關于血涂片染色及白細胞分類計數第1頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日1.瑞氏染色1.1試劑成分：伊紅——酸性——嗜堿性染料亞甲藍（美藍）——堿性——嗜酸性染料甲醇——固定溶劑磷酸緩沖液（pH:6.4-6.8）第2頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日1.2著色原理：化學親和作用+物理的吸附作用伊紅+細胞中的堿性物質——紅色亞甲藍+酸性物質——藍色中性物質+伊紅和亞甲藍——淡紫色第3頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日1.3pH對細胞染色影響pH過低

<PI

正電荷增多——易與伊紅結合——偏紅pH過高>PI

負電荷增多——易與亞甲藍結合——偏藍最適環境：弱酸（pH6.4-6.8）第4頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日

血涂片：淡紫紅色鏡下：成熟紅細胞——粉紅色

白細胞——胞質呈現其特有的色彩細胞核紫紅色染色質結構清楚判別方法第5頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日染色偏酸:

紅細胞、嗜酸粒細胞顆粒偏紅白細胞核淡紫紅色或不著色染色偏堿：紅細胞灰藍色中性粒細胞顆粒深暗、偏粗，紫黑色嗜酸性粒細胞暗褐色或紫黑色、藍色第6頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日第7頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日1.4器材載玻片、推玻片、洗耳球1.5試劑

瑞氏染液（商品）

I液：瑞特染料、純甲醇、甘油

I液：磷酸鹽緩沖液（KH2PO4Na2HPO4）

第8頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日1.6操作制備血涂片（待完全晾干）

加I液數滴覆蓋整個血膜0.5-1min

滴加等量或稍多的II液（洗耳球混勻）5-10min

沖洗（注意）

干燥第9頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日注意事項1.血涂片干后方可染色2.加染液不能過少3.沖洗時應以流水沖洗4.染色過淡可復染，先加緩沖液再加染液5.染色過深可用水沖洗或浸泡一定時間，也可用甲醇脫色6.染色時間與染液濃度、室溫及細胞多少有關。應在具體實踐中摸索合適的時間。

第10頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日2.WBC分類計數2.1原理2.2器材:顯微鏡、香柏油、拭鏡紙、清潔劑2.3操作步驟

1.采末梢血——染色

2.低倍鏡下選擇細胞分布均勻、著色良好的域，滴香柏油一滴

3.油鏡下分類，分類時要有秩序的連續進行（“幾”字形），避免主觀選擇視野。通常分類100個白細胞，計數并報告各種白細胞所占百分比。

4.計算

5.報告方式：XX細胞：XX%第11頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日2.4外周血正常白細胞形態特征:中性粒細胞：桿+分10-15

μm圓形胞質粉紅胞質內顆粒量多、細小、均勻、紫紅色核彎曲呈桿、帶狀染色質粗糙，紫紅色分葉核：核分2-5葉第12頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日13-15

μm圓形胞質著色不清胞質內顆粒粗大、整齊、均勻、充滿胞質、桔紅色核多分2葉染色質粗糙，紫紅色嗜酸性粒細胞+淋巴細胞第13頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日10-12

μm圓形胞質著色不清胞質內顆粒量少、大小不勻、排列零亂、紫黑色，可蓋核上核形不清染色質粗糙，紫紅色嗜堿性粒細胞第14頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日6-15

μm圓形/橢圓形胞質透明、淡藍色胞質內多無顆粒核形圓/橢圓/腎形染色質粗緊成塊，深紫紅色，核外緣光滑淋巴細胞第15頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日12-15

μm圓/橢圓/不規則胞質半透明、灰藍色或灰紅色胞質內有細小、塵土樣紫紅色顆粒核形不規則/山字/腎/馬碲形，扭曲折疊染色質疏松網狀，淡紫紅色，有膨脹感和立體起伏感第16頁，共18頁，星期日，2025年，2月5日2.5注意事項：1.分類最佳區域為體、尾交界處2.分類時要有秩序地連續進行3.白細胞總數與分類個數4.分類中如見幼紅細胞，不計入100個細胞內，以分類100個白細胞過程中見到幼紅細胞多少個來報告，并應注明其所屬階段。5.