上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性突發(fā)公共衛(wèi)生事件的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)技術(shù)上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性突發(fā)公共衛(wèi)生事件分類細(xì)菌性呼吸道疾病:群體性發(fā)熱細(xì)菌性食源性疾病:食物中毒細(xì)菌性生物恐怖事件:炭疽白粉事件上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性呼吸道疾病流行性腦脊髓膜炎(簡稱流腦)鏈球菌病(猩紅熱、人感染豬鏈2病)肺鼠疫土拉熱（弗朗西斯菌）肺炭疽軍團(tuán)菌病上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)樣本的選取原則根據(jù)病情的發(fā)展,本菌可相繼存在于鼻咽腔、肺泡灌洗液、血液、淤血點(diǎn)及腦脊液等標(biāo)本中，在實(shí)驗(yàn)室檢測中應(yīng)取相應(yīng)檢材上海市臨床檢驗(yàn)中心標(biāo)本的檢驗(yàn)意義

腦脊液、血液、皮膚粘膜出血點(diǎn)擠出液、肺泡灌洗液中檢出病原菌可直接作為確診依據(jù)

咽拭子一般是對健康人群或病人密切接觸者進(jìn)行帶菌檢驗(yàn)時(shí)采集，對病人如采集此標(biāo)本，在診斷上僅有參考價(jià)值上海市臨床檢驗(yàn)中心CSF標(biāo)本的采集腦脊液(CSF)：是用于分離和鑒定病原體最好的標(biāo)本取CSF2～3ml，注入無菌試管內(nèi)，3000轉(zhuǎn)/分，離心20分鐘，用無菌吸管取沉淀物直接接種CSF沉渣還可涂片，作G染色鏡檢CSF離心后的上清液供做血清學(xué)檢查特異性抗原和（或）DNA特異片段，以對病人進(jìn)行早期快速診斷

上海市臨床檢驗(yàn)中心血標(biāo)本的采集在疾病早期，病人高熱時(shí)采取靜脈血，及時(shí)分離純培養(yǎng)物供鑒定留2ml血注入無菌試管內(nèi)分離血清，膠乳凝集試驗(yàn)檢查特異抗原、PCR測DNA特異片段和ELISA測急性期抗體在病人病后1～2周采取第二次血液2ml，分離血清檢查病人恢復(fù)期抗體以作追溯性診斷上海市臨床檢驗(yàn)中心出血點(diǎn)滲出液標(biāo)本的采集選擇新出現(xiàn)的皮疹，以75%酒精消毒局部皮膚，用無菌針頭挑破淤點(diǎn)或淤斑，輕輕地?cái)D出組織液用無菌毛吸管吸取滲出液先增菌后分離、培養(yǎng)將滲出液涂片，作G染色鏡檢上海市臨床檢驗(yàn)中心咽拭子標(biāo)本的采集采樣時(shí)，令受檢者盡量張開口，用壓舌板將其舌頭輕輕壓下，用前端略向上彎曲45度角的無菌棉拭子探入口腔內(nèi)懸雍垂后面的鼻咽孔部位，小心涂抹該部粘膜數(shù)次，然后小心退出，注意盡量不接觸口腔其余部位咽拭子直接接種到選擇性平皿分離病原菌上海市臨床檢驗(yàn)中心樣品的處理和運(yùn)送

及時(shí)處理樣品：采集樣品后應(yīng)盡可能地做到床邊接種，若無可能則應(yīng)在最短地時(shí)間內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行接種培養(yǎng)早期采集樣品：應(yīng)盡可能采集病人用藥前的早期樣品，可以明顯提高病原菌的檢出水平保溫運(yùn)送：Nm對溫度較為敏感，應(yīng)保持樣品處于20

C～36

C之間，切不能低溫運(yùn)送（檢測抗體的血清標(biāo)本除外）

上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性生物恐怖事件炭疽白粉事件：直接吸入導(dǎo)致肺炭疽病原體：毒力型炭疽桿菌，即含有毒素質(zhì)粒（pxo1）和莢膜質(zhì)粒（pxo2）的菌株（tox+cap+）并不是要從分類學(xué)的角度去決定一種細(xì)菌是不是炭疽芽孢桿菌，或蠟樣芽孢桿菌的炭疽亞種，而是這種細(xì)菌能不能引起炭疽疾病。而炭疽疾病的決定因素是那兩個(gè)質(zhì)粒上的致病基因，缺一不可上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性食源性疾病由細(xì)菌通過攝食而進(jìn)入人體的，使人體患感染性或中毒性的一類疾病。屬食源性疾病范疇，主要包括細(xì)菌性腸道傳染病和細(xì)菌性食物中毒上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性腸道傳染病屬我國法定傳染病，主要包括霍亂、痢疾、傷寒、副傷寒及新近參照傳染病管理的由腸出血性大腸埃希菌O157引起的出血性腸炎上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性食物中毒人體攝入了被細(xì)菌或其毒素污染的食品后所出現(xiàn)的非傳染性急性、亞急性疾病上海市臨床檢驗(yàn)中心各類樣品采集方法（1）糞便、肛拭：糞便標(biāo)本應(yīng)盡量在病程早期和治療前采集，同時(shí)應(yīng)采集新鮮糞便，選取有膿血、粘液部分3-5克、水樣便取含絮狀物的2-5ml，盛于無菌容器中及時(shí)送檢。若無法獲得糞便時(shí)，可用保存液或增菌液濕潤過的棉拭子插入肛門4-5cm深處（小兒2-3cm），輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)一圈，擦取直腸表面的黏液后取出，盛入運(yùn)送培養(yǎng)基或保存液中送檢。注意為保證多個(gè)檢驗(yàn)項(xiàng)目的開展，同一病人應(yīng)至少采集2支肛拭

上海市臨床檢驗(yàn)中心各類樣品采集方法（2）嘔吐物：直接放入無菌容器中及時(shí)送檢

咽拭樣品：采集時(shí)應(yīng)將棉簽檫拭咽喉及扁桃體紅腫處（特別是白膜處），然后將棉簽插入4-5ml生理鹽水中，尾部棄去

血液：采集患者急性發(fā)病期（3天內(nèi)）和恢復(fù)期（2周左右）各3ml全血分離血清送檢

上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)項(xiàng)目霍亂弧菌、副溶血弧菌及其它致病性弧菌、金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、沙門菌、變形桿菌、致瀉性大腸埃希菌、空腸彎曲菌、小腸結(jié)腸耶爾森菌、志賀菌、溶血性鏈球菌及單核細(xì)胞增生李斯特菌引起的食源性突發(fā)事件的樣品檢驗(yàn)

上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌性食源性疾病的檢驗(yàn)宗旨竭盡全力盡快找到病原體快速、準(zhǔn)確可與傳統(tǒng)方法不一定完全相同

上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)程序

1.樣品采集

↓2.初步檢驗(yàn)→活菌數(shù)、直接鏡檢(涂片→染色→鏡檢)↓3.分離培養(yǎng)

(包括增菌培養(yǎng)和直接平板培養(yǎng))↓4.初篩試驗(yàn)↓5.純培養(yǎng)↓6.全面鑒定上海市臨床檢驗(yàn)中心直接涂片染色鏡檢

觀察存在于檢品中特種形態(tài)的細(xì)菌如霍亂弧菌、彎曲菌，為進(jìn)一步的檢驗(yàn)提供有用的信息

上海市臨床檢驗(yàn)中心檢樣的處理

病源檢樣因含較多病原菌而一般無須做預(yù)增菌處理，但若病源檢樣為服過抗生素后采集的檢樣應(yīng)按檢驗(yàn)項(xiàng)目要求而進(jìn)行預(yù)增菌處理以保護(hù)和放大目的病原菌直接插入2mlTSB管37℃預(yù)增菌4～6h上海市臨床檢驗(yàn)中心直接培養(yǎng)

將無須做增菌處理的病源檢樣按檢驗(yàn)項(xiàng)目要求直接接種于各相應(yīng)培養(yǎng)基

上海市臨床檢驗(yàn)中心增菌培養(yǎng)及接種

將預(yù)增菌處理后的服過抗生素后采集的病源檢樣按檢驗(yàn)項(xiàng)目要求接種各相應(yīng)增菌液培養(yǎng)

增菌培養(yǎng)后接種于各相應(yīng)培養(yǎng)基

上海市臨床檢驗(yàn)中心初篩試驗(yàn)克氏雙糖/三糖鐵/腸道綜合發(fā)酵管1、管2PCRVIDAS

上海市臨床檢驗(yàn)中心可疑菌的鑒定

全面生化試驗(yàn)（API、ATB、VETIK、IDS、SWF、手工鑒定等）

噬菌體試驗(yàn)

血清分型

毒素或毒素基因測試

上海市臨床檢驗(yàn)中心毒素或毒素基因測試

霍亂弧菌腸毒素、葡萄球菌腸毒素、EIEC侵襲毒素、ETEC腸毒素按國標(biāo)方法進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)或酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（VIDAS等）毒素基因測試：霍亂弧菌腸毒素、葡萄球菌腸毒素、致瀉性大腸埃希菌的所有毒力基因均可用PCR檢測，特別是對致瀉性大腸埃希菌的定論應(yīng)以毒素或毒素基因?yàn)闇?zhǔn)

上海市臨床檢驗(yàn)中心患者血清的試驗(yàn)

疑似傷寒或副傷寒的患者應(yīng)取發(fā)病一周的血清做肥達(dá)氏反應(yīng)，用作輔助診斷將患者急性期和恢復(fù)期的血清做凝集效價(jià)的對比，4倍增長可確診上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)結(jié)果的判定

應(yīng)以找到病原體或其毒素為最終結(jié)論，在此之前所有的快速檢驗(yàn)方法如PCR、VIDAS等得到的結(jié)果僅供參考

應(yīng)注意非病源檢樣與病源檢樣檢出的病原體的統(tǒng)一性

上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)結(jié)果的判定原則（1）多數(shù)患者樣品中檢出的致病意義明確的細(xì)菌在種類、生化和/或血清型、毒素型均一致時(shí)，可報(bào)告為細(xì)菌性食源性疾病事件的病原體上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)結(jié)果的判定原則（2）非病源檢樣與病源檢樣檢出占絕對優(yōu)勢但通常致病意義不甚明確的細(xì)菌如大腸艾希菌、溶藻弧菌等，且其在種類、生化和/或血清型均一致，同時(shí)本次細(xì)菌性食源性疾病事件中非患者對照標(biāo)本中未檢出該菌時(shí)，應(yīng)做該菌的毒素、毒素基因或動(dòng)物試驗(yàn)，陽性結(jié)果可報(bào)告為細(xì)菌性食源性疾病事件的病原體上海市臨床檢驗(yàn)中心檢驗(yàn)結(jié)果的判定原則（3）

樣品中檢出的生化、血清符合致瀉性大腸艾希菌、金黃色葡萄球菌，一定要以毒素、毒素基因測試陽性為最終結(jié)論報(bào)告蠟樣芽胞桿菌在非病源檢樣中須達(dá)到105cfu/g(ml)以上者才有報(bào)告價(jià)值

上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌檢驗(yàn)重要篩檢試驗(yàn)接觸酶試驗(yàn)氧化酶試驗(yàn)上海市臨床檢驗(yàn)中心

氧化酶試驗(yàn)用于分辨G-桿菌中腸桿菌科及弧菌科兩類細(xì)菌

革蘭陰性桿菌陽性反應(yīng)

弧菌科陰性反應(yīng)腸桿菌科上海市臨床檢驗(yàn)中心接觸酶試驗(yàn)用于分辨葡萄球菌及鏈球菌陽性反應(yīng)葡萄球菌

革蘭陽性球菌陰性反應(yīng)鏈球菌接觸酶接觸酶-+上海市臨床檢驗(yàn)中心

沙門菌檢測上海市臨床檢驗(yàn)中心概況1880年發(fā)現(xiàn)，至今已有2600種有動(dòng)力（除雞-雛沙門菌）大多產(chǎn)H2S

（除副甲傷寒沙門菌等）產(chǎn)酸大多產(chǎn)氣（除傷寒、雞-雛沙門菌）靛基質(zhì)-、蔗糖-、乳糖-甘露醇+符合腸桿菌科特征（葡萄糖+、硝酸鹽還原+、氧化酶-）上海市臨床檢驗(yàn)中心沙門菌的初篩腸道綜合發(fā)酵管1：甘露醇（上斜面）+葡萄糖（下直面）+產(chǎn)氣腸道綜合發(fā)酵管2：蔗糖-、動(dòng)力+、H2S+、靛基質(zhì)-上海市臨床檢驗(yàn)中心血清凝集（1）A-F多價(jià)+OH1H2上海市臨床檢驗(yàn)中心血清凝集（2）若生化反應(yīng)符合，而血清A-F多價(jià)-，考慮：Vi抗原（傷寒、副丙傷寒沙門菌）遮蔽，煮沸后再凝亞利桑那菌：遲緩發(fā)酵乳糖，延長Mac平板培養(yǎng)時(shí)間至4天可能是A-F以外的沙門菌：如O39：Hb，2旺次渥沙門菌在上海地區(qū)多見極可能是血清交叉的檸檬酸桿菌上海市臨床檢驗(yàn)中心報(bào)告方式A群

甲型副傷寒沙門菌1,2,12:aB群

乙型副傷寒沙門菌1,4,5,12:b:1,2

鼠傷寒沙門氏菌1,4,5,12:i:1,2

C群

丙型副傷寒沙門菌6,7,vi:c:1,5

豬霍亂沙門菌6,7,:c:1,5D群

腸炎沙門菌1,9,12:g,m

傷寒沙門菌1,9,vi:d

雞雛沙門菌1,9,12:-上海市臨床檢驗(yàn)中心

志賀菌檢測上海市臨床檢驗(yàn)中心概況至今已有4群（A、B、C、D）、32種（A-痢疾志賀菌10個(gè)血清型；B–福氏志賀菌6個(gè)血清型+X、Y變種；C-鮑氏志賀菌15個(gè)血清型、D-宋內(nèi)1個(gè)血清型，S，R兩相）無動(dòng)力乳糖-

（除宋內(nèi)遲緩發(fā)酵+）不產(chǎn)H2S產(chǎn)酸不產(chǎn)氣（除F6產(chǎn)極少量氣泡）靛基質(zhì)大多+（宋內(nèi)-）、蔗糖-甘露醇+（痢疾志賀菌為-）符合腸桿菌科特征（葡萄糖+、硝酸鹽還原+、氧化酶-）上海市臨床檢驗(yàn)中心志賀菌的初篩腸道綜合發(fā)酵管1：甘露醇（上斜面）+/-葡萄糖（下直面）+不產(chǎn)氣腸道綜合發(fā)酵管2：蔗糖-、動(dòng)力-、H2S-、靛基質(zhì)+上海市臨床檢驗(yàn)中心血清凝集（1）ABCD4組O抗原多價(jià)凝集血清群O單價(jià)型特異抗原種特異抗原（3，4，6，7）上海市臨床檢驗(yàn)中心血清凝集（2）若生化反應(yīng)符合，而血清A-F多價(jià)-，考慮：A、C群志賀菌O抗原外有K包膜抗原遮蔽，煮沸后再凝可能是EIEC，再做大生化以鑒別（產(chǎn)氣、ONPG）宋內(nèi)的R相菌，用R相血清凝集可能是蜂窩哈夫尼亞菌，做大生化以鑒別可能是類志賀鄰單胞菌，觀察動(dòng)力、氧化酶上海市臨床檢驗(yàn)中心報(bào)告方式痢疾志賀菌1型福氏志賀菌2a型福氏志賀菌X變種鮑氏志賀菌13型宋內(nèi)志賀菌S相上海市臨床檢驗(yàn)中心大腸桿菌O157：H7檢測上海市臨床檢驗(yàn)中心概況1885年德國人艾希自人畜腸腔分離出（E.coli），人類認(rèn)識(shí)該菌為正常細(xì)菌1945年Bary自病兒腹瀉便中大量檢出E.coli，并證實(shí)該E.coli是病源逐漸認(rèn)識(shí)E.coli有兩類：正常E.coli和致瀉E.coliEIEC、EPEC、ETEC1982年美國發(fā)現(xiàn)有種E.coli引起出血性腸炎（HC）和溶血性尿毒綜合征（HUS）1987年levine提出EHEC概念，指出SLT毒素是病因1996年日本9000名兒童暴發(fā)，11人死亡，E.coliO157：H71999年我國暴發(fā)？上海市臨床檢驗(yàn)中心大腸桿菌0157:H7檢測大腸桿菌O、H抗原不同分成200多血清型山梨醇不發(fā)酵（95%E.coli發(fā)酵）葡萄糖醛酸酶陰性（96%E.coli陽性）判斷為腸出血性大腸桿菌（EHEC），除血清型符合0157:H7或H-外，還須證實(shí)SLT（VT）陽性上海市臨床檢驗(yàn)中心李斯特菌檢測上海市臨床檢驗(yàn)中心該菌1926年被確認(rèn)為是人獸共患病菌，但很快受到重視：分布廣泛，在全世界的土壤、水中都有存在，溫帶比熱帶更多見易感動(dòng)物多，除人類外，迄今已從42種哺乳動(dòng)物，22種禽類、魚類、甲殼動(dòng)物中分離出來，其中易感性最高的是牛、兔、犬、貓低溫下可生長，雖然此菌屬于中溫型，但其生長溫度寬，為1—45℃在4－6℃的低溫下也可繁殖。因此，放在冰箱中的食品，或經(jīng)冷藏運(yùn)輸?shù)氖称?，如有此菌存在，它們都可生長繁殖并使人致病1988年世界衛(wèi)生組織證實(shí)為食物中毒病原菌：此菌可以通過水源、食品原料、廚房食物制作中任何一個(gè)環(huán)節(jié)的污染傳播給人類。主要的食品有4種：①牛乳和乳制品：②肉類，特別是牛肉及其制品；③蔬菜、沙拉等食品；④海產(chǎn)品概況上海市臨床檢驗(yàn)中心本菌為革蘭氏陽性桿菌，菌體短小，直或稍彎在22℃～25℃環(huán)境可形成4根鞭毛，故在25℃幼肉湯培養(yǎng)物中運(yùn)動(dòng)活潑，37℃基本無動(dòng)力。幼齡培養(yǎng)物為革蘭氏陽性，衰老培養(yǎng)物可轉(zhuǎn)為革蘭陰性，呈兩極著色，易誤認(rèn)為雙球菌。

形態(tài)、動(dòng)力與染色上海市臨床檢驗(yàn)中心本菌營養(yǎng)要求不高，在20-25℃培養(yǎng)有動(dòng)力，穿刺培養(yǎng)，2-5天可見倒立傘狀生長該菌的生長范圍為2--42℃（故可用4℃冷增菌以抑制其它雜菌的干擾），最適培養(yǎng)溫度為35--37℃初期在5%羊血瓊脂平板上菌落細(xì)小、露滴狀、光滑、透明，后變灰暗。單核細(xì)胞增生李斯特菌、綿羊李斯特菌、西爾李斯特菌在血平板上的菌落有狹窄的β-溶血環(huán)

培養(yǎng)特性上海市臨床檢驗(yàn)中心彎曲菌檢測上海市臨床檢驗(yàn)中心本菌為革蘭陰性菌，呈S形、螺旋狀或紡錘生長要求為微量的有氧條件培養(yǎng)最適宜溫度為42℃在選擇性平皿上，可形成兩類菌落1.第一型菌落不溶血、灰白色、扁平、濕潤、有光澤、有擴(kuò)散趨勢，看上去象水滴，有從接種劃線向外擴(kuò)散的傾向2.第二型菌落不溶血、菌落是分散單個(gè)的(直徑1～2mm)凸起，完整發(fā)亮的菌落形態(tài)、培養(yǎng)特性上海市臨床檢驗(yàn)中心快速檢測技術(shù)在細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)中的應(yīng)用上海市臨床檢驗(yàn)中心微生物診斷的演化(A)

1673年：顯微鏡發(fā)明1880年：人工培養(yǎng)基發(fā)明1914年：干燥培養(yǎng)基發(fā)明1970年以前：忙于分離各種細(xì)菌，采用生化及血清學(xué)鑒定上海市臨床檢驗(yàn)中心微生物診斷的演化(B)

1970年以后：電腦化+細(xì)菌數(shù)值分類鑒定的應(yīng)用1980年：微量快速生化的應(yīng)用及全自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的產(chǎn)生1985年以后：各種免疫及核酸技術(shù)的廣泛應(yīng)用上海市臨床檢驗(yàn)中心培養(yǎng)基的進(jìn)步利用細(xì)菌的專有酶進(jìn)行快速篩選原有篩選培養(yǎng)基的不足：SS、Mac、WS、XLD沙門氏菌具有辛酸酯酶，以β-萘酚辛酯為底物，經(jīng)沙門氏菌酶解，釋出β-萘酚與固蘭作用出現(xiàn)紫紅色大腸埃希氏菌具β-葡萄糖醛酸酶，但以O(shè)157：H7為代表的腸出血性大腸埃希氏菌（EHEC）卻不具此酶，故β-葡萄糖醛酸酶陰性已成為初步篩查EHEC的重要特征上海市臨床檢驗(yàn)中心E.coliO157:H7ID顯色培養(yǎng)基典型菌落O157：H7墨綠色菌落上海市臨床檢驗(yàn)中心沙門菌粉色菌落沙門菌ID顯色培養(yǎng)基典型菌落上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌微量快速鑒定系統(tǒng)（手工）

API

MicroScanRap-IDEnterotube

細(xì)菌鑒定的微量多項(xiàng)試驗(yàn)套組可使微生物有一標(biāo)準(zhǔn)的鑒定材料，不會(huì)因?yàn)樗褂玫呐囵B(yǎng)基不同而鑒定出不同菌名?？煽s短鑒定的時(shí)間。傳統(tǒng)試管鑒定法需配制各種不同培養(yǎng)基，非常麻煩，而鑒定套組一次可配上好幾百個(gè)，可存放。套組鑒定可以給細(xì)菌一個(gè)號(hào)碼，代表生物型號(hào)碼，以此作為追蹤傳染源的依據(jù)。上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌微量快速鑒定系統(tǒng)（自動(dòng)）

AMS

，

ATB，BIOLOGVITEK上海市臨床檢驗(yàn)中心獨(dú)特的試卡設(shè)計(jì)定向試驗(yàn)標(biāo)記樣本碼卡片碼載有底物的小孔批號(hào)卡片名稱VITEK上海市臨床檢驗(yàn)中心直接從標(biāo)本中檢查微生物抗原

應(yīng)用單克隆抗體結(jié)合各種形式的放射免疫分析（RIA）、酶免疫分析（EIA）、熒光免疫分析（FIA）、時(shí)間分辨熒光免疫分析（TrFIA）、化學(xué)發(fā)光免疫分析（CIA）、生物發(fā)光免疫分析（BIA）等，足以檢出臨床標(biāo)本中痕量的微生物抗原，免去細(xì)菌或病毒培養(yǎng)過程，直接完成微生物感染的快速診斷

上海市臨床檢驗(yàn)中心VIDAS篩檢致病菌ELFA檢測技術(shù)全自動(dòng)疫濃縮增菌技術(shù)上海市臨床檢驗(yàn)中心上海市臨床檢驗(yàn)中心樣本肉湯於SPR內(nèi)流動(dòng)Vidas免疫分析5個(gè)自動(dòng)步驟不斷的清洗標(biāo)致著的抗體跟目標(biāo)微生物抗原結(jié)合免疫夾心形成儀器閱讀最終螢光值A(chǔ)ntibodiescoatedontheSPRwall,specificallycapturethemicroorganismbeingdetectedOrganismbeingdetectedOtherorganismsSampledispensedintothestripAbconjugatedtoalkalinephosphatase4methylumbelliferylphosphateResidueafterwashingAgtobedetectedBoundAb上海市臨床檢驗(yàn)中心VIDAS提供8種試條

用於不同致病菌的檢測VIDASLMO VIDASLIS VIDASSLMVIDASICS單增李斯特 李斯特氏菌 沙門氏菌 免疫濃縮沙門氏VIDASSET VIDASCAM VIDASE.COVIDASICE金葡腸毒素 彎曲菌 大腸桿菌O157免疫濃縮O157上海市臨床檢驗(yàn)中心免疫濃縮例子用禽肉樣本的蛋白胨水涂布He平板免疫濃縮前40分鐘免疫濃縮後

上海市臨床檢驗(yàn)中心成品培養(yǎng)基手工/自動(dòng)鑒定系統(tǒng)全自動(dòng)檢測系統(tǒng)生物梅里埃提供符合需要的完整解決方案上海市臨床檢驗(yàn)中心快速檢測細(xì)菌生化反應(yīng)的色原或熒光底物

糖苷酶

色原（熒光）糖苷結(jié)合物糖苷+色原（熒光）氨基肽酶色原（熒光）氨基酸結(jié)合物氨基酸+色原（熒光）

上海市臨床檢驗(yàn)中心快速檢測細(xì)菌生化反應(yīng)的色原或熒光底物常用呈色的色原有：α、β萘酚，鄰位或?qū)ξ幌趸?，對硝基苯胺，酚酞?-氨4-硝基苯常用的熒光物有：4-甲基傘形酮（4MU），7氨基4甲基傘形酮香豆素

上海市臨床檢驗(yàn)中心細(xì)菌的致病作用細(xì)菌的致病作用是否發(fā)生與3要素：毒力、侵入數(shù)量、侵入部位有關(guān)毒力：毒素、侵襲力毒素：來源、理化性質(zhì)、作用分成內(nèi)毒素（G-產(chǎn)生）、外毒素（G+產(chǎn)生）2類侵襲力：突破機(jī)體屏障、在體內(nèi)定居、繁殖、擴(kuò)散的能力，菌毛、侵襲性酶上海市臨床檢驗(yàn)中心快速檢出細(xì)菌的毒素

直接檢出細(xì)菌的毒素，常比細(xì)菌培養(yǎng)更可靠。難辨梭菌產(chǎn)毒素埃希氏菌（ETEC）LT（熱敏毒素）與ST（耐熱毒素）腸出血性大腸埃希氏菌（EHEC）VT/SLT金黃色葡萄球菌多種腸毒素霍亂弧菌腸毒素副溶血弧菌TDH上海市臨床檢驗(yàn)中心引物名稱產(chǎn)物長度Bp基因位點(diǎn)名稱ETEC-Lt450大腸桿菌熱敏感型腸毒素（heat-labileenterotoxin）ETEC-St190大腸桿菌熱耐受型腸毒素（heat-stableenterotoxin）EPEC-BfpA324geneformajorstructuralsubunitofbundle-formingpilusEPEC-EaeA384大腸桿菌intimin基因EHEC-Stx1150大腸桿菌志賀樣毒素I型EHEC-Stx2255大腸桿菌志賀樣毒素II型EC-CadC282大腸桿菌賴氨酸脫羧酶調(diào)節(jié)子（lysinedecarboxylaseregulator）EHEC-HlyA498EHEC溶血素基因（EHEC-hemolysin）Salm-InvA582沙門氏菌侵襲蛋白（invasionprotein）Shig-IpaH679志賀氏菌侵襲蛋白質(zhì)粒抗原H（invasionplasmidantigenH）引物名稱產(chǎn)物長度Bp基因位點(diǎn)名稱tcpA235霍亂弧菌毒素協(xié)同菌毛基因（toxincoregulatedpilusA）VPToxR368副溶血性弧菌直接溶血素基因（TDH）ctxA564霍亂弧菌腸毒素A基因（choleratoxinA）VChlyA481霍亂弧菌溶血溶細(xì)胞蛋白基因(hemolytic-cytolyticA)YST208耶爾森腸炎桿菌耐熱腸毒素基因（YersiniaHeat-StableEnterotoxinGene）CadF418空腸彎曲菌粘連素基因（CampylobacteradhesiontoFibronectin）Cpa324產(chǎn)氣莢膜梭菌磷酸酶C基因（ClostridiumperfringensphospholipaseC）BCnprC688蠟樣芽胞桿菌中性蛋白酶基因（neutralproteasegene）上海市臨床檢驗(yàn)中心DNA RNA

蛋白質(zhì)抗體反應(yīng)代謝反應(yīng)脂肪酸特征

為什么要以基因技術(shù)為檢測基礎(chǔ)?

上海市臨床檢驗(yàn)中心

上海市臨床檢驗(yàn)中心PCR技術(shù)的具體應(yīng)用健康從業(yè)人員體檢致病微生物陽性檢出率的提高食物中毒應(yīng)急