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文檔簡介

1水產養殖用枯草芽孢桿菌培養技術規程本文件規定了水產養殖用枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）生產中所涉及的術語和定義、生和設備要求、培養基、菌液生產技術流程、指標檢測和儲運的相關技GB/T26428飼用微生物制劑中GB4789.28食品安全國家標準食品微生物學檢驗培養基和試劑的質量枯草芽孢桿菌bacillussubtilis速度較快，菌落表面粗糙不透明，灰白色或微24生產環境和設備要求4.1生產環境——發酵生產場地及發酵相關設施應符合安全、環保、消防等條件要求。4.2生產設備5培養基5.1一般要求培養基所使用的原材料應滿足菌液生產要求，具體按GB4789.28的規定執行。對于首5.2種子培養基初級菌種及一級菌種使用的種子培養基中應含有易被菌種吸收利用的碳氮源，營養豐富。種子培5.3發酵培養基來源豐富、成本低廉、營養緩釋的培養基原料，培養基中還應添加緩沖劑穩定pH值。發酵培養基見附用于枯草芽孢菌種分離、鑒定及活菌計數使用。固體培養基見附錄A中3——用于發酵的枯草芽孢桿菌應明確菌種來源的相關信息。——發酵罐接種前應檢測上一級菌種的純度和濃度，不應有雜菌污染，菌液濃度應達到1.0×108件為115℃~121℃,0.1MPa～0.15MPa，滅菌20min～30min。滅菌后無菌操作取培養基染色鏡檢，無接種針經火焰滅菌,待冷卻后沾取少量初級菌種，轉接至裝有種子培養基的三角瓶內，完成一級菌b)發酵溫度為35℃~37℃;c)初始攪拌轉速為250rpm～300rpm；d)接種量為裝液量的2%～5%；），4每噸海水或淡水加入500mL～800mL次氯酸鈉溶液，處理24小時后以適量的硫代硫制水浴溫度在60℃~65℃,保持30min，對培養基進行加熱溶解和消殺處理。趁熱將培養基轉入裝有擴培體積80%發酵用水的發酵容器內，待培養基混合均勻且溫度降至28℃~32℃時，快速將種子液倒入其b)發酵溫度為28℃~32℃;c)接種量為裝液量的2%～3%；——將枯草芽孢桿菌發酵液用無菌的0.85%生理鹽水做10倍梯度連續稀釋。5——選取3個連續適宜稀釋倍數的菌液，用無菌移液管取100μL接種于固體培養玻璃珠或涂布棒均勻涂布于培養基表面，每個稀釋樣品做3次重復。涂布好的平皿翻轉后置于37℃培養箱中培養24h～48h。——培養后，選取菌落數在30個～300個之間的平板進行計數，可得到發酵液中枯草芽孢桿菌的菌從測定有效活菌數的稀釋樣品中，選取3個連續適宜稀釋倍數的樣本，進行枯草芽孢桿菌發酵液中化學品，遠離熱源。長途運輸時，防止日曬、雨淋，避

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