…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年上教版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共8題，共16分)1、利用基因工程技術生產羧酸酯酶（CarE）制劑；用于降解某種農藥的殘留，基本流程如圖。下列敘述正確的是（）

A.過程①的反應體系中需要加入逆轉錄酶和核糖核苷酸B.過程②需使用限制酶和DNA聚合酶，是基因工程的核心步驟C.過程③需要使用NaCl溶液制備感受態的大腸桿菌細胞D.過程④可利用DNA分子雜交技術鑒定CarE基因是否成功導入受體細胞2、下列關于生物技術與倫理問題的觀點正確是（）A.反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術設計嬰兒性別B.通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業C.大量引入國外轉基因作物與本地近緣作物品種雜交D.生物武器包括致病菌物、病毒、干擾素及基因重組的重組致病菌等3、經研究發現；PVY﹣CP基因位于某種環狀DNA分子中。將PVY﹣CP基因導入馬鈴薯，使之表達即可獲得抗PVY病毒的馬鈴薯。如圖表示構建基因表達載體的過程，相關酶切位點如下表。以下說法錯誤的是（）

。BamHI

HindⅢ

BglII

SmaI

G↓GATCC

CCTAG↑G

A↓AGCTT

TTCGA↑A

A↓GATCT

TCTAG↑A

CCC↓GGG

GGG↑CCC

A.推測Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似B.由步驟③獲取的目的基因有1個粘性末端C.步驟④應選用的限制酶是BamHⅠ和SmaⅠD.NPTⅡ基因可能是用于篩選的標記基因4、紫杉醇具有良好的抗腫瘤作用。科研人員采用植物組織培養技術從紅豆杉愈傷組織中提取到大量的紫杉醇。下列操作或敘述錯誤的是（）A.通常選取紅豆植株的莖尖或根尖組織經消毒后作為外植體B.外植體脫分化成愈傷組織需要在適宜激素等條件下進行C.外植體脫分化成愈傷組織過程中發生了細胞分裂和細胞分化D.高度液泡化、無定形狀態的愈傷組織細胞經培養能合成紫杉醇5、科研人員利用胡蘿卜根段進行組織培養獲得試管苗，部分操作過程如圖所示。下列分析錯誤的是（）

A.步驟①選取形成層是因為其細胞分裂旺盛B.步驟②需要對胡蘿卜的組織塊進行消毒C.步驟③通過細胞分化形成愈傷組織D.步驟③和步驟④所用的培養基有差異6、試管嬰兒之父—愛德華茲因體外受精技術獲得2010年諾貝爾生理學或醫學獎，該體外受精技術又稱試管嬰兒技術。下列說法錯誤的是（）A.將收集到的精子放在一定濃度的肝素溶液中培養是為了誘導精子獲能B.受精過程防止多精入卵的生理反應包括透明帶反應和卵細胞膜反應C.進行早期胚胎培養時，培養液中除加入一些必要的營養成分外，還應添加激素和血清D.胚胎發育至原腸胚時，細胞開始分化7、某高校采用如圖所示的發酵罐進行葡萄酒主發酵過程的研究；下列敘述錯誤的是（）

A.夏季生產果酒時，常需對罐體進行降溫處理B.乙醇為揮發性物質，故發酵過程中空氣的進氣量不宜太大C.正常發酵過程中罐內的壓力高于大氣壓D.可以通過監測發酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發酵8、科學家已能運用基因工程技術；讓羊合成并分泌人的抗體．相關敘述正確的是（）

①該技術將導致定向變異②DNA連接酶把目的基因與運載體粘性末端的堿基對連接起來③蛋白質中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料④受精卵是理想的受體⑤該羊的產生要用到核移植技術A.①②③④B.②③④C.②③④⑤D.①③④評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)9、大腸桿菌的質粒常被用來做基因工程中的載體，這與它的哪項優點有關()A.具有黏性末端B.分子呈環狀，便于限制酶切割C.對宿主細胞的生存沒有決定性作用D.分子小，能自主復制，有標記基因10、下列有關生物技術引起的安全性和倫理問題的敘述，不正確的是（）A.基因編輯制造嬰兒的行為是不符合倫理道德的B.設計試管嬰兒是為了治療疾病，不會出現負面影響C.我國禁止生殖性克隆人和有關人胚胎干細胞的研究D.世界各國都應該禁止在任何情況下生產、儲存和發展生物武器11、下列動物細胞培養過程中屬于原代培養的是（）A.通常將動物組織消化后的初次培養稱為原代培養B.從機體取得細胞后立即進行培養的過程C.出現接觸抑制現象后接下來的細胞培養過程D.哺乳動物細胞在培養基中的懸浮生長過程12、重疊延伸PCR技術是一種通過寡聚核苷酸鏈之間重疊的部分互相搭橋；互為模板；經過多次PCR擴增。從而獲得目的基因的方法。該技術在擴增較長片段的DNA、不同來源的DNA片段拼接、基因的定點誘變等方而具有廣泛的應用前景，下圖表示利用重疊延伸PCR技術擴增某目的基因的過程。下列敘述正確的是（）

A.引物中G＋C的含量越高，引物與模板DNA結合的穩定性越高B.在第一階段由于引物2和引物3發生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應系統中C.引物1、2組成的反應系統和引物3、4組成的反應系統中均進行一次復制，共產生4種雙鏈DNA分子D.在引物1、2組成的反應系統中，經第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經過3次復制13、下圖是將人的生長激素基因導入細菌B細胞內制造“工程菌”的示意圖。已知細菌B細胞內不含質粒A，也不含質粒A上的基因。下列說法正確的是（）

A.若能在細菌B中檢測到人的生長激素基因，則說明該基因工程項目獲得成功B.將完成導入過程后的細菌涂布在含有氨芐青霉素的培養基上，能生長的就是導入了重組質粒的細菌C.將人的生長激素基因與質粒A結合的過程共形成了4個磷酸二酯鍵D.將重組質粒導入細菌B之前，可以用Ca2+處理細菌B14、北極比目魚中有抗凍基因，其編碼的抗凍蛋白有11個氨基酸的重復序列，該序列重復次數越多，抗凍能力越強，下圖是獲取轉基因抗凍番茄植株的過程示意圖，有關敘述不正確的是（）

A.過程①獲取的目的基因，可用于基因工程和比目魚基因組測序B.將多個抗凍基因編碼區依次相連成能表達的新基因，不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白C.過程②構成的重組質粒缺乏標記基因，需要轉入農桿菌才能進行篩選D.應用DNA探針技術，可以檢測轉基因抗凍番茄植株中目的基因的存在及其表達15、熔噴布是口罩生產的重要原料；主要成分是聚丙烯，其易降解程度是評價口罩合格性的重要指標之一。某研究小組從土壤中分離出高效降解聚丙烯的細菌，部分流程如圖所示。下列說法正確的是（）

A.②中的選擇培養基以聚丙烯為唯一碳源B.步驟③所用的接種工具是接種環C.在配制步驟②、③的培養基時，應先調pH后高壓蒸汽滅菌D.對③中平板上的菌落進行計數，可以計算出土壤浸出液中細菌的濃度16、白地霉侵染是導致柑橘酸腐病的主要原因，實驗證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養基中擴散并與其中的Fe3+形成穩定紅色復合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養基如下表所示。實驗結果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養物質B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結果表明，FeCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結合的數量減少D.結果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果評卷人得分三、填空題(共5題，共10分)17、請回答下列有關生物技術的安全性和倫理問題：

（1）一些持支持態度的科學家認為，由于不同物種間存在__________，同時花粉的傳播距離和__________有限；轉基因農作物很難與其它植物雜交，因而不大可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉基因生物或產品研究過程中，絕大多數科學家都能自覺遵守科學研究道德。例如，把重組DNA的轉移限制在遺傳上具有___________的生物上；對外源DNA進行認真選擇，避免能夠表達出對人體有毒性或過敏的___________．

（3）一些持反對態度的科學家認為，由于克隆技術尚不成熟，現在就做克隆人很可能孕育出有嚴重缺陷的孩子。但是支持克隆人的科學家則認為，一些技術問題可以通過胚胎分級、______和__________等方法得到解決。

（4）對于克隆技術，中國政府的態度是___________．但不反對___________。18、酵母菌是______________微生物。酵母菌進行有氧呼吸的反應式如下：______________________；酵母菌進行無氧呼吸的反應式如下：_________________。19、其它載體：_______20、DNA的粗提取實驗中，如果實驗材料是非哺乳動物如雞血細胞，需要在雞血細胞中加入一定量的____________，如果實驗材料是植物細胞，需要先使用_______________溶解細胞膜。21、基因工程是蛋白質工程的關鍵技術；蛋白質工程是基因工程的延伸。有人對基因工程和蛋白質工程的關系進行了比較，并歸納為下表。

基因工程與蛋白質工程的比較。比較項目蛋白質工程蛋白質工程原理中心法則中心法則區別過程獲取目的基因→構建表達載體→導入受體細胞→目的基因的檢測與鑒定預期蛋白質功能→設計蛋白質結構→推測氨基酸序列→合成DNA→表達出蛋白質實質定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需要的生物類型或生物產品（基因的異體表達）定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質定向改造蛋白質的分子結構以生產人類所需要的蛋白質結果生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質生產自然界中已有的蛋白質聯系蛋白質工程是第二代基因工程

上表的比較是否正確？如果有不妥之處，嘗試進行修改。_________評卷人得分四、判斷題(共4題，共36分)22、制備單克隆抗體時，2次篩選的目的不同。()____A.正確B.錯誤23、目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法。（選擇性必修3P54）()A.正確B.錯誤24、胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。()A.正確B.錯誤25、胚胎發育早期，細胞的數量不斷增加，胚胎的總體積也增加。（選擇性必修3P58）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共2題，共16分)26、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養基上形成菌落。利用his菌株可檢測環境或食品中是否存在化學致癌劑（誘發his-菌株突變）。回答下列問題：

(1).基本培養基的成分主要包括_____。制備基本固體培養基的操作：計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時應注意：_____。

(2).檢測是否存在化學致癌劑時，用_____法將his-菌株接種于基本培養基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養基滅菌合格，則可能影響該檢測結果的兩個重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實驗組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經正確檢驗后，結果如B所示，則實驗結果和結論為_____。

(3).使用過的培養基在丟棄之前應做的處理及目的是_____。27、科研人員利用營養菌（只能利用乳糖；但不能降解四環素）和抗性菌（不能利用乳糖，但能降解四環素）對細菌間的相互作用進行了探究。

(1)將兩種菌液分別用______法單獨接種于加入含四環素并以乳糖為唯一碳源的______（選填“固體”或“液體”）培養基中，培養一段時間后，培養皿中均未出現菌落，推測兩種菌______（填“發生”或“未發生”）可遺傳變異。

(2)將兩種菌混合后接種在與上述成分相同的培養基中，培養一段時間后，培養基中兩種菌落均有生長，推測兩種菌實現了“互利共生”，其原因最可能是：抗性菌增殖，______，為營養菌存活提供保障；營養菌增殖，______；代謝產物為抗性菌生長提供碳源。

(3)為進一步驗證上述現象；科研人員設計了如圖所示裝置進行實驗。

①實驗操作：在接種了營養菌和抗性菌混合菌液的培養板，左側加入以乳糖為唯一碳源的培養基，右側加入含______的培養基；培養基可從與兩側逐漸擴散到混合菌液培養板上。一段時間后檢測混合菌液培養板上兩種菌的數量情況。

②預期結果：左側______；右側______。評卷人得分六、綜合題(共3題，共21分)28、除草劑草銨膦（C5H15N2O4P）具有廣譜性；低毒、活性高等特點；由于其結構與谷氨酸相似，故可能會導致代謝紊亂、產生神經中毒效應；草銨膦又因有著較強的水溶性，在土壤中易發生遷移，可對環境造成危害，且能進一步在食物鏈中富集，會對人體產生在或長期的毒害。研究發現，草銨膦能被土壤中的某些微生物降解。分離降解草銨膦的菌株和探索其降解機制的實驗過程如下圖甲、乙所示。回答下列問題：

(1)欲篩選出能降解草銨膦的細菌，土壤樣品一般取自__________的土壤。需配制選用草銨膦作為__________的培養基進行篩選。

(2)由圖甲可知，純化培養目的菌時使用了__________（填“液體”或“固體”）培養基，所用的接種工具是__________。純化培養時，需要同時進行同條件下未接種培養基的培養，目的是__________。

(3)為探究草銨膦被降解的機制，某實驗室又做了如圖乙所示實驗，即將純化得到的該菌種的培養液過濾離心，取上清液并加入某種酶溶液，然后加入草銨膦溶液中，結果測得草銨膦的降解率為0。已知酶溶液對草銨膦不起作用，于是該實驗室得出結論：目的菌株能分泌出降解草銨膦的物質，該物質能被酶催化水解。則該結論__________（填“一定”、“不一定”或“一定不”）成立，請設計實驗加以完善：__________。29、甘藍型油菜中；抑制PEP基因的表達可提高油菜籽的含油量。通過基因工程將PEP基因反向連接在啟動子后，構建轉反義PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技術路徑。請回答下列問題：

(1)為將PEP基因反向連接在啟動子后，構建反義PEP基因，需要將限制酶酶切位點設計在引物上，PEP基因的上游引物和下游引物中應分別引入________酶切位點。

(2)用激光照射油菜愈傷組織時，可在細胞膜上打出一個穿孔，轉反義PEP基因表達載體由此小孔進入油菜細胞，幾秒鐘后小孔封閉，該過程體現了細胞膜具有____________。目的基因表達載體進入細胞后；Ti質粒上的T－DNA區段可轉移到油菜細胞的基因組中。

(3)篩選時，需在油菜愈傷組織培養基中加入__________進行初步選擇。在激光照射下，存活的細胞一般會發出______________。為檢測反義PEP基因是否整合到染色體上，研究者通常檢測細胞中是否存在ntp基因，而不檢測PEP基因。不直接檢測PEP基因的原因是________________。30、心臟移植是挽救終末期心臟病患者生命唯一有效的手段；然而心臟移植過程中會發生缺血再灌注損傷（IRI），可能導致心臟壞死。研究發現，IRI通過促進Caspase8等一系列凋亡基因的表達，導致細胞凋亡最終引起器官損傷。根據Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官損傷。圖1是利用豬的心肌細胞開展siRNA作用研究的示意圖，圖2是此研究可能用到的4種限制酶及其切割位點。回答下列問題：

(1)圖1中步驟構建重組質粒需要使用多種工具酶。常用的DNA連接酶有EcoliDNA連接酶和T4DNA連接酶。圖2中_____酶切割后的DNA片段可以用EcoliDNA連接酶連接，圖中_____酶切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。DNA連接酶催化目的基因片段與質粒載體片段之間形成的化學鍵是_____。

(2)圖1中步驟將重組質粒導入豬的心肌細胞最常用的方法是_____。siRNA對應DNA序列在心肌細胞中表達產生siRNA的步驟稱為_____。siRNA與RISC組裝形成基因沉默復合物，通過抑制基因表達的_____過程；使Caspase8基因沉默，從而降低IRI引起的細胞凋亡。

(3)研究人員根據Caspase8基因的堿基序列，設計了三種序列分別導入豬的心肌細胞，通過測定靶基因Caspase8的mRNA含量來確定最優序列。測定mRNA含量時，需提取心肌細胞的總RNA，經過_____過程得到cDNA，再進行PCR擴增，測定PCR產物量，結果如圖3所示。據此判斷最優序列是_____。

(4)與直接將siRNA導入豬的心肌細胞相比，通過重組質粒將siRNA對應的DNA序列導入心肌細胞，其優點是_____（答出一點）。

(5)選用豬的心肌細胞作受體細胞是因為豬在基因、解剖結構、生理生化和免疫反應等方面與人類極為相似。為了解決心臟移植供體短缺問題，許多科學家正在研究用豬心臟代替人的心臟。你認為將豬心臟移植到人體面臨的最大挑戰是_____。請說出一種解決這一問題的思路：_____。參考答案一、選擇題(共8題，共16分)1、D【分析】【分析】

分析圖解：圖中過程①表示利用mRNA通過反轉錄法合成相應的DNA；過程②表示構建基因表達載體（基因工程核心步驟）；過程③表示將目的基因導入受體細胞；過程④表示通過篩選獲得工程菌。

【詳解】

A；過程①表示通過反轉錄法合成目的基因；該過程需要逆轉錄酶和脫氧核糖核苷酸，A錯誤；

B；過程②需使用限制酶和DNA連接酶構建基因表達載體；是基因工程的核心步驟，B錯誤；

C、過程③常用Ca2+處理大腸桿菌使其成為易于吸收DNA的感受態細胞；C錯誤；

D、過程④可利用DNA分子雜交技術鑒定CarE基因是否成功導入受體細胞；D正確。

故選D。2、A【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養發育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。

2；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

3；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）。

【詳解】

A；反對設計試管嬰兒的原因之一是有人濫用此技術設計嬰兒性別；我國不允許利用體外受精技術篩選早期胚胎性別，A正確；

B；通過基因篩查禁止重大疾病基因攜帶者就業；不符合倫理道德，B錯誤；

C；引入外來物種不慎會導致生態入侵；C錯誤；

D；生物武器種類包括致病微生物、病毒、生化毒劑；以及經過基因重組的致病菌等，D錯誤。

故選A。

【點睛】3、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示是獲得抗病毒馬鈴薯的部分操作；步驟①~③是從環狀DNA中獲取目的基因（PVY-CP）的過程；質粒是選用的運載體；④過程需要用限制酶處理質粒；⑤表示基因表達載體的構建過程，該過程需要DNA連接酶。

【詳解】

A；由圖可知；步驟②中用Klenow酶處理后，黏性末端變成平末端，說明Klenow酶能催化DNA鏈的合成，從而將DNA片段的黏性末端變成平末端，故Klenow酶的功能與DNA聚合酶類似，A正確；

B；經過步驟③后；目的基因（PVY-CP）的一側是BamHI切割形成的黏性未端，目的基因（PVY-CP）的另一側是平未端，因此由步驟③獲取的目的基因有1個粘性末端，B正確；

C；由于目的基因只有一個黏性末端；質粒是順時針轉錄，使用BamHI切割會導致目的基因無法轉錄，需選擇一種粘性未端相同的限制性內切酶，另一種選擇平末端限制酶，故步驟④中選用的限制酶是BglⅡ或SmaI，C錯誤；

D；NPTⅡ基因可能是用于篩選的標記基因；D正確。

故選C。4、C【分析】【分析】

植物組織培養條件：

（1）在無菌條件下進行人工操作。

（2）保證水；無機鹽、碳源（常用蔗糖）、氮源（含氮有機物）、生長因子（維生素）等營養物質的供應。

（3）需要添加一些植物生長調節物質；主要是生長素和細胞分裂素。

（4）愈傷組織再分化到一定階段；形成葉綠體，能進行光合作用，故需光照。

【詳解】

A；通常選取紅豆植株的莖尖或根尖作為外植體；外植體需要消毒，A正確；

B；外植體脫分化成愈傷組織需要在一定的營養和激素等條件下進行；B正確；

C；外植體脫分化成愈傷組織過程中發生了細胞分裂；沒有發生細胞分化，C錯誤；

D；高度液泡化、不定形態的愈傷組織細胞經培養能合成大量的紫杉醇等細胞代謝產物；D正確。

故選C。5、C【分析】【分析】

題圖分析：①→④表示植物組織培養。外植體需要通過脫分化和再分化才能形成植物體。

【詳解】

A；形成層細胞分裂旺盛；容易誘導脫分化，A正確；

B；步驟②需要對胡蘿卜的組織塊進行消毒；防止培養過程中微生物感染，B正確；

C；步驟③通過脫分化形成愈傷組織；C錯誤；

D；步驟③為脫分化形成愈傷組織；步驟④為再分化形成外植體，脫分化和再分化培養基中細胞分裂素和生長素的含量、比例不同，因此步驟③和步驟④所用的培養基有差異，D正確。

故選C。6、D【分析】1；對精子進行獲能處理：包括培養法和化學誘導法．對于嚙齒動物、家兔和豬等動物的精子；一般采用培養法，即將取自附睪的精子，放入人工配置的獲能液中，培養一段時間后，精子就可獲能；對于牛、羊等家畜的精子常采用化學法，即將精子放在一定濃度的肝素或鈣離子載體A23187溶液。

2；受精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

A；將收集到的精子放在一定濃度的肝素溶液中培養是為了誘導精子獲能；精子獲能后才能完成受精作用，A正確；

B；受精過程中；防止多精入卵受精的兩道屏障是透明帶反應和卵細胞膜反應，B正確；

C；由于人們對動物細胞所需要的營養物質還沒有完全弄清楚；所以進行早期胚胎培養時，培養液中除加入一些必要的營養成分外，還應添加血清等天然成分，C正確；

D；囊胚期細胞開始分化；其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤，D錯誤。

故選D。7、B【分析】1；酵母菌是兼性厭氧微生物；

在有氧條件下進行有氧呼吸，反應式是：

無氧條件下進行無氧呼吸，無氧呼吸的產物是酒精和二氧化碳，反應式是：

2；分析圖解：圖中排料口的作用是出料、檢測；充氣口的作用是在果酒制作前期通入氧氣的；以便于酵母菌有氧呼吸大量繁殖；排氣孔是排氣，其彎彎曲曲的好處是防止雜菌和浮塵的污染。

【詳解】

A；果酒制作是利用酵母菌的無氧呼吸；而酵母菌適宜生存的溫度為18～25℃，而夏天溫度較高，因此夏季生產果酒時，常需對罐體進行降溫處理，A正確；

B；產生酒精表明此時已經進行無氧呼吸；無氧呼吸過程中不能充氣，否則會抑制酵母菌的無氧呼吸，B錯誤；

C；正常發酵過程中；酵母菌無氧呼吸不消耗氣體，但是不斷產生二氧化碳，因此罐內的壓力高于大氣壓，C正確；

D；可以通過監測發酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發酵；D正確。

故選B。

【點睛】8、D【分析】【分析】

基因工程是指按照人們的意愿；進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，從而創造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。

【詳解】

①基因工程技術能按照人們的意愿進行；所以變異是定向的，①正確；

②DNA連接酶把目的基因與運載體粘性末端的磷酸與脫氧核糖連接成磷酸二酯鍵；而不是將堿基對連接起來，②錯誤；

③蛋白質中的氨基酸序列可為合成目的基因提供資料；先推知mRNA中的密碼子序列，再推知目的基因中的脫氧核苷酸序列，③正確；

④受精卵能直接發育成新的個體；是理想的受體，④正確；

⑤該羊的產生沒有用到核移植技術；直接由受精卵發育而成，⑤錯誤。

綜上正確的選項有①③④；D正確，ABC錯誤。

故選D。

【點睛】二、多選題(共8題，共16分)9、C:D【分析】【分析】

1；作為運載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選；③能在宿主細胞中穩定存在并復制；④是安全的，對受體細胞無害，而且要易從供體細胞分離出來；

2；大腸桿菌的質粒是一種裸露的、結構簡單、獨立于細菌擬核DNA之外并具有自我復制能力的雙鏈環狀DNA分子。

【詳解】

A；質粒是一種獨立于細菌擬核外的環狀DNA分子；沒有切割時不含具有黏性末端，A錯誤；

B；基因工程的運載體必須要有一個或多個限制酶切點；便于與目的基因連接形成重組DNA分子，B錯誤；

C；質粒對宿主細胞的生存沒有決定性作用；C正確；

D；作為載體的質粒分子小；能自主復制，且常含有抗生素抗性基因，可以作為標記基因，對重組后重組子進行篩選，D正確。

故選CD。

【點睛】10、B:C【分析】【分析】

人們現在的倫理道德觀念還不能接受克隆人﹔設計試管嬰兒是為了治療疾病；但有可能被濫用，如用于設計嬰兒性別等，可能會出現負面影響﹔進行基因檢測時，可通過基因進行檢測，也可通過測定基因的表達產物蛋白質來進行;對于基因歧視現象，可通過正確的科學知識傳播；倫理道德教育和立法得以解決。

【詳解】

A；基因編輯制造嬰兒的行為不符合倫理道德；A正確；

B；設計試管嬰兒如專門用來設計嬰兒性別是不符合倫理道德的；可能會存在負面影響，B錯誤；

C；我國禁止生殖性克隆人；但允許人胚胎干細胞的研究在有關規定下進行，C錯誤；

D；生物武器危害巨大；世界各國都應禁止生物武器，D正確。

故選BC。11、A:B【分析】【分析】

動物細胞培養時；取幼齡動物的組織，剪碎后，用胰蛋白酶處理分散成單個細胞，制成細胞懸浮液，轉入細胞培養液中進行的培養是原代培養；當細胞貼滿瓶壁，在用胰蛋白酶處理分散成單個細胞，制成細胞懸浮液，轉入培養液中進行的是傳代培養。

【詳解】

A；通常將動物組織經處理后的初次培養稱為原代培養；A正確；

B；從機體取得細胞后立即進行培養過程是原代培養；B正確；

C；出現接觸抑制現象后；接去下的細胞的培養過程是傳代培養，C錯誤；

D；無論原代培養和傳代培養細胞過程；細胞都有在培養基中的懸浮生長過程，D錯誤。

故選AB。12、A:B【分析】【分析】

PCR擴增運用DNA分子復制的原理；經過變性；復性、延伸，最終獲得大量DNA的過程。

【詳解】

A；引物中G＋C的含量越高；C和G之間是三個氫鍵連接，因此引物與模板DNA結合的穩定性越高，A正確；

B；圖中可知；引物2和引物3分別作用同一段DNA的兩條鏈，會發生堿基互補配對，因此兩者置于不同反應系統中，B正確；

C；引物1、2組成的反應系統和引物3、4組成的反應系統中均進行一次復制；共產生2種雙鏈DNA分子，C錯誤；

D；在引物1、2組成的反應系統中；經第一階段要形成圖示雙鏈DNA，至少要經過2次復制，D錯誤。

故選AB。13、C:D【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成；

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法；

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；檢測到細菌B合成人的生長激素才能說明獲得成功；A錯誤；

B；根據題意；細菌B不含有質粒A及其上的基因，即沒有抗氨芐青霉素基因；質粒含抗四環素基因和抗氨芐青霉素基因，基因發生重組時抗四環素基因被破壞，抗氨芐青霉素基因被保留，故在含氨芐青霉素的培養基上能生長的是導入了普通質粒或者重組質粒的細菌，B錯誤；

C；將人的生長激素基因與質粒A結合的過程連接兩個切口；該過程共形成4個磷酸二酯鍵，C正確；

D、將目的基因導入細菌時，需要用Ca2+處理細菌；使其處于易于吸收周圍環境中DNA分子的生理狀態，D正確。

故選CD。

【點睛】14、A:C:D【分析】【分析】

分析題圖：①表示反轉錄法獲取目的基因的過程；②表示基因表達載體的構建過程；之后采用農桿菌轉化法；將目的基因導入番茄組織塊；最后采用植物組織培養技術，將導入目的基因的番茄組織細胞培養成抗凍番茄植株。基因表達載體通常由啟動子；目的基因、終止子和標記基因構成，其中標記基因的作用是篩選重組質粒，利用農桿菌轉化法能將質粒導入受體細胞。

【詳解】

A；過程①是通過人工合成法獲取的目的基因；由于真核生物體內的基因含有不能編碼蛋白質的序列（內含子），導致逆轉錄合成的目的基因與原基因有較大的差異，因此人工合成的目的基因不能用于比目魚基因組測序，A錯誤；

B；抗凍蛋白的11個氨基酸的重復序列重復次數越多；抗凍能力越強，并不是抗凍基因的編碼區重復次數越多抗凍能力越強，抗凍基因編碼區依次相連形成的新基因已不是原來的抗凍基因，因此不能得到抗凍性增強的抗凍蛋白，B正確；

C；②是基因表達載體的構建過程；基因表達載體通常由啟動子、目的基因、終止子和標記基因構成，其中標記基因的作用是篩選重組質粒，過程②構成的重組質粒缺乏標記基因，可以通過DNA分子雜交或PCR技術檢測受體細胞是否含有目的基因，C錯誤；

D；利用DNA探針技術檢測目的基因是否導入到受體細胞；但表達的產物通常是蛋白質，可利用抗原-抗體雜交技術檢測目的基因是否表達出來，D錯誤。

故選ACD。

【點睛】15、A:C【分析】【分析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；根據題意；熔噴布是口罩生產的重要原料，主要成分是聚丙烯，本實驗目的是篩選出可以高效降解一次性口罩的細菌，②中的選擇培養基要以聚丙烯為唯一碳源，A正確；

B；步驟③接種方法為稀釋涂布平板法；接種工具為涂布器，B錯誤；

C；在配制步驟②、③的培養基時；為避免雜菌污染，應先調pH值后再進行高壓蒸汽滅菌，C正確；

D；對③中平板上的菌落進行計數；可以計算出土壤浸出液中細高效降解聚丙烯的細菌的濃度，D錯誤。

故選AC。16、A:D【分析】【分析】

1；培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質；根據物理性質分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養物質，在培養液中加入瓊脂可以使液體培養基成為瓊脂固體培養基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯誤；

C、隨培養基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結合增強；抑菌圈的紅色加深，C錯誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復合物，但隨培養基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。三、填空題(共5題，共10分)17、略

【分析】1；試管嬰兒技術是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養發育為早期胚胎后，再經移植后產生后代的技術。

2；設計試管嬰兒技術是通過體外受精獲得許多胚胎；然后從中選擇符合要求的胚胎，再經移植后產生后代的技術。

3；轉基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應、過敏源、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響）；生物安全主要是指轉基因生物釋放到環境中，可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅。

【詳解】

（1）一些持支持態度的科學家認為；由于不同物種間存在生殖隔離，同時花粉的傳播距離和存活時間有限，不會造成轉基因農作物與其它植物的雜交，因而也不太可能對生物多樣性造成威脅。

（2）在轉基因生物或產品研究過程中；為保證轉基因生物的安全，要把重組DNA的轉移限制在遺傳上具有特定缺陷的生物上；對外源DNA進行認真選擇，避免能夠表達出對人體有毒性或過敏的蛋白質等等。

（3）堅持克隆人的科學家則認為；一些技術問題可以通過胚胎分級；基因診斷和染色體檢查等方法得到解決。

（4）中國政府對于克隆技術的態度是禁止生殖性克隆；但不反對治療性克隆。

【點睛】

本題難度一般，屬于考綱中識記、理解層次的要求，結合基因工程的應用，綜合考查了基因工程、試管嬰兒和轉基因生物的安全性問題，并且深入考查了相關基礎知識，要求考生能夠構建一定的知識網絡．面對轉基因技術的利弊，正確的做法應該是趨利避害，不能因噎廢食。【解析】①.生殖隔離②.存活時間③.特定缺陷④.蛋白質⑤.基因診斷⑥.染色體檢查⑦.禁止生殖性克隆人⑧.治療性克隆18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】兼性厭氧C6H12O6+6H2O+6O2→6CO2+12H2OC6H12O6→2C2H5OH+2CO219、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】噬菌體、動植物病毒20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽21、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系作為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，其結果是生產自然界沒有的蛋白質。【解析】蛋白質工程的結果是生產自然界沒有的蛋白質四、判斷題(共4題，共36分)22、A【分析】【詳解】

制備單克隆抗體時，第一次篩選的目的是獲得雜交瘤細胞，第二次篩選目的是獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，故正確。23、A【分析】【詳解】

目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作法。也有人采用梯度離心、紫外線短時間照射和化學物質處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細胞透明帶的情況下去核或使其中的DNA變性，故正確。24、A【分析】【分析】

早期胚胎發育從受精卵開始；當卵裂分裂到16-32個細胞時，卵裂產生的子細胞逐漸形成致密的細胞團，形似桑葚時，這時的胚胎稱為桑葚胚，這一階段及之前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，屬于全能細胞。胚胎進一步發育，細胞開始出現分化，形成內細胞團；滋養層；隨著胚胎進一步發育，胚胎內部出現了含有液體的囊腔—囊胚腔，這個時期的胚胎叫做囊胚。胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化。

【詳解】

囊胚時期聚集在胚胎一端的細胞形成內細胞團，將來發育成胚胎的各種組織，即發育成完整的胚胎，而沿透明帶內壁拓展和排列的細胞，稱為滋養層細胞，它們將來發育成胎膜和胎盤，為胚胎的發育提供營養，故“胚胎發育至囊胚期時，細胞逐漸分化表述”正確。25、B【分析】【詳解】

胚胎發育早期；細胞數量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯誤。五、實驗題(共2題，共16分)26、略

【分析】【分析】

培養基的制作流程一般為：計算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調節pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環或接種針等專用工具，從一個培養皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉接到另一個培養基中進行培養的方法。【小問1】

培養基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機鹽、生長因子等。倒平板時；應待培養基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應在酒精燈火焰附近進行，以防止雜菌污染。【小問2】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養基滅菌合格，影響因素應為除培養基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實驗中能觀察到出現野生型菌株菌落，說明環境中存在化學致癌劑導致突變型菌株突變成野生型菌株。【小問3】

使用過的培養基應滅菌后再丟棄；以防止培養基中的有害物質污染環境或感染實驗操作者。

【點睛】

本題考查培養基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關知識，意在考查考生對所學知識的識記和理解能力。【解析】【小題1】①.碳源；氮源、水和無機鹽②.待培養基冷卻至50℃左右時；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養基上突變為his+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學誘變劑，這些化學物質具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環境造成污染27、略

【分析】【分析】

接種最常用的方法是平板劃線法和稀擇涂布平板法；接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養甚表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體菌落。

【詳解】

（1）為了觀察菌落；需用固體培養基，接種方法為平板劃線法或稀釋涂布平板均可，培養皿中均未出現菌落，說明未發生可遺傳變異。

（2）混合接種能形成菌落的原因是相互產生或創造了各自所需的物質或條件；所以推測兩種菌最可能是：抗性菌增殖，降解了四環素，為營養菌存活提供保障；營養菌增殖，分解了乳糖，代謝產物為抗性菌生長提供營養所需。

（3）①由題意可知；營養菌只能利用乳糖，但不能降解四環素，抗性菌不能利用乳糖，但能降解四環素，故在接種了營養菌和抗性菌混合菌液的培養板，左側加入以乳糖為唯一碳源的培養基，右側應加入四環素但不含乳糖的培養基，培養基可從與兩側逐漸擴散到混合菌液培養板上。

②根據兩種菌能實現了“互利共生”，左側添加以乳糖為唯一碳源的培養基后營養菌和抗性菌都能生長。右側加入含四環素的培養基，因沒有碳源則兩種菌都不能生長。【解析】(1)（稀釋）涂布平板或平板劃線固體未發生。

(2)降解了四環素分解了乳糖。

(3)四環素但不含乳糖營養菌和抗性菌都能生長兩種菌都不能生長六、綜合題(共3題，共21分)28、略

【分析】【分析】

在微生物學中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。雖然各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水；碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。

【詳解】

（1）應該在適合微生物生長的環境中尋找菌種；所以應該在被草銨膦污染的土壤中取樣，草銨膦含有氮元素，所以可以以草銨膦作為唯一氮源配制培養基進行篩選。

（2）由圖甲可知；純化培養目的菌時利用了平板劃線法，此方法用到的培養基是固體培養基，使用的接種工具是接種環。若要確定培養基是否滅菌合格，對照組的設置是將未接種的（或接種等量無菌水的）培養基在相同條件下進行培養。

（3）由于該實驗室只做了一個實驗組，沒有對照組，不能證明目的菌株能分泌出降解草銨膦的物