如何留好微生物檢驗標本臨床檢驗中心

在倡導抗菌藥物精細化治療的今天，微生物標本的留取顯得至關重要，所謂“君子慎始，差之毫厘，謬以千里”。如果送檢標本不對，不僅僅是浪費人力物力，最重要的是誤導臨床，加重不合理使用抗菌藥物。存在的主要問題二、醫護人員或患者采樣操作不規范方法不正確未執行無菌操作標本保存不恰當運輸過程的污染血培養采血指征：必須送檢的情況：發熱＞38.5℃伴下列一項：寒戰、肺炎、留置導管大于5天、白細胞＞1.8萬/mm3、IE、收縮壓＜90mmHg、無其它原因可解釋的感染。發熱＞39.5℃。2001年Khanna數據7072份血培養，640份陽性，陽性率為9％EurJClinMicrobiolInfectDDis,2001,20:217-219出現陽性時間：需氧瓶有9%比厭氧瓶早1天報告結果厭氧瓶有5%比需氧瓶早1天報告結果因此,只做需氧菌不做厭氧菌培養,將有的菌株不能發現,另有5%的血培養延遲1天報告陽性結果。如果血培養只做需氧瓶培養，漏檢的不僅是嚴格厭氧菌,也會影響兼性厭氧菌的分離率及報告陽性結果的時間

KhannaP,CollignonP.Anaerobicbottlesarestillimportantinbloodculturesets.EurJClinMicrobiolInfectDis,2001,20:217-219嗜血桿菌屬(H)放線桿菌屬(A)人心桿菌屬(C)艾肯菌屬(E)金氏桿菌屬(K)尿培養采集指征

發熱、尿頻、尿急、膿尿、小便困難、恥骨上壓痛等臨床癥狀

尿常規異常者

懷疑有泌尿系統感染時中段尿：女性采樣前用肥皂水或0.1％高錳酸鉀溶液沖洗外陰部尿道口（男性須翻轉包皮沖洗），滅菌紗布擦干。留中段尿。為避免尿道周圍皮膚及器官的正常菌群污染尿液，自然留取時，尿液需呈直線狀排出。如果需要可收集第一段尿液數毫升作淋球菌和衣原體檢查；導尿：按常規方法對會陰局部進行消毒后，用導尿管直接經尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，一般插入導管后先讓尿流10ml再留取培養標本。本法極易將下尿道細菌引入膀胱，導致繼發感染，一般不提倡使用。留置導尿留取前，有條件者可夾管4~5小時以上，使細菌有足夠的時間繁殖，以提高陽性率。采樣時應松管棄去前端尿液，左手戴無菌手套固定導尿管后，按中、左、右、中的順序，嚴格消毒尿道口處的導尿管壁，用無菌注射器針頭斜穿管壁抽吸尿液。不可打開導尿管和引流管連接處收集標本。恥骨上膀胱穿刺法：是評估膀胱內細菌感染的“金標準”方法，尤其做厭氧菌檢查時必須采用膀胱穿刺法。但本法有一定的痛苦，患者難以接受。主要用于厭氧菌培養或留取標本困難的尿標本的采集。注意事項：盡量采集晨尿，至少儲留4h以上。嚴格無菌操作，避免污染至關重要。在用藥前采集尿液。不可從集尿袋下端管口留取標本。不要因為排尿而攝入過多液體。

結果解讀：正常人體內膀胱中的尿液是無菌的。中段尿以晨起第一次尿液為主，其革蘭陰性桿菌濃度大于10５／ｍｌ，革蘭陽性球菌大于10４／ｍｌ可認為是感染的病原菌，真菌濃度大于103～4/ml可認為感染菌。有的患者呈低菌計數＜102～4/ml菌尿。結果解讀：如果出現3種及以上的細菌為污染。已用抗菌藥或經導尿管采集的尿液，多次尿培養為單一的同種菌，細菌濃度雖未達到上述界限，也可認為是感染的病原菌。尿路感染排菌可呈間歇性，如慢性膀胱炎、尿路梗阻，培養可呈陰性，當急性發作時可為陽性。下呼吸道標本：痰氣管插管抽出物經支氣管鏡的支氣管肺泡灌洗液標本（BAL）BALFPSB

咽拭子？痰：自然咳痰：最好晨痰，生理鹽水漱口，用力咳深部痰，勿將唾液和鼻后分泌物當作痰可出。誘導痰：20-30ml3%NaCl霧化吸入。合格的痰標本鱗狀上皮細胞＜10/LP，白細胞＞25/LP合格痰標本，培養出的病原菌具有診斷意義！不合格的標本，無論實驗室如何回報，僅具有參考意義！必須結合臨床。痰培養價值有限，原因為單次培養有多種細菌，多次培養為不同細菌。所以，痰培養結果陽性是感染？定值？還是污染？臨床很難區分。當然，如果肺部沒有癥狀體征，也不建議送標本。25-50%的肺部感染可能發生菌血癥，應同時做血培養,慎送痰標本，多送血培養！一份不合格的標本所有的努力都是徒勞無益的鑒定越精確離真相越遠GarbageinGarbageout氣管插管抽出痰由于不經過口腔，鱗狀上皮細胞＜10/LP插管對呼吸道有刺激，多數白細胞＞25/LP氣管插管抽出痰，大部分是合格的插管時間＜24h，培養的病原菌有診斷意義！插管時間＞24h，培養的細菌多數是定植菌，即便是純培養，也僅僅有參考意義！必須結合臨床。氣管插管抽出痰支氣管鏡的支氣管肺泡灌洗液標本標本合格指標：鱗狀上皮細胞＜1%定量接種細菌計數：PSB＞103cfu/mlBALF＞104cfu/ml鏡下吞噬細菌的白細胞＞5%咽拭子咽拭子只能代表咽部感染，不能代表肺部！咽部感染細菌譜與肺部不一致！皮膚切口與皮膚和軟組織感染標本采集組織（膿腫周圍或感染部位下組織）經手術或活檢獲得的組織是最好的標本開放性膿腫無菌鹽水清潔創面，盡量吸取深部膿液送檢。閉合膿腫用75%酒精消毒膿腫局部皮膚或黏膜表面后，用注射器以無菌方法穿刺抽取膿液5～10ml，注入厭氧血培養瓶送檢。

皮膚切口與皮膚和軟組織感染標本采集分泌物用無菌生理鹽水擦去表面滲出物，用無菌拭子深入潰瘍基底部或邊緣部取，需取兩個拭子送檢，分別