臨床輸血檢驗技術ABO血型系統基礎理論學習目標掌握ABO血型系統的基因及遺傳、ABO血型系統抗體的特點及臨床應用、臨床常見的ABO亞型。導入：血型是什么？廣義的血型：泛指高等動物和人類血液中的紅細胞、白細胞、血小板以及各種血漿蛋白質的抗原型別。狹義的血型：僅指紅細胞抗原的型別。目前為止，已檢出30多個紅細胞血型系統，抗原近300個。其中，ABO血型系統是最常用也是最重要的血型系統。ABO血型基因ABO血型基因位于人類9號染色體的長臂3區4帶，由A、B、O三個等位基因控制，其中A和B為顯性基因，O為隱性基因。A、B基因不直接編碼抗原，而是編碼連接糖所需的特異性轉移酶，這些酶能使糖分子與A、B抗原前體物質（H抗原或H物質）相連接，進而合成AB抗原。A基因編碼產生N-乙酰基半乳糖胺基轉移酶1該酶將N-乙酰半乳糖胺（A抗原表位或抗原決定簇）連接到H抗原末端的半乳糖上，使之成為A抗原B基因編碼產生D-半乳糖糖基轉移酶2該酶將D-半乳糖（B抗原表位）連接到H抗原末端的半乳糖上，使之成為B抗原O基因產生的糖基轉移酶無活性，不能修飾H物質，因此不產生A、B抗原但表面有大量H物質。ABO血型基因ABH抗原主要存在于紅細胞上，但也可出現在除腦脊液外的分泌液中，唾液中最豐富，稱為血型物質。意義在于：1.在紅細胞抗原弱表達個體中確定ABO血型；2.檢測唾液、羊水中的血型物質，輔助鑒定血型和預測胎兒血型；3.能中和天然抗體（IgM），有助于鑒別抗體性質。血型物質ABO血型遺傳是常染色體顯性遺傳。每個子代均可從親代各得到一個單倍體，組合后共有6種基因型，4種表型。ABO血型遺傳（一）天然抗體

ABO抗體多為天然抗體，出生后開始產生，3-6個月時可能被檢出，5-10歲達到高峰，80歲降至6個月水平。天然抗體由環境中的與A、B抗原類似的物質在無覺察的免疫刺激下產生，多為IgM，分子量大，不能通過胎盤，一般不會引起新生兒溶血病。ABO血型抗體（二）免疫抗體

免疫抗體不是天然存在血漿中，而是由于輸血或妊娠分娩時進入受血者或母體的紅細胞抗原（母體缺乏的），使淋巴細胞致敏后免疫產生的抗體，免疫抗體多為IgG，IgG的分子量小，能透過胎盤，因此能引起新生兒溶血病。ABO血型抗體O型人血液中含抗A、抗B和（或）抗AB抗體，其中抗AB不是抗A和抗B的混合物，它識別的是A和B抗原上共同的結構部位。抗AB以IgG為主，效價較高，可以通過胎盤，因此，O型母親親子血型不合，易發生新生兒溶血病。ABO血型抗體ABO血型抗體的臨床意義：1.ABO不相容的輸血可以引起嚴重的溶血性輸血反應，一般為急性血管內溶血反應，嚴重時可導致DIC、急性腎功能衰竭甚至死亡。2.ABO抗體可引起新生兒溶血病，在器官移植、造血干細胞移植等方面都有重要意義。ABO血型抗體亞型是指雖屬同一血型抗原，但抗原結構、性能或抗原表位數有一定差異的血型。1.A亞型常見的A亞型有A1與A2、A3、Ax、Am、Ay等，其中A1、A2亞型占全部A型血的99.9%。ABO血型亞型A1亞型A抗原A1抗原A2亞型A抗原tips1：由于A2型和A2B型血漿中含有抗A1，它們可能在輸血時去凝集A1型紅細胞，因此A2型的人接受A1型人的血，也可發生輸血反應。tips2：A2型和A2B型紅細胞膜上的A抗原抗原性較弱，在血型鑒定時，不易與抗A反應，容易將A2型和A2B型誤定為O型和B型，因此應特別注意A亞型的存在。ABO血型亞型A1亞型A抗原A1抗原抗A1抗體2.B亞型B亞型要少于A亞型，包括B3、Bx、Bm和Bel等，鑒定技術與弱A亞型鑒定技術相同。亞型通常是在正反定型不符或凝集較弱時通過進一步試驗發現，不作為常規檢查。ABO血型亞型B細胞上有弱A抗原表達、A細胞上有弱B抗原表達B（A）及A（B）表型A與B基因位于同一條染色體上，兩個基因同時遺傳順式AB腸道細菌進入血液后，其脫乙酰基酶使A抗原的N-乙酰半乳糖胺變成半乳糖胺，與B抗原半乳糖相似獲得性B特殊ABO血型臨床輸血檢驗技術ABO血型鑒定學習目標1、常用紅細胞懸液的制備方法2、血型鑒定卡式法、試管法原理、結果判斷及質量控制。卡式法1現推薦方法，靈敏度高、重復性好、可自動化操作，但成本較高試管法2傳統方法，操作簡便、設備簡單、成本低廉，但影響因素多、靈敏度低ABO血型鑒定試管法包括鹽水凝集試驗、低離子強度鹽水試驗、酶試驗、凝聚胺試驗、抗人球蛋白試驗等，本課以鹽水凝集試驗為例。現目前兩種方法均在臨床使用中，故均需掌握。一、紅細胞懸液制備常用濃度：1%、2%、5%、10%。方法：①抗凝血移去上層血漿待測

②洗滌：剩余的紅細胞中加5MLNS，混勻，洗滌，棄上清，此步驟重復3次，最后一次上清應清亮并全部棄去。

③配制懸液。（根據要求濃度）如5%：洗滌后壓積紅細胞1滴+19滴NS，混勻3000r/min5min3000r/min5min二、試管法血型鑒定正定型原理：

用特異性血型抗體檢測被檢RBC,在鹽水介質中發生肉眼可見的凝集，從而測定被檢RBC膜上有無與特異性血型抗體相對應的抗原，進一步判定血型。正定型方法：加標準血清1滴（-A-B

）加紅細胞懸液1滴（5%）混勻，離心觀察結果-A-B1000r/min1min二、試管法血型鑒定正定型結果判定：試管法：輕輕搖動（或捻動）試管，使沉于管底的RBC浮起，觀察有無凝集或溶血，如上層清亮，管底有RBC凝塊，輕彈管底，凝塊無散開，為凝集（＋）；如上層清亮，管底有RBC沉積，邊緣整齊，輕彈管底，RBC浮起或成為均勻的RBC懸液，則為不凝集（一）；若不確定，可將反應物倒在載玻片上，顯微鏡下觀察。注意：若上層為清亮的櫻紅色，考慮是否溶血二、試管法血型鑒定抗A抗B結果＋—A—＋B＋＋AB——O正定型結果判定：二、試管法血型鑒定二、試管法血型鑒定反定型原理：

原理：用標準紅細胞檢測被檢血清（血漿）,在鹽水介質中發生肉眼可見的凝集，從而測定被檢血清（血漿）中有無與標準紅細胞相對應的抗體，進一步判定血型。二、試管法血型鑒定反定型方法：加待測血清2滴（-A-B

）加標準紅細胞懸液2滴（5%）混勻，離心觀察結果-A-B1000r/min1min（方法同正定型）二、試管法血型鑒定抗A抗B結果＋—A—＋B＋＋AB——O正定型結果判定：結果判定：A(RBC)B(RBC)結果＋—B—＋A＋＋O——AB反定型結果判定：二、試管法血型鑒定注意：1、正反定型一致才能確定結果；

2、所用器材必須清潔干凈，避免溶血，專型專用；

3、控制離心速度和時間，防止假陽性和假陰性；

4、抗原抗體比例要適當；

5、溶血時，注意結果的判定；

6、正反定型結果不一致時，不可輕易判定，需查明原因，可能有技術問題也可能有標本問題。二、試管法血型鑒定檢測原理：

正定型原理：在事先包被好抗A與抗B的凝膠介質中，加入待測的紅細胞懸液，抗原與抗體結合，經低速離心，未與抗體結合的紅細胞沉于凝膠底部，而已經結合的凝集的紅細胞，位于凝膠上部或懸浮與凝膠中。反定型原理：采用中性微柱凝膠，加入待測的血清與標準紅細胞懸液，其余同正定型。三、卡式法血型鑒定卡的結構：凝膠微柱：試管上端（反應池）、柱體（分離池）過濾介質：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）三、卡式法血型鑒定卡式法方法：正定：將待測紅細胞懸液加在凝膠上部反應，離心后觀察反定：將待測血清和標準紅細胞加在凝膠上部反應，離心后觀察陽性：凝集的紅細胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央陰性：游離的紅細胞，被擠過裝有過濾介質的小柱，而到達小柱的底部

三、卡式法血型鑒定結果判讀模式：三、卡式法血型鑒定結果判讀模式：三、卡式法血型鑒定卡式微柱凝膠試驗就是利用實驗中紅細胞在凝膠微柱中的移動，來指示肉眼所不能見的紅細胞與相應抗體發生的血清學反應，因此只需要更換不同的試劑卡，就能廣泛地應用在：紅細胞血型鑒定、交叉配血、抗體篩查、新生兒溶血病的檢測等。三、卡式法血型鑒定臨床輸血檢驗技術HLA分子生物學分型方法學習目標掌握PCR-SSP檢測方法的基本原理、特點及其適應范圍。原理PCR—序列特異引物法編碼HLA的基因具有高度的多態性，每一個基因座位上有眾多的復等位基因，而每一個等位基因都有其各自的DNA序列，因此可用相應的序列特異性引物（sequencespecificprimers，SSP）進行擴增。通過控制PCR反應條件，特異性引物僅擴增與其相應的等位基因，而不擴增其他的等位基因。檢測材料PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例

1、血樣：0.2mlEDTA抗凝血

2、紅細胞裂解液

3、白細胞裂解液

4、PCR混合液PCRbufferHLA-B27SSPTaqdNTPinternalpositivereferenceprimersetc操作流程一、DNA的提取1、取1ml紅細胞裂解液入血樣管中混勻，裂解紅細胞;2、離心4000rpm2min;3、重復步驟1-2兩次，最后用棉簽吸干管壁液體；4、取50ul白細胞裂解液入上述白細胞管中混勻；5、將白細胞管于60℃水浴消化20min；6、取出白細胞管再于100℃，3-5min，滅活蛋白酶K；7、離心10000rpm2min。上清即為富含DNA的PCR模板。PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例操作流程PCR擴增1、吸2ul模板DNA入裝有PCR混合液的小管中；2、將小管置于PCR儀內進行擴增。（需80min）

×12×2394oC2min

94oC12sec

65oC1min94oC12sec61oC50sec72oC30sec

37oC10sec

HLA-B27擴增程序PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例擴增產物電泳PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例擴增產物電泳制膠使用電泳緩沖液在制膠器上配制1.0%的瓊脂糖凝膠。混樣2μL載樣緩沖液、2μL核酸熒光染料，10μLPCR產物混勻。點樣將上步混好的樣10μL加到凝膠孔中。電泳90V電壓下電泳10~20min。PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例結果觀察HLA-B27(+)標本電泳結果觀察

PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例試劑操作：提取DNA最后一步，乙醇要揮發干凈防止PCR污染質量控制PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例方法學評價方法評價PCR-SSP該方法操作簡單、快速，耗時較短，結果判斷簡便，但可能出現漏孔或假性條帶現象，為實驗室最常用方法之一。PCR-SSOP操作較復雜，耗時較長，結果較準確，部分探針易出現干擾。目前被Luminex檢測技術所替代。Luminex檢測技術靈敏度高，操作簡便，快速，結果較準確，是目前實驗室中最常用的方法之一。PCR-SBT能夠直接檢測基因的核苷酸序列，屬于高分辨方法，結果準確性最高，但需要特殊的儀器設備，耗時較長，成本較高。基因芯片技術具有超高速、高通量、低成本和高效益等優點，但分型可能存在一定的偏差。PCR—序列特異引物法——以B27檢測為例臨床輸血檢驗技術HLA抗體檢測技術學習目標熟悉淋細胞毒交叉配合試驗的原理、方法及質量控制。HLA血清學分型試驗的原理及質量控制。淋巴細胞毒交叉配合試驗+補體臺盼藍染液抗原與抗體結合當特異性抗體與待檢淋巴細胞表面HLA分子結合后，激活補體，使細胞膜通透性增加或細胞死亡，加入染料后在顯微鏡下可見結合補體的細胞被活性染料著色。分離淋巴細胞淋巴細胞毒交叉配合試驗供者淋巴細胞+受者血清37℃孵育30分鐘兔補體2%臺盼藍死細胞體積大，著黑色，無折光性；活細胞大小正常，未著色，折光性強，較透亮；抗體測定-試管法37℃孵育60分鐘淋巴細胞毒交叉配合試驗質量控制HLA抗原抗體最好選用單克隆抗血清抗體效價適宜存在劑量效應淋巴細胞要求活性和純度高濃度為2～4×106/mL病理狀態下HLA可能會表達異常孵育溫度和時間嚴格掌握孵育時間最適溫度為20-25℃其他補體染液應進行預試驗；用甲醛固定設置陽性和陰性對照淋巴細胞毒交叉配合試驗淋巴細胞毒交叉配合試驗<10%或為陰性才能施行腎移植。如果受體以前曾經接受過輸血、有過妊娠或接受過同種異體移植，很可能在其血清內已產生抗淋巴細胞抗體，對人類白細胞抗原（HLA）敏感。此時，淋巴細胞毒交叉配合試驗可為陽性，器官移植術后將可能發生超急性排斥反應。臨床應用臨床輸血檢驗技術HLA抗原檢測技術學習目標1.熟悉HLA血清學分型試驗的原理及質量控制。2.淋巴細胞毒交叉配合試驗的原理及質量控制。3.HLA分子生物學分型方法HLA血清學分型試驗+補體臺盼藍染液抗原與抗體結合當特異性抗體與待檢淋巴細胞表面HLA分子結合后，激活補體，使細胞膜通透性增加或細胞死亡，加入染料后在顯微鏡下可見結合補體的細胞被活性染料著色。分離淋巴細胞HLA血清學分型試驗待檢淋巴細胞懸液靜置30-40分鐘兔補體靜置60-70分鐘5%伊紅死細胞體積大，著黑色，無折光性；活細胞大小正常，未著色，折光性強，較透亮；微量淋巴細胞毒試驗HLA血清學分型試驗質量控制HLA抗原抗體最好選用單克隆抗血清抗體效價適宜存在劑量效應淋巴細胞要求活性和純度高濃度為2～4×106/mL病理狀態下HLA可能會表達異常孵育溫度和時間嚴格掌握孵育時間最適溫度為20-25℃其他補體染液應進行預試驗；用甲醛固定設置陽性和陰性對照HLA血清學分型試驗

臨床輸血檢驗技術

Rh血型鑒定

Rh（D）血型鑒定原理：IgM型抗D標準血清與被檢者RBC表面D抗原在室溫條件下鹽水介質中產生特異性反應，根據是否出現凝集判斷是否有D抗原的存在。加抗D血清1滴加紅細胞懸液1滴（5%）輕輕搖動玻片混勻，2min內判斷結果，有凝集（＋），無凝集需進一步實驗確認是否為陰性

Rh（D）血型鑒定臨床輸血檢驗技術Rh血型系統基礎理論學習目標掌握Rh血型系統的命名方法、Rh抗原、抗體的各類。Rh血型系統概述Rh系統的發現：1940LandsteinerWiener

恒河猴。Rh血型的抗原：已發現40多種，D、E、C、c、e等。Rh系統的命名:Fisher-Race；Wiener；Rosenfield。Rh系統的遺傳:遵循常染色體共顯性連鎖遺傳規律。Rh血型連鎖遺傳規律Rh血型系統的抗原及亞型抗原性強度僅次于A及B抗原；已發現的Rh血型抗原達48個；D抗原抗原性最強,以下依次E、C、c、e；臨床將D抗原陽性的個體稱為Rh陽性，反之為Rh陰性。Rh血型系統的抗體主要為IgG，應答早期可有部分IgM。抗D與D紅細胞產生嚴重的溶血反應。不同個體對Rh＋抗原刺激存在差異。RBC刺激或輸血、妊娠后產生，偶見天然抗E、抗CW。臨床輸血檢驗技術白細胞抗原系統基礎理論學習目標1.什么是HLA？HLA等位基因的命名應遵循哪些原則？2.HLA-Ⅰ類、Ⅱ類及Ⅲ類基因的結構怎樣？HLA復合體的遺傳特點有哪些？3.HLA分子的結構怎樣？如何命名？HLA復合體HLA復合體的遺傳特點單體型遺傳

多態性遺傳共顯性遺傳復等位基因連鎖不平衡（linkagedisequilibrium）基因頻率連鎖不平衡現象的可能原因HLA復合體HLA-I類基因位于6號染色頂端經典HLA-I類基因：包括A、B、C三個基因座位，編碼三組高免疫性、高度多態性的HLA-A、HLA-B、HLA-C糖蛋白分子。非經典HLA-I類基因：免疫功能關基因，包括E、F、G、H、J基因座位，編碼免疫性和多態性均較低的分子HLA復合體HLA-II類基因位于6號染色著絲點經典HLA-II類基因（DP、DQ、DR）編碼HLA-II類分子；非經典的HLA-II類基因（LMP、TAP、DM）為與抗原加工和遞呈有關的基因。HLA復合體HLA-III類基因位于II類和I類基因中段經典HLA-III類基因編碼產生C4、C2、B因子等HLA復合體HLA等位基因命名HLA-A*02：101：01：02N連字符基因座位分隔符基因組字段分隔符特異性HLA蛋白編碼區DNA同義突變非編碼區DNA差異指示表達發生變化HLA復合體按基因位點的產物分別命名抗原特異性用基因位點后的數字表示由細胞學技術及淋巴細胞試驗確定的特異性的表示HLA抗原裂解后寬特異性的表示抗原特異性及基因位點之間的表示HLA分子組織分布HLA分子HLA分子分布HLA-Ⅰ類分子廣泛分布在所有有核細胞表面HLA-Ⅱ類分子主要表達在如樹突狀細胞、巨噬細胞、B淋巴細胞等細胞表面HLA分子也分布在血、尿、唾液及精液中檢出HLA分子臨床輸血檢驗技術白細胞抗原系統檢測的臨床應用學習目標掌握HLA分型在移植醫學、輸血醫這和法醫學中的應用白細胞抗原系統檢測的臨床應用在移植醫學中的應用造血干細胞移植HLA相合同胞（ＭＲＤ）ＨＬＡ相合非血緣（MUD）單倍體臍體器官移植HLA－AHLA-BHLA-DR白細胞抗原系統檢測的臨床應用在輸血醫學中的應用HLA與非溶血性輸血反應(1)臨床輸血中發熱性非溶血性輸血反應多數是由于HLA抗體破壞白細胞后釋放出熱源物質引起；(2)表現為頭暈、面紅、惡心、寒戰，體溫可高達39℃以上，嚴重者可并發肺部綜合征，呼吸困難；(3)采用白細胞濾器過濾后的血液輸注，非溶血性輸血反應明顯減少。

白細胞抗原系統檢測的臨床應用在輸血醫學中的應用HLA與血小板輸注

(1)30％的HLA抗體陽性者對隨機獻血者的血小板輸注無效；(2)在血小板輸注中HLA抗體的產生很少由血小板引起，多數由血小板血液中的白細胞引起；(3)輸血小板進行治療時，最好測定HLA-A、B抗原，防止由于患者產生針對血小板膜HLA抗原的抗體。白細胞抗原系統檢測的臨床應用在法醫學中的應用HLA與親子鑒定(1)由于HLA復合體的高度多態性，在無關個體間HLA表型全相同的機率極低，故HLA復合體被看作是伴隨個體終生的特異性遺傳標記；(2)借助HLA基因型和（或）表型檢測，可用于法醫上的個體識別，使HLA分型成為鑒定親子關系的重要手段。白細胞抗原系統檢測的臨床應用臨床輸血檢驗技術血小板血型檢測的臨床應用學習目標掌握血小板血型系統檢測的臨床應用。血小板血型與臨床血小板抗原同種異體抗原

HLA-I,HPA,ABH同種抗原

GPⅡb/Ⅲa,CD36自身抗原

GPⅡb/Ⅲa,GPⅠb/Ⅸ藥物依賴性抗原肝素、奎寧等非特異性抗原血小板免疫性疾病血小板輸注無效癥新生兒血小板減少癥輸血后紫癜自身免疫性血小板減少癥藥物引起的血小板減少癥移植相關的血小板減少癥臨床病癥淤點淤斑流產（顱內）出血死亡血小板血型與臨床輸血妊娠骨髓移植致敏血小板并引起破壞抗供者血小板抗體抗父親血小板抗體抗供者血小板抗體出血/紫癜流產/死胎移植排斥血小板血小板血型與臨床采取預防和治療措施避免流產、出血等減少血小板輸注無效避免紫癜、出血和死亡血小板相容性檢測抗原定型抗體檢測交叉配型建立血小板供者庫篩選基因型相容的供者避免血小板抗體的產生診斷血小板免疫性疾病篩查血小板相容性供者臨床輸血檢驗技術血小板血型檢測技術學習要求掌握簡易致敏紅細胞小板血清學試驗的原理、方法及質量控制。簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn患者血小板反應板（固相化血小板）血小板單層陽性反應陰性反應患者血清/血漿PBS指示紅細胞（IgG抗RealhD致敏紅細胞）甲醛固定20分鐘洗滌5次50μl/孔陽性陰性25μl/孔各25μl/孔原理簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn患者血小板反應板（固相化血小板）甲醛固定20分鐘洗滌5次50μl/孔制備固相化血小板血液7mlACD-A液1ml100g*10min富血小板血漿ACD-A液101g*15min生理鹽水洗滌5次調整血小板濃度簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn血小板單層陽性反應陰性反應PBS指示紅細胞（IgG抗D抗體致敏紅細胞）患者血清25μl/孔洗滌2次室溫濕盒靜置1小時陽性陰性各25μl/孔靜置4小時靜置4小進間接試驗（檢查患者血清中的抗血小板抗體）PBS25ul簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn陽性反應陰性反應PBS指示紅細胞（IgG抗D抗體致敏紅細胞）各25μl/孔靜置4小時靜置4小進直接試驗（檢查血小板表面結合的抗血小板抗體）簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn質量控制1．待檢的血清或血漿標本檢測前應充分離心以去除顆粒及聚焦物，否則會出現假陽性結果；標本脂類含量高或微生物污染也會導致假陽性結果。纖維蛋白原未充分析出的血清標本也會導致錯誤結果。2．血小板懸液的濃度要符合要求，血小板數量太少、濃度過低將會影響試驗結果；特別注意不能將血小板置于4℃冰箱儲存。3．待檢測的標本只能用血清或血小板，檢查前需2800×g離心10分鐘以上以去除沉淀，以免顆粒及微聚物造成假陽性；高脂血或微生物污染也會造成假陽性結果。4．指示紅細胞使用前未充分混勻或試驗中微孔板離心不充分，可導致假陽性結果；過度離心會導致假陰性結果。5．為防止靜電干擾，操作過程需在室溫濕盒中水濕潤狀態下進行。簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗.cn方法學評價方法評價簡易致敏紅細胞血小板血清學試驗簡便快速，可用于血小板抗體（HLA，HPA）檢測和交叉配血試驗，也可用于血小板抗原的鑒定以及血小板自身和藥物依賴性抗體檢測。微柱凝膠血小板相容性試驗操作簡便、快速、敏感性強，結果易于觀察，屬于微柱凝膠間接血凝試驗。可用于血小板交叉配血試驗、血小板抗體篩檢和致敏血小板檢測等。單克隆抗體特異的血小板抗原固定試驗敏感性強，可以檢測出血小板膜上微量表達的HPA-5抗原。可用于鑒定血小板抗原和血小板同種特異性HPA抗體，以及血小板交叉配血試驗。但由于HPA定型血清來源困難，本方法主要用于對部分HPA基因定型結果的驗證。改進的抗原捕獲酶聯免疫吸附試驗特異性較高，血小板無需氯喹或酸預處理就能區分血清中的HLA和HPA抗體。主要用于血小板抗體特異性鑒定試驗，以便血小板抗體陽性患者輸注對應抗原表達陰性的供血者血小板。流式細胞術可用于鑒定血小板抗原，也可用于檢測血小板抗體和交叉配合試驗，雖然敏感性很高，但需要特殊儀器和專業操作人員，成本較高。分子生物學檢測PCR-SSP是最簡單常用的測定血小板HPA基因型的方法。PCR-RELP法比較簡單，DNA純度要求不高，實驗重復性好，適合大批量檢測。PCR-ASO特異性強，但雜交過程費時、繁瑣，雜交背景較強或雜交信號較弱時，結果難以判斷。

血小板血型系統基礎理論學習要求掌握血小板血型系統相關抗原與特異性抗原、血小板抗體的特征。血小板血型系統抗原.cn血小板：D:2~5μm