廣西南寧市三十六中2021-2022學年高二下學期期中生物試卷姓名：__________班級：__________考號：__________題號一二總分評分一、單選題1．下列有關果酒制作的敘述，錯誤的是（）A．葡萄酒自然發酵過程中起主要作用的微生物最終來自于土壤B．葡萄酒自然發酵過程的初期也需要有氧氣C．葡萄酒自然發酵的過程中，起作用的微生物不止有酵母菌一種D．葡萄酒自然發酵的過程中，酒的風味形成只與葡萄糖分解成酒精有關2．醋酸菌是釀制果醋時起主要作用的菌種。下列有關說法正確的是（）A．醋酸菌是一種好養性微生物，氧氣在其線粒體內膜上被利用B．醋酸菌細胞內能實現糖分→酒精→乙醛→醋酸的轉化過程C．醋酸菌對氧氣含量特別敏感，在深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡D．一般而言，在四川盆地，春季比夏季更適合醋酸菌的生長3．下列關于腐乳發酵的說法中，錯誤的是（）A．豆腐發酵中起主要作用的微生物，具有成形的細胞核和各種細胞器B．食用的腐乳表面的“皮”，主要是長在豆腐塊表面的霉菌菌絲C．制作好的腐乳中含有各種小分子的肽、氨基酸、甘油、脂肪酸等，形成了其獨特的風味D．在實驗室進行腐乳發酵時，若豆腐塊表面出現黃色、油膩狀，說明發酵成功了4．以下是腐乳制作的實驗流程，請判斷下列敘述正確的是（）讓豆腐上長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制A．加鹽是為了促進毛霉的生長B．加料酒主要是為了滅菌，避免腐敗變質C．若前期發酵溫度過低，腐乳的“皮”不易形成D．加鹽腌制時，底層和近瓶口處需加大用鹽量5．酒變酸后表面的菌膜、腐乳外部致密的“皮”、泡菜壇表面的白膜分別是（）A．酵母菌、乳酸菌、醋酸菌 B．醋酸菌、毛霉菌絲、酵母菌C．醋酸菌、毛霉菌絲、毛霉菌 D．醋酸菌、毛霉菌絲、乳酸菌6．中國酸菜的制作歷史悠久，不僅口感好，而且對人體有益。下列說法正確的是（）A．真空包裝的酸菜“脹袋”是因為乳酸菌大量繁殖導致B．腌制過程中，酸菜壇中有機物的含量和種類都會增加C．腌制酸菜配制的鹽水入壇前要煮沸，以防止雜菌污染D．酸菜腌制的時間越長，其口味越好，營養價值也越高7．下列制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的敘述，正確的是（）A．操作順序為計算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．將培養基滅菌后必須馬上倒平板，以免培養基凝固D．將倒完平板后，將平板立即倒過來放置，以免冷凝水落入污染培養基8．細菌培養過程中分別采用了高壓蒸氣、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理，這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌（）A．接種環、手、培養基 B．高壓鍋、手、接種環C．培養基、手、接種環 D．接種環、手、高壓鍋9．下圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗中樣品稀釋示意圖，據圖分析正確的是（）A．2號試管的稀釋倍數為102倍B．一般選用103、104、105倍的稀釋液進行平板培養C．4號試管中稀釋液進行平板培養得到的菌落數一定為5號試管的10倍D．5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1.7×109個10．關于土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗的敘述正確的是（）A．培養基應以尿素為唯一氮源，該細菌與硝化細菌所利用的碳源物質是相同的B．測定土壤樣品中的活菌數目，常用顯微鏡直接計數法C．對10mL土樣稀釋106倍后，取0.1mL該溶液進行重復的涂布實驗，測得的菌落數分別為18、234、276，則該10mL土樣中分解尿素的細菌數為2.55×108個D．應該設置對照以排除非測試因素對實驗結果的干擾，提高可信度11．已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解，會造成環境污染。某小組用以下三種培養基篩選土壤中能高效降解X的細菌，下列說法錯誤的是（）培養基組分Ⅰ牛肉膏(適量)、蛋白胨(適量)、X(15g/L)Ⅱ氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機鹽(適量)，X(15g/L)Ⅲ氯化鈉(5g/L)，硝酸銨(3g/L)，其他無機鹽(適量)，X(45g/L)A．Ⅰ號培養基中，為微生物提供氮源的有機物是蛋白胨B．Ⅱ、Ⅲ號培養基中，為微生物提供碳源的有機物是XC．在Ⅱ號培養基中，加入一定量的瓊脂后可制成固體培養基D．Ⅲ號接種培養一段時間后，不能降解X的細菌比例會降低12．在分離分解尿素的細菌的實驗時，有一個同學從對應106倍稀釋的培養基中篩選出大約150個菌落，而其他同學從同樣的稀釋度下只篩選出大約50個菌落，造成這種差異的原因不可能是（）A．培養基被污染 B．土壤樣品不同C．沒有設置對照 D．由于操作失誤13．蒸熟的蘋果具有很好的止瀉作用，這是因為蘋果中果膠的“立場”不太堅定，未經加熱的生果膠可軟化大便，與膳食纖維共同起著通便的作用，而煮過的果膠則搖身一變，不僅具有吸收細菌和毒素的作用，而且還有收斂、止瀉的功效。下列有關果膠的敘述，不正確的是（）A．果膠是植物細胞壁和胞間層的主要成分之一B．果膠是一種高分子化合物，可被果膠酶分解C．果膠在果汁加工中，影響果汁的出汁率和澄清度D．酵母菌也可產生果膠酶，因其細胞壁中含有果膠14．如圖表示在最適溫度條件下探究果膠酶用量的實驗結果，敘述正確的是（）A．在BC段限制反應速率的因素是溫度、pH或酶催化反應的時間等B．在AB段增加酶的用量或反應物的濃度，可以明顯加快反應速率C．增加酶的用量，反應速率沒有增加可能是蘋果泥用量少導致的D．在該實驗給定的條件下，果膠酶的最佳用量是C點對應的值15．下列關于探究不同加酶洗衣粉對某種污漬洗滌效果的實驗，敘述錯誤的是（）A．探討含有蛋白酶洗衣粉的洗滌效果不能選擇絲綢作為洗滌材料B．洗滌材料應該選擇固定大小的新布料以保證科學實驗的嚴謹C．實驗的觀察指標可以是相同洗滌時間內不同污漬的殘留程度D．污漬的污染程度可以通過滴加在洗滌材料上污染物的量來控制16．為了使牛仔褲呈現“穿舊”效果，在工業洗衣機中用酶洗代替傳統的浮石擦洗，是目前重要的生產手段（工藝流程見下圖），下列敘述中錯誤的是（）A．溫度、pH等條件，會影響牛仔褲的“穿舊”效果B．上述工藝中，不可選用包埋法固定化纖維素酶C．上述工藝中，仿舊顏色的深淺由使用的染料量控制D．上述工藝中，纖維素酶的作用機理與其在洗衣粉中去污的機理相似17．蛋白質的提取和分離是蛋白質研究的重要技術，以下敘述正確的是（）A．實驗過程中可采用透析法將蛋白質與其他小分子雜質分離B．可選擇豬、牛、羊、蛙等動物的血液為材料分離血紅蛋白C．實驗操作流程依次為粗分離、樣品處理、純化、純度鑒定D．根據蛋白質的相對分子質量大小，可通過電泳分離蛋白質18．如圖表示對某蛋白質溶液進行SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的結果（相似于紙層析法分離色素），下列相關敘述不正確的是（）A．蛋白質上某些基團解離后可使蛋白質帶電，電場中帶電的蛋白質分子（或多肽）會向著與其所帶電荷相反的電極移動B．電泳結果表明溶液中蛋白質可能有兩種，但也可能只有一種C．蛋白質在SDS-聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度基本取決于其分子量大小D．蛋白質在SDS-聚丙烯酰胺凝膠中的遷移速度完全取決于其所帶凈電荷多少19．玫瑰精油素有“液體黃金”之稱，下面是提取玫瑰精油的實驗流程圖，請據圖分析不正確的是（）A．提取玫瑰精油的方法是水蒸氣蒸餾法B．①和②操作要求分別加入氯化鈉和無水硫酸鈉C．③操作是萃取，以除去固體硫酸鈉D．該實驗流程也可用于從薄荷葉中提取薄荷油20．如圖是利用水中蒸餾法提取玫瑰精油的裝置。下列有關該裝置的描述，錯誤的是（）A．該裝置在安裝時需要先固定熱源酒精燈，再固定蒸餾瓶，并要注意蒸餾瓶與熱源的距離B．該裝置的安裝，一般按照自下而上、從左到右的順序C．圖中冷凝管的進水口、出水口接錯，進水口應在下，出水口應在上D．將溫度計固定在蒸餾瓶頭上，固定的位置如圖所示，使溫度計水銀球略高于液面二、綜合題21．棉籽餅作動物飼料時，其所含棉酚（元素組成為C、H、O）對動物有毒害作用。某科技小組配制培養基（成分為：棉酚0.25g、(NH4)2SO45.0g、其他無機鹽適量、瓊脂2%、蒸餾水）欲從棉花秸稈中分離棉酚分解菌，以對棉籽餅進行脫毒。回答下列問題：（1）此培養基中(NH4)2SO4能為微生物提供的主要營養為；按功能分該培養基屬于培養基。（2）用平板劃線法分離棉酚分解菌，劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有（答出一點）。在接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養一段時間，這樣做的目的是。（3）采用稀釋涂布平板法接種后，菌落數隨培養時間的延長而發生變化，因此需每隔24h統計一次菌落數，選擇的記錄數據作為結果。在37℃下培養48h，若培養基上出現形狀、大小、隆起程度和顏色不同的菌落，可判斷培養基上有多種細菌，這里判斷依據是在一定的培養條件下，同種微生物表現出。（4）在某次分離棉酚分解菌的實驗中，大部分同學從培養基上篩選出大約50個菌落，而有一位同學從培養基上篩選出大約150個菌落，這種差異產生的原因可能是(答出1點即可)。22．如表所示甲、乙分別是分離兩種土壤中微生物的培養基的配方，圖丙所示為相關分離過程，回答下列問題：KH2PO41.4g纖維素粉5.0gNa2HPO42.1gNaNO31.0gMgSO4·7H2O0.2gNa2HPO41.2g葡萄糖10.0gKH2PO40.9g尿素1.0gMgSO4·7H2O0.5g瓊脂15.0gKCl0.5g

酵母膏0.5g

水解酪素0.5g將上述物質溶解后，用蒸餾水定容至1000mL甲乙注：水解酪素，即水解酪蛋白，由酪蛋白水解得到。（1）從功能上看，甲培養基屬于。從物理性質上看，甲培養基屬于。其中提供氮源的物質是。（2）如果將乙培養基配制成固體培養基，則在該培養基上長出的菌落是否都能分解纖維素？。如果培養基中加入可以篩選出具有分解纖維素能力的菌株，同時透明圈越(填“大”或“小”)，表示該菌分解纖維素的能力越強。（3）為了計數微生物的數量，圖丙采用法進行接種培養計數，除此之外，還可以采用法進行計數。其中前一種計數方法所得結果要比后一種計數方法所得結果(填“大”或“小”)。（4）用稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比活菌的實際數目(填“少”或“多”)，原因是。（5）一位同學利用圖丙的方法步驟在4個平板培養基上分別接種0.1mL土壤稀釋液④，培養后菌落數分別為180、155、176、129個，則1mL原土壤樣液①中微生物數量約為。23．蛋白質對生命活動來說是不可缺少的，人們要研究蛋白質，就得從復雜的細胞混合物中提取、分離高純度的蛋白質。下圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置。請回答下列問題：（1）根據圖甲可知，這是采用法對血紅蛋白進行分離的過程，此方法是根據蛋白質的不同來分離蛋白質的。在對甲圖所示的凝膠柱進行裝填時，一定要裝填均勻，不能有氣泡存在，因為氣泡會。（2）圖乙表示對分離出的血紅蛋白進行的過程，此操作的目的是。（3）圖丙為向色譜柱中加樣的過程。操作先后順序應為（用圖中數字和“→”表示）。（4）經過丙圖所示的操作，連接好緩沖液洗脫瓶，并以較為恒定的流速緩慢加入緩沖液。如果能看到凝膠色譜柱中的紅色區帶，說明色譜柱制作成功。在對蛋白質進行分離純化后，還需要對得到的蛋白質進行分子量的測定，我們通常使用的是的方法，這種方法中，蛋白質的遷移率完全取決于。24．胡蘿卜素是一種常用的備用色素，可分別從胡蘿卜或產生胡蘿卜素的微生物體中提取獲得。薰衣草精油氣味芳香，能夠清熱解毒，清潔皮膚，祛斑美白，深受女性朋友的喜愛，研究還發現薰衣草精油有抑菌作用。請回答下列問題：（1）薰衣草精油化學性質穩定，不溶于水，易揮發。根據以上特點，可用法提取薰衣草精油，其原理是。（2）科研人員探究薰衣草精油抑菌實驗時，以滴加等體積精油小圓形濾紙片為中心的透明圈的大小來比較薰衣草精油對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果，如下表所示。薰衣草精油對兩種細菌活性影響的測定濃度（μg/disc）0.512.5大腸桿菌抑菌圈直徑（mm）6.726.938.66金黃色葡萄球菌抑菌圈直徑（mm）5.86.216.95由表數據可知，薰衣草精油對抑菌效果更好，且表中數據能否得知薰衣草精油對大腸桿菌抑菌效果的最佳濃度？。（3）探究薰衣草精油抑菌實驗時所用的培養基需要用法進行滅菌，滅菌結束后，切斷電源，等自然冷卻到壓力表為0時，再打開排氣閥。（4）從植物中提取胡蘿卜素常用的方法是，其效率主要取決于。下圖是胡蘿卜素粗品鑒定裝置示意圖。該鑒定方法的名稱是法。在圖乙的胡蘿卜素層析結果示意圖中，A，B，C，D四點中，屬于提取樣品的樣點是。

答案解析部分1．【答案】D【解析】【解答】A、葡萄酒自然發酵的微生物主要來源于葡萄皮上的野生酵母菌，最終來自于土壤，A正確；B、葡萄酒自然發酵過程的初期也需要有氧氣，使酵母菌進行有氧呼吸，生長、增殖，B正確；C、葡萄酒自然發酵的過程中，起作用的微生物主要是酵母菌，還有其他雜菌，C正確；D、葡萄酒自然發酵的過程中，酒的風味形成與酵母菌菌種、葡萄品種以及葡萄糖分解成酒精有關，D錯誤。故答案為：D。

【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發酵。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，20℃左右，酒精發酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。2．【答案】C【解析】【解答】A、醋酸菌屬于原核生物，其細胞內沒有線粒體，A錯誤；B、醋酸菌是一種好氧型微生物，不能將葡萄糖分解為酒精，B錯誤；C、醋酸菌是一種好氧型微生物，對氧氣含量特別敏感，在深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡，C正確；D、醋酸菌生長的適溫度是30～35℃，所以在四川盆地，夏季比春季更適合醋酸菌的生長，D錯誤。故答案為：C。

【分析】醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。3．【答案】D【解析】【解答】A、豆腐發酵中起主要作用的微生物是毛霉，屬于真核生物，其細胞中具有成形的細胞核和各種細胞器，A正確；B、食用的腐乳表面的“皮”，主要是毛霉長在豆腐塊表面的匍匐菌絲，B正確；C、制作好的腐乳中含有各種小分子的肽、氨基酸、甘油、脂肪酸等，形成了其獨特的風味，C正確；D、在實驗室進行腐乳發酵時，若豆腐塊表面出現黃色、油膩狀，說明鹽量太少，沒有抑制其他微生物的生長，D錯誤。故答案為：D。

【分析】腐乳的制作原理：（1）腐乳的發酵在多種微生物的協同作用下進行，其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類型是異樣需氧型。（2）毛霉等微生物產生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪分解成甘油和脂肪酸。4．【答案】C【解析】【解答】A、加鹽能抑制微生物的生長，避免腐乳腐敗變質，還能析出豆腐中的水分，使腐乳成形，A錯誤；B、加料酒能抑制微生物的生長，不能達到滅菌的目的，料酒還能使腐乳具有獨特的香味，B錯誤；C、腐乳制備的溫度是15-18℃，前期發酵溫度過低，不適宜毛霉生長，則腐乳“皮”不易形成，C正確；D、將長滿毛霉的豆腐裝瓶腌制時，應逐層加鹽，近瓶口處需鋪厚一點，防止雜菌污染，因此腐乳裝瓶時每層豆腐塊均需要加鹽但添加的鹽量一般由下到上逐層增加，D錯誤。故答案為：C。

【分析】1、原理：(1)腐乳的發酵在多種微生物的協同作用下進行，其中起主要作用的是毛霉，它是一種絲狀真菌，新陳代謝類型是異養需氧型。(2)毛霉等微生物產生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸。

2、需要注意的問題：(1)腐乳制作所需豆腐的含水量及意義；豆腐含水量以70%為宜。毛霉為異養需氧型真菌，若含水量過高，影響毛霉的有氧呼吸，豆腐不宜成塊；若含水量過少，則不利于毛霉的生長，毛霉的代謝也離不開水。(2)配制鹵湯時酒量的控制：加酒的目的之一是殺死微生物。如果過少，達不到殺死微生物的目的，導致豆腐腐敗；若過多，不但殺死了微生物，而且會因酒精度過高抑制了酶的活性，從而影響腐乳的成熟，同時還會因酒精含量過高而影響腐乳的風味。一般應控制在12%左右。

5．【答案】B【解析】【解答】在氧氣充足的條件下，能將乙醇轉化成醋酸，變酸酸的酒表面的一層菌膜，主要與醋酸菌有關；腐乳表面一層致密的皮是由毛霉的匍匐菌絲形成的；泡菜壇液面的一層白膜，主要是產膜酵母繁殖的結果。故答案為：B。

【分析】1、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發酵。溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，20℃左右，酒精發酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2、醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層發酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。6．【答案】C【解析】【解答】A、真空包裝的酸菜“脹袋”是因為雜菌污染，導致產生氣體，氣壓變大，A錯誤；B、腌制過程中，酸菜壇中有機物被分解，產生大量中間產物，所以有機物的種類增加，但有機物的含量會減少，B錯誤；C、腌制酸菜配制的鹽水入壇前要煮沸，以防止雜菌污染，同時也能除氧，C正確；D、酸菜制作過程中會產生亞硝酸鹽，因此并不是腌制時間越長，口感越好，營養價值越高，D錯誤。故答案為：C。

【分析】泡菜的制作原理是微生物的發酵在食品的制作而成。制作泡菜時要用到乳酸菌，乳酸菌是一種厭氧菌，在無氧的條件下，乳酸菌發酵產生乳酸，使得菜呈現一種特殊的風味，還不改變菜的品質。7．【答案】B【解析】【解答】A、操作順序為計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，A錯誤；B、部分牛肉膏粘附在稱量紙上，將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，保證稱量的牛肉膏均進入培養基，B正確；C、將培養基滅菌后，應冷卻到50℃時倒平板，C錯誤；D、倒完平板后，待培養基凝固后，將平板倒過來放置，以免冷凝水落入污染培養基，D錯誤。故答案為：B。

【分析】制作牛肉膏蛋白胨固體培養基應盡量避免雜菌污染，一般步驟為計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板，將培養基滅菌后，應冷卻到50%時倒平板，溫度太高容易燙手，溫度太低培養基會凝固。8．【答案】C【解析】【解答】ABCD、高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個設備，通常用于培養基的滅菌；用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法；火焰灼燒，可以迅速徹底地滅菌，適用于微生物的接種工具，如接種環、接種針等金屬用具。ABD錯誤，C正確。故答案為：C。

【分析】滅菌指用強烈的物理或化學方法殺滅所有微生物，包括致病的和非致病的，以及細菌的芽胞。常用滅菌方法：灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法。高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養基和玻璃器皿的滅菌，干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌。

9．【答案】D【解析】【解答】A、2號試管的稀釋倍數為103倍，A錯誤；B、測定土壤中細菌的數量，一般選用104、105、106倍的稀釋液進行平板培養，B錯誤；C、4號中稀釋液進行平板培養，稀釋倍數比5號的低10倍，如果稀釋倍數適當，得到的菌落平均數可能是5號的10倍，C錯誤；D、5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為（169+176+165）÷3÷0.1×105×100÷10=1.7×109個，D正確。故答案為：D。

【分析】1、分解尿素的細菌的鑒定細菌合成的脲酶將尿素分解成氮，氮會使培養基的堿性增強。在以尿素為唯一氨源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

（1）該培養基配方中的氨源除了尿素外，還有蛋白胨，因此尿素不是唯一氨源，不能分離出尿素分解菌。

（2）為了防止雜菌污染，接種前需要對培養基進行滅菌。在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行。

（3）純化細菌時，如菌液濃度過高，則培養基中菌落可能連成一片，需要對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數），以避免此種現象出現。

（4）獲取分解尿素的細菌后，如要臨時保存，可將菌種接種在回體斜面培養基上，在合適的溫度下培養。當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。

2、統計菌落數目的方法∶(1)顯微鏡直接計數法①原理∶利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法∶用計數板計數；③缺點∶不能區分死菌與活菌。(2)間接計數法(活菌計數法）①原理∶當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=(c+V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。10．【答案】D【解析】【解答】A、從土壤中分離分解尿素的細菌，培養基應以尿素為唯一氮源，尿素分解菌為異養型，利用的是有機碳源，硝化細菌是自養型，以二氧化碳為碳源，二氧化碳為無機物，A錯誤；B、測定土壤樣品中的活菌數目，常用稀釋涂布平板法，B錯誤；C、對10mL土樣稀釋106倍后，取0.1mL該溶液進行重復的涂布實驗，測得的菌落數分別為18、234、276，則該10mL土樣中分解尿素的細菌數為[(234＋276)÷2]÷0.1×106×10＝2.55×1010個，C錯誤；D、分離微生物時，需要設置不接種的培養基與實驗組一起培養做空白對照，以排除實驗組中非測試因素對實驗結果的干擾，提高可信度，D正確。故答案為：D。

【分析】1、分解尿素的細菌的鑒定細菌合成的脲酶將尿素分解成氮，氮會使培養基的堿性增強。在以尿素為唯一氨源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

（1）該培養基配方中的氨源除了尿素外，還有蛋白胨，因此尿素不是唯一氨源，不能分離出尿素分解菌。

（2）為了防止雜菌污染，接種前需要對培養基進行滅菌。在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行。

（3）純化細菌時，如菌液濃度過高，則培養基中菌落可能連成一片，需要對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數），以避免此種現象出現。

（4）獲取分解尿素的細菌后，如要臨時保存，可將菌種接種在回體斜面培養基上，在合適的溫度下培養。當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。

2、統計菌落數目的方法∶(1)顯微鏡直接計數法①原理∶利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法∶用計數板計數；③缺點∶不能區分死菌與活菌。(2)間接計數法(活菌計數法）①原理∶當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=(c+V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。11．【答案】A【解析】【解答】A、Ⅰ號培養基中，為微生物提供氮源的有機物不只是蛋白胨，牛肉膏也可以，A錯誤；B、Ⅱ、Ⅲ號培養基中，只有有機物X，且其中含有C、H兩種元素，因此X能為微生物提供碳源，B正確；C、瓊脂是凝固劑，因此，在Ⅱ號培養基中，加入一定量的瓊脂后可制成固體培養基，C正確；D、Ⅲ號培養基中只有X這一種有機物，因此能篩選出降解X的微生物，隨著培養時間的延長，X物質含量減少，且出現其他中間產物，因此，接種培養一段時間后，不能降解X的細菌比例會降低，D正確。故答案為：A。

【分析】1、培養基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產物的營養物質。營養物質歸納為碳源、氨源、生長因子、無機鹽和水。培養基按物理性質可分為固體培養基和液體培養基，液體培養基中加入凝固劑可以制成固體培養基；固體培養基一般用于微生物的鑒別、分離和計數，液態培養基常用于擴大化生產，觀察細菌運動。根據化學成分分為合成培養基、天然培養基等；根據用途分為選擇培養基、鑒別培養基。

2、選擇培養原理：（1）利用營養缺陷選擇培養基進行的選擇培養：不加含碳有機物的無碳培養基分離自養型微生物，無氮培養基分離自生固氮微生物；（2）利用微生物(目的菌）對某種營養物質的特殊需求，使該營養物質成為某類微生物的唯一供給者：石油作為唯一碳源的培養基分離出能消除石油污染的微生物，尿素為唯一氮源的培養基分離分解尿素的微生物；（3）在完全培養基中加入某些化學物質，利用加入的化學物質抑制部分微生物生長或利于部分微生物生長：加入青霉素等抗生素分離出酵母菌和霉菌等真菌，同時抑制細菌的生長，加入高濃度的食鹽分離耐高溫的微生物；（4）利用培養條件進行的選擇培養：在高溫環境中培養分離耐高溫的微生物，將培養基pH調至較低水平分離耐酸的微生物，在無氧環境中培養分離厭氧微生物和兼性厭氧微生物。12．【答案】C【解析】【解答】A、若該同學所用的培養基被污染，則可能導致獲得的菌落遠大于其他同學，A正確；B、若該同學所用的土樣不同，則可能導致獲得的菌落遠大于其他同學，B正確；C、沒有設置對照，不會影響該同學培養的菌落數，即不設置對照不會造成該同學的結果與其他同學的結果的差異，C錯誤；D、若該同學操作失誤，則可能會因為被污染而導致獲得的菌落遠大于其他同學，D正確。故答案為：C。

【分析】生物實驗應遵循對照原則、等量原則、單一變量原則和控制無關變量原則。某同學的實驗結果可能是培養基污染造成的，還可能是某同學實驗操作過程中污染造成的，也可能是與其他同學所取土壤樣品不同造成的，關鍵是設法排除影響結果的因素。13．【答案】D【解析】【解答】A、植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要組成成分之一，果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層，A正確；B、根據以上分析可知，果膠是由半乳糖醛酸聚合而成的一種高分子化合物，果膠酶能夠分解果膠形成可溶性半乳糖醛酸，B正確；C、果膠在果汁加工中，影響果汁的出汁率和澄清度，C正確；D、酵母菌雖然有細胞壁，但其細胞壁中不含果膠成分，D錯誤。故答案為：D。

【分析】果膠酶是分解果膠的一類酶的總稱，它包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶.產生果膠酶的生物有植物、霉菌、酵母菌和細菌等.果膠酶能夠分解果膠，瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，也是果汁變得澄清。14．【答案】C【解析】【解答】A、該實驗已經是在最適溫度下測得的，在BC段限制反應速率的因素不會是溫度，A錯誤；B、在AB段限制反應速率的因素是酶的用量，增加酶的用量可以加快酶促反應速率，但增加反應物濃度不可以，B錯誤；C、增加酶的用量，反應速率沒有增加可能是蘋果泥用量少導致的，C正確；D、在該實驗給定的條件下，果膠酶的最佳用量是B點對應的值，D錯誤。故答案為：C。

【分析】酶

（1）酶是由活細胞產生的具有催化活性的有機物，其中大部分是蛋白質、少量是RNA。

（2）酶催化作用的實質：降低化學反應的活化能，在反應前后本身性質不會發生改變。

（3）酶的特性：①高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107-1013倍。②專一性：每一種酶只能催化一種或者一類化學反應。③酶的作用條件較溫和：在最適宜的溫度和pH條件下，酶的活性最高；溫度和pH偏高或偏低，酶的活性都會明顯降低。

（4）酶的變性：過酸、過堿或溫度過高，會使酶的空間結構遭到破壞，使酶永久失活；低溫使酶活性明顯下降，但在適宜溫度下其活性可以恢復。15．【答案】C【解析】【解答】A、絲綢作為洗滌材料主要成分是蛋白質，故探討含有蛋白酶洗衣粉的洗滌效果不能選擇絲綢作為洗滌材料，A正確；B、做實驗，無關變量保持相同且適宜，故洗滌材料應該選擇固定大小的新布料以保證科學實驗的嚴謹性，B正確；C、本實驗的自變量是洗衣粉的種類，污漬屬于無關變量，應該是相同的，實驗的觀察指標可以是相同洗滌時間內相同污漬的殘留程度，C錯誤；D、污漬的污染程度要保持一致，這可以通過滴加在布料上的污染物的量來控制，D正確。故答案為：C。

【分析】加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。16．【答案】C【解析】【解答】A、溫度、pH等條件會影響酶的活性，改變溫度、酸堿度和處理時間會影響酶作用的結果，進而會影響牛仔褲的“穿舊”效果，A正確；B、由于纖維素酶較小，不能用包埋法固定化酶，B正確；C、上述工藝中，仿舊顏色的深淺由纖維素酶的作用效果和使用的染料量共同決定，C錯誤；D、纖維素酶在仿舊中的作用機理是適當分解布料中的纖維素成分，洗衣粉中添加纖維素酶的作用機理是適當分解布料中的纖維素成分使織物膨松有利于去污，即纖維素酶均是起催化作用，二者作用機理相似，D正確。故答案為：C。

【分析】1、加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2、纖維素酶是一種復合酶，一般認為它至少含有三種組分，即C酶、CX酶、葡萄糖苷酶，其中葡萄糖糖苷酶可將纖維二糖分解成葡萄糖；剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，可以通過觀察是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。纖維素分解菌鑒別培養基屬于固體培養基。17．【答案】A【解析】【解答】A、蛋白質分子不能透過半透膜，而溶液中的小分子物質則可以透過半透膜，因此可以將蛋白質和溶液中的小分子物質分離，A正確；B、蛋白質的提取和分離實驗可以以豬、牛、羊或其他哺乳動物的血液為材料分離血紅蛋白，而不用蛙的，因為血紅蛋白存在于紅細胞內，哺乳動物的成熟紅細胞不含細胞核及眾多細胞器，易分離，B錯誤；C、實驗操作流程依次為：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定，C錯誤；D、凝膠色譜法分離蛋白質的原理是不同蛋白質的相對分子質量不同，在凝膠柱中移動的速度不同，從而將分子質量較大的蛋白質分子除去，D錯誤。故答案為：A。

【分析】1、蛋白質的提取與分離的原理是根據蛋白質的理化性質，即蛋白質的形狀、大小、電荷性質和多少、溶解度、吸附性質、親和力等的干差萬別，由此提取和分離各種蛋白質。凝膠色譜法的原理：分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙，路程短，流動快；分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內部，路程長，流動慢。

2、蛋白質的提取與分離的步驟為：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析（3）純化：調節緩沖液面一加入蛋白質樣品→調節緩沖液面一洗脫一收集分裝蛋白質（4）純度鑒定一SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。18．【答案】D【解析】【解答】A、蛋白質的氨基與羧基可發生解離，使其帶正電或負電，帶電的蛋白質分子（或多肽）會向著與其所帶電荷相反的電極移動，A正確；B、SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳會使蛋白質水解成肽鏈，故結果所示可能只有一種蛋白質（有兩種肽鏈），也可能是兩種蛋白質，B正確；C、蛋白質在SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳的遷移速度由其分子大小決定，C正確；D、SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳所加的SDS可完全掩蓋蛋白質本身所帶電荷，故其移動速度與本身所帶電荷無關，D錯誤。故答案為：D。

【分析】凝膠色譜法是根據相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法。相對分子質量大的蛋白質分子不能進入凝膠顆粒內部，通過的路程短，移動速度快；相對分子質量小的蛋白質分子比較容易進入凝膠內的通道，通過的路程長，移動速度慢。因此，樣品中相對分子質量大的蛋白質先流出，相對分子質量小的分子后流出。某蛋白質溶液進行SDS-聚丙烯酰膠凝膠電泳的結果有兩條帶，說明溶液中可能有兩種蛋白質，但也可能只有一種（蛋白質水解成兩條肽鏈）。19．【答案】C【解析】【解答】A、玫瑰精油的化學性質穩定，難溶于水，易溶于有機溶劑，能隨水蒸氣一同蒸餾，故提取玫瑰精油的方法是水蒸氣蒸餾法，A正確；B、①是加入氯化鈉出現油水分層，②是加入無水硫酸鈉吸水，B正確；C、③是過濾，C錯誤；D、薄荷油與玫瑰精油相同，該實驗流程也可用于從薄荷葉中提取薄荷油，D正確。故答案為：C。

【分析】植物芳香油的蒸餾提取過程：浸泡、加熱蒸餾、乳濁液的分離。植物芳香油的主要成分：主要包括類化合物及其衍生物。橘皮精油的主要成分：檸檬烯。植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等。

（1）蒸餾法：芳香油具有揮發性。把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發性較強的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據蒸餾過程中原料放置的位置的標準，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。

（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點的有機溶劑中，是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點的溶劑，剩下的就是芳香油。

（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法。20．【答案】D【解析】【解答】A、該裝置在安裝時需要先固定熱源——酒精燈，再固定蒸餾瓶，并要注意其離熱源的距離，A正確；B、蒸餾裝置的安裝一般都按自下而上、從左到右的順序，B正確；C、圖中冷凝管進水口、出水口接錯，冷凝管進水口在下，出水口在上，與水蒸氣流向相反，C正確；D、溫度計固定在蒸餾頭上，使溫度計水銀球的上限與蒸餾頭側管的下限處在同一水平線上，D錯誤。故答案為：D。

【分析】植物芳香油的蒸餾提取過程：浸泡、加熱蒸餾、乳濁液的分離。植物芳香油的主要成分：主要包括類化合物及其衍生物。橘皮精油的主要成分：檸檬烯。植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等。

（1）蒸餾法：芳香油具有揮發性。把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發性較強的芳香油攜帶出來，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據蒸餾過程中原料放置的位置的標準，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。

（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點的有機溶劑中，是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點的溶劑，剩下的就是芳香油。

（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法。21．【答案】（1）氮源和無機鹽；選擇（2）接種環灼燒后沒有冷卻就開始劃線、劃線未從第一區域末端開始（未接觸到第一區域末端）；檢測培養基滅菌是否合格（3）菌落數目穩定時；穩定的菌落特征（4）所取材料不同、培養基污染、操作失誤、取樣前未搖勻樣液【解析】【解答】(1)根據(NH4)2SO4的化學式可知，里面含有氮元素和無機離子，因此(NH4)2SO4能為微生物提供氮源和無機鹽。此培養基具有選擇功能，理由是以棉酚作為唯一碳源，只有棉酚分解菌才能在此培養基上生長，因此按功能分該培養基屬于選擇培養基。(2)在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做可以將聚集的菌落逐步減少以獲得單個菌落。劃線的某個平板培養后，第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區域的第一條線上無菌落，其它劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是接種環灼燒后未冷卻劃線，或者是未從第一區域末端開始。在接種前，隨機取若干滅菌后的空平板先行培養一段時間，這樣做的目的檢測培養基滅菌是否徹底，即檢測培養基滅菌是否合格。(3)為了防止培養時間不足，導致遺漏菌落數目，采用稀釋涂布平板法接種后，選擇菌落數目穩定時記錄數據作為結果。不同的細菌在培養基上的菌落特征是不同的，有的菌落表面光滑黏稠，有的粗糙干燥，有的易挑起等，因此可依據同種微生物表現出的穩定的菌落特征來判斷出菌落上有多種細菌。(4)兩位同學篩選出的菌落個數差異較大，可能是因為所取的材料不同，也可能是培養基污染、操作失誤、取樣前未搖勻樣液等實驗操作問題造成的差異。

【分析】1、培養基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產物的營養物質。營養物質歸納為碳源、氨源、生長因子、無機鹽和水。培養基按物理性質可分為固體培養基和液體培養基，液體培養基中加入凝固劑可以制成固體培養基；固體培養基一般用于微生物的鑒別、分離和計數，液態培養基常用于擴大化生產，觀察細菌運動。根據化學成分分為合成培養基、天然培養基等；根據用途分為選擇培養基、鑒別培養基。

2、平板劃線法操作步驟：①將接種環放在火焰上灼燒，直到接種環燒紅；②在火焰旁冷卻接種環，并打開棉塞；③將試管口通過火焰；④將已冷卻的接種環伸入菌液中蘸取一環菌液；⑤將試管通過火焰，并塞上棉塞；⑥左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養皿；⑦灼燒接種環，待其冷卻后，從第一區域劃線的末端開始往第二區域內劃線。重復以上操作，在三、四、五區域內劃線。注意不要將最后一區的劃線與第一區相連；⑧將平板倒置放入培養箱中培養。稀釋涂布平板操作的步驟：①將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中；②取少量菌液，滴加到培養基表面；③將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8~10s；④用涂布器將菌液均勻地涂布在培養基表面。

3、統計菌落數目的方法∶(1)顯微鏡直接計數法①原理∶利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法∶用計數板計數；③缺點∶不能區分死菌與活菌。(2)間接計數法(活菌計數法）①原理∶當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=(c+V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。22．【答案】（1）選擇培養基；固體培養基；尿素（2）不一定；剛果紅；大（3）稀釋涂布平板；顯微鏡直接計數（或血球計數板計數）；小（4）小；因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（5）2.5×105【解析】【解答】（1）培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。其中氮源一般是含氮的化合物，根據甲培養基的配方，甲培養基中提供氮源的物質是尿素。從功能上看，甲培養基屬于選擇培養基。從物理性質上看，甲培養基屬于固體培養基。（2）如果將乙培養基配制成固體培養基，則在該培養基上長出的菌落不一定都能分解纖維素，有可能利用水解酪素等能提供碳源，也有可能纖維素被分解后產生的糖類等也可為其它微生物生長提供碳源等。如果在含有纖維素的培養基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養基中的纖維素形成紅色復合物。當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復合物就無法形成，培養基中會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，就可以通過是否產生透明圈來篩選出具有分解纖維素能力的菌株；同時透明圈越大，表示該菌分解纖維素的能力越強。（3）純化微生物可以用稀釋涂布法和平板劃線法，其中稀釋涂布法能用于微生物的計數。除了上述的活菌計數法外，顯微鏡直接計數（或血球計數板計數）也是測定微生物數量的常用方法。所以，圖丙采用了稀釋涂布法進行接種培養計數，除此之外，還可以采用顯微鏡直接計數法進行計數（能計活的和死的細胞）。其中前一種計數方法所得結果要比后一種計數方法所得結果小。（4）稀釋涂布法統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。（5）由于整個過程涉及3次稀釋，每次稀釋倍數為50/10=5倍，所以利用平板菌落計數法的計算公式估算原土壤樣液中的微生物數：（180+155+176+129）/4÷0.1×5×5×5=2.0×105個。

【分析】1、分解尿素的細菌的鑒定細菌合成的脲酶將尿素分解成氮，氮會使培養基的堿性增強。在以尿素為唯一氨源的培養基中加入酚紅指示劑培養細菌，若指示劑變紅，可確定該種細菌能夠分解尿素。

（1）該培養基配方中的氨源除了尿素外，還有蛋白胨，因此尿素不是唯一氨源，不能分離出尿素分解菌。

（2）為了防止雜菌污染，接種前需要對培養基進行滅菌。在整個微生物的分離和培養中，一定要注意在無菌條件下進行。

（3）純化細菌時，如菌液濃度過高，則培養基中菌落可能連成一片，需要對菌液進行梯度稀釋（加大稀釋倍數），以避免此種現象出現。

（4）獲取分解尿素的細菌后，如要臨時保存，可將菌種接種在回體斜面培養基上，在合適的溫度下培養。當菌落長成后，將試管放入4℃的冰箱中保藏。對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。

2、統計菌落數目的方法∶(1)顯微鏡直接計數法①原理∶利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法∶用計數板計數；③缺點∶不能區分死菌與活菌。(2)間接計數法(活菌計數法）①原理∶當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作∶a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b、為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30~300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=(c+V)×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數。23．【答案】（1）凝膠色譜法；相對分子量大小；攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序（降低分離效果）（2）透析；除去樣品中分子量較小的雜質（3）④→①→②→③（4）均勻一致地移動；SD