3GB/TXXXXX—XXXX保健食品原料破壁靈芝孢子粉本文件規定了保健食品用原料破壁靈芝孢子粉的質量要求，包括技術要求、試驗方法、檢驗規則和標志、標簽、包裝、運輸、貯存。本文件適用于以多孔菌科真菌赤芝（Ganodermalucidum(Leyss.exFr.)Karst.）、紫芝（GanodermasinenseZhao,XuetZhang）、松杉靈芝（Ganodermatsugae）的干燥成熟孢子經滅菌（輻照滅菌和濕熱滅菌等滅菌方法）、干燥、低溫物理破壁后過篩制得的保健食品用原料破壁靈芝孢子粉的生產、檢驗和銷售。2規范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T191包裝儲運圖示標志GB/T601化學試劑標準滴定溶液的制備GB/T602化學試劑雜質測定用標準溶液的制備GB/T603化學試劑試驗方法中所用制劑及制品的制備GB4789.2食品安全國家標準食品微生物學檢驗菌落總數測定GB4789.3食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數GB4789.4食品安全國家標準食品微生物學檢驗沙門氏菌檢驗GB4789.10食品安全國家標準食品微生物學檢驗金黃色葡萄球菌檢驗GB4789.15食品安全國家標準食品微生物學檢驗霉菌和酵母計數GB5009.3食品安全國家標準食品中水分的測定GB5009.4食品安全國家標準食品中灰分的測定GB5009.11食品安全國家標準食品中總砷及無機砷的測定GB5009.12食品安全國家標準食品中鉛的測定GB5009.15食品安全國家標準食品中鎘的測定GB5009.17食品安全國家標準食品中總汞及有機汞的測定GB5009.123食品安全國家標準食品中鉻的測定GB5009.138食品安全國家標準食品中鎳的測定GB5009.227食品安全國家標準食品中過氧化值的測定GB/T6682分析實驗室用水規格和試驗方法GB7718食品安全國家標準預包裝食品標簽通則3術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。GB/TXXXXX—XXXX44技術要求4.1鑒別樣品粉末呈棕褐色，置顯微鏡下觀察，孢壁多破碎，可見多數黃褐色的大小不等的微粒、破碎程度不同的孢子殼段或孢子破碎后暴露的黃色至黃褐色內容物，少見有未破壁孢子，不得檢出子實體、菌絲、淀粉粒等異物（未破壁的靈芝孢子粉顯微鏡參考圖見附錄C圖C.1，破壁靈芝孢子粉顯微鏡參考圖見附錄C圖C.2）。4.2感官要求應符合表1的規定。表1感官指標無結塊，干燥疏松細膩粉末，無粘連，無沙粒感，無4.3理化指標應符合表2的規定。表2理化指標破壁率/%鉛（以Pb計）/（mg/kg）砷（以As計）/（mg/kg）汞（以Hg計）/（mg/kg）鎘（以Cd計）/（mg/kg）4.4微生物指標GB/TXXXXX—XXXX5應符合表3的規定。表3微生物指標霉菌和酵母/（CFU/g）金黃色葡萄球菌≤4.5標志性成分指標應符合表4的規定。表4標志性成分指標5試驗方法5.1感官要求取適量樣品，置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光下觀察色澤和狀態。嗅其氣味，用溫開水漱口，品其滋味。5.2破壁率按附錄B規定的方法測定。5.3水分按照GB5009.3規定的方法測定。5.4總灰分按照GB5009.4規定的方法測定。5.5過氧化值GB/TXXXXX—XXXX6按照GB5009.227規定的方法測定。5.6鉛按照GB5009.12規定的方法測定。5.7砷按照GB5009.11規定的方法測定。5.8汞按照GB5009.17規定的方法測定。5.9鎘按照GB5009.15規定的方法測定。5.10鎳按照GB5009.138規定的方法測定。5.11鉻按照GB5009.123規定的方法測定。5.12菌落總數按照GB4789.2規定的方法測定。5.13霉菌和酵母菌按照GB4789.15規定的方法測定。5.14大腸菌群按照GB4789.3中“MPN計數法”規定的方法測定。5.15沙門氏菌按照GB4789.4規定的方法測定。5.16金黃色葡萄球菌GB/TXXXXX—XXXX7按照GB4789.10規定的方法測定。5.17多糖按附錄A規定的方法測定。6檢驗規則6.1組批同一批原料、相同生產工藝、連續生產或同一班次生產的同一規格的產品為一批。6.2抽樣6.2.1按表5規定隨機抽取樣本。表5破壁靈芝孢子粉抽樣表<5024>10066.2.2將抽取的樣品平均分裝2份置于兩個潔凈、干燥的容器中，密封，注明產品名稱、批號、取樣時間及地點、取樣人姓名等，其中1份供檢測用，另1份封存后保存以備復查。6.3出廠檢驗6.3.1產品出廠前，應按本文件規定逐批進行檢驗。檢驗符合本文件要求后方可出廠。6.3.2出廠檢驗項目為：感官、破壁率、多糖、水分、灰分、微生物。6.4型式檢驗檢驗項目為本文件要求中規定的全部項目，一般情況下，型式檢驗半年進行一次。有下列情況之一時，亦應進行型式檢驗：a)原輔材料有較大變化時；b)更改關鍵工藝或設備時；c)新試制的產品或正常生產的產品停產三個月后，重新恢復生產時；d)出廠檢驗與上次型式檢驗結果有較大差異時；e)生產場所發生變化時；f)國家行政主管機構提出型式檢驗要求時。6.5判定規則6.5.1所檢驗項目全部合格，判定該批次產品合格。6.5.2檢驗結果中有任何指標不符合本文件規定時，可自同批產品中重新加倍取樣進行復檢。若復檢結果仍不符合本文件規定,則判定該批產品不合格。微生物指標不應復檢。GB/TXXXXX—XXXX87標志、標簽、包裝、運輸、貯存7.1標志7.1.1標簽或說明書中應標示產品分類。7.1.2包裝儲運圖示標志應符合GB/T191的要求。7.1標簽7.1.1標簽標示內容應符合GB7718的要求。7.2包裝7.2.1包裝容器應整潔、無破損。7.3運輸7.3.1運輸工具應清潔。7.3.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混裝、混運，應避免受潮、受壓、曝曬。裝卸時，應輕拿輕放，不得直接鉤扎包裝。7.4貯存7.4.1應儲存在密閉、遮陰、陰涼干燥、清潔的倉庫內，嚴防曝曬雨淋，嚴禁火種。7.4.2不得與有毒、有害、有腐蝕性和含有異味的物品混放。GB/TXXXXX—XXXX9（規范性附錄）破壁靈芝孢子粉中多糖的測定方法A.1一般規定A本方法中所用的水，在未注明其他要求時，應符合GB/T6682中水的規格，所用試劑，在未注明其他規格時，均指分析純。分析中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其它要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。AA.2原理試樣中的多糖經水提取、硫酸水解后，與蒽酮試劑發生顯色反應，經分光光度計檢測，以外標法定量。A.3試劑和材料A.3.1硫酸。A.3.2無水葡萄糖標準品（CAS號：50-99-7）。A.3.3無水乙醇。A.3.4硫酸蒽酮溶液：精密稱取蒽酮0.1g，加硫酸溶液100mL使溶解，搖勻，置于棕色瓶中。A.3.5濾紙（中速定性濾紙）。A.4儀器和設備A.4.1分析天平（感量0.1mg）。A.4.2分光光度計(±2nm）。A.4.3玻璃回流裝置。A.4.4電熱恒溫水浴鍋或旋轉蒸發儀。A.4.525mL容量瓶，50mL容量瓶。A.4.6移液管（最小刻度不大于0.02mL）。A.4.710mL具塞試管。A.5標準曲線的制備A.5.1標準溶液的制備GB/TXXXXX—XXXX取無水葡萄糖標準品適量，精密稱定，加水制成濃度為0.12mg/mL的標準品溶液。A.5.2標準曲線繪制精密量取標準品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL，分別置于10mL的具塞試管中，各加水至2.0mL，迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6mL，立即搖勻，放置15min，立即置冰水浴中冷卻15min，取出，以相應的試劑為空白，在625nm處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪制標準曲線（標準曲線圖見附錄D圖D.1）。A.6試樣溶液的制備取樣品粉末約2g（精確至0.1mg），置圓底燒瓶中，加水60mL，靜置1h，加熱回流4h，趁熱過濾，用少量熱水洗滌濾器和濾渣，將濾紙和濾渣置圓底燒瓶中，加水60mL，加熱回流3h，趁熱過濾，合并濾液，水浴鍋或旋轉蒸發儀蒸干，殘渣用5mL水溶解，邊攪拌邊緩慢加入75mL乙醇，搖勻，4℃條件下放置12h，離心，棄去上清液，沉淀物用熱水溶解并轉移至50mL容量瓶，放冷，加水至刻度，搖勻，取溶液適量，離心，精密量取上清液3mL，置25mL容量瓶，加水至刻度，搖勻。A.7測定精密量取試樣溶液2mL，置10mL具塞試管中，照A.5.2的方法，自“迅速精密加入硫酸蒽酮溶液6mL”起，同法操作，測定吸光度，根據標準曲線計算得到試樣溶液中無水葡萄糖的含量。A.8結果計算破壁靈芝孢子粉中多糖含量按式A.1計算式中：W——多糖的含量，單位為%；c——從標準曲線上查的樣品的多糖濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；m——樣品質量，單位為毫克（mg）；、——稀釋倍數；50——水提醇沉后獲得的沉淀物經熱水溶解定容的體積，單位為毫升（mL）。GB/TXXXXX—XXXX計算結果保留三位有效數字。在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。GB/TXXXXX—XXXX（規范性附錄）靈芝孢子粉破壁率的測定方法B.1一般規定B本方法中所用的水，在未注明其他要求時，應符合GB/T6682中水的規格，所用試劑，在未注明其他規格時，均指分析純。分析中所用標準滴定溶液、雜質測定用標準溶液、制劑及制品，在沒有注明其它要求時，均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規定制備。BB.2原理將破壁與未破壁的靈芝孢子粉置于血球計數板上計數，以單位面積內二者完整靈芝孢子數之比計算破壁率。B.3試劑和材料B.3.1吐溫80。B.3.2蔗糖。B.4儀器和設備B.4.1血球計數板：25個中格×16個小格或16個中格×25個小格。B.4.2分析天平（感量0.1mg）。B.4.3超聲波清洗器：功率≥45W。B.4.4光學顯微鏡：放大倍數≥200。B.4.5烘箱。B.5樣品制備分別取同一批次有代表性靈芝孢子粉和破壁靈芝孢子粉的樣品各至少100g，分別充分混勻，置于密閉的容器內。B.6分析步驟B.6.1取適量同一批次的靈芝孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，于烘箱60℃下烘干5h。B.6.2準確稱取經烘干的孢子粉A和破壁靈芝孢子粉B，其中mA=0.1000g，mB=0.1500g。B.6.3分別稱取5.0g經過研磨后過100目篩的蔗糖粉末，分別與孢子粉A、B充分混合至色澤均一。用蒸餾水分別溶解上述樣品，在樣品溶液中加0.1mL吐溫80，用蒸餾水定容到100mL的容量瓶中，并在GB/TXXXXX—XXXX室溫超聲震蕩30min，使孢子充分分散。B.6.4將待測孢子懸液，用吸管吸取一滴置于蓋玻片的邊緣，使液體緩緩滲入，多余的液體用吸水紙吸取，進樣完成后靜置約30s，然后將血球計數板置于200倍及以上放大倍數的光學顯微鏡下進行觀察計數。B.6.5使用25個中格×16個小格的計數板時，應計算出血球計數板4個角上與中央5個中格中含完整靈芝孢子的數目（即以80個小格為一個計數單位當使用16個中格×25個小格的計數板時，應計算出血球計數板4個角上的4個中格中含完整靈芝孢子的數目（即以100個小格為一個計數單位）。如有部分孢子處于中格邊線上，計數時應該僅統計位于中格四個邊線的其中兩個邊線的孢子數，每個樣品觀察計數時應去掉離群較大的值，每個樣品有效觀察計數不少于3次，然后計算它們的平均數n。B.7結果計算B.7.1使用25個中格×16個小格的計數板時，每克孢子粉中含完整靈芝孢子數按式（B.1）計算：式中：N——每克孢子粉含完整的靈芝孢子數，單位為個每克（個/g）；n——80個小方格內含完整靈芝孢子的總數，單位為個；V——孢子稀釋液定容體積，單位為毫升（mL）；m——樣品的質量，單位為克（g）；80——參與計數的小方格數量，單位為格；400——血球計數板計數室內小方格的數目，單位為格每板（格/板）；10000——血球計數板計數室的容積為0.1m