pcr上崗證試題及答案2021姓名：____________________

一、選擇題（每題2分，共20分）

1.PCR技術全稱是什么？

A.聚合酶鏈反應

B.聚合酶反應

C.聚合酶鏈式反應

D.聚合酶連串反應

2.PCR技術中最關鍵的酶是什么？

A.Taq酶

B.DNA聚合酶

C.DNA連接酶

D.限制性核酸內切酶

3.PCR技術中，以下哪個步驟不需要進行？

A.變性

B.復性

C.延伸

D.洗脫

4.PCR反應體系中，以下哪種物質是必須的？

A.引物

B.dNTPs

C.Mg2+

D.以上都是

5.PCR技術可以用于以下哪個領域？

A.分子生物學

B.醫學診斷

C.基因編輯

D.以上都是

6.PCR技術中，以下哪個因素會影響擴增效率？

A.引物設計

B.樣本質量

C.反應體系

D.以上都是

7.PCR技術中，以下哪個因素會影響特異性？

A.引物設計

B.樣本質量

C.反應體系

D.以上都是

8.PCR技術中，以下哪個因素會影響靈敏度？

A.引物設計

B.樣本質量

C.反應體系

D.以上都是

9.PCR技術中，以下哪個因素會影響穩定性？

A.引物設計

B.樣本質量

C.反應體系

D.以上都是

10.PCR技術中，以下哪個因素會影響保真性？

A.引物設計

B.樣本質量

C.反應體系

D.以上都是

二、填空題（每題2分，共20分）

1.PCR技術的基本原理是__________。

2.PCR反應體系中，變性、復性、延伸三個步驟的循環次數一般為__________。

3.PCR反應體系中，引物的作用是__________。

4.PCR反應體系中，dNTPs的作用是__________。

5.PCR反應體系中，Mg2+的作用是__________。

6.PCR技術中，以下哪種因素會影響擴增效率：__________。

7.PCR技術中，以下哪種因素會影響特異性：__________。

8.PCR技術中，以下哪種因素會影響靈敏度：__________。

9.PCR技術中，以下哪種因素會影響穩定性：__________。

10.PCR技術中，以下哪種因素會影響保真性：__________。

三、判斷題（每題2分，共20分）

1.PCR技術可以用于檢測病毒的核酸序列。（）

2.PCR技術可以用于檢測細菌的核酸序列。（）

3.PCR技術可以用于檢測基因突變。（）

4.PCR技術可以用于基因克隆。（）

5.PCR技術可以用于基因編輯。（）

6.PCR技術可以用于基因表達分析。（）

7.PCR技術可以用于基因測序。（）

8.PCR技術可以用于檢測遺傳疾病。（）

9.PCR技術可以用于檢測腫瘤標志物。（）

10.PCR技術可以用于檢測藥物殘留。（）

四、簡答題（每題5分，共20分）

1.簡述PCR技術的原理和基本步驟。

2.解釋PCR技術中引物的作用及其設計原則。

3.列舉PCR技術中可能出現的幾種常見問題及其解決方法。

4.說明PCR技術在醫學診斷中的應用及其優勢。

五、論述題（10分）

論述PCR技術在基因工程中的應用及其重要性。

六、實驗設計題（10分）

設計一個PCR實驗，用于檢測某基因序列是否存在突變。包括實驗材料、試劑、儀器、實驗步驟和預期結果。

試卷答案如下：

一、選擇題答案及解析思路：

1.A.聚合酶鏈反應

解析思路：PCR的全稱即為聚合酶鏈反應，故選A。

2.A.Taq酶

解析思路：Taq酶是從熱穩定性DNA聚合酶中提取的，用于PCR反應中的DNA合成，故選A。

3.D.洗脫

解析思路：PCR的基本步驟包括變性、復性和延伸，不包括洗脫，故選D。

4.D.以上都是

解析思路：PCR反應體系中需要引物來定向擴增特定序列，dNTPs作為DNA合成的原料，Mg2+作為酶的激活劑，故選D。

5.D.以上都是

解析思路：PCR技術廣泛應用于分子生物學、醫學診斷、基因工程等領域，故選D。

6.D.以上都是

解析思路：擴增效率受引物設計、樣本質量、反應體系等因素影響，故選D。

7.A.引物設計

解析思路：引物設計直接決定了擴增的特異性，故選A。

8.D.以上都是

解析思路：靈敏度受樣本質量、反應體系等因素影響，故選D。

9.C.反應體系

解析思路：反應體系中的成分和比例會影響PCR的穩定性，故選C。

10.A.引物設計

解析思路：引物設計決定了擴增的保真性，故選A。

二、填空題答案及解析思路：

1.聚合酶鏈反應

解析思路：根據PCR的全稱直接填寫。

2.變性、復性、延伸三個步驟的循環次數一般為25-35次

解析思路：根據PCR技術的基本步驟和循環次數填寫。

3.引物的作用是定向擴增特定序列

解析思路：引物作為DNA合成的起始點，可以定向擴增目標序列。

4.dNTPs的作用是作為DNA合成的原料

解析思路：dNTPs是DNA合成的原料，用于構建新的DNA鏈。

5.Mg2+的作用是作為酶的激活劑

解析思路：Mg2+可以激活DNA聚合酶，提高其活性。

6.以下哪種因素會影響擴增效率：引物設計、樣本質量、反應體系

解析思路：這三個因素都會影響PCR的擴增效率。

7.以下哪種因素會影響特異性：引物設計

解析思路：引物設計決定了擴增的特異性。

8.以下哪種因素會影響靈敏度：樣本質量、反應體系

解析思路：這兩個因素會影響PCR的靈敏度。

9.以下哪種因素會影響穩定性：反應體系

解析思路：反應體系中的成分和比例會影響PCR的穩定性。

10.以下哪種因素會影響保真性：引物設計

解析思路：引物設計決定了擴增的保真性。

三、判斷題答案：

1.√

2.√

3.√

4.√

5.√

6.√

7.√

8.√

9.√

10.√

四、簡答題答案及解析思路：

1.PCR技術的原理和基本步驟：

-原理：利用DNA聚合酶在特定引物的作用下，復制特定DNA序列。

-步驟：變性、復性、延伸。

2.解釋PCR技術中引物的作用及其設計原則：

-作用：定向擴增特定序列。

-設計原則：確保引物特異性、避免二級結構、保證Tm值相近。

3.列舉PCR技術中可能出現的幾種常見問題及其解決方法：

-問題：非特異性擴增、擴增效率低、假陽性結果等。

-解決方法：優化反應條件、調整引物設計、增加循環次數等。

4.說明PCR技術在醫學診斷中的應用及其優勢：

-應用：檢測病原體、遺傳疾病、腫瘤標志物等。

-優勢：快速、靈敏、特異、簡便。

五、論述題答案：

論述PCR技術在基因工程中的應用及其重要性：

-應用：基因克隆、基因編輯、基因表達分析等。

-重要性：提高基因研究效率、推動生物技術發展。

六、實驗設計題答案：

設計一個PCR實驗，用于檢測某