文件號：AA第1版頁數PAGE3共5頁試劑標準操作規程項目肌酸磷酸激酶（CK）方法DGKC速率法儀器H7600系列編寫人日期審核人日期批準人日期文件分發部門和/或個人本規程自年月日起實施 目錄檢測原理標本采集與處理2.1受檢者的準備2.2靜脈采血2.3抗凝劑2.4標本處理3.試劑3.1試劑3.2校準血清3.3試劑、校準血清的穩定性4.儀器5.操作6.計算7.操作性能7.1精密度7.2準確度7.3靈敏度7.4可報告范圍7.5特異性7.6干擾8.參考值9.臨床意義附錄A:參數1.檢測原理CK肌酸磷酸+ADP肌酸+ATPHKATP+葡萄糖葡萄糖-6-磷酸+ADPG6PDH葡萄糖-6-磷酸+NADP+6-磷酸葡萄糖酸+H++NADPHNADPH在340nm處有特異吸收，通過測定NADPH生成速率計算出CK活性。2．標本采集與處理2.1受檢者的準備：病人空腹12h，不飲酒24h后采集血樣。體檢對象抽血前應有兩周的的正常狀況記錄。注意有無應用影響測試項目的藥物。此外，對于體檢者，采血的季節都應做相關記錄，因為樣本中各項目的含量有季節性變動，為了前后比較應在每年同一季節檢驗。應囑體檢對象在抽血前24小時內不做劇烈運動。2.2靜脈采血：除非是臥床的病人，一般在采血時取坐位。體位影響水分在血管內外的分布，會影響測試項目的濃度。在采血前至少應靜坐5分鐘，一般從肘靜脈取血，使用止血帶的時間不超過1分鐘，穿刺成功后立即松開止血帶。2.3抗凝劑：血漿使用肝素作為抗凝劑。2.4標本處理：血標本室溫放置30min～45min后離心分離血清或血漿，置潔凈試管加蓋低溫保存。3．試劑3.1試劑：本科使用上海華臣生物技術有限公司CK試劑盒，為液體雙試劑，各組分如下：試劑包裝規格見試劑說明書。試劑1咪唑緩沖液 pH6.7100mmol/L葡萄糖 20mmol/LN-乙酰半胱氨酸 20mmol/L乙酸鎂 10mmol/LEDTA-Na2 2mmol/LADP 2mmol/LAMP 5mmol/L5’-磷酸二腺苷 10mmol/LNADP 2mmol/L葡萄糖-6-磷酸脫氫酶 >1500U/L已糖激酶 >2500U/L試劑2磷酸肌酸30mmol/L3.2：校準血清使用上海華臣生物技術有限公司提供的復合校準血清或采用因數法。按照說明書提供的樣本和試劑比例上機。校準頻次：空白定標：每日需做試劑空白定標。全點定標：試劑換批號使用時或質控結果超過規定的2SD范圍，需要全點定標。3.3試劑、校準血清的穩定性：原包裝試劑儲存在2-8℃至標簽所示失效日期。18-22℃穩定15天，試劑應避免污染。當試劑空白吸光度高于0.5時，試劑按照失效處理。多項校準血清在2-8℃儲存至標簽所示失效日期，復溶后-20℃保存，可穩定一個月，只可凍融一次，避免反復凍融。參見校準血清說明書。4．儀器H7600系列型號儀器。5．操作樣品為血清或肝素抗凝血漿。本法為速率法。參數見后附，附錄A。試劑參數設置、定標操作以及樣本檢測常規操作，見儀器操作規程。6．計算ΔA/min×Vt×1000 CK(U/L)==ΔA/min×Fe×Vs×d式中：ΔA/min——每分鐘吸光度變化率；e——摩爾吸光系數；Vt——反應液總體積（ml）；d——1比色杯光徑（cm）；1000——變化因數；Vs——標本體積（ml）；7．操作性能7.1精密度：批內CV<5%，批間CV<7%。7.2準確度：測量結果在上海華臣生物質控血清靶值±2SD范圍內。不同方法學試劑的質控結果之間會存在差異，使用時請確保質控選擇與試劑的方法學保持一致。7.3靈敏度：肌酸磷酸激酶濃度為：500U/L時，吸光度變化率ΔA340nm/min為0.130～0.158。7.4可報告范圍：血清與試劑用量之比為10:240:60時，測定上限為1500U/L。7.5特異性：測量值在給定值的90%-110％范圍內。7.6干擾：內源性干擾物溶血為1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黃疸30mg/ml、抗壞血酸300mg/ml對測試結果無明顯影響。8．參考值