞具有全能性B．如果a是體外受精技術，則形成的b屬于克隆動物C．如果a是胚胎分割技術，b中個體的基因型和表型一定相同D．如果a是基因工程，b是乳腺生物反應器，則需對移植的胚胎進行性別選擇22．下列有關哺乳動物受精和早期胚胎發育的敘述正確的是（）A．在自然條件下，受精在子宮中完成B．精子需要獲能才能與卵子結合，而卵子一經排出就具備受精能力C．在桑椹胚階段，胚胎的內部開始出現含液體的腔D．囊胚期的內細胞團將來發育成胎兒的各種組織23．下列關于胚胎工程的敘述，正確的是（）A．經胚胎移植產生的后代，其遺傳特性與受體保持一致B．采用胚胎分割技術獲得同卵雙胎或多胎，可以看做動物的無性繁殖C．胚胎移植時，供體和受體母畜都必須具備優秀的遺傳性能D．試管牛與試管苗一樣都可以保持優良品種的遺傳特性24．將患有線粒體遺傳病的婦女的卵母細胞的細胞核移植到健康婦女捐獻的去核卵母細胞中，再利用胚胎工程技術，可最終產下了健康的“三親嬰兒”。下列相關敘述錯誤的是（）A．該過程需要用到體外受精和胚胎移植等胚胎工程技術B．在核移植過程中，用物理或化學方法激活重構胚，使其發育為早期胚胎C．卵母細胞捐獻者攜帶的紅綠色盲基因可以遺傳給“三親嬰兒”D．“三親嬰兒”同時擁有自己父親、母親及卵母細胞捐獻者的部分基因25．下列有關動物細胞工程的敘述，正確的是（）A．干細胞是從胚胎中分離提取的細胞，都具有發育成完整個體的能力B．進行胚胎移植前，要對供體和受體進行免疫檢查，以防止發生免疫排斥反應C．將純化的病毒抗原蛋白反復注射到小鼠體內即可從其血清中分離得到單克隆抗體D．若要對胚胎進行性別鑒定，通常選擇囊胚中的滋養層細胞進行DNA分析26．下列關于“DNA的粗提取和鑒定”實驗的原理的敘述，錯誤的是（）A．利用DNA不溶于酒精溶液，而蛋白質能溶于酒精溶液，可將DNA與蛋白質分離B．利用高溫能使蛋白質變性，卻對DNA沒有影響的特性，可將DNA與蛋白質分離C．在用預冷的酒精沉淀DNA時，要用玻璃棒沿一個方向攪拌，防止DNA斷裂D．利用DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可將提取的絲狀物或沉淀物溶解于NaCl溶液中27．下圖為不同限制性核酸內切膀識別的序列及切割位置（箭頭所指），下列敘述錯誤的是（）A．圖示4種限制性核酸內切酶均不能夠識別和切割RNA分子內的核苷酸序列B．若DNA上的堿基隨機排列，NotI限制性核酸內切酶切割位點出現頻率較其他三種限制性核酸內切酶高C．酶切時使用兩種限制酶同時處理是為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化D．用酶BglII切出的目的基因與酶BamHI切割的質粒重組后，則不能再被這兩種酶切開28．某質粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因，獲得此質粒的農桿菌表現出對兩種抗生素的抗性。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程，如下圖所示。請據XIA圖分析下列表述錯誤的是（）A．在構建重組質粒時，選用HindⅢ和SalⅠ兩種酶切割目的基因的兩端及質粒可防止目的基因和質粒的自我環化B．若轉基因抗鹽煙草幼苗中檢測出現了抗鹽基因的DNA，不能說明煙草幼苗有抗鹽特性C．用分別含有氨芐青霉素和四環素的培養基篩選農桿菌時，發現含有目的基因的農桿菌不能在含青霉素的培養基上生長，能在含四環素的培養基上生長D．利用植物組織培養技術培育轉基因抗鹽煙草植株，依據的原理是高度分化的植物細胞具有發育成完整植株的能力29．微生物在食品和飲料生產中發揮了重要作用。下表中敘述正確的是（）選項應用主要菌種發酵說明A味精谷氨酸棒狀桿菌發酵得到的谷氨酸就是提味增鮮的味精B醬油霉菌（黑曲霉）將原料中的蛋白質分解成多肽和氨基酸，經淋洗調制而成C醋醋酸菌O2和糖類都充足時分解糖類產生乙酸，缺少糖源則不能產生乙酸D啤酒酵母菌主發酵階段糖分解和代謝物生成后，需低溫、通氣環境進行后發酵A．A B．B C．C D．D30．下列關于PCR擴增DNA片段及電泳鑒定的敘述，錯誤的是（）A．在凝膠中DNA分子的遷移速率主要和DNA分子的大小、構象等有關B．耐高溫的DNA聚合酶只能從引物的5'C．作為引物的脫氧核苷酸序列必須不斷的加進每一次的擴增當中D．PCR擴增產物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來進行鑒定二、綜合題31．為提高作物產量，種植業往往使用大量的氮素化肥，既增加了生產成本，又易造成環境污染。自生固氮菌營獨立生活，為改變這種現狀帶來了希望。科研人員進行了土壤中自生固氮菌的分離和固氮能力測定的研究，部分實驗流程如下圖。回答下列問題：（1）土壤是微生物的天然培養基，該培養基能為微生物的生長提供的四大營養物質分別是。步驟④所用的接種工具是。（2）下表為兩種培養基的配方，步驟④應選其中的培養基。培養基類型培養基組分培養基甲甘露醇、KH2PO4、MgS培養基乙甘露醇、KH2PO4、MgS（3）純化培養時，需同時進行未接種培養基的培養，目的是。（4）④的平板上統計結果數一般用表示（“菌落數”或者“活菌數”），一般選擇數目在范圍的平板上計數。若甲、乙研究員同時做這個實驗，甲統計的菌落數分別是90、178、259、390；乙統計的菌落數分別是125、132、135、128，則每克土壤中含有的固氮菌為個，運用這種方法統計的結果往往較實際值。原因是。三、非選擇題組32．細胞工程根據操作對象的不同，可分為植物細胞工程和動物細胞工程兩大領域。請回答以下相關問題：Ⅰ.科學家利用植物體細胞雜交技術成功獲得了番茄-馬鈴薯雜種植株，其培育過程如下圖所示：（1）番茄細胞和馬鈴薯細胞融合成功的標志是，與圖示過程相比，誘導動物細胞融合所特有的方法是。（2）圖示步驟③④利用的細胞工程技術是，該技術的原理是。（3）從步驟③到步驟④需要更換新的培養基，其原因是。（4）實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是。（5）為了得到能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。圖中篩選1所采用的培養基屬于，使用該培養基進行細胞培養的結果是，圖中篩選2所依據的基本原理是。（6）若要使能產生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細胞大量增殖，可采用的方法有和。四、綜合題33．我國科學家已經成功建立了小鼠單倍體胚胎干細胞系。相比傳統的胚胎干細胞，其具有純合子的特色，即能夠從基因型直接顯示表型。如下圖是獲得孤雄單倍體胚胎干細胞系的兩種方式，請回答下列相關問題：（1）方法一中，研究人員需對實驗小鼠注射促性腺激素，使其，從而獲得更多的卵母細胞。從卵巢中采集到的卵母細胞需在體外培養到期，然后通過去核。（2）方式二是通過精子與卵子的受精作用“替代”核移植技術，受精作用過程中和會發生生理反應防止多精入卵。在核融合之前，剔除卵細胞的，然后就得到了只含來自精子的染色體組的胚胎干細胞，再通過相同的體外培養技術獲得單倍體胚胎干細胞系，單倍體胚胎干細胞在體外培養時需要的氣體條件是。（3）我國科研人員通過細胞融合技術將小鼠孤雌單倍體干細胞和大鼠孤雄單倍體干細胞融合，創造出一種新型的干細胞-異種雜合胚胎干細胞。此小鼠—大鼠雜交細胞中通常含有個染色體組，該技術突破了有性雜交的局限，使成為可能。34．賴氨酸是人體細胞不能合成的必需氨基酸。科學家把某種必需氨基酸含量多的蛋白質編碼基因（R）導入玉米中，使玉米中賴氨酸的含量提高30%。據下圖回答下列問題。（1）利用PCR技術擴增R基因時，需要在一定的緩沖液中才能進行，其中需要加入酶和激活該酶所需的。為了特異性擴增R基因序列，需根據設計特異性引物。（2）在構建基因表達載體時，若為了避免R基因和質粒的自連或反向連接，提高重組效率，應該選擇的限制酶是。（3）隨著轉化方法的突破，農桿菌侵染玉米這種單子葉植物也取得了成功。科研人員從新鮮的玉米葉片上取下的圓形小片與農桿菌共培養，當農桿菌侵染玉米細胞后，能將上的T-DNA轉移到被侵染的細胞，并且將其整合到。（4）檢測R基因是否表達的方法是。（5）在基因工程中若要培養轉基因小鼠，將基因表達載體導入受體細胞常用的方法是，常用的受體細胞是。

答案解析部分1．【答案】D【解析】【解答】A、淀粉屬于生物大分子物質，水解為小分子糖有利于發酵過程中酵母菌對糖類的利用，A正確；B、煎煮是進行消毒，除去發酵產品中的酵母菌等微生物，利于儲藏，B正確；C、“開耙”（攪摔）是為了讓酵母菌進行有氧呼吸，增加酵母菌的數量，有利于活化酵母，C正確；D、黃酒釀制過程中不產生亞硝酸鹽，不需要檢測亞硝酸鹽含量，D錯誤。故答案為：D。

【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。2．【答案】C【解析】【解答】A、制作果酒過程中產生的二氧化碳和制作果醋過程中產生的醋酸都會使發酵液的pH下降，A正確；B、加水的目的是對酒進行稀釋，避免高濃度酒精導致醋酸菌失水過多死亡，B正確；C、“衣”位于變酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C錯誤；D、攪拌有利于酒精與醋酸菌充分接觸，還可以增加溶液中的溶解氧，利于醋酸菌進行醋酸發酵，D正確。故答案為：C。

【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。

2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養需氧型。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃。3．【答案】B【解析】【解答】A、毛霉能夠產生蛋白酶，該蛋白酶能夠將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，A正確；B、腐乳外部的“皮”是前期發酵時毛霉等微生物在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐菌絲)，對人體無害，B錯誤；C、用鹽腌制腐乳的過程中，要控制鹽的用量，鹽的濃度過高會影響口味，過低則不足以抑制雜菌的生長，導致豆腐腐敗，C正確；D、腐乳的制作過程主要是：讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制，整個過程中應注意避免雜菌污染，D正確。故答案為：B。

【分析】參與腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陳代謝類型是異養需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物產生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪分解成甘油和脂肪酸。4．【答案】C【解析】【解答】A、制作泡菜時，通常用白酒擦拭泡菜壇，以達到消毒的目的，A正確；B、陳泡菜水中有乳酸菌，因此，加入“陳泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌種，從而縮短發酵的時間，B正確；C、溫度過高、食鹽用量過低、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加，C錯誤；D、若制作的泡菜咸而不酸，是因為大量的食鹽抑制了乳酸菌的發酵過程，從而導致酸味無法產生，D正確。故答案為：C。

【分析】1、泡菜發酵的實驗原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化。溫度過高，食鹽用量不足10%、腌制時間過短，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。一般在腌制10天后，亞硝酸鹽的含量開始下降。

2、泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質量比為10：1的比例配制鹽水，將鹽、水煮沸冷卻。將經過預處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內，裝至半壇時，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內乳酸菌發酵所需的無氧環境。在發酵過程中要注意經常向水槽中補充水。發酵時間長短受室內溫度的影響。5．【答案】D【解析】【解答】A、為了防止雜菌污染，應將配制好的選擇培養基分裝到錐形瓶中再進行高壓蒸汽滅菌，A錯誤；B、倒平板、接種均需要在酒精燈火焰旁進行，配制培養基不需要在酒精燈火焰旁進行，B錯誤；C、牛肉膏蛋白胨培養基需要利用濕熱滅菌法（例如高壓蒸汽滅菌法）進行滅菌，C錯誤；D、實驗中所使用的微量離心管、細胞培養瓶等可以使用干熱滅菌法進行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。故答案為：D。

【分析】實驗室常用的滅菌方法：

（1）灼燒滅菌：將微生物的接種工具，如接種環、接種針或其他金屬工具，直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以迅速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌。

（2）干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養皿）和金屬用具等，可以采用這種方法滅菌。

（3）高壓蒸汽滅菌：將滅菌物品放置在盛有適量水的高壓蒸汽滅菌鍋內，為達到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min。6．【答案】B【解析】【解答】A、過程①紫外線照射的作用是利用物理因素誘導發生基因突變，由于突變的不定向性，被照射的三孢布拉霉負菌可能有少數能在含β－紫羅酮的培養基上生長，A正確；B、橙紅色的菌體為高產菌，進行③操作時，應選擇較大的橙紅色菌落中的菌株繼續接種培養，B錯誤；C、圖乙中的菌落均勻分布于平板，說明接種方法是稀釋涂布平板法，C正確；D、由題意“未突變菌不能在含有β-紫羅酮的培養基上生長”可知，含β-紫羅酮的培養基屬于選擇培養基，D正確。故答案為：B。

【分析】圖中過程①表示利用紫外線誘導基因突變，過程②表示微生物接種（結合圖乙可知，平板中的菌落均勻分布，應采用了稀釋涂布平板法），過程③④表示選擇培養，過程⑥表示濃縮。7．【答案】C【解析】【解答】A、若要判斷選擇培養基是否起到了選擇作用，需設置接種了的沒有選擇作用的細菌通用的牛肉膏蛋白胨培養基作對照，A錯誤；B、將土樣進行10倍稀釋后，取1mL上清液加入盛有9mL無菌水的試管中依次等比稀釋，B錯誤；C、將涂布器在火焰上灼燒，待其上的酒精燃盡后，必須先冷卻再進行涂布平板操作，防止高溫殺死菌種，C正確；D、待長成的菌落穩定后，可直接觀察，無需在無菌條件下進行尿素分解菌菌落的觀察和計數，D錯誤。故答案為：C。

【分析】1、培養基選擇分解尿素的微生物的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微生物。

2、分解尿素的細菌的鑒定細菌合成的脲酶將尿素分解成氨，氨會使培養基的堿性增強。在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。8．【答案】D【解析】【解答】A、劃線接種不能用于菌落的計數，A錯誤；B、剛果紅相當于指示劑，要用以纖維素為唯一碳源的選擇培養基，B錯誤；C、由于剛果紅染料與纖維素形成紅色復合物，因此出現以因纖維素降解菌為中心的透明圈，菌落直徑與透明圈直徑比值越小，分解纖維素的能力越強，故答案為：菌落直徑與周圍透明圈直徑比值小的菌落進行純化，C錯誤；D、濾紙的主要成分是纖維素，可以通過此操作獲得能夠分解纖維素的微生物，D正確。故答案為：D。

【分析】實驗過程：

①土壤取樣：采集土樣時，應選擇富含纖維素的環境。

②梯度稀釋：用選擇培養基培養，以增加纖維素分解菌的濃度。

③涂布平板：將樣品涂布于含剛果紅的鑒別纖維素分解菌的固體培養基上。

④挑選產生中心透明圈的菌落：產生纖維素酶的菌落周圍出現透明圈，從產生明顯的透明圈的菌落上挑取部分細菌，并接種到纖維素分解菌的選擇培養基上，在30～37℃條件下培養，可獲得較純的菌種。9．【答案】A【解析】【解答】A、發酵罐內發酵是發酵工程的中心環節，發酵罐培養的環境條件會影響微生物的生長繁殖，也會影響微生物代謝產物的形成，A錯誤；B、可通過誘變育種、細胞工程、基因工程等方法選育出性狀優良的工程菌并進行擴大培養，從而獲得人類有用的產品，B正確；C、在發酵工程的發酵環節中，發酵條件不僅影響微生物的生長繁殖，也會通過影響酶的活性影響微生物的代謝途徑，C正確；D、單細胞蛋白是指利用發酵工程獲得的大量的微生物菌體，可作為食品添加劑，例如用酵母菌生產的單細胞蛋白可作為食品添加劑，甚至制成“人造肉”供人們直接使用；也可制成微生物飼料，例如在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質，動物食用后能提高免疫力，D正確。故答案為：A。

【分析】發酵工程的基本環節：

（1）菌種的選育：性狀優良的菌種可以從自然界中篩選出來，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得。

（2）擴大培養：在發酵之前還需要對菌種進行擴大培養。

（3）培養基的配制：在菌種確定之后，要選擇原料制備培養基。在生產實踐中，培養基的配方要經過反復試驗才能確定。

（4）滅菌：培養基和發酵設備都必須經過嚴格的滅菌。

（5）接種：將菌種接種到發酵罐培養液中。

（6）發酵：這是發酵工程的中心環節。①在發酵過程中，要隨時檢測培養波中的微生物數量、產物濃度等，以了解發酵進程。②要及時添加必需的營養組分，要嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發酵條件。

（7）產品的分離、提純：①如果發酵產品是微生物細胞本身，可在發酵結束之后采用過濾沉淀等方法將菌體分離和干燥，即得到產品。②如果產品是代謝物，可根據產物的性質采取適當的提取、分離和純化措施來獲得產品。10．【答案】C【解析】【解答】A、酵母菌一般不能直接將淀粉轉化為酒精，釀酒的原理是酵母菌可以將葡萄糖轉化為酒精和CO2，A錯誤；B、脫落酸抑制細胞分裂、抑制植物的生長、也能抑制種子萌發，故用脫落酸溶液浸泡大麥種子不能促進α-淀粉酶的合成，用赤霉素溶液浸泡大麥種子可以有效促進α-淀粉酶合成，增加麥芽汁中可發酵糖的含量，B錯誤；C、泡蓋的形成是由于向發酵池中通入無菌空氣后，酵母菌有氧呼吸產生大量的CO2，形成的25～30cm厚氣泡層，能將麥芽汁與空氣隔絕，C正確；D、可以用稀釋涂布法調查發酵液中酵母菌的數量，不能用平板劃線法調查酵母菌的數量，D錯誤。故答案為：C。

【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。

2、稀釋涂布平板法常用來統計樣品中活菌的數目，當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數為30～300的平板進行計數。11．【答案】C【解析】【解答】A、甲、乙是二倍體植株，通過體細胞雜交技術獲得的目的植株是四倍體，故目的植株相對于甲、乙而言發生了染色體數目變異，A正確；B、④是篩選獲得的具有耐鹽特性的胚狀體，但不能確定其是高產還是低產，故需要進一步篩選，B正確；C、①過程利用了酶的專一性，即利用纖維素酶和果膠酶獲取原生質體的過程，②過程誘導原生質體的融合應用了細胞膜具有流動性原理，C錯誤；D、①過程的目的是破壞細胞壁，將植物細胞置于適當濃度的低滲溶液中，有利于提高纖維素酶和果膠酶的處理效果，使細胞壁因吸水而被漲破，D錯誤。故答案為：C。

【分析】植物體細胞雜交技術：

1、植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。

2、過程：

（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等。化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。

（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。

（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質。

3、意義：克服了遠緣雜交不親和的障礙。

4、題圖分析：①是酶解法去除細胞壁，②是誘導原生質體融合，③是雜種細胞，④是經過耐鹽培養篩選獲得的具有耐鹽特性的胚狀體。12．【答案】C【解析】【解答】A、在黃花蒿組織培養過程中的再分化階段必須給予光照，以形成葉綠素，A正確；B、培養基中添加的生長素和細胞分裂素的作用用誘導分裂、分化，啟動脫分化、再分化，B正確；C、愈傷組織是一團大而無定形狀態的薄壁細胞，C錯誤；D、青蒿素是從植物黃花蒿的葉片中所提取的一種代謝產物，可大規模栽培組織培養苗以獲取藥用成分，D正確。故答案為：C。

【分析】1、植物組織培養過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養依據的原理是植物細胞的全能性。愈傷組織的細胞排列疏松而無規則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態的薄壁細胞。

2、植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產。13．【答案】B【解析】【解答】A、蝸牛消化道提取液可用來處理植物細胞的細胞壁，植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，蝸牛消化道提取液含有纖維素酶和果膠酶，可以去除植物的細胞壁，A正確；B、誘導原生質體融合最常用的方法是聚乙二醇，秋水仙素不能誘導融合，B錯誤；C、誘導原生質體融合后，只考慮兩兩融合，會產生三種融合細胞，例如A、B兩種細胞的融合，會產生A-A、B-B及A-B三種融合細胞，C正確；D、原生質體融合依靠細胞膜與細胞膜的融合，體現了細胞膜的流動性，D正確。故答案為：B。

【分析】植物體細胞雜交技術：

1、植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。

2、過程：

（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等。化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。

（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。

（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束。

（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質。14．【答案】A【解析】【解答】A、若該模型表示核移植技術，A和B表示供體細胞核和去核的卵細胞，則C→D過程表示胚胎體外培養和胚胎移植技術，A錯誤；B、若此圖表示植物體細胞雜交過程，則從A、B原生質體到C融合的原生質體的過程可以用電融合法誘導，B正確；C、若此圖為試管牛生產的流程圖，則A、B表示獲能的精子和MⅡ的卵母細胞，C正確；D、若A、B表示培養液和胚胎干細胞，若在培養液中加入分化誘導因子，則C→D的傳代培養過程中有可能出現分化現象，D正確。故答案為：A。

【分析】1、動物體細胞核移植：將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育為克隆動物。

2、植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。

15．【答案】B【解析】【解答】A、植物組織培養過程中，需要更換培養基，提高生長素的比例有利于生根，提高細胞分裂素的比例有利于芽的生長，A正確；B、細胞產物的工廠化生產主要是利用促進細胞生長的培養條件，提高總的細胞次生代謝物的含量，但不是提高單個細胞中次生代謝物的含量，B錯誤；C、由于植物組織培養容易受到培養條件和外界壓力（如射線、化學物質等)的影響而產生突變，所以常利用植物組織培養過程中產生的突變體培育新品種，C正確；D、植物微型繁殖具有高效、快速的特點，且為無性繁殖，因而能保持親本的優良性狀，D正確。故答案為：B。

【分析】1、植物組織培養就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養在人工配制的培養基上，給予適宜的培養條件，誘導其產生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。

2、植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產物的工廠化生產。16．【答案】D【解析】【解答】A、基因突變具有不定向，因此對植物的愈傷組織進行誘變處理后，需要進行檢測和篩選才能培育出符合要求的作物新品種，A錯誤；B、將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，需要用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，還需進行抗體陽性檢測，得出能產生單克隆抗體的雜交瘤細胞，B錯誤；C、利用植物細胞工程技術培育“蘿卜-甘藍”時，需要篩選出“蘿卜-甘藍”雜種細胞進行培養，C錯誤；D、植物的快速繁殖往往是無性繁殖，即通過使外植體細胞經歷脫分化與再分化過程成為試管苗，不需要進行檢測與篩選，D正確。故答案為：D。

【分析】1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

2、植物體細胞雜交是將不同植物的細胞通過細胞融合技術形成雜種細胞，進而利用植物的組織培養將雜種細胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細胞雜交是首先用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，獲得原生質體；用物理法（離心、振動、電刺激）或者化學法（聚乙二醇）誘導細胞融合，獲得融合的原生質體；原生質體再生出細胞壁，獲得雜種細胞；雜種細胞經過脫分化和再分化獲得雜種植株。17．【答案】D【解析】【解答】A、誘導動物細胞融合的常用方法之一是滅活病毒誘導法，可見，用滅活的病毒處理供體細胞的目的是促進兩細胞融合，A正確；B、克隆猴是非人靈長類，與人類親緣關系非常接近，研發出的藥物用于人類患者出現無效或副作用的幾率大大降低，可有縮短藥物研發進程，B正確；C、題干中“將組蛋白去甲基化酶的mRNA和組蛋白脫乙酰酶抑制劑注入重構胚”，說明降低組蛋白的甲基化水平，提高組蛋白的乙酰化水平，從而激活重構胚的發育，C正確；D、胚胎移植時進行同期發情處理，是為胚胎移入受體提供相同的生理環境，此時代孕母猴對外來胚胎基本不存在免疫排斥，D錯誤。故答案為：D。

【分析】1、采集牛卵巢中的卵母細胞，在體外培養到減數第二次分裂中期→通過顯微操作去核→去核的卵母細胞高奶牛（供體）→從供體身體某一部位上取體細胞→供體細胞培養→將供體細胞注入去核的卵母細胞→通過電融合法使兩細胞融合，供體核進入卵母細胞→得到重構胚→用物理或化學方法激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育過程→早期胚胎→將胚胎移入受體（代孕）母牛體內→生出與供體奶牛遺傳物質基本相同的犢牛。

2、胚胎移植的生理學基礎：

①動物發情排卵后，同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環境。

②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態。這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應。這為胚胎在受體的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。18．【答案】A【解析】【解答】A、單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的特點，因此利用p30的單克隆抗體與病毒蛋白p30蛋白特異性結合的方法可診斷出病毒感染者，故針對p30的單克隆抗體可用于ASFV早期診斷試劑盒的研發，A正確；B、B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合除了可以用化學方法誘導外，還可用滅活的病毒進行促進細胞融合，B錯誤；C、將小鼠B淋巴細胞和骨髓瘤細胞混合，經誘導融合后的細胞不都是雜交瘤細胞，還有B細胞自身融合的細胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞等，C錯誤；D、動物細胞的體細胞全能性不易體現，在單克隆抗體的制備過程中，需要對雜交瘤細胞進行克隆化培養，D錯誤。故答案為：A。

【分析】1、單克隆抗體的制備：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原，然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。

2、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導彈”。

由于單克隆抗體的特異性強，能特異性識別抗原，因此可以把抗癌細胞的單克隆抗體跟放射性同位素、藥物等相結合，制成“生物導彈”，借助單克隆抗體的定位導向作用將藥物定向帶到癌細胞，在原位殺死癌細胞，療效高，副作用小，位置準確。19．【答案】C【解析】【解答】A、由題干可知，培養消化道上皮細胞是貼壁生長的細胞，因此更易觀察判斷細胞是否具有接觸抑制現象，A正確；B、動物細胞培養常在含有95%空氣和5%的CO2混合氣體的恒溫培養箱中進行，CO2作用是維持培養液的pH值，B正確；C、動物細胞培養過程中，為營造無菌、無毒的培養環境，需要對培養液和所有培養用具進行滅菌處理，以及在無菌環境下操作，并且要定期更換培養液，C錯誤；D、出現接觸抑制時，用胰蛋白酶處理，使之分散成單個細胞，再用離心法收集細胞，制成細胞懸液后，分瓶培養，D正確。故答案為：C。

【分析】動物培養條件：

（1）無菌無毒環境：無菌--對培養液和所有培養用具進行無菌處理；在細胞培養液中添加一定量的抗生素；無毒-一定期更換培養液，防止細胞代謝產物積累對自身造成危害。

（2）營養成分：所需營養物質與體內基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養基類型：合成培養基（將細胞所需的營養物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養基）

（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環境：通常采用培養皿或松蓋培養瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。O2：是細胞代謝所必需的CO2主要作用是維持培養液的pH。20．【答案】A【解析】【解答】A、小鼠體細胞誘導成CiPS細胞是形態、結構和功能發生穩定性差異的過程，而遺傳物質不變，A錯誤；B、與小鼠成體細胞相比，誘導形成的Cips細胞分化程度較低，全能性較高，B正確；C、這一過程類似于植物細胞的脫分化過程，C正確；D、體細胞轉化成CiPS細胞時，類似于脫分化過程，即細胞內部分不表達的基因又恢復為表達狀態，D正確。故答案為：A。

【分析】胚胎干細胞

（1）胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。

（2）特點：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞。另一方面，在體外培養條件下，ES細胞可不斷增殖而不發生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造。

（3）胚胎干細胞的主要用途是：

①可用于研究哺乳動物個體發生和發育規律；

②是在體外條件下研究細胞分化的理想材料。ES細胞在飼養層細胞上或在添加抑制因子的培養液中，能夠維持不分化的狀態。在培養液中加入分化誘導因子，如牛黃酸、丁酰環腺苷酸等化學物質時，就可以誘導ES細胞向分化，這為揭示細胞分化和細胞凋亡機理提供了有效的手段；

③可以用于治療人類的某些頑疾，如帕金森綜合征、糖尿病、老年癡呆癥、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；

④培育各種組織器官，用于器官移植，解決供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題。21．【答案】D【解析】【解答】A、如果a是核移植技術，b的產生說明了動物細胞的細胞核具有全能性，A錯誤；B、如果a是體外受精技術，則形成的b屬于有性生殖產生的動物，B錯誤；C、如果a是胚胎分割技術，b中個體的基因型一定相同，表型由于受到環境影響不一定相同，C錯誤；D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反應器，目的基因表達的產物在雌性動物的乳汁中提取，則需對移植的胚胎進行性別選擇，D正確。故答案為：D。

【分析】1、動物細胞核移植技術

（1）動物細胞核移植技術是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育成動物個體．用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物；其原理是動物細胞核的全能性。

（2）動物細胞核移植可分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植：體細胞核移植的難度明顯高于胚胎細胞核移植。原因：動物胚胎細胞分化程度低，恢復其全能性相對容易，動物體細胞分化程度高，恢復其全能性十分困難。

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體。用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。22．【答案】D【解析】【解答】A、在自然條件下，受精在輸卵管中完成，A錯誤；B、精子需要獲能才能與卵子結合，而卵子排出后要在輸卵管內進一步成熟到MII期，才具備與精子受精能力，B錯誤；C、在囊胚階段，胚胎的內部開始出現含液體的腔，即囊胚腔，C錯誤；D、囊胚期的內細胞團將來發育成胎兒的各種組織，滋養層細胞發育成胎膜和胎盤，D正確。故答案為：D。

【分析】胚胎發育的過程：受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體。

①卵裂期：細胞進行有絲分裂，數量增加，胚胎總體積不增加。

②桑葚胚：32個細胞左右的胚胎（之前所有細胞都能發育成完整胚胎的潛能屬全能細胞）。

③囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔（注：囊胚的擴大會導致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化）。

④原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔（細胞分化在胚胎期達到最大限度）。23．【答案】B【解析】【解答】A、胚胎移植后，經受體孕育的后代的遺傳特性與供體保持一致，因為供體胚胎與受體子宮建立的僅是生理和組織上的聯系，其遺傳物質在孕育過程中不會發生任何變化，A錯誤；B、采用胚胎分割技術可以獲得同卵雙胎或多胎，來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質，可以看作動物的無性繁殖，B正確；C、胚胎移植時要求供體母畜必須具備優秀的遺傳性能，受體需要身體健康且繁殖能力強，C錯誤；D、試管牛是采用體外受精、胚胎移植等技術形成的，屬于有性生殖的范疇，會發生基因重組，不能保持優良品種的遺傳特性，D錯誤。故答案為：B。

【分析】1、胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養等技術。經過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內產生后代，以滿足人類的各種需求。

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理．選擇遺傳特性和生產性能優秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種．并用激素進行同期發情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理．②配種或人工授精．③對胚胎的收集、檢查、培養或保存．配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）．對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發育到桑椹或胚囊胚階段．直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存．④對胚胎進行移植．⑤移植后的檢查．對受體母牛進行是否妊娠的檢查。24．【答案】C【解析】【解答】A、“三親嬰兒”的培育過程包括體外受精、早期胚胎培養和胚胎移植等技術，A正確；B、在核移植過程中，需要用物理或化學方法激活核移植產生的重構胚，使其完成發育進程，B正確；C、捐獻者攜帶的紅綠色盲基因位于其細胞核內，而捐獻者給三親嬰兒提供的是卵母細胞的細胞質，故捐獻者攜帶的紅綠色盲基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯誤；D、該嬰兒細胞的核基因由形成受精卵的夫婦提供，質基因由提供去核卵母細胞的婦女提供，D正確。故答案為：C。

【分析】1、動物細胞核移植技術是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育成動物個體．用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物；其原理是動物細胞核的全能性。

2、線粒體中遺傳物質的遺傳方式為細胞質遺傳（母系遺傳）。

25．【答案】D【解析】【解答】A、干細胞是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞，正常狀態下，不具有發育成完整個體的能力，需要核移植，A錯誤；B、胚胎移植的生理學基礎之一是母體子宮對植入胚胎基本無免疫排斥反應，這為胚胎在受體的存活提供了可能，能保證胚胎正常發育，因此進行胚胎移植前，供體和受體不需要進行免疫檢查，B錯誤；C、用純化的病毒抗原蛋白反復注射到小鼠體內，使其產生免疫反應，以獲得相應的B細胞，從小鼠血清中分離的抗體數量少，不是單克隆抗體，C錯誤；D、滋養層細胞將來發育成胎膜胎盤，胚胎移植前，可取囊胚的滋養層細胞進行性別鑒定，不會影響胚胎的發育，D正確。故答案為：D。

【分析】1、胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，如體外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干細胞培養等技術。經過處理后獲得的胚胎，還需移植到雌性動物體內產生后代，以滿足人類的各種需求。

2、胚胎發育過程：（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數量增加，胚胎總體積不增加；（2）桑椹胚：32個細胞左右的胚胎，之前所有細胞都能發育成完整胚胎的潛能，屬全能細胞；（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團，將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔。注：囊胚的擴大會導致透明帶的破裂，胚胎伸展出來，這一過程叫孵化；（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔。

3、胚胎移植的生理學基礎：

①動物發情排卵后，同種動物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的。這就為供體的胚胎移入受體提供了相同的生理環境。

②早期胚胎在一定時間內處于游離狀態。這就為胚胎的收集提供了可能。

③受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應。這為胚胎在受體的存活提供了可能。

④供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯系，但供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受影響。26．【答案】B【解析】【解答】A、DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精，可利用這個特性將DNA與蛋白質分離，A正確；B、高溫能使蛋白質、DNA變性，蛋白質在60～80℃發生變性，DNA在80℃以上變性，B錯誤；C、在用預冷的酒精沉淀DNA時，要用玻璃棒沿一個方向攪拌，為了防止絲狀的DNA攪碎，有利于DNA絮狀物的挑出，C正確；D、DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，DNA在2mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大，可利用此特性將提取的絲狀物或沉淀物溶解于NaCl溶液中，D正確。故答案為：B。

【分析】DNA粗提取和鑒定的過程：

（1）實驗材料的選取：凡是含有DNA的生物材料都可以考慮，但是使用DNA含量相對較高的生物組織，成功的可能性更大。

（2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液：

動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的蒸餾水，同時用玻璃棒攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞，需要先用洗滌劑溶解細胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的洗滌劑和食鹽，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。

（3）去除濾液中的雜質：

方案一的原理是DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；

方案二的原理是蛋白酶分解蛋白質，不分解DNA；

方案三的原理是蛋白質和DNA的變性溫度不同。

（4）DNA的析出與鑒定

①將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等、冷卻的酒精溶液，靜置2～3min，溶液中會出現白色絲狀物，這就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一個方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。

②取兩支20mL的試管，各加入物質的量濃度為2mol/L的NaCl溶液5mL，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變藍。27．【答案】B【解析】【解答】A、酶具有專一性，限制酶是專門切割DNA序列中一定部位的酶，所以圖示4種限制性核酸內切酶均不能夠識別和切割RNA分子內的核苷酸序列，A正確；B、由于NotI限制性核酸內切酶識別的序列比其他三種酶的序列長，若DNA上的堿基隨機排列，NotI限制性核酸內切酶切割位點出現頻率較其他三種限制性核酸內切酶低，B錯誤；C、兩種不同的限制酶可產生不同的黏性末端，所以使用兩種限制酶同時處理是為了防止質粒和含目的基因的外源DNA片段自身環化，C正確；D、用酶BglⅡ切出的目的基因與酶BamHⅠ切割的質粒重組后，重組DNA分子序列為，6個脫氧核苷酸對序列既不能被限制酶BglⅡ識別，也不能被BamHⅠ識別，所以不可能被這兩種酶切開，D正確。故答案為：B。

【分析】基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。28．【答案】C【解析】【解答】A、在構建重組質粒時，選用HindⅢ和Sall兩種不同的限制酶切割目的基因的兩端及質粒可防止目的基因和質粒的自我環化，A正確；B、若轉基因抗鹽煙草幼苗中檢測出現了抗鹽基因的DNA，只能說明煙草幼苗細胞中含有抗鹽基因，該基因正確表達為相關蛋白，可能使煙草幼苗表現出抗鹽特性，B正確；C、所給的限制酶在質粒上的切割位點都位于抗四環素基因的部位，如果目的基因插入到質粒中，得到重組質粒，則含重組質粒的農桿菌只含有完整的抗氨芐青霉素基因，不含完整的抗四環素基因（被目的基因破壞)，則含有目的基因的農桿菌不能在含四環素的培養基上生長，C錯誤；D、植物組織培養技術依據的原理是植物細胞的全能性，D正確。故答案為：C。

【分析】農桿菌轉化法（約80%的轉基因植物都是用這種方法獲得的）

1、農桿菌轉化法的具體過程：

（1）利用土壤的Ti質粒構建基因表達載體，即將目的基因整合到土壤農桿菌的Ti質粒上。

（2）將整合了目的基因的Ti質粒導入土壤農桿菌細胞內。

（3）利用土壤農桿菌感染植物細胞，該過程實際上是將含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒導入植物細胞內。

（4）含有目的基因的土壤農桿菌Ti質粒進入植物細胞后，可以把自己的一段基因整合到細胞核中的染色體上，這段基因中包含了目的基因。

2、原理：農桿菌中的Ti質粒上的T-DNA可轉移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據農桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質粒的T-DNA上，通過農桿菌的轉化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上。

3、農桿菌特點：易感染雙子葉植物和裸子植物，對單子葉植物沒有感染力；Ti質粒的T-DNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞的染色體上。

4、轉化：目的基因插入Ti質粒的T-DNA上農桿菌→導入植物細胞→目的基因整合到植物細胞染色體上→目的基因的遺傳特性得以穩定維持和表達。29．【答案】B【解析】【解答】A、發酵得到谷氨酸經過一系列處理制成谷氨酸鈉是味精，A錯誤；B、醬油由霉菌（黑曲霉）將原料中的蛋白質分解成多肽和氨基酸，經淋洗調制而成，B正確；C、醋酸菌在缺少糖源時，可以直接將乙醇轉化為乙醛，再將乙醛變為乙酸，C錯誤；D、啤酒發酵過程中，主發酵階段糖分解和代謝物生成后，需低溫、密閉環境進行后發酵，D錯誤。故答案為：B。

【分析】1、釀酒，選用異養厭氧型（酒精發酵型）微生物，利用無氧呼吸，獲取代謝產物；

2、制醋，選用醋酸桿菌（異養需氧型），在有氧條件下將酒精氧化成醋酸；

3、做腐乳選用霉菌（毛霉、根霉），利用毛霉或根霉中的淀粉酶和蛋白酶將豆腐中的淀粉、蛋白質水解為糖、多肽和氨基酸；

4、做泡菜，選用乳酸菌（異養厭氧型）在密閉條件下，利用乳酸菌的發酵作用，發酵產物乳酸不斷積累，抑制其他菌的活動；

5、利用放線菌、霉菌生產抗生素；

6、轉基因工程菌的培養，獲得特殊代謝產物或菌體、治理環境污染。30．【答案】B【解析】【解答】A、DNA分子在凝膠中的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象有關，一般DNA分子越大，遷移速度越慢，A正確；B、耐高溫的DNA聚合酶只能從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸，B錯誤；C、模板鏈只要加入一次，引物片段必須不斷加入，DNA聚合酶、DNA連接酶也可以反復使用，C正確；D、PCR擴增產物，需要進行鑒定，一般選用瓊脂糖凝膠電泳，D正確；故答案為：B。

【分析】1、PCR原理：在高溫作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2、DNA分子具有可解離的基團，在一定的pH下，這些基團可以帶上正電荷或負電荷。在電場的作用下，這些帶電分子會向著與它所帶電荷相反的電極移動，這個過程就是電泳。PCR的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象等有關。31．【答案】（1）水、碳源、氮源、無機鹽；涂布器（2）乙（3）檢測培養過程中培養基是否被雜菌污染（4）菌落數；1.3×107；小；當兩個或多個細胞連在一起時，只能觀察計數為一個菌落【解析】【解答】（1）培養基的主要成分是水、碳源、氮源、無機鹽，土壤是微生物的天然培養基，也能為微生物的生長提供這些營養物質。步驟④的涂布方法是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器。（2）培養基甲不含瓊脂，為液體培養基，不能用于涂布平板，故步驟④應選其中的培養基乙。（3）純化培養時，需同時進行未接種培養基的培養，目的是檢測培養過程中培養基是否被雜菌污染。（4）稀釋涂布平板法是將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落，在統計結果數一般用菌落數表示。甲研究員的4個平板菌落數差別較大，可能操作出現問題，乙研究員的4個平板菌落數據差別不大，且均符合計數要求。將土壤10g加入90mL無菌水中，稀釋了10倍，步驟③中的稀釋梯度分別為10、100、1000倍，故步驟③將土壤懸浮液稀釋了1000倍，整個過程共稀釋了10000倍，因此每克土壤中含有的固氮菌為（125+132+135+128）÷4÷0.1×104=1.3×107個，運用稀釋涂布平板法統計的結果往往較實際值偏小的原因是當兩個或多個細胞連在一起時，只能觀察計數為一個菌落。

【分析】釋涂布平板計