…………○…………內…………○…○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年上外版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、以下有關動物細胞培養、植物組織培養的表述中正確的是（）A.動物細胞培養中，含15%CO2的恒溫培養箱的作用是調控pH和溫度B.植物組織培養過程中加入誘導因素也不會出現組織分化現象C.目前使用或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內，以保持細胞正常的二倍體核型D.動物細胞培養過程中，首先要用胃蛋白酶處理部分組織以使細胞分散獲得單個細胞2、如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離和計數”實驗中樣品稀釋示意圖。據圖分析錯誤的是（）

A.用移液管吸取菌液進行梯度稀釋時，可用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻B.對4號試管中的稀釋液進行平板培養得到的菌落平均數必然為5號試管的10倍C.5號試管的結果表明每克土壤中的菌株數為1．7×109D.該實驗方法統計得到的結果往往會比實際活菌數目要低3、基因工程的設計施工是在什么水平上進行的：A.細胞B.細胞器C.分子D.原子4、能充當生物武器的生物是()A.炭疽桿菌B.乳酸菌C.大麻D.酵母菌5、2018年，我國科學家利用成纖維細胞通過核移植技術成功的培育出克隆猴“中中”和“華華”，當重組細胞重新編程為全能干細胞后，細胞中物質含量變化最明顯的是（）A.有氧呼吸酶B.DNA聚合酶C.細胞骨架D.細胞膜蛋白6、對下圖所示DNA片段的說法錯誤的是（）

A.甲、乙、丙的黏性末端一定是由兩種限制酶催化產生的B.甲、乙之間可形成重組DNA分子，但甲、丙之間不能C.DNA連接酶催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成化學鍵D.切割甲的限制酶很可能不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子7、馬鈴薯利用塊莖進行無性生殖，種植的世代多了以后往往會感染病毒而減產，為此農戶都希望得到無病毒的幼苗進行種植，獲得無病毒幼苗的最佳辦法是（）A.選擇優良品種進行雜交B.進行遠緣植物體細胞雜交C.利用莖尖進行組織培養D.人工誘導基因突變8、利用某目的基因（圖甲）和P1噬菌體載體（圖乙）構建重組DNA，圖乙陰影部分表示標記基因。限制性內切核酸酶BglⅡ、EcoRⅠ和HindⅢ的酶切位點分別如下圖所示（已知這三種限制酶切割產生的黏性末端不同）。下列分析錯誤的是（）

A.將Bt抗蟲蛋白基因插入P1噬菌體載體，能構建轉基因抗蟲棉的“分子運輸車”B.構建重組DNA時，可用EcoRⅠ和HindⅢ切割目的基因所在片段和P1噬菌體載體C.圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoRⅠ切割后，末端含有兩個游離的磷酸基團D.用EcoRⅠ切割圖甲的DNA和圖乙的載體，再用DNA連接酶連接，能產生多種重組DNA9、和牛是世界公認的高檔肉牛品種，其體型小、肉質鮮嫩、營養豐富。我國科學家通過胚胎工程技術，可以利用本地黃牛代孕來繁育和牛，主要步驟如圖所示。下列相關敘述正確的是（）

A.為避免代孕牛對植入胚胎產生排斥反應，應注射免疫抑制劑B.受精卵發育成早期胚胎所需營養主要來源于培養基中的營養液C.科學家可通過給和牛飼喂外源促性腺激素，促使其超數排卵D.步驟乙為胚胎的移植，胚胎移植是胚胎工程的最終技術環節評卷人得分二、多選題(共7題，共14分)10、營養缺陷性菌株是野生型菌株經過人工誘變或自發突變失去合成某種成長因子的能力；只能在補充了相應的生長因子的基本培養基中才能正常生長的變異菌株。某研究小組對酵母菌用紫外線照射后將其接種到甲培養皿的培養基上，一段時間后將甲培養皿的菌落影印接種（不改變菌落位置）到乙；丙兩培養皿的培養基中，進一步培養得到如下圖所示結果。

下列分析正確的是（）A.接種到甲培養皿采用的是稀釋涂布平板法B.甲、丙兩培養皿中的培養基是基本培養基C.甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少D.甲、乙、丙三個培養皿都可能存在營養缺陷型11、表中生物工程實驗選擇的材料與實驗目的搭配合理的是（）

。組別實驗目的實驗材料材料特點A獲得生產人生長激素的轉基因動物乳腺細胞分泌乳汁將相應產物排出體外B獲得脫毒苗莖尖分生區附近病毒極少，甚至不含病毒C獲得植物突變體愈傷組織細胞分裂能力強，易誘發突變D胚胎干細胞培養囊胚內細胞團能分化形成各種組織和器官A.AB.BC.CD.D12、有一個嬰兒在出生后保留了臍帶血，在以后他生長發育過程中如果出現了某種難治療的疾病，就可以通過血液中的干細胞來為其治病。關于這個實例說法不正確的是（）A.用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病，需要激發細胞的所有全能性B.用臍帶血中的干細胞能夠治療這個孩子所有的疾病C.如果要移植用他的干細胞培育出的器官，需要用到細胞培養技術D.如果要移植用他的干細胞培育出的器官，應該長期給他使用免疫抑制藥物13、下列就“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗的有關敘述，正確的是（）A.經高壓蒸汽滅菌的培養基所倒平板和接種后培養時的平板均要倒置B.同一稀釋度下至少要涂布三個平板并且要培養到菌落數穩定時計數C.在稀釋度足夠高時，所形成的單個菌落中所有細胞的遺傳信息必定相同D.在相同培養條件下，未接種的培養基表面無菌落生長說明培養基沒有被雜菌污染14、熒光定量PCR技術可定量檢測樣本中DNA含量，也可用于RNA病毒的核酸檢測。其原理是：先由病毒的RNA逆轉錄得到cDNA，然后對得到的DNA進行PCR擴增。在PCR反應體系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當Taq酶催化子鏈延伸至探針處會水解探針，使熒光監測系統接受到熒光信號，即每個DNA分子擴增一次，就有一個熒光分子生成（如圖）。Ct值（循環閾值）的含義為：每個反應管內的熒光信號到達設定閾值時所經歷的循環數。下列說法錯誤的是（）

A.擴增過程中引物先于探針結合到模板DNA上B.若最初該反應體系中只有逆轉錄而來的一個DNA分子，經n次循環后，需要消耗熒光探針2n-1個C.C值越大表示被檢測樣本中病毒數目越多D.若樣本被污染，RNA酶將病毒RNA降解，檢測結果可能為陰性15、下列說法錯誤的是（）A.因為土壤中各類微生物的數量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數進行分離B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數量，選用的稀釋范圍相同C.只有得到了3個或3個以上菌落數目在30～300的平板，才說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數D.牛肉膏蛋白胨培養基的菌落數明顯大于選擇培養基的數目，說明選擇培養基已篩選出一些細菌菌落16、GAL4基因的表達產物能識別啟動子中的UAS序列，從而驅動UAS序列下游基因的表達。野生型雌雄果蠅均為無色翅，且基因組中無GAL4基因和含UAS序列的啟動子。科研人員利用基因工程在雄果蠅的一條Ⅲ號染色體上插入GAL4基因，雌果蠅的某條染色體上插入基因M（含有UAS序列啟動子的綠色熒光蛋白基因），利用雜交實驗對雌果蠅中基因M插入的位置進行判斷：將上述雌雄果蠅雜交得到F1，讓F1中綠色翅雌雄果蠅隨機交配，觀察并統計F2個表型和比例。下列說法正確的是（）A.同時含有GAL4基因和基因M的果蠅才能表現出綠色性狀B.若F1中綠色翅：無色翅為1：3，則基因M插入Ⅲ號染色體上C.若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則基因M插入Ⅲ號以外的其他常染色體上D.若F2中綠雌：無雌：綠雄：無雄=6：2：3：5，則基因M插入X染色體上評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)17、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發展；酶已經走出實驗室，走進人們的生產和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質量大的雜質蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。18、獲取目的基因的方法______、______、______19、動物基因工程：______。20、胚胎工程。

胚胎工程指對動物早期胚胎或配子所進行的多種顯微操作和處理技術，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術和______技術等組成的現代生物技術。21、請回答有關植物細胞工程的問題：

（1）在植物中，一些分化的細胞，經過________的誘導，可以脫分化失去其__________而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養中，將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫_________（填：“光照”或“黑暗”）條件下培養。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到_________培養基上繼續培養。

（3）在植物組織培養過程中，由于培養細胞一直處于不斷的分生狀態，因此容易受到__________的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含_____的培養基上，獲得所需個體。22、生物武器的致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，但對植物無害。（選擇性必修3P111）()23、首先要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共14分)24、培養動物細胞一般使用液體培養基，培養基通常需要加入血清等一些天然成分。()A.正確B.錯誤25、胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共30分)26、“掌心對掌心；手心壓手背，十指交叉摩，手握關節搓，拇指圍軸轉，指尖掌心揉，手腕別放過。”七步洗手法可以清除手部的污物和微生物，是預防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物實驗小組設計了“比較洗手前后手上細菌分布情況”的探究活動：各小組成員分別將拇指在甲組培養基上輕輕按一下，然后用肥皂將該手洗干凈，再將洗凈后的拇指在乙組培養基上輕輕按一下。將這兩組培養基放入恒溫培養箱中，在適宜溫度下培養24小時后，統計兩組培養基中菌落數目。

（1）該實驗中用到的培養基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以為微生物的生長提供__________________________等營養物質，為了使配制的溶液呈固體狀態，還需要加入__________。為了防止外來雜菌的入侵，可以將培養基放入盛有適量_________的高壓滅菌鍋內滅菌15－30min。

（2）實驗中“將拇指在培養基上輕輕按一下”相當于微生物培養操作中的_______，該操作應該在酒精燈火焰附近進行，原因是__________________________。

（3）統計甲乙兩組培養皿中的菌落，乙組中菌落數比甲少得多，實驗結果說明肥皂洗手不能徹底清除手上的微生物。為避免手上微生物在無菌操作中污染培養基，洗過的手還應進行________________________等方法處理（答出1種即可）。

（4）有同學認為乙中也有菌落產生，是因為培養過程受到雜菌污染，請你在本實驗的基礎上設計一個簡單的方案驗證他的猜想是否正確，并預期結果和結論。________________________________。27、番茄果實在成熟的過程中；多聚半乳糖醛酸酶（PG）合成顯著增加，以降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，但不利于保鮮。科學家利用基因工程得到轉基因番茄，大大延長果實保質期。操作流程如下，回答下列問題：

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因，最好從番茄的_____細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有_____。

（2）據圖可知，轉基因番茄主要通過抑制PG基因的_____過程；使PG合成量減少，從而延長果實保質期。

（3）圖中的農桿菌。能夠在含_____的培養基中生存，而在含_____的培養基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌。

（4）圖中將反向連接PC基因導入番茄細胞的方法稱為_____。要檢測感染農桿菌后的番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，_____（填“能”或“不能”）用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測，理由是_____。

（5）在將轉化的番茄細胞通過植物組織培養技術形成番茄幼苗過程中，培養基_____（填“要”或“不要”）添加有機營養物質，原因是_____。28、已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性；二室(M)對多室(m)為顯性，控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。育種工作者利用紅果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法進行了四組實驗。請據圖回答問題：

(1)以上四種育種實驗都主要應用了________的原理，培育中發生了脫分化的過程有________。

(2)用番茄植株的花粉隨機進行有關實驗，得到幼苗B直接移栽，發育成的番茄植株的基因型和表型分別是________、________，如果植物體C僅是花粉兩兩隨機融合得到的，則植物體C的基因型及其比例是____________。

(3)圖中________大部分細胞中染色體數量最少，要保證植物體B可以用于生產，培育中④過程可使用__________________處理幼苗。

(4)圖中植物體________少數細胞中染色體數量最多，培育該植物體的過程稱為________育種法，植物體D能表現出兩個親本的一些性狀，根本原因是___________________________________________。

(5)植物體A只表現紅果多室，原因是_______________________________。評卷人得分六、綜合題(共4題，共32分)29、培養基中含有微生物生長繁殖所需的各種營養成分。分解尿素的細菌的培養基各營養成分如下表所示；請回答下列問題：

。KH2PO4

1．4g

Na2HPO4

2．1g

MgSO4·7H2O

0．2g

葡萄糖。

10．0g

尿素。

1．0g

瓊脂。

15g

將上述物質溶解后；用蒸餾水定容至1000mL

（1）根據上表中培養基的成分可推測；其從物理形態上看屬于_____培養基，從功能上看屬于_____培養基，其中為分解尿素的細菌提供碳源的物質是_____。

（2）實驗中發現不能分解尿素的微生物不能在該培養基上存活；原因是_____。當樣品的稀釋度足夠高時，平板上的菌落數較能準確地反映樣品中的_____數。

（3）培養過程中若某一組平板上菌落平均數為56個/平板；而空白對照組的一個平板上出現了6個菌落，某同學將50（即56-6）個/平板作為本組菌落數的平均值，該做法是否正確？_____。請說明理由：_____。

（4）假設在培養過程中，某培養基經紫外線照射后其上的分解尿素的細菌不能正常生長，需添加某種維生素才能恢復生長，請推測最可能的原因是：_____。30、1975年科學家首次利用B淋巴細胞雜交瘤技術制備出單克隆抗體。請觀察下圖；回答問題：

。培養基特殊成分。

主要作用。

次黃嘌呤。

骨髓瘤細胞不能利用。

氨基蝶嘌呤。

阻斷DNA合成。

胸腺嘧啶核苷。

脾細胞用于合成DNA

（1）單克隆抗體的特點是_____。

（2）1984年以來，科學家針對如圖所示的單克隆抗體來自小鼠，應用于人體，會產生___；以及完整的抗體分子的相對分子質量過大，難以穿透腫瘤組織，達不到有效治療的濃度等問題，制備出可用于腫瘤治療的相對分子質量小的單克隆抗體。

（3）若用于SARS的預防上，實質上采用的_____細胞與骨髓瘤細胞融合。一般從_____（器官）中采集。科學工作者正在研究治療癌癥使用的生物導彈組成有__________。從上表看，用于篩選雜交瘤細胞的是特定的_____培養基，在該種培養基上_____的細胞不能生長繁殖。

（4）若要制備少量的單克隆抗體的方法是_____。31、近年來；高氨氮廢水的處理不當以及持續排放，導致了水體污染的日益嚴重。生物脫氮法是較好的氨氮廢水處理方法。某科研團隊從湖底污泥中分離；篩選出能降解氨氮的菌株，并研究其降解氨氮的最佳培養時間，實驗步驟如下：

步驟一：將1g水底污泥加入9mL無菌水中制成懸液，接種至100mL液體培養基中，于30℃的溫度條件下在搖床中培養7天。期間，每天向培養基中加入1mL濃度為5%的(NH4)2SO4溶液。

步驟二：將培養后的菌液用____法均勻接種到分離培養基中；倒置于30℃的恒溫培養箱中，培養至長出菌落。

步驟三：將篩選分離后的各菌株分別接種到氨氮含量為120mg/L的液體篩選培養基(模擬高濃度氨氮水樣)中；在30℃的溫度條件下搖瓶培養24小時后，取培養液進行離心10分鐘，取其上清液進行測量，從而計算出各個降解菌的氨氮降解率，篩選出降解氨氮能力最強的菌株。請分析回答下列問題：

(1).(NH4)2SO4能夠為菌種生長提供_____，培養期間每天向培養基中加入1mL濃度為5%的(NH4)2SO4溶液的目的是_________。

(2).步驟二中A處對應的方法為_____。若平板中菌落過于密集，應進—步_____；直到獲得單菌落。

(3).步驟三中應測量上清液中的_____；計算各降解菌的氨氮降解率。

(4).為研究降解氨氮的最佳培養時間，將篩選出的最優菌種于30℃的溫度條件下在搖床中培養24小時，每隔2小時對培養基進行測定。下圖是某菌株的氨氮降解率曲線圖：

①實驗中，溫度條件30℃屬于該實驗的_____量。

②據圖可知，培養時間為_____h為降解氨氮的最佳培養時間，其判斷依據是______。32、干擾素是人體T細胞產生的淋巴因子；幾乎對一切病毒有效且可用于癌癥治療，但人體細胞產生的干擾素量很少。下圖表示早期利用大腸桿菌生產人干擾素的流程（強啟動子替換普通啟動子有加強基因表達的作用）。此過程生產的干擾素沒有糖鏈，但糖鏈對蛋白質的穩定性和半衰期有影響，所以后期需對干擾素進行體外加工。請回答下列問題：

(1)過程①表示通過________法獲取目的基因。首先從提取的三種RNA中針對性擴增mRNA，已知真核生物基因的mRNA在5’端通過甲基化保護頭部，3’端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸序列）保護尾部不被降解。為了針對性擴增RNA堿基序列，該如何設計逆轉錄第一步時的DNA引物？________________。

(2)過程③形成的重組質粒可能為反向連接，可利用過程④PCR技術進行鑒別。如圖所示，分析已知堿基序列后，設計一對引物b和c（或者引物a和d）進行PCR擴增，如果實驗結果是________則為正向連接，如果結果是________則為反向連接。

(3)提取產品需破碎大腸桿菌，原因是________________________。

(4)大腸桿菌不能生成糖基化的干擾素，原因是________________________。

(5)生產干擾素的檢測除核酸分子檢測和蛋白質分子檢測外，還需要進行________檢測。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

動物細胞培養過程中，需要適宜的溫度和一定的其他環境，所以含5%CO2的恒溫培養箱用來調控pH值和溫度；動物組織培養過程中會出現組織分化；原代培養的細胞因最接近于體內細胞的生長特性；動物細胞培養的適宜pH是7.2-7.4；該pH下胃蛋白酶會失活，所以動物細胞培養過程中，應用胰蛋白酶處理部分組織使細胞分散獲得單個細胞。

【詳解】

A、動物細胞培養過程中，需要適宜的溫度和一定的其他環境，所以含5%CO2的恒溫培養箱用來調控pH值和溫度；A錯誤；

B；植物組織培養過程中加入誘導因素會出現組織分化；B錯誤；

C；使用或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內；以保持細胞正常的二倍體核型，C正確；

D；動物細胞培養的適宜pH是7.2-7.4；該pH下胃蛋白酶會失活，所以動物細胞培養過程中，應用胰蛋白酶處理部分組織使細胞分散獲得單個細胞，D錯誤。

故選C。2、B【分析】【分析】

從土壤中分離尿素分解菌的一般步驟是：土壤取樣；選擇培養、梯度稀釋、涂布培養和篩選菌株。圖中5支試管為梯度稀釋；最后經稀釋涂布平板法接種培養后進行計數。

【詳解】

A；用移液管稀釋菌液時；吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻，防止對后續的稀釋過程造成影響，A正確；

B；4號中稀釋液進行平板培養；稀釋倍數比5號的低10倍，如果稀釋倍數適當，得到的菌落平均數可能是5號的10倍，B錯誤；

C、分析圖解可知，菌液一共稀釋106倍，每克土壤中的菌株數為（168+175+167）÷3÷0.1×106≈1.7×109個；C正確；

D；稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落；使該實驗方法統計得到的結果往往會比實際活菌數目要低，D正確。

故選B。3、C【分析】【分析】

基因工程：

。基因工程的別名基因拼接技術或DNA重組技術操作環境生物體外操作對象基因操作水平DNA分子水平基本過程剪切→拼接→導入→表達結果人類需要的基因產物【詳解】

基因工程又叫DNA重組技術，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。由此可見，基因工程的操作對象是基因，屬于分子水平。4、A【分析】【分析】

生物武器種類：包括致病菌；病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等．把這些病原體直接或者通過食物、生活必需品等散布到敵方，可以對軍隊和平民造成大規模殺傷后果．根據生物武器的概念可知，生物武器包括致病菌、病毒、生化毒劑，以及經過基因重組的致病菌等。

【詳解】

A；炭疽桿菌傳染性和致病性很強；屬于生物武器，A正確；

B；乳酸菌為益生菌；不屬于生物武器，B錯誤；

C；大麻不屬于生物武器；C錯誤；

D；酵母菌為有益生物；不屬于生物武器，D錯誤。

故選A

【點睛】5、B【分析】【分析】

哺乳動物的胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞；是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的一類細胞。ES細胞具有胚胎細胞的特性，在形態上，表現為體積小；細胞核大、核仁明顯；在功能上，具有發育的全能性，即可以分化為成年動物體內任何一種組織細胞。

【詳解】

A；重組細胞重新編程為全能干細胞后；細胞中有氧呼吸酶的含量基本不變，A錯誤；

B；重組細胞重新編程為全能干細胞后；細胞中DNA聚合酶的含量明顯增加，為DNA復制做準備，B正確；

C；細胞骨架是細胞中由蛋白質纖維組成的網架結構；屬于結構物質，在該過程中含量不變，C錯誤；

D；細胞膜蛋白屬于細胞結構的一部分；當重組細胞重新編程為全能干細胞后，細胞膜蛋白應該不會發生明顯變化，D錯誤。

故選B。

【點睛】6、A【分析】【分析】

分析題圖：切割產生甲的限制酶的識別序列為：GAATTC∥CTTAAG；切割產生乙的限制酶的識別序列為：CAATTG∥GTTAAC，切割產生丙的限制酶的識別序列為：CTTAAG∥GAATTC，其中甲和乙形成的黏性末端相同，但甲和丙；乙和丙形成的黏性末端不同。

【詳解】

A；切割產生甲的限制酶的識別序列為：GAATTC∥CTTAAG；切割產生乙的限制酶的識別序列為：CAATTG∥GTTAAC，切割產生丙的限制酶的識別序列為：CTTAAG∥GAATTC，由此可見，甲、乙、丙的黏性末端是由三種限制酶催化產生的，A錯誤；

B；甲、乙的黏性末端相同；因此可在DNA連接酶的作用下形成重組DNA分子，但甲、丙的黏性末端不同，它們之間不能形成重組DNA分子，B正確；

C；DNA連接酶催化磷酸基團和脫氧核糖之間形成磷酸二酯鍵；C正確；

D；切割甲的限制酶的識別序列為：GAATTC∥CTTAAG；而甲、乙片段形成的重組DNA分子序列為：GAATTG∥CTTAAC，因此切割甲的限制酶不能識別由甲、乙片段形成的重組DNA分子，D正確。

故選A。

【點睛】

本題結合三種DNA片段，考查基因工程的相關知識，重點考查限制酶和DNA連接酶的相關知識，要求考生識記限制酶的特點，能根據圖中信息判斷三種限制酶的識別序列；識記DNA連接酶的作用，能結合所學的知識準確判斷各選項。7、C【分析】【分析】

1；植物組織培養過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體．植物組織培養依據的原理是植物細胞的全能性。

2；培育無病毒植株苗；應選擇不含病毒部分培養，而植物體新生部位不含病毒，如根尖和莖尖。

【詳解】

進行植物微型繁殖時常采用莖尖或根尖作為外植體；原因是莖尖或根尖病毒極少，因此切取一定大小的莖尖或根尖進行組織培養，再生的植株就可能不帶病毒，C正確；

故選C。8、A【分析】【分析】

一種限制酶只能識別一種核苷酸序列且在特定的位點對DNA分子進行切割；切割出的末端有黏性末端和平末端兩種，具有相同黏性末端的DNA片段之間可以在DNA連接酶的作用下連接到一起。

【詳解】

A；P1噬菌體不能侵染植物細胞；A錯誤；

B；分析圖甲；HindⅢ的酶切位點在第二個EcoRⅠ的酶切位點的左側，因此用EcoRⅠ和HindⅢ切割目的基因所在片段，目的基因兩端將形成不同的黏性末端，同樣用EcoRⅠ和HindⅢ切割P1噬菌體載體也形成這兩種黏性末端，因此它們可構成重組DNA，B正確；

C；P1噬菌體載體為環狀DNA；其上只含有一個EcoRⅠ的酶切位點，因此用EcoRⅠ切割后，該環狀DNA分子變為鏈狀DNA分子，因每條DNA單鏈各含有一個游離的磷酸基團，故切割后末端含有兩個游離的磷酸基團，C正確；

D；用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌體后形成的黏性末端相同；可正向連接或反向連接，目的基因、質粒也可能自連，能產生多種重組DNA，D正確。

故選A。9、D【分析】【分析】

分析題圖：步驟甲為受精作用；步驟乙為胚胎移植，其中誘導超數排卵用的是促性腺激素，受精過程使用的培養液是獲能溶液或專用受精溶液，早期胚胎培養的培養液成分，除了一些無機鹽和有機鹽類外，還需添加維生素；激素、氨基酸、核苷酸以及血清等。

【詳解】

A；受體子宮一般不會對植入胚胎產生排斥反應；因此不需要給代孕牛注射免疫抑制劑，A錯誤；

B；受精卵發育成早期胚胎所需營養主要來源于卵細胞中的卵黃；B錯誤；

C；促性腺激素的本質是蛋白質（多肽）；飼喂會使其分解而失去作用，C錯誤；

D；胚胎移植是胚胎工程的最后一道“技術工序”；實質是早期胚胎在相同或相似的生理環境條件下空間位置的轉移，D正確。

故選D。二、多選題(共7題，共14分)10、A:C【分析】【分析】

①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后，可形成單菌落。

【詳解】

A；甲培養皿的菌落均勻分布；接種方法應為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲、丙培養基菌落數目多；包括野生型酵母菌菌株和某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿菌株是某種營養缺陷型酵母菌菌株，乙培養皿的培養基是基本培養基，甲和丙是加入了同種營養成分的培養基，B錯誤；

C；由于基因突變具有不定向性；接種到甲培養皿的酵母菌可能還有其他營養缺陷型，且有些菌落不一定由一個酵母菌形成，所以，甲培養皿中菌落數有可能比接種的酵母菌數少，C正確；

D；乙培養皿的培養基是基本培養基；形成的菌落只可能是野生型菌落，D錯誤。

故選AC。11、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的內細胞團細胞屬于胚胎干細胞；具有很強的分裂能力，可以用胚胎干細胞培養；采用基因工程技術培養乳腺生物反應器時，受體細胞是受精卵，因為受精卵全能性最高。

【詳解】

A；采用基因工程技術培養乳腺生物反應器時；受體細胞是受精卵而不是乳腺細胞，因為受精卵全能性最高，A錯誤；

B；植物分生區附近（如莖尖）含病毒極少；甚至不舍病毒，因此可采用莖尖組織培養技術獲得脫毒苗，B正確；

C；愈傷組織分裂能力強；易發生突變，容易獲得突變體，C正確；

D；囊胚的內細胞團細胞具有很強的分裂能力；可以用于胚胎干細胞培養，進而誘導培養成各種組織和器官，D正確。

故選BCD。12、A:B:D【分析】【分析】

臍帶血中的干細胞分化程度低；全能性較高，能分裂分化形成多種組織，因此可以用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病，如果是自體器官移植不會發生免疫排斥反應，所以自體移植后不需要用免疫抑制藥物，但用臍帶血中的干細胞不能治療所有疾病。

【詳解】

A；用干細胞培育出人體需要的器官用來移植治病；不需要激發細胞的所有全能性，因為培養的目標是特定的器官，A錯誤；

B；用臍帶血中的干細胞不能治療這個孩子所有的疾病；如傳染性疾病等，B錯誤；

C；如果要移植用他的干細胞培育出的器官；需要用細胞培養技術，然后發育成器官用于移植，C正確；

D；自體器官移植不會發生免疫排斥反應；因此，如果要移植用他的干細胞培育出的器官，不需要給他使用免疫抑制藥物，D錯誤。

故選ABD。

【點睛】13、A:B:D【分析】【分析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗中；需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養基，計數的關鍵是經梯度稀釋后的倍數要合適，計數時通常選擇菌落數在30-300之間的實驗組平板進行計數。

【詳解】

A；倒置培養的原因是可以防止培養皿蓋上凝結的水珠落入培養基中造成污染；經高壓蒸汽滅菌的培養基所倒平板和接種后培養時的平板均要倒置，以防止雜菌污染，A正確；

B；為使實驗結果更準確；同一稀釋度下可以多涂布幾個平板，至少要涂布三個平板并且要培養到菌落數穩定時計數，求平均值，B正確；

C；細菌在分裂生殖中也會產生基因突變；雖然一個菌落是由一個活菌繁殖而來，但是個菌落中所有細胞的遺傳信息不一定相同，C錯誤；

D；證明選擇培養基沒有被雜菌污染的方法是對培養基進行空白培養；即選取未接種的培養皿與接種樣品的培養皿同時培養，在相同培養條件下，未接種的培養基表面無菌落生長，說明培養基沒有被雜菌污染，D正確。

故選ABD。14、A:B:C【分析】【分析】

多聚酶鏈式反應擴增DNA片段：

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細胞內DNA的復制過程。DNA的復制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應過程是：變性→復性→延伸。

【詳解】

A；基因擴增過程中需要特定的引物；該引物的作用是定位基因的位置，與模板鏈結合并為子鏈的延伸提供起點，擴增過程中引物和探針應同時結合到模板DNA上，A錯誤；

B、若最初該反應體系中只有逆轉錄而來的一個DNA分子，每個DNA分子需要1個探針，擴增n次，可得到2n個DNA分子，則共需要消耗2n-1個探針；B錯誤；

C；由題可知C值越大；該反應管內的熒光信號到達設定閾值經歷的循環數越大，即每次循環出現的熒光信號越少。每次循環出現的熒光信號越少，代表被檢測樣本中的病毒數目越少，C錯誤；

D；如果樣本內的病毒RNA被降解；會導致無法檢測出樣本內的正確病毒數目，D正確。

故選ABC。15、B:C【分析】【分析】

1；從土壤中篩選目的微生物的流程一般為：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養基上→挑選能生長的菌落→鑒定。當樣品的稀釋庋足夠高時；培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數來推測樣品中大約含有的活菌數。

2、統計菌落數目的方法：（1）顯微鏡直接計數法：①原理：利用特定細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物數量；②方法：用計數板計數；③缺點：不能區分死菌與活菌。（2）間接計數法（活菌計數法）：①原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌．通過統計平板上的菌落數，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作：a、設置重復組，增強實驗的說服力與準確性；b；為了保證結果準確；一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數。③計算公式：每克樣品中的菌株數=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數。

【詳解】

AB；樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數目；土壤中各類微生物數量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀釋倍數進行分離，A正確；B錯誤；

C；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數目在30～300的平板；就說明稀釋操作比較成功，并能夠進行菌落的計數，C錯誤；

D；驗證選擇培養基是否具有選擇作用；需設立牛肉膏蛋白胨固體培養基作為對照，若后者的菌落數明顯大于前者，說明前者具有篩選作用，D正確。

故選BC。

【點睛】16、A:D【分析】【分析】

分析題意可知，GAL4基因可以控制GAL4蛋白的表達，它能夠與特定的DNA序列UAS結合，并驅動UAS下游基因的表達。將GAL4基因插入到雄果蠅的Ⅲ號染色體上(一條常染色體上)，UAS綠色熒光蛋白基因隨機插入到雌果蠅某條染色體上，但無法表達(親代雌果蠅缺乏GAL4蛋白)。同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因的果蠅，才能合成GAL4蛋白驅動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達，從而表現出綠色性狀。為便于理解，假設插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)。UAS-綠色熒光蛋白基因插入的位置有3種可能：Ⅲ號染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循連鎖定律)，其他常染色體上(則雄、雌基因型可表示為Aabb×aaBb，遵循自由組合定律)、X染色體上(則雄、雌基因型可表示為AaXbY×aaXBXb；遵循自由組合定律)。

【詳解】

A；同時具備GAL4和UAS-綠色熒光蛋白基因（M基因）的果蠅；才能合成GAL4蛋白驅動UAS下游的綠色熒光蛋白基因表達，從而表現出綠色性狀，A正確；

B、若綠色熒光蛋白基因（M基因）插入Ⅲ號染色體上，發生基因連鎖，假設插入GAL4基因用A表示(沒有該基因用a表示)，插入UAS綠色熒光蛋白基因用B表示(沒有該基因用b表示)，則親本為Aabb×aaBb，則F1中綠色翅（AaBb）：無色翅（Aabb、aaBb、aabb）為1：3，若插入Ⅲ號染色體以外的染色體上，兩對基因遵循基因組合定律，則親本仍為Aabb×aaBb，F1中綠色翅（AaBb）與無色翅（Aabb、aaBb、aabb）比例仍為1：3；B錯誤；

C、若F2中綠色翅：無色翅=9：7，則說明兩種基因自由組合，故綠色熒光蛋白基因（M基因）沒有插入Ⅲ號染色體上，但不能確定熒光蛋白基因的具體位置，不一定就在常染色體上，也可能在X染色體上，C錯誤；

D、若F2中綠色翅雌性：無色翅雌性：綠色翅雄性：無色翅雄性=6：2：3：5；雌雄中綠色翅和無色翅比例不同，說明與性別相關，則可以得出熒光蛋白基因（M基因）插入X染色體的結論，D正確。

故選AD。三、填空題(共7題，共14分)17、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質量大的雜質蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】提高動物生長速度、改善畜產品品質、用轉基因動物生產藥物20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術、胚胎移植技術、胚胎分割技術性別控制21、略

【分析】【分析】

植物組織培養的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度；適時的光照、pH和無菌環境等）；②一定的營養（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例；特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”。

【詳解】

（1）在植物中；一些分化的細胞，經過激素的誘導，可以脫分化失去其特有的結構和功能而轉變成未分化細胞。

（2）胡蘿卜的組織培養中；將接種后的胡蘿卜組織塊，放在恒溫黑暗條件下培養。一段時間后，將生長良好的愈傷組織轉接到分化培養基上繼續培養。

（3）在植物組織培養過程中；由于培養細胞一直處于不斷的分生狀態，因此容易受到培養條件和外界壓力的影響而產生突變。為篩選出具有抗鹽性狀的突變體，需將種子播種在含一定濃度的鹽的培養基上，獲得所需個體。

【點睛】

本題考查植物組織培養的相關知識，要求考生識記植物組織培養的過程、原理及條件，掌握植物組織培養技術的相關應用，能結合所學的知識準確分析，屬于考綱識記和理解層次的考查。【解析】①.激素②.特有的結構和功能③.黑暗④.分化⑤.培養條件和外界壓力⑥.一定濃度的鹽22、略

【分析】【詳解】

生物武器是利用生物戰劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。致病能力強、攻擊范圍廣。它可以直接或通過食物、生活必需品和帶菌昆蟲等散布，經由呼吸道、消化道和皮膚等侵入人、畜體內，造成大規模傷亡，同時可毀壞植物，該說法錯誤。【解析】錯誤23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術。四、判斷題(共2題，共14分)24、A【分析】【分析】

液體培養基主要是模擬動物體內環境；動物體細胞是生活在組織液當中，而且細胞要直接從組織液里獲得營養和排出廢物。所以液體培養基相當于組織液的液體環境。

【詳解】

為了保證細胞培養時營養物質和生長因子的供給，培養基中需添加一定量的動物血清等天然成分，可以補充合成培養基中缺乏的物質，故該表述正確。25、A【分析】【分析】

早期胚胎發育從受精卵開始；當卵裂分裂到16-32個細胞時，卵裂產生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞。胚胎進一步發育，細胞開始出現分化，形成內細胞團；滋養層；隨著胚胎進一步發育，胚胎內部出現了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個時期的胚胎叫做囊胚。胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時期聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發育成胚胎的各種組織，即發育成完整的胚胎，而沿透明帶內壁拓展和排列的細胞，稱為滋養層細胞，它們將來發育成胎膜和胎盤，為胚胎的發育提供營養，故“胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化表述”正確。五、實驗題(共3題，共30分)26、略

【分析】【分析】

1；培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質；分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物種和氧氣的要求。

2；微生物實驗中無菌技術的主要內容：

（1）對實驗操作的空間；操作者的衣著和手；進行清潔和消毒。

（2）將用于微生物培養的器皿；接種用具和培養基等器具進行滅菌。

（3）為避免周圍環境中微生物的污染；實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。

（4）實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

【詳解】

（1）該實驗中用到的培養基中加入了牛肉膏；蛋白胨、NaCl和水；蛋白胨來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質，故蛋白胨可以為微生物的生長提供碳源、氮源和維生素等營養物質，為了使配制的溶液呈固體狀態，還需要加入瓊脂。為了防止外來雜菌的入侵，可以將培養基放入盛有適量水的高壓滅菌鍋內滅菌15-30min。

（2）實驗中“將拇指在培養基上輕輕按一下”相當于微生物培養操作中的接種；該操作應該在酒精燈火焰附近進行，這樣能夠保證接種時處于一個無菌的環境，防止周圍環境中的微生物污染培養基。

（3）為避免手上微生物在無菌操作中污染培養基；洗過的手還應酒精棉球擦拭雙手；帶消毒手套等方法處理。

（4）有同學認為乙中也有菌落產生；是因為培養過程受到雜菌污染，若要驗證乙培養基是否被污染，需要再加一個不接種的相同培養基作為對照，與甲乙在相同條件下培養，若該培養基上沒有生長菌落，說明培養過程中未被雜交污染，故猜想錯誤；若該培養基上生長菌落，則說明猜想正確。

【點睛】

本題主要考查微生物的分離和培養，解題關鍵是識記培養基的概念、微生物實驗中無菌技術和實驗操作等知識，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。【解析】碳源、氮源和維生素瓊脂水接種避免周圍環境中的微生物污染培養基酒精棉球擦拭雙手、戴消毒手套等再加一個不接種的相同培養基（空白培養基），與甲乙在相同條件下培養，若該培養基上沒有生長菌落，說明培養過程未被雜交污染，猜想錯誤；若該培養基上生長菌落，說明培養基中被雜菌污染，猜想正確27、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA??分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）利用RT—PCR技術即逆轉錄—多聚酶鏈式反應制備PG基因；由于多聚半乳糖醛酸酶（PG）可降解果膠使細胞壁破損，從而使果實變紅變軟，說明PG基因在果肉中表達量較高，所以最好從番茄的果肉細胞中提取mRNA，此技術所需要的酶主要有逆轉錄酶和Taq酶（或熱穩定DNA聚合酶）；

（2）據圖可知；轉基因番茄PG基因與反向連接PG基因的轉錄產物mRNA1和mRNA2相結合形成雙鏈，從而抑制PG基因的翻譯過程，使PG合成量減少，從而延長果實保質期；

（3）分析表達載體的構建過程圖可知；目的基因插入到圖中農桿菌的四環素抗性基因上，導致農桿菌失去了四環素的抗性，所以圖中農桿菌能夠在含卡那霉素的培養基中生存，而在含四環素的培養基中不能生存的即為已轉化的所需農桿菌；

（4）圖中是利用農桿菌將反向連接PC基因導入番茄細胞的；此方法稱為農桿菌轉化法。不能用標記的PG基因的單鏈作為探針進行檢測番茄細胞染色體DNA上是否插入了反向連接PC基因，理由是番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶；

（5）將轉化的番茄細胞通過植物組織培養技術形成番茄幼苗過程中；需要在培養基中添加有機營養物質，原因是該培養過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）。

【點睛】

本題結合圖解，考查基因工程和植物組織培養的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養的過程及應用，能結合圖中信息準確答題。【解析】果肉逆轉錄酶和Taq酶（或熱穩定DNA聚合酶）翻譯卡那霉素四環素農桿菌轉化法不能番茄細胞內原有的天然PG基因和插入的反向連接PG基因，均會與該探針形成雜交帶要該培養過程中植物細胞不能進行光合作用（或光合作用很弱）28、略

【分析】【分析】

分析題圖：①⑤⑥為植物組織培養；③為花粉離體培養；幼苗B為單倍體，若過程④使用秋水仙素處理幼苗B，則植物體B為可育的純合植株。

【詳解】

（1）由圖可知；圖中的四種育種方法都利用了離體的植物細胞進行育種，運用了植物細胞具有全能性的原理，離體植物細胞的培育都必須運用植物組織培養技術，該過程中會發生脫分化，即①③⑤⑥。

（2）紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉基因型及比例是Ym：ym＝1：1；故花粉苗直接發育成的番茄幼苗B的基因型是Ym或ym，但其為單倍體，高度不育，故表型為無果實；而植物體C僅是花粉兩兩隨機融合得到的，基因型及其比例是YYmm：Yymm：yymm＝1：2：1。

（3）育種過程中染色體數量最少的是由減數分裂產生的花粉及幼苗B；植物體B中只有一個染色體組；高度不育，可以使用一定濃度的秋水仙素或適當低溫處理使之成為二倍體，以用于生產。

（4）植物體D是由番茄體細胞和馬鈴薯體細胞融合培育而來的；其染色體數量是兩個物種親本的染色體數量之和，有絲分裂中少數細胞中的染色體數量暫時加倍，染色體數量最多；植物體D具有兩個親本的遺傳物質，故能表現出兩個親本的一些性狀。

（5）植物體A的形成過程中沒發生減數分裂，只進行了有絲分裂，沒有基因重組，沒發生基因突變，故完全表現親本紅果多室的性狀。【解析】(1)植物細胞全能性①③⑤⑥

(2)Ym或ym無果YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1

(3)花粉和幼苗B一定濃度的秋水仙素或適當低溫。

(4)D植物體細胞雜交具有兩個親本的遺傳物質。

(5)該培育過程中只進行了有絲分裂，且沒發生基因突變，完全保持了親本的遺傳性狀六、綜合題(共4題，共32分)29、略

【分析】【分析】

培養基的成分：水；碳源、氮源、無機鹽、生長因子等。按物理性質分為：液體培養基、固體培養基和半固體培養基；按成分來源分為：天然培養基、合成培養基；按功能用途分為：選擇培養基、鑒別培養基。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

【詳解】

（1）培養基中含有瓊脂；故為固體培養基。含有的唯一氮源是尿素，故從功能上看又屬于選擇培養基，只有能分解尿素的微生物才能在該培養基上存活，由葡萄糖提供碳源。

（2）由于該培養基中以尿素作為唯一的氮源；故不能分解尿素的微生物不能存活。當樣品的稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養基表面形成的那個的菌落，故平板上的菌落數可以較準確的反映樣品中的活菌數。

（3）空白對照組長出了6個菌落；說明培養基已經被污染，實驗失敗，應該重新做實驗。

（4）原本分解尿素的細菌可以正常生長；經紫外線照射后不能正常生長，必須添加某種微生物才能生長，說明紫外線照射導致分解尿素的細菌發生基因突變，從而導致該突變菌種不能合成維生素。

【點睛】

可以在培養基中加入青霉素分離酵母菌和霉菌；加入尿素作為唯一氮源，可以分離分解尿素的微生物；加入纖維素作為唯一碳源，可以分離分解纖維素的微生物。【解析】固體選擇葡萄糖培養基中的尿素是唯一的氮源，不能利用尿素的微生物氮元素得不到補充活菌不正確空白對照組出現了6個菌落，說明該組培養基出現了污染，該實驗數據不可用，應重做紫外線照射導致分解尿素的細菌發生基因突變，從而導致該突變菌種不能合成維生素30、略

【分析】【分析】

病原體侵入機體后；首先被吞噬細胞處理；誘導動物細胞融合，常用的誘導劑有聚乙二醇或滅火的病毒；雜交瘤細胞具有漿細胞和骨髓瘤細胞的遺傳信息，故雜交瘤細胞的特點是既能無限增殖，又能產生特定抗體；從選擇培養基中獲得能產生所需抗體的雜交瘤細胞后，可以通過體外培養或注射到小鼠腹腔中，獲得單克隆抗體．

（1）

單克隆抗體的特點是化學性質單一；特異性強，靈敏度高。

（2）

科學家用針對小鼠的單克隆抗體應用于人體；會作為異物產生排異反應。

（3）

制備單克隆抗體所用的B淋巴細胞一般從脾中采集；若用在SARS預防上，實質上采用的SARS病毒感染后產生的漿（效應B）細胞與骨髓瘤細胞融合，形成雜交瘤細胞，最后篩選出能針對SARS病