選修3現代生物科技專題1-1重組DNA分子模擬制作生物科技創造美好未來閱讀課本，歸納思考：作為“分子運輸車”，需要具備哪些條件？？EcoRI酶切后的載體和目的基因目的基因載體模擬實驗

多個EcoRI酶切后的載體與目的基因混合之后，加入DNA連接酶，其連接產物將有幾種？(為了方便分析，至多考慮兩個分子相連接)

載體與目的基因之間的連接載體與載體之間的連接目的基因與目的基因之間的連接載體自身頭尾相連接（自身環化）目的基因自身環化同向插入○○反向插入○○為什么EcoRI酶切后會有這么多種連接產物呢？結論：一種限制酶切割后產生的黏性末端只有一種，相同的黏性末端之間可以任意連接。↗↗↗↗↗↗載體自身環化和目的基因自身環化是干擾重組的常見因素。如何避免？兩種限制酶切割產生的黏性末端不同載體及目的基因無法自身環化無法連接↘↘○○正確連接○○載體與載體間，目的基因與目的基因間仍可連接載體特點中除有多個酶切位點外，還攜帶標記基因。如何篩選出含目的基因的重組DNA呢？載體與載體重組DNA載體與目的基因重組DNA提示：在基因工程的實際操作中，科學家選擇的載體往往含有兩個或更多的標記基因。

如果在目的基因的插入位置有一個標記基因，當目的基因插入后，標記基因將被破壞而無法表達，從而達到篩選目的。←目的基因pBR322質粒結構如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因失活標記基因進行篩選在基因工程中，真正被用作載體的質粒，都是在天然質粒的基礎上進行人工改造的。①在宿主細胞中能保存下來并能大量復制。②有多個限制酶切點，以便與外源基因連接。③具有標記基因，以便進行篩選。

④對受體細胞無害、易分離。⑤載體DNA分子大小應適合，便于提取和操作。運載體的作用：運載體必須具備的五個條件：作為運載工具，將目的基因轉移到宿主細胞中利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量復制基因工程的操作工具（1）有一或多個限制酶切點,以便目的基因可以插到載體上（2）有一個或多個標記

基因，便于篩選（3）必須能在受體細胞中穩定保存并具備復制、表達的能力。（或整合到染色體DNA上，隨染色體DNA進行同步復制。）（4）對受體細胞無害（5）大小合適，利于提取和操作載體的特點：目的基因所在片段運載體PStⅠDNA連接酶重組DNA運載體自連目的基因自連CTTAAGAATTCGCTTAAAATTCGGPStⅠ目的基因與運載體連接pBR322質粒結構如果外源DNA插入，氨卞青霉素抗性基因失活標記基因進行篩選限制性內切酶識別序列外源基因連接PStⅠPStⅠ自主復制DNA連接酶DNA聚合酶限制酶DNA水解酶解旋酶RNA聚合酶若干種酶的比較33分別代表什么酶？AATTGCAATTAATTDNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶DNA聚合酶基因工程的操作工具DNA連接酶DNA聚合酶相同點形成的鍵化學本質不同點模板作用對象（鏈接部位）用途都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質

不需要需要基因工程DNA復制將單個脫氧核苷酸連接到已有的DNA片段上，形成磷酸二酯鍵，形成DNA的一條鏈在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，最終形成完整的重組DNA分子DNA連接酶與DNA聚合酶的比較溫故知新：核酸的類型概念：細胞內攜帶遺傳信息的物質，在生物體的遺傳、

變異和蛋白質的生物合成中具有極其重要的作用。脫氧核糖核酸(DNA)核糖核酸(RNA)基本單位：脫氧核糖核苷酸核糖核苷酸堿基種類：A、G、C、T基本單位：堿基種類：A、G、C、U類型指基因中

排列順序。是具有的DNA片段，是決定的基本單位。

基因：基因的概念遺傳效應生物性狀片段1片段2片段3片段4片段5基因A基因B基因C間區間區GATCTAGACGGGAAATTTCCTCTAGATCTGCCCTTTAAAGGADNA遺傳信息：脫氧核苷酸編碼區非編碼區非編碼區啟動子RNA聚合酶結合位點終止子原核基因編碼區非編碼區非編碼區啟動子RNA聚合酶結合位點外顯子內含子終止子真核基因基因的結構基因的載體：染色體DNA基因主要由DNA和蛋白質組成染色體為基因的主要載體；基因在染色體上呈線性排列。線粒體葉綠體次要載體包含關系圖：染色體DNA基因脫氧核苷酸脫氧核苷酸、基因、DNA、染色體的關系不同種生物的基因能夠實現重組，并成功表達的原因有哪些？1、大多數生物的遺傳物質都是DNA，且都是有脫氧核苷酸構成的（化學成分相同）。2、不同生物