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文檔簡介

分光光度技術目錄一、分光光度技術的基本原理二、分光光度計三、分光光度技術的定量方法一、分光光度技術的基本原理Lambert-Beer定律Lambert-Beer定律是討論溶液吸光度同溶液濃度和溶液層厚度之間關系的基本定律，該定律是分光分析的理論基礎。其表達式為：A=KLC注：式中A為吸光度；K為比例常數，稱為吸光系數；L為溶液層厚度，稱為光徑；C為溶液濃度。

（Lambert-Beer定律適用于可見光、紫外光、紅外光和均勻非散射的液體。）二、分光光度計（一）分光光度計的分類分光光度計的分類紅外分光光度計:可見光分光光度計:

紫外分光光度計:測定波長范圍為大于760nm的紅外光區

測定波長范圍為400~760nm的可見光區測定波長范圍為200～400nm的紫外光區

二、分光光度計（二）分光光度計的基本結構光源單色器比色杯檢測器顯示器五大部份5最常用的是可見分光光度計和紫外-可見光分光光度計

結構：三、分光光度技術的定量方法（一）標準曲線法其方法和步驟是：1）配制一組濃度不同的標準溶液(c1

、c2……)；2）在一定波長下，分別測定其吸光度(A1、A2……)。3）以A為縱坐標，濃度c為橫坐標，繪制曲線，得到一條通過原點的直線，稱為標準曲線（A-c曲線）。4）用完全相同的方法和步驟測定待測溶液的吸光度Ax，從標準曲線上找出對應的濃度cx值（Ax

cx

）。Axcx

空白標準溶液待測溶液

c1c2c3c4cxc0標準曲線三、分光光度技術的定量方法（二）比較法

己知濃度CS的標準品和未知濃度CX標本作同樣處理，使用相同的空白調零，同時測定標準管和標本的吸光度AS和AX，根據測定的吸光度及標準品濃度，可直接計算出標本的濃度，計算公式為：Cx=(Ax×Cs)/As

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