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文檔簡介

阜新市重點中學2025屆生物高三上期末教學質量檢測模擬試題注意事項1.考生要認真填寫考場號和座位序號。2.試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上,在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答;第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3.考試結束后,考生須將試卷和答題卡放在桌面上,待監考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.如圖曲線沒有標注橫縱坐標具體含義,下列關于此曲線的描述正確的是()A.橫坐標表示時間,縱坐標表示洋蔥細胞在一定濃度蔗糖溶液中的質壁分離和復原過程中失水量B.橫坐標表示溫度,縱坐標表示酶促反應的速率,曲線可表示酶促反應的速率隨著溫度的升高而變化的趨勢C.橫坐標表示生長素濃度,縱坐標表示生長素促進或者抑制,曲線可表示生長素的兩重性D.橫坐標表示pH,縱坐標表示酶的活性,曲線可表示pH由12逐漸降低到2過程中酶的活性變化的趨勢2.TATA框是多數真核生物基因的一段DNA序列,位于基因轉錄起始點上游,其堿基序列為TATAATAAT,RNA聚合酶與TATA框牢固結合之后才能開始轉錄。相關敘述正確的是A.含TATA框的DNA局部片段的穩定性相對較低,容易解旋B.TATA框屬于基因啟動子的一部分,包含DNA復制起點信息C.TATA框經RNA聚合酶催化轉錄形成的片段中含有起始密碼D.某基因的TATA框經誘變缺失后,并不影響轉錄的正常進行3.圖為蛙坐骨神經腓腸肌標本,靈敏電流計的兩個電極均置于坐骨神經的神經纖維外側且距離較近,下列說法正確的是()A.蛙坐骨神經由多個運動神經元被結締組織包圍而成B.電刺激①處,電流計先檢測到電位變化,后腓腸肌收縮C.電刺激①處,電流計兩次偏轉方向不同但幅度肯定相同D.電刺激②處,腓腸肌先發生反射,后電流計檢測到電位變化4.下列對相關實驗的敘述,正確的是()A.向馬鈴薯勻漿中滴加碘液可以檢測淀粉是否轉化成了葡萄糖B.8%的鹽酸可加速染色劑進入細胞,有利于RNA與甲基綠結合C.探究溫度影響酶活性的實驗中,應在改變反應物溫度后再加入酶D.重鉻酸鉀在酸性條件下與酒精反應先變成綠色再變成黃色5.細胞要經歷產生、生長、成熟、增殖、衰老直至死亡的生命歷程。下列相關敘述錯誤的是()A.細胞分化不改變細胞的遺傳物質,能提高生理功能的效率B.衰老細胞中多種酶的活性顯著降低,呼吸速率減慢C.細胞凋亡對于維持人體內環境穩態有重要意義D.大腸桿菌分裂過程沒有出現紡錘絲和染色體,屬于無絲分裂6.在細胞的生命歷程中,會出現增殖、分化、衰老、凋亡等現象。下列敘述正確的是()A.端粒是位于染色體兩端的特殊DNA序列,隨著細胞的衰老端粒逐漸延長B.胰島B細胞中只有與胰島素合成有關的基因處于活動狀態C.細胞的增殖過程既受細胞核的控制,也受溫度等條件的影響D.被病原體感染細胞的清除要依靠細胞免疫,與細胞凋亡無關7.新型冠狀病毒感染的肺炎是一種急性感染性肺炎,其病原體為2019新型冠狀病毒(SARS-CoV-2注:國際病毒分類委員會命名),屬于單股正鏈RNA病毒。下列相關敘述正確的是()A.人體的細胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供模板、原料和能量等B.SARS-CoV-2病毒侵入人體后,在內環境中不會發生增殖C.該病毒在人體細胞的核糖體上合成多肽鏈需要RNA聚合酶的催化D.患者在感染初期須要用抗生素進行治療以阻止SARS-CoV-2病毒的擴散8.(10分)如圖為研究某一種群遷入兩個新環境(理想環境和適宜生存但條件有限環境)后圍繞種群數量變化而建立的相關數學模型,其中對Y的含義表述錯誤的一項是()A.若①為理想條件下種群的某模型,則Y代表種群數量B.若②為有限條件下種群的某模型,則Y代表種群數量C.若③為理想條件下種群的某模型,則Y可代表λ或λ-1D.若④為有限條件下種群的某模型,則Y可代表增長速率二、非選擇題9.(10分)基因打靶技術是建立在基因同源重組技術以及胚胎干細胞技術的基礎上而發展起來的一種分子生物學技術。請結合圖示回答下列有關問題:注:neor是新霉素抗性基因;tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質,導致細胞死亡。(1)將目的基因和與細胞內靶基因同源的DNA片段都重組到__________上,構建打靶載體(基因表達載體)。(2)打靶載體測序驗證正確后,利用__________酶,將之線性化,以提高重組率。通過__________技術將打靶載體導入胚胎干細胞,這樣打靶載體和與細胞內靶基因同源的區段就有機會發生同源重組。(3)為了篩選發生同源重組的細胞,可在培養液中加入__________。最后還需要通過__________技術鑒定同源重組的細胞(去除靶基因),將這樣的細胞通過動物細胞培養后,獲得大量打靶成功的細胞。其中,暫時不用的細胞進行__________保存。(4)將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、__________的母鼠體內,一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查,確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________(填“體細胞”或“生殖細胞”)恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現基因完全被“修飾”過的小鼠。10.(14分)在熒光素酶中加入正確的熒光素底物就可以放出熒光。熒光素酶及其合成基因在生物研究中有著廣泛的應用。請回答下列問題:(1)熒光素酶基因可以從基因文庫中獲取,也可以通過________方法得到,再利用PCR技術擴增即可,擴增熒光素酶基因利用的原理是__________________。(2)在基因工程操作過程中,需要用________酶和________酶構建基因表達載體,基因表達載體要有________,以便篩選出含有目的基因的受體細胞。(3)熒光素酶基因也可以作為目的基因轉入某些動植物細胞中表達產生熒光素酶。將目的基因導入植物細胞,目前常用的目的基因載體是農桿菌的Ti質粒,目的基因需插入到該基因載體的________上,然后再轉移至受體細胞中。將目的基因導入動物細胞的技術中,應用最多的是_______。11.(14分)2019年底爆發的新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)是由SARS-CoV-2病毒引起的,能否快速、準確地檢測出病原體成為疾病防控的關鍵。請回答:(1)下圖表示SARS-CoV-2病毒檢測的部分流程。科學家以病毒的RNA為模板通過①____________過程合成cDNA,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)進行RT-PCR需要加入的酶是____________和___________。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入__________、dNTP及所需的酶一起構成反應體系。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與_____________互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結構完整時,R發射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監測就可實現對產物的檢測。熒光信號達到設定的閾值時,經歷的循環數越少,說明含有病毒的概率越____________。(4)一次核酸檢測歷時需16小時,為快速檢測可采用抗原-抗體雜交技術,這一技術的關鍵是要生產出能與新冠病毒結合的特異性抗體.請寫出生產這種抗體的思路:__________________。12.“渥堆”是普洱茶生產過程中的一道特殊工序,是形成普洱茶品質特征最關鍵的一步。在“渥堆”過程中,曲霉、青霉、酵母菌、細菌等微生物的活動使茶葉所含茶多酚等成分發生了一系列復雜的物理、化學變化,促使了普洱茶甘滑、醇厚和陳香等良好品質特征的形成。請回答下列問題:(1)牛肉膏蛋白胨培養基可用于“渥堆”茶樣中細菌的分離,其中的牛肉膏、蛋白胨可為細菌生長主要提供______________。配好的培養基常用______________法滅菌。接種培養后可根據______________顏色、形態、大小等特征及菌體革蘭染色情況細胞形態特征等進行初步鑒定。(2)下圖為“渥堆”茶樣分離出的某種微生物亞顯微結構意圖,可根據圖中______________(填序號)結構判斷其肯定不是細菌。(3)茶多酚中的兒茶素(C)有一定的抗菌作用,但作用較弱。研究人員用稀土離子Yb3+對兒茶素(C)進行化學修飾,形成配合物Yb3+一C,并探究其抗菌效果。將金黃色葡萄球菌制成菌懸液,分別加入等量的C、Yb3+和一定濃度的Yb3+-C,測定24h內金黃色葡萄球菌存活數量變化(用A600值表示,數值越大,表示細菌數量越多),結果如下圖。由圖可以看出,______________能最有效縮短滅菌時間。研究人員利用透射電鏡觀察了各組金黃色葡萄球菌細胞的超微結構,結果顯示:(a)未加抗菌劑:細菌菌體較小,其細胞質分布均勻;(b)C處理:細胞壁和細胞膜等結構不光滑,略顯粗糙;(c)Yb3+處理:細胞質出現較明顯的固縮及空泡化現象;(d)Yb3+-C處理:細胞壁及細胞膜等結構發生破裂,細胞質出現了嚴重的固縮及空泡化現象。由此可見,兒茶素(C)作用的主要位點是______________,推測Yb3+-C具有更強抗菌作用的機理是______________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、影響酶促反應速率的因素主要有:溫度、pH、底物濃度和酶濃度。(1)溫度(pH)能影響酶促反應速率,在最適溫度(pH)前,隨著溫度(pH)的升高,酶活性增強,酶促反應速率加快;到達最適溫度(pH)時,酶活性最強,酶促反應速率最快;超過最適溫度(pH)后,隨著溫度(pH)的升高,酶活性降低,酶促反應速率減慢。另外低溫酶不會變性失活,但高溫、pH過高或過低都會使酶變性失活。(2)底物濃度能影響酶促反應速率,在一定范圍內,隨著底物濃度的升高,酶促反應速率逐漸加快,但由于酶濃度的限制,酶促反應速率達到最大值后保持相對穩定。(3)酶濃度能影響酶促反應速率,在底物充足時,隨著酶濃度的升高,酶促反應速率逐漸加快。2、生長素的兩重性:生長素既能促進生長也能抑制生長;既能促進發芽也能抑制發芽;百既能防止落花落果也能疏花疏果。【詳解】A、若橫坐標表示時間,則洋蔥細胞在一定濃度蔗糖溶液中不會表現出質壁分離復原現象,A錯誤;B、橫坐標表示溫度,縱坐標表示酶促反應的速率,曲線可表示酶促反應的速率隨著溫度的升高先增加后減少,B正確;C、橫坐標表示生長素濃度,縱坐標只能表示生長素促進的程度先增加后減少,不能表現生長素的抑制作用,C錯誤;D、橫坐標表示pH,縱坐標表示酶的活性,pH12時可能導致酶失活,逐漸降低到2過程中酶的活性將不再變化,D錯誤;故選B。【點睛】結合酶促反應的影響因素、生長素的兩重性及植物細胞的失水和吸水的過程分析題圖是解題的關鍵。2、A【解析】

分析題意:TATA框是基因的非編碼區的基因啟動子的一部分,雖然不參與轉錄,但決定基因轉錄的開始,為RNA聚合酶的結合處之一,RNA聚合酶與TATA框牢固結合之后才能開始轉錄。【詳解】A、含TATA框的DNA局部片段的穩定性相對較低,容易解旋,A正確;B、TATA框屬于基因啟動子的一部分,但屬于真核生物的非編碼區,不包含DNA復制起點信息,B錯誤;C、TATA框位于真核基因的非編碼區,經RNA聚合酶催化轉錄形成的片段中沒有起始密碼,起始密碼位于對應的基因的編碼區轉錄形成的mRNA片段中,C錯誤;D、TATA框是基因的非編碼區的基因啟動子的一部分,雖然不參與轉錄,但決定基因轉錄的開始,為RNA聚合酶的結合處之一,RNA聚合酶與TATA框牢固結合之后才能開始轉錄,因此某基因的TATA框經誘變缺失后,會影響轉錄的正常進行,D錯誤。故選A。3、B【解析】

興奮在神經纖維上的傳導形式是電信號,而在神經元之間的傳遞是化學信號;由于神經纖維與肌細胞的接觸部位類似于突觸,又神經遞質只存在于突觸小體的突觸小泡中,只能由突觸前膜釋放作用于突觸后膜,使下一個神經元產生興奮或抑制,因此興奮在神經元之間的傳遞只能是單向的。【詳解】A、蛙坐骨神經是由多根傳出神經元的神經纖維組成的,A錯誤;B、由于興奮在神經纖維上傳導的速度大于在突觸處的傳遞速度,因此電刺激①處,電流計先檢測到電位變化,后腓腸肌收縮,B正確;C、電刺激①處,電流先后經過靈敏電流計的兩側,電流計指針會發生反向的兩次偏轉,幅度可能相同,C錯誤;D、電刺激②處,腓腸肌先發生反應,但是沒有經過完整的反射弧,不屬于反射;由于興奮不能由突觸傳到神經纖維,所以電流計檢測不到電位變化,D錯誤。故選B。4、C【解析】

淀粉遇碘液變藍,斐林試劑可檢測還原性糖。探究溫度對酶活性的影響時,操作順序一般是先將各組酶保溫在不同溫度下,再與底物混合。【詳解】A、碘液遇淀粉變藍,向馬鈴薯勻漿中滴加碘液可以檢測是否含有淀粉,但不能檢測淀粉是否轉化成了葡萄糖,A錯誤;B、8%的鹽酸處理可改變細胞膜的通透性,加速染色劑進入細胞,并使染色體中的DNA和蛋白質分離,有利于DNA與甲基綠結合,B錯誤;C、探究溫度影響酶活性的實驗中,溫度為自變量,為了保證酶的催化是在預設溫度下進行的,應先將反應物和酶在相應的溫度下分別保溫,然后再將酶加入對應溫度的反應物中,C正確;D、重鉻酸鉀溶液在酸性條件下與酒精反應變成灰綠色,D錯誤。故選C。5、D【解析】

1、衰老細胞的特征:(1)細胞內水分減少,細胞萎縮,體積變小,但細胞核體積增大,染色質固縮,染色加深;(2)細胞膜通透性功能改變,物質運輸功能降低;(3)細胞色素隨著細胞衰老逐漸累積;(4)有些酶的活性降低;(5)呼吸速率減慢,新陳代謝減慢。2、真核細胞的分裂方式有:有絲分裂、減數分裂和無絲分裂。原核細胞的分裂方式為二分裂。【詳解】A、細胞分化的實質是基因選擇性表達,分化過程中遺傳物質不變,細胞分化使多細胞生物體中的細胞趨向專門化,有利于提高生理功能的效率,A正確;B、衰老細胞中多種酶的活性顯著降低,呼吸速率減慢,B正確;C、細胞凋亡是基因控制的細胞程序性死亡,有利于維持人體內環境的穩態,C正確;D、大腸桿菌為原核生物,沒有細胞核,分裂方式為二分裂,D錯誤。故選D。6、C【解析】

1、細胞分化是指在個體發育中,由一個或一種細胞增殖產生的后代,在形態,結構和生理功能上發生穩定性差異的過程。細胞分化的實質:基因的選擇性表達。2、細胞凋亡是由基因決定的細胞編程序死亡的過程。細胞凋亡是生物體正常的生命歷程,對生物體是有利的,而且細胞凋亡貫穿于整個生命歷程。細胞凋亡是生物體正常發育的基礎、能維持組織細胞數目的相對穩定、是機體的一種自我保護機制。在成熟的生物體內,細胞的自然更新、被病原體感染的細胞的清除,是通過細胞凋亡完成的。【詳解】端粒是位于染色體兩端的特殊DNA序列,隨著細胞的衰老端粒逐漸縮短,A錯誤;胰島B細胞中除了與胰島素合成有關的基因處于活動狀態外,還有多種基因也處于活動狀態,如細胞呼吸酶基因、ATP合成酶基因等,B錯誤;細胞的增殖過程既受細胞核的控制,也受溫度等條件的影響,C正確;被病原體感染細胞的清除要依靠細胞免疫,屬于細胞凋亡,D錯誤。故選C。【點睛】注意:由于基因的選擇性表達,只有胰島B細胞可以表達胰島素基因,但該細胞還可以表達其他基因,如呼吸酶基因等。7、B【解析】

抗生素,是指由微生物(包括細菌、真菌、放線菌屬)或高等動植物在生活過程中所產生的具有抗病原體或其他活性的一類次級代謝產物,能干擾其他生活細胞發育功能的化學物質。臨床常用的抗生素有微生物培養液中的提取物以及用化學方法合成或半合成的化合物。抗生素等抗菌劑的抑菌或殺菌作用,主要是針對“細菌有而人(或其他動植物)沒有”的機制進行殺傷,包含四大作用機理,即:抑制細菌細胞壁合成,增強細菌細胞膜通透性,干擾細菌蛋白質合成以及抑制細菌核酸復制轉錄。【詳解】A、人體的細胞能為SARS-CoV-2的繁殖提供原料和能量等,模板來自病毒本身,A錯誤;B、病毒需寄生在宿主細胞內才能繁殖,SARS-CoV-2病毒侵入人體后,在內環境中不會發生增殖,B正確;C、RNA聚合酶催化的是RNA的形成,是轉錄的過程,而該病毒在人體細胞的核糖體上合成多肽鏈是翻譯,需要合成多肽鏈的相關酶來催化,C錯誤;D、抗生素對病毒無效,D錯誤。故選B。8、A【解析】

“J”型曲線是指數增長函數,描述在食物充足,無限空間,無天敵的理想條件下生物無限增長的情況。種群的增長率為恒定的數值。“S”型曲線是受限制的指數增長函數,描述食物、空間都有限,有天敵捕食的真實生物數量增長情況,存在環境容納的最大值K,種群增長速率先增加后減少,在k/2處種群增長速率最大。【詳解】A、曲線①是理想條件下種群的增長速率曲線而非種群數量變化曲線,因為種群數量的起點不能為0,A錯誤;B、曲線②為有限條件下的種群數量變化的S型曲線,B正確;C、曲線③代表理想條件下種群數量變化的J型曲線的相鄰世代種群數量的倍數關系(即λ)或增長率(即λ-1),它們都穩定不變(且必須λ>1),C正確;D、曲線④為種群數量變化的S型曲線的增長速率曲線,D正確。故選A。【點睛】本題考查種群數量變化曲線,意在考查學生識圖和判斷能力。要注意曲線的起點,表示種群數量的曲線一般不是從0開始。二、非選擇題9、載體(或質粒)限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮(或冷凍)生理狀態相同(或經同期發情處理)生殖細胞【解析】

基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術;個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)分析題圖可知,將目的基因和與細胞內靶基因同源的DNA片段都重組到載體(或質粒)上,構建打靶載體(基因表達載體)。(2)打靶載體測序驗證正確后,利用限制酶,將之線性化,以提高重組率。通過顯微注射技術導入胚胎干細胞,這樣打靶載體與細胞內靶基因同源的區段就有幾率發生同源重組。(3)neor是新霉素抗性基因,tk基因的表達可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質,導致細胞死亡,因此為了篩選發生同源重組的細胞,可在培養液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術鑒定同源重組的細胞(去除靶基因),將這樣的細胞通過動物細胞(或克隆)培養后,獲得大量打靶成功的細胞。其中,暫時不用的細胞進行液氮(或冷凍)保存。(4)將打靶成功的細胞注射入小鼠囊胚,移植到同種、生理狀態相同(或經同期發情)的母鼠體內,一段時間后對受體母鼠進行妊娠檢查,確保其生下嵌合小鼠。這種嵌合體小鼠長大后,體內同時存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的生殖細胞恰巧被“修飾”過了,則它們的雜交后代中,就可能出現基因完全被“修飾”過的小鼠。【點睛】本題考查基因工程的原理及技術以及胚胎工程的有關知識,重點考查基因工程的操作步驟,要求考生識記基因表達載體的構建過程,識記胚胎工程的操作過程,屬于考綱識記層次的考查。10、人工合成DNA(雙鏈)復制限制DNA連接標記基因T-DNA顯微注射技術【解析】

1、基因工程的工具:(1)限制酶:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。(2)DNA連接酶:連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。(3)運載體:常用的運載體:質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒2、基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因導入受體細胞:根據受體細胞不同,導入的方法也不一樣,將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術.個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】(1)熒光素酶基因屬于目的基因。目的基因可以從基因文庫中獲取,也可以通過人工合成方法得到,再利用PCR技術擴增即可。利用PCR技術擴增目的基因的原理是DNA雙鏈復制。(2)構建基因表達載體時,需要用限制酶分別切割目的基因和載體,然后用DNA連接酶進行連接,基因表達載體要有標記基因,以便篩選出含有目的基因的受體細胞。(3)將目的基因導入植物細胞,目前常用的目的基因載體是農桿菌的Ti質粒,目的基因需插入到該基因載體的T-DNA上,然后再轉移至受體細胞中。將目的基因導入動物細胞的技術中,應用最多的是顯微注射技術。【點睛】本題結合基因工程的原理及技術,要求考生識記基因工程的原理、操作工具、操作步驟及相關應用,能結合所學的知識準確答題,屬于考綱識記和理解層次的考查。11、逆轉錄(或:反轉錄)逆轉錄酶Taq酶(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物目的基因大①向小鼠體內注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒):②提取免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,經多次篩選獲得能產生特異性抗體的雜交瘤細胞;③將雜交瘤細胞在體外條件下做大規模培養、或注射到小鼠腹腔內增殖,從培養液或小鼠腹水中就提取大量的單克隆抗體【解析】

1.將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性、低溫復性、適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈式反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得Ct值,同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。2.單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用單克隆抗體技術來制備,單克隆抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的效應B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞,雜交瘤細胞既能產生抗體,又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。【詳解】(1)以RNA為模板合成DNA的過程為逆轉錄或反轉錄,故題圖中以病毒的RNA為模板合成cDNA的過程為①逆轉錄,再對cDNA進行PCR擴增,這項技術稱為RT-PCR。(2)RT-PCR是擴增DNA的過程,因為加入的模板是RNA,故需要加入的酶是逆轉錄酶和Taq酶。要從cDNA中擴增出新冠病毒特有的基因序列ORF1ab和核殼蛋白基因N關鍵在于要加入(ORF1ab和核殼蛋自基因N)的特異性引物、dNTP及所需的酶一起構成反應體系,從而實現了相關基因的擴增。(3)RT-PCR加入Taqman熒光探針可以通過測定熒光強度來檢測產物濃度,原理如下:Taqman熒光探針為一段與目的基因互補的核苷酸單鏈,兩端分別連接一個熒光基團R和一個淬滅基團Q。探針結構完整時,R發射的熒光被Q吸收;而PCR擴增時結合在模板鏈上的探針被切斷,使R和Q分離,R基團發射的熒光不被淬滅,這樣通過對熒光信號強弱的監測就可實現對產物的檢測。若熒光信號達到設定的閾值時,經歷的循環數越少,說明擴增次數少,說明更多的熒光探針與目的基因進行了堿基互補配對,可推測獲得的核酸產物中含有病毒的概率越大。(4)若采用抗原-抗體雜交技術進行病毒檢測,需要制備能與新冠病毒結合的特異性抗體,單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高且能夠大量制備的優勢,故設計的思路是設法獲得能產生該特異性抗體的雜交瘤細胞,步驟如下:①向小鼠體內注射新冠病毒的抗原蛋白(或滅活的新冠病毒),目的是要獲得能能產

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