…………○…………內…………○…………裝…………○…………內…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年陜教新版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、在基因工程操作中，科研人員利用識別兩種不同序列的限制酶（R1和R2）處理基因載體，進行聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，結果如圖所示。以下相關敘述中，不正確的是（）

A.該載體最可能為環形DNA分子B.兩種限制酶在載體上各有一個酶切位點C.限制酶R1與R2的切點最短相距約200bpD.限制酶作用位點會導致氫鍵和肽鍵斷裂2、科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備單克隆抗體，下列步驟中敘述不正確的是（）A.用適宜濃度相同抗原多次免疫小鼠，以獲得更多的漿細胞B.用培養液培養禽流感病毒，通過離心獲得抗原蛋白C.可以用電融合法或PEG融合法誘導漿細胞與骨髓瘤細胞融合得到雜交瘤細胞D.單克隆抗體相比血清抗體特異性更強，并且可以大量制備3、我國科學家運用基因工程技術，將蘇云金芽孢桿菌的抗蟲基因導入棉花細胞并成功表達，培育出了抗蟲棉。下列敘述不正確的是（）A.基因表達載體的構建都需要專用的工具酶和運載體B.重組DNA分子中增加一個堿基對，不一定導致毒蛋白的毒性喪失C.抗蟲棉的抗蟲基因可通過花粉傳遞到近緣作物，從而造成基因污染D.轉基因棉花是否具有抗蟲特性是通過檢測棉花對抗生素抗性來確定的4、玉米是一種重要的農作物；為了提高玉米的產量，科學家在玉米育種中和栽培中作了大量的研究。如下圖是關于玉米培養的過程，據圖判斷下列說法中錯誤的是（）

A.從繁殖原理上分析，A→D屬于無性生殖B.植株D和G中的染色體組數不同C.E→G不能體現細胞的全能性D.E→F過程中獲得的植株一般沒有直接的使用價值5、硝化細菌廣泛存在于通氣性較好的土壤中，其部分代謝反應如圖所示，下列關于硝化細菌的培養條件的描述不正確的是（）

A.碳源為葡萄糖B.培養時需要通入空氣C.氮源是氨氣D.培養時需要適宜的溫度6、為了加快良種牛的繁殖速度；科學家采用了以下兩種方法。下列說法正確的是（）

A.方法Ⅰ獲得公牛的新鮮精液，可直接用于受精作用B.胚胎體外培養過程中不需要利用相關技術去除透明帶C.E和F的培育過程中均用到了胚胎移植技術，均屬于有性生殖D.如圖方法Ⅱ，產生的F牛的性別與C牛相同，性狀也與C牛完全一致7、下圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶（HGPRT-），在HAT篩選培養液中不能正常合成DNA，無法生長。免疫B細胞（HGPRT+）能在HAT篩選培養液中正常生長。下列敘述正確的是（）

A.從HAT培養液中獲得的抗體即為單克隆抗體B.仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷，進而促進細胞融合C.在HAT培養液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點D.多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養液中死亡的原因是不能合成DNA8、某實驗小組利用菜花進行DNA的提取及電泳鑒定，并對菜花非常保守的葉綠體基因trn-L進行PCR擴增。下列相關敘述錯誤的是（）A.將預冷的酒精溶液加入菜花研磨濾液離心獲得的上清液中，靜置可見絲狀物B.用二苯胺鑒定DNA時，試管中溶液無藍色出現可能是DNA提取量過少或無C.PCR反應體系中必須含有trn-L基因的引物、Ca2+、4種脫氧核糖核苷酸等成分D.將混合液注入凝膠的加樣孔時，需留一個加樣孔加入指示分子大小的標準參照物9、下列有關現代生物技術敘述，正確的是（）A.外源DNA需位于重組質粒的啟動子和終止子之間才能表達B.進行動物細胞培養時定期更換培養液的目的是防止雜菌污染C.卵裂期是胚胎發育最關鍵的時期，每個細胞的DNA含量不斷增加D.改變脫氧核苷酸的序列就可以合成自然界中不存在的蛋白質評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)10、農桿菌Ti質粒上的T-DNA可以轉移并隨機插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環；并以此環為模板，利用PCR技術擴增出T-DNA插入位置兩側的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進行PCR擴增的依據是DNA分子雙鏈復制的原理B.進行PCR擴增需要的酶有解旋酶和熱穩定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴增出兩側的未知序列D.通過與受體細胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置11、下列關于轉基因生物安全性的敘述，正確的是（）A.重組的微生物在降解污染物的過程中可能產生二次污染B.種植抗蟲棉可以減少農藥的使用量，對環境沒有任何負面影響C.如果轉基因花粉中有毒蛋白或過敏蛋白，可能會通過食物鏈傳遞到人體內D.轉基因生物所帶來的安全性問題是可以解決的12、白地霉侵染是導致柑橘酸腐病的主要原因，實驗證明桔梅奇酵母通過分泌普切明酸對白地霉具有生物防治能力。已知鐵是真菌生長的必需元素，是胞內重要酶活性中心的組成部分。普切明酸是桔梅奇酵母產生的一種水溶性鐵螯合劑，能快速在培養基中擴散并與其中的Fe3+形成穩定紅色復合物。研究配制的含有不同濃度FeCl3的培養基如下表所示。實驗結果為隨FeCl3濃度增大，抑菌圈紅色加深但變窄，如下圖所示。相關敘述正確的是（）。成分MgSO4NaH2PO4蛋白胨FeCl3溶液水瓊脂用量5g7g15g500mL7g20g

A.蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素，瓊脂不是營養物質B.白地霉采用了平板劃線法，桔梅奇酵母采用了涂布平板法C.結果表明，FeCl3濃度增大，普切明酸與Fe3+結合的數量減少D.結果表明，FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果13、下列有關微生物的分離與培養實驗的敘述，正確的是（）A.倒平板前，為了防止雜菌污染，需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰B.倒平板時，應將培養皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免培養基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環經灼燒滅菌后應立即挑取菌落D.用移液器吸取相應的菌液前，需要將樣液充分搖勻14、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設計品種乙組織培養實驗時，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進行預實驗。為確定品種乙的II階段的最適細胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設計5個濃度水平的實驗，其中細胞分裂素最高濃度設為M。下列有關敘述正確的是（）。品種甲組織培養階段細胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導形成愈傷組織α1b1II誘導形成幼芽α2b2Ⅲ誘導生根α3b3

A.表中發生基因選擇性表達的是II和Ⅲ階段B.實驗中共配制了2種不同的培養基，即生根培養基和生芽培養基C.確定品種乙II階段最適細胞分裂素濃度的實驗中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素15、全球首個鼻噴新冠肺炎疫苗已獲準臨床試驗，該疫苗是在流感病毒載體上，插入新冠病毒基因片段，制成活病毒載體疫苗，模擬呼吸道病毒天然感染途徑，激活局部免疫應答和全身性免疫應答，從而發揮保護作用。下列相關敘述正確的是（）A.疫苗制備過程中，對流感病毒進行改造利用的原理是基因突變B.從接種方式來看，該疫苗的優點是通過鼻噴接種，無針、無痛C.該疫苗需侵入人體細胞中經基因表達后才能發揮作用D.該疫苗可通過激活淋巴細胞，產生細胞免疫和體液免疫評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)16、微生物________________的方法很多，最常用的是_____________和__________________。17、假設PCR反應中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環后，反應物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。18、去除DNA中的雜質，可以在濾液中加入2mol/L濃度的NaCL溶液，目的是____去除__________________；再調節NaCL溶液濃度為0．14mol/L，目的是_______________，_______________去除_______________；最后用濃度為2mol/L的NaCL溶液重新溶解________________19、科學家采用定點誘變的方法構建T4溶菌酶的新蛋白質，發現其中一種新蛋白質的第9和第164位氨基酸殘基被轉換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質的熱穩定性會有什么變化？這項技術的要點是什么？_________20、在日常生活中，我們還遇到哪些有關生物技術安全與倫理問題？我們能基于所學生物學知識參與這些問題的討論嗎？嘗試舉一個實例加以說明______。21、動物細胞培養的條件：_____、_____、_____、_____等。22、蛋白質工程在生物制藥上有廣泛的應用。如果已經確認某種新蛋白質可能具有特殊的抗癌功能，其氨基酸序列也已經確認，如何通過蛋白質工程生產這種新藥？如果回答有困難，可以向老師請教或通過互聯網查找答案。_____23、應用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共1題，共6分)24、要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造氨基酸序列來完成。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共12分)25、如圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗過程中的一些重要操作示意圖；請分析回答有關問題：

（1）正確的操作順序是_______________________（用字母和箭頭表示）。

（2）圖中C、E步驟都加入了蒸餾水，但其目的不同，分別是_______________________和_______________________。

（3）為鑒定圖中A步驟中所得到的絲狀物的主要成分為DNA，可將其溶解后，滴加________________試劑后沸水浴加熱，如果出現___________________；則證明該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是_________________________________________。26、研究發現柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白質）均有抑菌作用；兩者的提取及應用如圖所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，該過程得到的糊狀液體可通過___________除去其中的固體雜質。

（2）篩選乳酸菌A時可選用平板劃線法或____________接種。對新配制的培養基滅菌時所用的設備是_______________。實驗前需對超凈工作臺進行____________處理。

（3）培養基中的尿素可為乳酸菌A生長提供______________。電泳法純化乳酸菌素時，若分離帶電荷相同的蛋白質，則其分子量越大，電泳速度___________。

（4）抑菌實驗時，在長滿致病菌的平板上，會出現以抑菌物質為中心的透明圈。可通過測定透明圈的______________來比較柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果27、已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性；二室(M)對多室(m)為顯性，控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。育種工作者利用紅果多室(Yymm)番茄植株，采用不同的方法進行了四組實驗。請據圖回答問題：

(1)以上四種育種實驗都主要應用了________的原理，培育中發生了脫分化的過程有________。

(2)用番茄植株的花粉隨機進行有關實驗，得到幼苗B直接移栽，發育成的番茄植株的基因型和表型分別是________、________，如果植物體C僅是花粉兩兩隨機融合得到的，則植物體C的基因型及其比例是____________。

(3)圖中________大部分細胞中染色體數量最少，要保證植物體B可以用于生產，培育中④過程可使用__________________處理幼苗。

(4)圖中植物體________少數細胞中染色體數量最多，培育該植物體的過程稱為________育種法，植物體D能表現出兩個親本的一些性狀，根本原因是___________________________________________。

(5)植物體A只表現紅果多室，原因是_______________________________。評卷人得分六、綜合題(共2題，共20分)28、新型冠狀病毒是一種RNA病毒；其表面的刺突蛋白（簡稱S蛋白）是主要的病毒抗原。制備抗S蛋白單克隆抗體的流程如下圖。

回答下列問題：

(1)步驟①前需給小鼠注射_____，目的是_____。

(2)步驟②中常用的誘導方法有：_____（答出兩點即可）。

(3)步驟③是使用具有篩選作用的培養基進行細胞培養，培養的結果是只有_____能夠生存。

(4)步驟④需進行_____；并經多次篩選，就可獲得細胞B。

(5)細胞B可在體外條件下進行大規模培養，或注射到_____內增殖，這樣就可獲得大量的單克隆抗體。抗S蛋白的單克隆抗體有什么用途？_____（寫出一點即可）。29、SD藻是一種可以生產生物柴油的海洋單細胞生物。SD藻可利用光能合成糖類進行生長；在SD藻的脂肪酸合成過程（如圖，示意圖）中，乙酰輔酶A羧化酶（ACCase）是脂肪酸合成關鍵酶。研究者通過技術手段改變編碼SD藻ACCase基因的第1999位堿基可以提高油脂合成量。在大規模生產中，研究者會挑選顏色較綠且繁殖更快的SD藻，這種SD藻可以生成更多油脂，以獲得更多生物柴油。

(1)SD藻葉綠體具有的功能有：_________，SD的內質網具有的功能有_________。（編號選填）

①暫時儲存有機物的場所②能量轉化的場所③清除衰老細胞結構的場所④發生蛋白質加工的場所⑤物質轉化的場所。

(2)根據題中信息，能合成脂肪酸的SD藻屬于____。A．RNA病毒B．原核生物C．DNA病毒D．真核生物(3)改變編碼SD藻乙酰輔酶A化基因的第1999位堿基，對該酶產生了什么影響?列舉其中3個：__________________________________。

(4)若須在實驗室中培養SD藻并大量合成脂肪酸，從下列①-⑥中，選擇并組合形成合理的原料配置方案:__________。（編號選填）

①大量有機碳源②氮源③少量無機碳源④Mg2+等金屬離子⑤血漿生長因子⑥大量無機碳源。

(5)顏色較綠且繁殖更快的SD藻細胞，為什么可以生成更多生物柴油?闡述分析過程__________。

表列出了在連續的時期I～V中，SD藻細胞內發生的事件。時期細胞內事件I①細胞核位于細胞中央；②遺傳物質復制II③染色質凝集成團塊狀；④核膜消失Ⅲ⑤染色質團排在細胞中央；⑥形成桶狀紡錘體IV⑦染色質團平均厚度是0.5-0.6m；⑧染色質團分成均等的兩團V⑨核膜重新出現；⑩染色質團隨胞質分而分至兩個子細胞

(6)根據題意推測，表1中描述的是SD藻的哪個過程:__________。（編號選填）

①有絲分裂②細胞分化③細胞凋亡④細胞衰老⑤減數分裂。

(7)表1①-⑩中，支持你做出第6中判斷的遺傳物質方面的證據是:_______；支持你做出第6題中判斷的其他細胞結構方面的證據是:________（編號選填）參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

基因工程又稱基因拼接技術或DNA重組技術；是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現代方法為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建雜種DNA分子，然后導入活細胞，以改變生物原有的遺傳特性；獲得新品種、生產新產品。

基因工程的操作步驟：1.提取目的基因；2.目的基因與運載體結合；3.將目的基因導入受體細胞；4.目的基因的檢測和表達。

【詳解】

A；由題可知；當僅用一種限制酶切割載體時，僅產生一種長度的DNA片段，因此該載體最有可能為環狀DNA分子，A正確；

B；由題可知；當僅用一種限制酶切割載體時，兩種限制酶切割產生的DNA片段等長，而兩種限制酶同時切割時則產生兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶在載體上各有一個酶切位點，B正確；

C、由題知，兩種限制酶同時切割時則產生600bp和200bp兩種長度的DNA片段，所以兩種限制酶的酶切位點至少相距200bp；C正確；

D；限制酶切割DNA分子；破壞的是作用位點上兩脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。

故選D。

【點睛】

本題考查限制酶作用機理及作用結果，需明確聚丙烯酰胺凝膠電泳結果及限制酶作用機理。2、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，可用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養，最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；多次給小鼠注射適宜濃度的抗原；引起小鼠發生體液免疫，可以獲得更多的漿細胞，A正確；

B；禽流感病毒沒有細胞結構；不能在培養液中獨立生存，B錯誤；

C；用滅活的病毒可誘導漿細胞與骨髓瘤細胞發生融合形成雜交瘤細胞；除外還可以用聚乙二醇誘導融合，C正確；

D；雜交瘤細胞既具有漿細胞能合成抗體的特點；也具有骨髓瘤細胞無限繁殖的特點，骨髓瘤細胞既能無限增殖，又能產生特異性抗體，因此單克隆抗體相比血清抗體特異性更強，并且可以大量制備，D正確。

故選B。3、D【分析】【分析】

1.基因工程的操作工具：限制酶；DNA連接酶、運載體。

2.基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；基因表達載體的構建都需要專用的工具酶；如限制酶和DNA連接酶，還有運載體，A正確；

B；重組DNA分子中增加一個堿基對屬于基因突變；而基因突變不一定會導致生物性狀發生改變，因此該變異不一定導致毒蛋白的毒性喪失，B正確；

C；抗蟲棉的抗蟲基因可通過花粉傳遞到近緣作物；從而可能使近源物種有了抗藥性，因而造成基因污染，C正確；

D；轉基因棉花是否具有抗蟲特性是通過檢測棉花細胞中是否產生毒蛋白或從個體水平上檢測轉基因棉花是否能抗蟲來確定的；D錯誤。

故選D。

【點睛】4、C【分析】【分析】

分析題圖：圖示表示玉米培養過程；其中A→D表示玉米莖尖組織培養過程，E→F表示玉米花藥離體培養形成單倍體幼苗的過程。A→B表示脫分化；B→C表示再分化、E→F也經歷了脫分化和再分化過程。D是正常的二倍體植株，而G是單倍體幼苗。

【詳解】

A；A→D是植物組織培養過程；從繁殖原理上分析，屬于無性生殖，A正確；

B；D是正常的二倍體植株；而G是單倍體幼苗，兩者的染色體數目不同，B正確；

C；E→G表示花藥離體培養形成單倍體幼苗的過程；該過程體現了植物生殖細胞的全能性，C錯誤；

D；E→F過程中獲得的植株是單倍體植株；高度不育，一般沒有直接的使用價值，D正確。

故選C。

【點睛】5、A【分析】【分析】

分析題圖：生活在土壤中的硝化細菌，能將土壤中的氨（NH3)氧化成亞硝酸(HNO2)，進而將亞硝酸氧化成硝酸（HNO3)。這兩個化學反應中釋放出的化學能，就被硝化細菌用來將CO2和H2O合成糖類。這些糖類就可以供硝化細菌維持自身的生命活動。

【詳解】

A、土壤中的硝化細菌能將CO2和H2O合成糖類；為自養生物，培養基中的碳源為二氧化碳，A錯誤；

BC、硝化細菌能利用將NH3氧化釋放的能量把CO2和H2O合成糖類；所以培養時需要通入空氣，氮源是氨氣，BC正確；

D、硝化細菌在將NH3氧化并把CO2和H2O合成糖類的過程中；離不開酶的催化作用，而酶的活性受溫度影響，因此培養時需要適宜的溫度，D正確。

故選A。6、B【分析】【分析】

試管動物屬于有性生殖；克隆動物屬于無性生殖。

【詳解】

A；在體外受精前；要對精子進行獲能處理，通常采用的體外獲能方法有培養法和化學誘導法兩種，A錯誤；

B；動物胚胎發育的早期有一段時間是在透明帶中完成的；胚胎體外培養過程中不需要利用相關技術去除透明帶，B正確；

C；E和F的培育過程中均用到了胚胎移植技術；但是E是通過體外受精得到的，屬于有性生殖，F是通過核移植得到的，屬于無性生殖，C錯誤；

D；如圖方法Ⅱ；產生的F牛的性別與C牛相同，但是性狀不與C牛完全一致，一方面是因為性狀還與所處環境有關，另外一方面是卵細胞中的質基因也會對牛的性狀有所影響，D錯誤。

故選B。7、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發生免疫反應；之后從小鼠脾臟中獲取已經免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養，即用培養基培養和注入小鼠腹腔中培養；最后從培養液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；在HAT培養液中篩選出來的是雜交瘤細胞；可能有多種類型，因此后續還需要對這些雜交瘤細胞進行單一抗體檢測，進而篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，可見從HAT培養液中獲得的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；

B；仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷；進而促進細胞融合，據此可用滅活的仙臺病毒作為促融劑，B正確；

C；在HAT培養液中能長期存活的細胞為雜交瘤細胞；這些細胞可能產生多種類型的抗體，因而不具有特異性強、靈敏度高的特點，C錯誤；

D；多個B細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養液中死亡的原因是不能無限增殖；D錯誤。

故選B。8、C【分析】【分析】

PCR技術：①概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應，是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，所利用的原理為DNA分子的復制，因此PCR技術一般用于基因擴增；②原理：DNA復制；③條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶(Taq酶)；④方式：以指數的方式擴增，即約2n；⑤過程：變性；復性、延伸。

2；影響DNA在瓊脂糖凝膠中遷移速率的因素很多；包括DNA分子大小和構象、瓊脂糖濃度、電泳緩沖液的離子強度等。

【詳解】

A；DNA不溶于冷卻的酒精溶液；所以將預冷的酒精溶液加入菜花研磨濾液離心獲得的上清液中，靜置可見絲狀物，A正確；

B；正常情況下二苯胺與DNA在沸水浴條件下反應呈藍色；試管中溶液無藍色出現，可能是DNA的提取量過少或未提取出DNA,B正確；

C、PCR反應體系中含有trn-L上基因的物，DNA聚合酶、模板、Mg2+、4種脫氧核糖核苷酸等成分，DNA聚合酶一般需要Mg2+激活；C錯誤；

D；將混合液注入凝膠的加樣孔時；需留一個加樣孔加入指示分子大小的標準參照物，D正確。

故選C。9、A【分析】【分析】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別；結合和開始轉錄的一段DNA序列；終止子是給予RNA聚合酶轉錄終止信號的DNA序列；（2）動物細胞培養中保證無菌、無毒的環境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養液，以清除代謝廢物；（3）蛋白質工程應先根據蛋白質功能，從設計蛋白質結構入手，然后通過基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造出一種新的蛋白質。

【詳解】

A；啟動子和終止子分別是轉錄開始和結束的DNA序列；外源DNA需位于重組質粒的啟動子和終止子之間才能表達，A正確；

B；進行動物細胞培養時定期更換培養液的目的是清除代謝廢物；B錯誤；

C；卵裂期每個細胞的DNA含量先加倍后減半；最后保持與親代一樣，C錯誤；

D；由于密碼子的簡并性等原因；改變改變脫氧核苷酸的序列，其合成的蛋白質可能不變，不一定能合成自然界中不存在的蛋白質，D錯誤；

故選A。二、多選題(共6題，共12分)10、A:D【分析】【分析】

PCR技術：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。

2；原理：DNA復制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復性：引物結合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴增依據的是DNA分子雙鏈復制的原理；A正確；

B；進行PCR擴增需要熱穩定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴增出兩側的未知序列，C錯誤；

D；通過與受體細胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點睛】11、A:C:D【分析】【分析】

轉基因植物可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅理由：①轉基因植物擴散到種植區外變成野生種或雜草；②轉基因植物競爭能力強，可能成為“入侵的外來物種”，③轉基因植物的外源基因與細菌或病毒雜交，重組出有害的病原體，④可能使雜草成為有抗除草劑基因的“超級雜草”。

【詳解】

A；重組的微生物在降解污染物的過程中可能產生二次污染；造成環境安全問題，A正確；

B；種植抗蟲棉可以減少農藥的使用量；保護環境，但轉基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，可能會對生物多樣性構成潛在的風險和威脅，B錯誤；

C；轉基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白；可能會通過食物鏈傳遞到人體內，轉基因作物可通過花粉散落到它的近親作物上，從而污染生物基因庫，C正確；

D；對待轉基因技術；應趨利避害，可以避免轉基因生物引發的安全性問題，轉基因生物所帶來的環境安全問題在今后有可能得到解決，D正確。

故選ACD。12、A:D【分析】【分析】

1；培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求；配制出供其生長繁殖的營養基質；根據物理性質分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質和氧氣的要求。

2；微生物常見的接種的方法：

（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后；均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。

【詳解】

A；蛋白胨可以提供碳源、氮源、維生素；瓊脂是凝固劑的一種，并不是營養物質，在培養液中加入瓊脂可以使液體培養基成為瓊脂固體培養基，A正確；

B；白地霉、桔梅奇酵母的接種都采用了涂布平板法；B錯誤；

C、隨培養基中FeCl3濃度的增加，普切明酸與Fe3+的結合增強；抑菌圈的紅色加深，C錯誤；

D、普切明酸與Fe3+形成紅色復合物，但隨培養基中FeCl3濃度的增加，抑菌圈變窄，說明FeCl3能降低桔梅奇酵母對白地霉的防治效果；D正確。

故選AD。13、A:D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：(1)右手持接種環；經火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將已冷卻的接種環伸入菌液，沾取一環菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環迅速伸入平板內，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環不應劃破培養基表面。(3)燒灼接種環，殺滅環上殘留菌液，待冷卻，從第一區域劃線的末端開始往第二區內劃線，重復以上操作，在第三四五區內劃線，注意不要將最后一區的劃線與第一區相連。(4)將平板倒置，放入培養箱中培養。

【詳解】

A；倒平板前；需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰，通過灼燒滅菌防止雜菌污染，A正確；

B；倒平板時；應將培養皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免雜菌進入，而不是為了防濺，B錯誤；

C；接種環經灼燒滅菌后應等到冷卻后再挑取菌落；否則高溫會使菌落死亡，C錯誤；

D；用移液器吸取相應的菌液前；需要將樣液充分搖勻，保證菌液中微生物均勻分布，提高實驗的準確性，D正確。

故選AD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養中植物激素使用：物組織培養中關鍵性激素是生長素和細胞分裂素；同時使用生長素和細胞分裂素時；兩者用量的比例影響植物細胞的發育方向；先使用細胞分裂素，后使用生長素，細胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會發生基因的選擇性表達，A錯誤；

B；實驗至少配制了3種不同的培養基；即形成愈傷組織的培養基、生根培養基和生芽培養基，B錯誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設計5個濃度水平的實驗，則細胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細胞分裂素的最高濃度M應設為a2+1.0μmol/L；C錯誤；

D；生長素和細胞分裂素的配比是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵因素；D正確。

故選ABD。15、B:C:D【分析】【分析】

分析題文描述：題述的疫苗是借助基因工程研制而成的；改造利用的原理是基因重組。疫苗屬于抗原，在抗原的刺激下，機體可以產生特異性免疫反應。特異性免疫包括體液免疫與細胞免疫。

【詳解】

A；該疫苗是在流感病毒載體上；插入新冠病毒基因片段制成的，改造利用的原理是屬于基因重組，A錯誤；

B；鼻噴疫苗都配有鼻噴裝置；以鼻噴接種方式外用，是一種無針、無痛的接種方式，B正確；

C；該疫苗插入的新冠病毒基因片段；需要在細胞內經表達產生蛋白質后，才能發揮作用，C正確；

D；該疫苗可以侵入到人體細胞中；使機體既能產生細胞免疫，又能產生體液免疫，D正確。

故選BCD。三、填空題(共8題，共16分)16、略

【解析】①.接種②.平板劃線法③.稀釋涂布平板法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－218、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】不容的雜質析出DNA過濾溶液中的雜質DNA19、略

【分析】【詳解】

蛋白質形成二硫鍵，使蛋白質的結構更加穩定，因此T4溶菌酶的熱穩定性會提高。這項技術屬于蛋白質工程技術，其步驟為從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。【解析】會提高T4溶菌酶的耐熱性。這項技術屬于蛋白質工程技術，該技術的要點是從預期的蛋白質功能出發→設計預期的蛋白質結構→推測應有的氨基酸序列→找到并改變相對應的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質。20、略

【分析】【詳解】

在日常生活中；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗病；抗災害能力，并且在北美地區轉基因食品已經使用的很多年，可以說現在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養的小白鼠癌癥發病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現這個實驗結果。

在環境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據，反對人持有的觀點是，通過改良基因創造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優勢地位，但轉基因技術產生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創新呈現前所未有的復雜性,并不可避免地會引發很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創新沿著科學的軌道健康發展。【解析】在日常生活中；我們遇到的有關生物技術安全與倫理問題有：生殖性克隆人倫理問題；試管嬰兒與設計試管嬰兒倫理問題、轉基因產品的安全性與倫理問題和生物武器的安全性等。

例如轉基因產品的安全性：轉基因技術的安全性的爭議；主要集中在兩個方面，一是對人是否安全，二是對環境的影響。

對人的安全方面；支持轉基因技術的人認為投放市場的轉基因作物都是經過充分實驗的，被改變的基因僅限于增加作物的抗病；抗災害能力，并且在北美地區轉基因食品已經使用的很多年，可以說現在美國加拿大20歲左右的年輕人從小就是吃轉基因食品長大的；反對轉基因技術的人認為轉基因食品有害，他們的證據主要是一位科學家的實驗證明，用轉基因食品喂養的小白鼠癌癥發病率明顯升高，但問題是這個實驗只成功過一次，后來別的科學家在相同的條件下都沒能再現這個實驗結果。

在環境方面對轉基因技術的爭議是最大的；也是歐洲人反對轉基因技術的重要依據，反對人持有的觀點是，通過改良基因創造出抵抗病蟲害和其他災害的植物，這種技術如果失去控制可能會把農作物改造成適應性極強的超級植物，自然平衡使任何生物都不可能占絕對優勢地位，但轉基因技術產生的超級植物可能會打破自然平衡而泛濫成災。

倫理問題：由于轉基因技術創新打破了物種界限,使不同物種間的基因可以進行前所未有的新組合,其可能造成的危害難以預見,這就使轉基因技術創新呈現前所未有的復雜性,并不可避免地會引發很多全新的社會倫理問題,引出種種有關生物科學家的道德責任和學術自由的哲學爭論。在轉基因植物技術創新中,功利主義的預設和學術自由的主張必須以人類的價值、尊嚴和社會公正為前提條件。相關領域的科學家必須擔當起必要的道德責任,把握好倫理橫桿,以促使轉基因植物技術創新沿著科學的軌道健康發展。21、略

【分析】略【解析】營養無菌、無毒的環境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環境22、略

【分析】【詳解】

蛋白質工程的基本途徑：從預期的蛋白質功能出發，設計預期的蛋白質結構，推測應有的氨基酸序列，找到相對應的脫氧核苷酸序列，以下按照基因工程的一般步驟進行。該蛋白質的氨基酸序列已知，因此通過蛋白質工程，生產該蛋白質新藥的基本過程為：根據已知的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥。【解析】根據已知的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列→合成該蛋白質新藥基因→將獲得的目的基因與質粒構建形成基因表達載體→將重組質粒導入受體菌→獲得工程菌→生產該蛋白質新藥23、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術，其目的是用于生育，獲得人的復制品；治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術，其目的是用于醫學研究和疾病的治療。

據概念可知，實現生殖性克隆和治療性克隆都會用到的技術有體細胞核移植技術、動物細胞培養技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等；治療性克隆在獲取胚胎干細胞后，根據治療目的誘導干細胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會應用到的技術為干細胞培養技術。【解析】生殖性克隆指利用克隆技術獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個體的克隆性技術治療性克隆是指利用克隆技術產生特定細胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術體細胞核移植技術、動物細胞培養技術、早期胚胎培養技術、胚胎移植技術等體細胞核移植技術，早期胚胎培養技術、動物細胞培養技術、胚胎移植技術、干細胞培養技術等用于生育，獲得人的復制品用于醫學研究和疾病的治療四、判斷題(共1題，共6分)24、B【分析】【詳解】

要對蛋白質的結構進行設計改造，最終必須通過改造基因中的堿基序列來完成，因為基因能指導蛋白質的生物合成，故說法錯誤。五、實驗題(共3題，共12分)25、略

【分析】【分析】

1；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗原理：①DNA在氯化鈉溶液中的溶解度；是隨著氯化鈉的濃度變化而改變的．當氯化鈉的物質的量濃度為0.14mol/L時，DNA的溶解度最低．利用這一原理，可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些物質則可以溶于酒精溶液．利用這一原理，可以進一步提取出含雜質較少的DNA；②DNA遇二苯胺（沸水浴）會染成藍色，因此，二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

2；利用動物細胞進行DNA的粗提取與鑒定的實驗步驟是：①制備雞血細胞液；②提取雞血細胞和物質，③細胞核物質中DNA的溶解，④析出含有DNA的粘稠物，⑤過濾獲取紗布上的粘稠物，⑥DNA的再溶解，⑦加冷卻酒精使DNA析出，⑧二苯胺鑒定DNA分子。

【詳解】

（1）DNA的粗提取和鑒定步驟是：加入蒸餾水；破碎細胞→過濾，獲取含DNA的濾液→去除濾液中雜質→DNA的析出→鑒定．所以正確的操作順序是C→B→E→D→A。

（2）C加入蒸餾水的目的是使雞血細胞吸水漲破；釋放細胞核物質；E步驟甲蒸餾水是降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出。

（3）鑒定A中所得到的絲狀物的主要成分為DNA；可滴加二苯胺試劑，在沸水浴加熱的條件下如果出現藍色則該絲狀物的主要成分為DNA。

（4）圖中A步驟的目的是獲取含雜質較少（或較純凈）的DNA。

【點睛】

本題結合圖解，考查DNA的粗提取和鑒定，要求考生識記DNA粗提取和鑒定的原理、操作步驟、實驗中采用的試劑及試劑的作用等，再結合所學的知識準確答題，難度適中。【解析】C→B→E→D→A使雞血細胞吸水漲破，釋放出細胞核物質降低NaCl溶液的濃度，使DNA析出二苯胺藍色提取含雜質較少（或較純凈）的DNA26、略

【分析】【詳解】

(1)植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等。具體采用哪種方法要根據植物原料的特點來決定。柚皮易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油。壓榨過程中得到的糊狀液體需用過濾法除去其中固定雜質。

(2)篩選、純化培養某一特定微生物時，常用平板劃線法或稀釋涂布平板法。為防止雜菌的污染，需對器具培養基等進行消毒滅菌處理，培養基宜采用高壓蒸汽滅菌鍋進行高溫滅菌處理，而超凈工作臺常使用紫外線或化學藥物進行消毒處理。

(3)微生物培養過程中為微生物的生長提供氮源的有尿素、蛋白胨等含氮豐富的物質。電泳法純化特定生物成分，是利用了待分離樣品中各種分子帶電性質的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，這些不同使帶電分子產生不同的遷移速度，從而實現樣品中不同分子的分離。當待分離分子所帶電荷相同時，分子量越大，電泳速度越慢。

(4)抑菌實驗時；在長滿致病菌的平板上，會出現以抑菌物質為中心的透明圈，透明圈越大，抑菌效果越好。

【點睛】【解析】①.壓榨②.過濾③.稀釋涂布平板法(或：稀釋混合平板法)④.高壓蒸汽滅菌鍋⑤.消毒⑥.氮源⑦.越慢⑧.直徑(或：大小)27、略

【分析】【分析】

分析題圖：①⑤⑥為植物組織培養；③為花粉離體培養；幼苗B為單倍體，若過程④使用秋水仙素處理幼苗B，則植物體B為可育的純合植株。

【詳解】

（1）由圖可知；圖中的四種育種方法都利用了離體的植物細胞進行育種，運用了植物細胞具有全能性的原理，離體植物細胞的培育都必須運用植物組織培養技術，該過程中會發生脫分化，即①③⑤⑥。

（2）紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉基因型及比例是Ym：ym＝1：1；故花粉苗直接發育成的番茄幼苗B的基因型是Ym或ym，但其為單倍體，高度不育，故表型為無果實；而植物體C僅是花粉兩兩隨機融合得到的，基因型及其比例是YYmm：Yymm：yymm＝1：2：1。

（3）育種過程中染色體數量最少的是由減數分裂產生的花粉及幼苗B；植物體B中只有一個染色體組；高度不育，可以使用一定濃度的秋水仙素或適當低溫處理使之成為二倍體，以用于生產。

（4）植物體D是由番茄體細胞和馬鈴薯體細胞融合培育而來的；其染色體數量是兩個物種親本的染色體數量之和，有絲分裂中少數細胞中的染色體數量暫時加倍，染色體數量最多；植物體D具有兩個親本的遺傳物質，故能表現出兩個親本的一些性狀。

（5）植物體A的形成過程中沒發生減數分裂，只進行了有絲分裂，沒有基因重組，沒發生基因突變，故完全表現親本紅果多室的性狀。【解析】(1)植物細胞全能性①③⑤⑥

(2)Ym或ym無果YYmm∶Yymm∶yymm＝1∶2∶1

(3)花粉和幼苗B一定濃度的秋水仙素或適當低溫。

(4)D植物體細胞雜交具有兩個親本的遺傳物質。

(5)該培育過程中只進行了有絲分裂，且沒發生基因突變，完全保持了親本的遺傳性狀六、綜合題(共2題，共20分)28、略

【分析】【分析】

單克隆抗體的制備：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原；然后從小鼠體內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。

(1)

該操作目的是制備抗S蛋白單克隆抗體；故步驟①前需給小鼠注射新型冠狀病毒的S蛋白，目的是獲取已經免疫的B淋巴細胞。

(2)

步驟②為誘導細胞融合；常用方法為聚乙二醇(PEG)；滅活病毒、電激等。

(3)

由圖可知；步驟③是使用具有篩選作用的培養基進行細胞培養，在該培養基上未融合的細胞核同種融合的細胞都死亡，只有雜交瘤細胞能夠存活。

(4)

由于小鼠生活中還會受到其他抗原的刺激；提取的B淋巴細胞有很多種，故需進行步驟④專一抗體檢驗陽性，其原理是抗原與抗體的結合具有特異性，經多次篩選，就可獲