課程：細胞生物學實驗授課老師：張金葉,龔慧明授課班級：11/12級生物科學授課時間：2013-2014年度上半學期學時：18學時考核：60%考試+40%實驗報告課程要求實驗室規則（服裝整潔、秩序井然、前后清點、節約與賠償、清潔衛生）實驗報告（實驗報告及時完成，有所思考）繪圖要求（鉛筆、清晰、突出典型特征、不抄繪、引線、注字及放大倍數）實驗內容實驗一普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用實驗二

細胞膜的通透性觀察實驗三死活細胞的鑒別實驗四人微量外周血淋巴細胞培養實驗五

人染色體標本的制備實驗六人染色體分帶技術——G帶實驗目的實驗原理試劑與器材實驗步驟注意事項作業與思考實驗一普通顯微鏡及特殊顯微鏡的使用一.實驗目的了解生物顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡、熒光顯微鏡和倒置顯微鏡的構造原理，并掌握其使用方法。熟悉光鏡下細胞的基本形態與結構。掌握顯微鏡暗視野的簡易制作。二.實驗原理顯微鏡的工作原理成像原理照明原理主要性能參數顯微鏡成像原理顯微鏡的工作原理暗視野顯微鏡以丁達爾現象為原理。

特點：利用拋物型聚光器進行斜射照明顯微鏡的工作原理顯微鏡照明原理顯微鏡的工作原理臨界照明科勒照明正置顯微鏡倒置顯微鏡倒置熒光顯微鏡三目暗視野顯微鏡倒置激光共聚焦顯微鏡顯微鏡主要性能參數分辨率（分辨力）指在25cm的明視距離處能區分開被檢物體上兩個相近質點間的最小距離。放大率與有效放大倍數放大率/放大倍數(M)=目鏡放大倍數(Mob)×物鏡放大倍數(Moc)有效放大倍數：物鏡數值孔徑的500-1000倍。清晰度

指顯微鏡形成輪廓明顯的物象的能力。焦點深度

當顯微鏡對標本的某一點或平面聚焦時，焦點平面上下物象清晰的距離或深度。三.試劑與器材

材料：柿胞間連絲裝片、動物細胞分裂裝片和浮游生物等。試劑：香柏油、二甲苯等器材：生物顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡、熒光顯微鏡、載玻片、蓋玻片等。四、實驗內容普通生物顯微鏡的構造及使用方法。觀察標本，熟悉細胞的一般形態結構。暗視野顯微鏡的簡易制作及浮游生物的觀察。三.實驗步驟顯微鏡的構造及使用暗視野顯微鏡的制作及使用亮度調節開關鏡筒目鏡目鏡鏡臂物鏡載物臺物鏡轉換器聚光鏡底座調焦器聚光鏡升降輪顯微鏡的構造頭部固定螺釘顯微鏡的使用柿細胞胞間連絲動物細胞有絲分裂過程注意事項任何旋鈕轉動有困難時，絕不能用力過大，而應查明原因，排除障礙。如果自己不能解決時，要向老師說明，幫助解決。保持顯微鏡的清潔，盡量避免灰塵落到鏡頭上；盡量避免試劑或溶液沾污或滴到顯微鏡上。顯微鏡用過后，應用清潔棉布輕輕擦拭；鏡頭有灰塵，必須用擦鏡紙擦。每次實驗結束，把顯微鏡以拿出時的樣子放回到鏡盒里（即轉動物鏡頭，使之“八”字形向外；降低鏡筒至底部）。制作暗視野紙片空隙大小適中才能取得較好的觀察效果。注意根據動物細胞有絲分裂特征來辨別細胞分裂的各個時相。作業思考繪出你所觀察到的柿胞間連絲、動物細胞有絲分裂及暗視野下浮游生物圖片。為什么在觀察動物細胞有絲分裂標本時，同一標本中會出現細胞分裂的不同時相？在制作暗視野時，應注意哪些關鍵環節？End，ThankS！實驗二細胞膜的通透性觀察實驗目的實驗原理試劑與儀器實驗內容注意事項作業與思考一.實驗目的觀察細胞膜的通透性。了解溶血現象及其發生機制。掌握普通光學顯微鏡下細胞及細胞碎片的形態。細胞膜是細胞與環境進行物質交換的選擇通透性屏障。溶血現象：將紅細胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細胞內，可使細胞脹破，血紅蛋白釋放到介質中，由不透明的紅細胞懸液變為紅色透明的血紅蛋白溶液的現象。將紅細胞放在某些等滲鹽溶液中，由于紅細胞膜對各種溶質的通透性不同，膜兩側的滲透壓平衡會發生改變，也會發生溶血現象。因此，發生溶血現象所需時間長短可作為測量物質進入紅細胞速度的一種指標。二.實驗原理三.試劑和儀器材料：雞血細胞器材：普通顯微鏡、試管、試管架、滴管、載玻片、蓋玻片、擦鏡紙、記號筆等。試劑：0.17mol/LNaCl、0.17mol/LNH4Cl、0.17mol/L醋酸銨、0.17mol/L硝酸銨、0.12mol/L草酸銨、0.12mol/LNaSO4溶液、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、

0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮、蒸餾水。雞紅細胞懸液的制備。低滲溶血的觀察。顯微鏡檢查細胞的完整性。四.實驗內容五.注意事項膠頭滴管不可混用，以免造成溶液間的交叉污染。試管中有紅細胞和測試溶液時，不應強力搖晃，以免造成人為的紅細胞破裂。注意組實驗過程的同步性，尤其滴加血液的操作要迅速。六.作業與思考記錄各種溶液所發生的溶血現象及溶血時間。比較并分析各種溶液發生溶血現象的原理。為什么同一種溶液，有的同學會得出不同的結論？思考溶血實驗在研究中應用的可能性。試管編號所加試劑是否溶血溶血時間結果分析End，ThankS！溶血實驗在研究中的應用1.溶血空斑實驗

溶血空斑實驗是體外檢測單個抗體形成細胞（B淋巴細胞）的一種方法，即將經綿羊紅細胞（SRBC）免疫過的家兔淋巴結或小鼠脾臟制成細胞懸液，與一定量的SRBC結合，于37℃作用下，免疫活性淋巴細胞能釋放出溶血素，在補體的參與下，使抗體形成細胞周圍的SRBC溶解，從而在每一個抗體形成細胞周圍，形成肉眼可見的溶血空斑。每個空斑表示一個抗體形成細胞，空斑大小表示抗體生成細胞產生抗體的多少。由于溶血空斑實驗具有特異性高，篩選力強，可直接觀察等優點，故可用做判定免疫功能的指標，觀察免疫應答的動力學變化，并可進行抗體種類及亞類的研究。

2.有時在提紅細胞膜蛋白時要用到，先用低滲溶液讓紅細胞脹破，高速離心收集、純化膜蛋白。實驗三死活細胞的鑒別實驗目的實驗原理

材料、試劑與器材

方法與步驟注意事項

作業與思考一實驗目的學習并掌握死活細胞鑒別的原理及方法。二實驗原理死活細胞的鑒別方法：質壁分離法

、染色法和儀器分析法染色法（化學染色和熒光染色）其原理是：許多酸性染料不容易穿過活細胞的質膜進入胞內，卻能滲入死亡的細胞內，使其著色，以此來鑒別死活細胞。臺盼藍染色法、甲基藍染色、伊紅Y。微電極技術（利用死活細胞膜兩側電位的差異）、全自動分析細胞記數儀和流式細胞儀。儀器分析法中性紅染色、美藍染色、熒光素雙醋酸酯染色、二丙酸脂熒光素染色、

Hoechst、碘化丙啶（PI）。其原理是：許多堿性染料能夠滲入到活細胞內，由于活細胞的代謝作用而是其顯色。死細胞染色活細胞染色死活細胞鑒定原理依據死活細胞在生理機能和性質上的差異不同。圖1.血球計數板示意圖A：血球計數板正面；B：血球計數板側面1.血球計數板；2.蓋玻片；3.計數室圖2.血球計數板1mm25個中格：1mL培養液中細胞數=N/5x25x10000x稀釋倍數16個中格：1mL培養液中細胞數=N/4x16x10000x稀釋倍數材料：血細胞試劑：0.4％臺盼藍溶液（生理鹽水配制）、PBS。器材：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管等。三材料、試劑與器材四方法與步驟血細胞懸液的制備取一定量的新鮮血液加入20等份的PBS。染色制片取0.5ml細胞懸液放入干凈試管中，加入1-2滴臺盼藍染液，混合，2min后制成臨時裝片，鏡檢。3.細胞存活率的計算

細胞存活率=（細胞總數-死細胞數）/細胞總數×100%五注意事項計數時應多選擇幾個視野，以多個視野內的平均值作為細胞的存活率。以臺盼藍排除法在顯微鏡下計數死活細胞數目需注意染色時間。六作業與思考計數死活細胞數，計算出細胞存活率。討論細胞存活率在研究中的應用和意義。①中性紅染色：常用染料之一，是細胞器的專有染料。利用細胞膜的通透性差異，用來染原生動物和顯示動植物組織中活細胞的內含物等。中性紅無毒，常做活體染色的染料。②臺盼藍染色：當細胞損傷或死亡時，臺盼藍可穿透變性的細胞膜，與解體的DNA結合，使其著色。而活細胞能阻止染料進入細胞內。故可以鑒別死細胞與活細胞。嚴格來說，臺盼藍染色檢測的是細胞膜的完整性，通常認為細胞膜喪失完整性，即可認為細胞已經死亡。通過顯微鏡很容易就能識別出死亡的被臺盼藍染色的細胞，并可使用細胞計數器進行計數。③美藍染色法：美藍是一種無毒性染料，它的氧化型是藍色的，而還原型是無色的，用它來對活細胞進行染色，由于細胞中新陳代謝的作用，使細胞內具有較強的還原能力，能使美藍從藍色的氧化型變為無色的還原型，所以活細胞無色，而對于死細胞或代謝緩慢的老細胞，則因它們無此還原能力或還原能力極弱，而被美藍染成藍色或淡藍色。因此，用美藍水浸片不僅可觀察酵母的形態，還可以區分死、活細胞.④甲基藍染色法：甲基藍染色與臺盼藍類似的染色機理。每個血球計數板上有兩個計數室（圖1）。血球計數板上的符號和數字（圖1）的含義是：XB-K-25為計數板的型號和規格，表示此計數板中計數室分25個中格；0.1mm為蓋上蓋玻片后計數室的高；1/400mm2表示計數室面積是1mm2（計數室邊長1mm），分400個小格，每小格面積是1/400mm2（圖2），9個大方格中只有中間的有小方格的中央大方格才是計數室。不要認為9個大方格都是計數室。

計數室通常也有兩種規格：一種是16x25型，即大方格內分為16中格，每一中格又分為25小格（圖2）；另一種是25x16型，即大方格內分為25中格，每一中格又分為16小格。但是不管計數室是哪一種構造，它們都有一個共同的特點，即每一大方格都是由16x25=25x16=400個小方格組成。

計數時，若計數室是由16個中方格組成，數左上、左下、右上、右下的4個中方格（即100個小方格）的菌數。如果是由25個中方格組成的計數室，除數上述4個中方格外，還需數中央1個中方格（即80個小格方）的菌數（圖3）。計數時對壓在中格四條線上的細胞只計數相鄰兩邊及其夾角上的細胞（一般選左邊和上邊的線）。

死活細胞的鑒定在生物學和醫學上具有很重要的意義。細胞培養過程中要隨時記錄細胞的生長情況，需要經常測定細胞的存活率；在腫瘤細胞的研究中，為了檢驗各種藥物對腫瘤細胞的殺傷力，也需要測定腫瘤細胞的存活率。在臨床醫學中死活細胞的鑒定也有很大的應用，例如為了檢測某一男子的生育能力，測定精子細胞的存活力是比較常用的辦法。實驗四人微量外周血淋巴細胞培養實驗目的實驗原理

試劑與器材

操作方法

注意事項

作業與思考一實驗目的掌握無菌培養技術。熟悉人外周血淋巴細胞培養過程。并掌握人外周血淋巴細胞培養培養方法。二實驗原理在活體情況下，進入外周血的小淋巴細胞不能進行增殖，存活一定時間即死亡。在人工培養條件下，培養基中的PHA有刺激小淋巴細胞轉化并進行分裂的能力，此時如加入秋水仙素，可使許多細胞停滯于分裂中期。采用常規制片技術，即可獲得大量含染色體的標本。三試劑與器材

材料：人指血。試劑：RPMI-1640培養基、胎牛血清、肝素、PHA、

雙抗、PBS，2μg/ml的秋水仙素、酒精等。器材：超凈工作臺、恒溫培養箱、注射器、燒杯、

量筒、細胞培養瓶、酒精燈等。四實驗內容采樣接種

在無菌條件下，用采血針刺破無名指，采血4~5滴，接種至培養瓶，塞緊瓶塞后輕搖均勻，盡量避免與瓶蓋接觸。采血后，用膠布密封瓶口并作好標記。四、實驗內容培養將標記好的培養瓶置37℃培養箱中培養72小時，每隔12小時左右輕遙1次，以促進細胞生長增殖。四實驗內容加秋水仙素終止培養前6小時以注射器向培養瓶中加入秋水仙素3-4滴，使其終濃度為0.01-0.02μg/ml，振蕩混勻后于培養箱中繼續培養6小時。五注意事項嚴格注意采血過程的無菌操作。采血時，采血針不可混用。采血后，各自的培養瓶應做好標記。六作業與思考簡述人外周血淋巴細胞的培養過程。肝素和PHA在人外周血淋巴細胞培養中的作用是什么？影響人外周血淋巴細胞培養的主要因素有哪些？如何控制？End，ThankS！RPMI1640

培養基中由多種氨基酸、維生素、生物素、無機鹽等按不同比例配置而成，再加入酚紅作指示劑是細胞體外培養的必要營養素。10.4gRPMI1640干粉溶于900ml三蒸水中，磁力攪拌2h，充分溶解，用NaHCO3調pH=7.2，然后定容至1000ml，無菌室內抽濾滅菌、分裝，4℃保存，長時間存放英防御-20℃.抗凝劑抗凝劑常采用肝素，肝素鈉。肝素：一種多糖，能阻止白細胞和淋巴細胞與紅細胞集結在一起而影響培養的質量，但肝素濃度過大會導致溶血。一般劑量是100單位肝素液可抗凝5ml外周血液。肝素鈉為粉劑，每毫克130單位。植物凝集素：PHA

從豆子中提取出來的，其化學成分為糖蛋白，具有刺激淋巴細胞進行有絲分裂的作用。用量不足影響分裂細胞的數量；用量過高則使培養的外周血凝集而影響淋巴細胞生長。秋水仙素

是從地中海的一種名叫秋水仙的鱗莖中提取的一種植物堿，他的作用是：

（1）抑制細胞紡錘死的形成，使細胞分裂停止在中期，從而起到積累大量中期細胞的作用。

（2）是染色體單體縮短分開，呈現明顯的外形。秋水仙素的使用濃度范圍比較寬，可差幾十倍之多，一般終濃度為1.2-1.5微克/毫升。處理4-6小時。秋水仙素作用時間越長，被阻止的中期細胞越多，但染色體也會收縮，收縮過度會影響形態。

實驗五人染色體標本的制備實驗目的實驗原理

試劑與器材

操作方法

注意事項

作業與思考一實驗目的了解染色體制備原理。掌握染色體制備方法。二實驗原理被秋水仙素處理后停滯于中期的大量分裂細胞，用低滲液處理使樣品中的紅細胞膜破裂，并使分裂細胞和轉化的淋巴母細胞膨脹，結合離心技術，即可去掉紅細胞碎片。再用固定液使已膨脹的分裂細胞和轉化的淋巴細胞膜破裂，隨著分裂細胞膜破裂，染色體被釋放出來，并且將其形態固定下來，然后制片即可得到滿意的染色體標本。三試劑與器材材料

終止培養前6小時加入秋水仙素的人外周血淋巴細胞。試劑

低滲液（0.075%KCl溶液）、

固定液（甲醇：冰醋酸=3：1，現用現配）等。器材

離心機、離心管、倒置顯微鏡、水浴鍋、天平、酒精燈、載玻片和蓋玻片等。四操作方法收集細胞取出培養瓶，上下顛倒均勻，將細胞移至離心管內，1000r/min離心8min收集細胞，棄上清。低滲處理

加入已經預熱的低滲液6-8ml，吹打成細胞懸液，37℃水浴中低滲20min。固定

①預固定；②固定；③再固定。制片

預冷的玻片，立即吹干。染色1:10Giemsa染液染色10min，流水沖洗，晾干。鏡檢，拍照。五注意事項從培養箱中取培養瓶時，注意觀察培養液顏色，根據顏色變化判斷細胞有無污染。用吸管吸棄上清液時，勿用力過猛導致部分細胞丟失。固定液需現用現配。載玻片需干凈且保持濕冷狀態。六作業與思考簡述人外周血淋巴細胞染色體標本制備的過程。秋水仙素處理、低滲和固定處理在染色體標本制備過程中的作用是什么？固定液為什么要現用現配？End，ThankS！低滲溶液：0.075MKCl低滲溶液使細胞膨脹，便于染色體分散而易于觀察和計數。（1）染色體輪廓較清楚。（2）染色性增強，可縮短染色時間。（3）用于G帶技術更能顯示其優越性。固定液

穩定染色體的形態結構，清除染色體外層物質對染色體在玻片上展開的影響，通過更換固定液2-3次，清除紅細胞的碎片，使標本片的背景更為清晰，廣泛使用的固定液為Carnoy固定液，即甲醇與冰醋酸3:1混合液。淋巴細胞轉化試驗表明培養物生長發育良好，但制成的標本質量不佳時，其原因為：秋水仙素處理不當：一般秋水仙素溶液的濃度與處理時間有一定關系，若處理時間太短，則標本中分裂細胞就少，相反，雖然標本中的分裂細胞雖多，若處理時間太長，染色體縮得太短，以致形態特征模糊，不容易觀察。低滲處理不當：低滲處理細胞時間過長，細胞膜旺旺過早破裂，以致分裂細胞或染色體丟失；若處理時間不足，細胞膨脹不夠，則染色體分散不佳，難以進行染色體計數分析。離心速度不合適：若從培養瓶收集細胞后進行離心時的速度太低，細胞可能被丟失；如果細胞被低滲后離心速度過高，旺旺使分裂細胞過早破裂，分散良好的分裂相丟失，以致制出的標本分裂相較少或大部分為剩余的分散不好的分裂相。標本固定不充分：若固定液不新鮮，甲醇、冰醋酸的質量不佳，此時染色體形態模糊、不分散，其周圍有細胞漿的藍色背景。載玻片清洗不徹底：玻片有油跡，致使滴在在玻片上的細胞懸液不能均勻分散，且細胞隨液體流動而丟失。載玻片冷凍不夠：合適的冰濕玻片，從低溫中拿出時，其表面有一層霜雪。如冷凍不夠則無此現象，此時細胞難以貼附在在玻片上。實驗六人染色體分帶技術—G帶實驗目的實驗原理試劑與器材操作方法注意事項作業與思考一實驗目的

掌握制備G帶染色體方法。了解G帶染色體在細胞遺傳學分析中的重要意義。二實驗原理染色體顯帶技術

將染色體標本經過一定程序處理，并用特定染料染色，使染色體沿其長軸顯現明暗或深淺相間的橫行帶文，這些橫行帶紋為染色體帶。如果染色體上某一區域的DNA為重復序列，轉錄活性低，相應地包裝它們的蛋白質也較穩定，可能通過較強的二硫鍵形成很穩定的疏水的a-螺旋結構，成為染料沉淀物積累的環境，從而顯示出陽帶(暗帶)。反之，如果染色體上某一區域的DNA富含具轉錄活性的結構基因，則功能上相對活躍，包裝它們的蛋白質也較疏松，構象上類似b-折疊結構，經處理后二硫鍵斷裂，還原為巰基，成為親水性蛋白，不利于染料沉淀物的積累，所以著色淺，顯示陰帶(明帶)。Giemsa染料是噻嗪-曙紅燃料，著色之一取決于染色體原位形成噻嗪-曙紅沉積物，兩個噻嗪分子和DNA結合，在此基礎之上再結合1個曙紅分子；其次取決于一個疏水環境，以利于燃料沉淀而著色。G帶顯帶在用Gimsa染色以前，要用胰蛋白酶進行預處理，將染色體陰性G帶區的疏水蛋白除去或使它們的構型變為更為親水狀態，以利于著色。G帶區含有較豐富的A-T對，在間期核呈固縮狀態，是DNA晚復制區之一。Giemsa燃料在G帶區與DNA結合，而且與結合DNA的染色質非組蛋白有關。其特性是顯帶方法簡單恒定，帶型穩定，保存時間長。二實驗原理三試劑與器材材料

人染色體標本。試劑GKN液、胰蛋白酶液、Gimsa染液、香柏油等。器材

恒溫培養箱、恒溫水浴箱、顯微鏡、染色缸、量筒、燒杯等。四實驗內容置70℃烤箱中處理2小時，然后轉入37℃培養箱中備用，一般在第3-7天進行顯帶。將染色體標本投入胰酶液中，以15s、30s、1min、1.5min、2min不同時間進行預試片，選擇最佳時間。（隨著片齡的增長、時間也隨之增長）。在GKN液內漂洗30s。Gimsa染液中染色8-10min，流水沖洗。鏡檢。質量較好的染色體標本可用二甲苯透明，D.P.X(中性樹脂)封片。男性G顯帶(10××100×)女性G顯帶(10××100×)人類23對染色體的G顯帶記憶口訣一禿二蛇三蝶飄，四像鞭炮五黑腰；六號像個小白臉，七蓋八下九苗條；十號長臂近帶好，十一低來十二高；十三、四、五、四二一；十六長臂縊痕大；十七長臂帶腳鐐，十八白頭肚子飽；十九中間一點腰，二十頭重腳飄飄；二十一好像黑葫蘆瓢，二十二頭上一點黑；X染色一擔挑，Y染色長臂帶黑腳。五注意事項胰蛋白酶處理時間不宜過長。觀察染色體標本時，應先用低倍鏡再用高倍鏡、油鏡觀察染色體長軸上明暗和寬度不同的橫紋即帶。油鏡觀察后應立即將鏡頭清理干凈。六作業與思考正常人染色體核型分析。正常人染色體的數目及結構特點。染色體核型分析在臨床疾病診斷中的作用。End，ThankS！A組：1-3號染色體。1號染色體。短臂：近側段有2條深帶，第2深帶稍寬，在處理較好的標本上，遠側段可顯出3～4條淡染的深帶。此臂分為3個區，近側的第1深帶為lp21；第2深帶為1p31。長臂：副縊痕緊貼著絲粒，染色濃。其遠側為一寬的淺帶，近中段與遠側段各有兩條深帶，此中段第2深帶染色較濃，中段兩條深帶稍靠近，此臂分為4個區，副縊痕遠側的淺帶為lp21號帶、中段第2深帶為lp31號帶，遠側段第1深帶為lp41號帶。2號染色體。短臂：可見4條深帶，中段的2條深帶稍靠近，此臂分為2個區，中段兩條深帶之間的淺帶為2p21。長臂：可見7條深帶，第3和第4深帶有時融合。此臂分為3個區，第2和第3深帶之間的淺帶為2p21帶，第4和第5深帶之間的淺帶為2p31號帶。3號染色體。在長臂與短臂的近中段各具有1條明顯的寬的淺帶。短臂：一般在近側段可見1條較寬的深帶，遠側段可見2條深帶，其中遠側1條較窄，且著色淡，這是區別3號染色體短臂的顯著特征。在處理較好的標本上，近側段的深帶可分為2條深帶，此臂分2個區，中段淺帶為2區1帶。長臂：一般在近側段和遠側段各有1條較寬的深帶，在處理好的標本上，近側段的深帶可分為2條深帶，遠側段的深帶可分為3條深帶，此臂分為2個區，中段淺帶為2區1帶。該染色體的G帶圖有點象蝴蝶結。B組：4-5號染色體。4號染色體短臂：可見2條深帶，近側深帶染色較淺，短臂只有1個區。長臂：可見均勻分布的4條深帶，在處理較好的標本上，遠側段的2條深帶可各自分為2條較寬的深帶。此臂分為3區，近側段第1和第2深帶之間的淺帶為2區1帶，遠側段兩條深帶之間的淺帶為3區1帶。5號染色體短臂：可見2條深帶，其遠側的深帶寬且著色濃，此臂僅1個區。長臂：近側段2條深帶，染色較淡，有時不明顯，中段可見3條深帶，染色較濃，有時融合成1條寬的深帶，遠側段可見2條深帶，近末端的1條著色較濃，此臂分為3個區，中段第2深帶為2區l帶，中段深帶與遠側深帶之間的寬闊的淺帶為3區1帶。C組：6-12號和X染色體6號染色體短臂：中段有1條明顯寬闊的淺帶，形如“小白臉”，是此染色體的特征，近側段和遠側段各有1條深帶，近側深帶貼著絲粒。在處理較好的標本上，遠側段的深帶可分為兩條深帶。此臂分為2個區，中段的明顯而寬的淺帶為2區1帶。長臂：可見5條深帶，近側1條緊貼著絲粒，遠側末端的1條深帶著色較淡；此臂分為2個區，第2和第3深帶之間的淺帶為2區1帶。7號染色體著絲粒著色濃。短臂：有3條深帶，中段深帶著色較淡，有時不明顯，遠測深帶著色濃，形似“瓶塞”。此臂分為2個區，遠側段的深帶為2區1帶。長臂：有3條明顯深帶，遠側近末端的1條著色較淡；第2和第3帶稍接近。此臂分為3個區，近側第1深帶為2區1帶、中段的第2深帶為3區1帶。8號染色體。短臂：有2條深帶，中段有1條較明顯的淺帶，這是與10號染色體相鑒別的主要特征。此臂分為2個區，中段的淺帶為2區1帶。長臂：可見3條分界極不明顯的深帶，此臂分2個區，中段的深帶為2區1帶。9號染色體著絲粒著色濃。短臂：近側段和中段各有1條深帶，在處理較好的標本上，中段可見2條較窄的深帶。此臂分為2個區，中段深帶為2區1帶。長臂：可見明顯的2條深帶，次縊痕一般不著色，在有些標本上呈現出特有的頸部區。此臂分為3個區，近側的1條深帶為2區1帶，遠側的1條深帶為3區1帶。10號染色體著絲粒著絲濃。短臂：近側段和近中段各有1條深帶，在有些標本上近中段可見2條深帶，但與8號染色體短臂比較，其上深帶的分界欠清晰。此臂只有1個區。長臂：可見明顯的3條深帶，遠側段的2條深帶稍靠近，這是與8號染色體相鑒別的一個主要特征，此臂分為2個區，近側段的1條深帶為2區1帶。11號染色體短臂：近中段可見1條深帶，在處理較好的標本上，這條深帶可分為3條較窄的深帶。此臂只有1個區。長臂：近側有1條深帶，緊貼著絲粒。遠側段可見1條明顯的較寬的深帶，這條深帶與近側的深帶之間是1條寬闊的淺帶，這是與12號染色體相鑒別的一個明顯的特征，在處理較好的標本上，遠側段的這條較寬的深帶可分為2條較窄的淺帶，兩深帶之間有1條很窄的淺帶，一般極難辨認，但它是分區的一個界標，在有些標本上近末端處可見1條窄的淡染的深帶。此臂分2個區，上述遠側兩條深帶之間的那條很窄的淡帶為2區1帶。12號染色體短臂：中段可見1條深帶，此臂只有1個區。長臂：近側有1條深帶，緊貼著絲粒，中段有1條寬的深帶，這條深帶與近側深帶之間有1條明顯的淺帶，但與11號染色體比較這條淺帶較窄，這是鑒別11號與12號染色體的一個主要特征。在處理較好的標本上，中段這條較寬的深帶可分為3條深帶。其正中一條著色較濃，在有些標本上，遠側段還可以看到l～2條染色較淡的深帶。此臂分為2個區，中段正中的深帶為2區1帶。X染色體其長度介于7號和8號染色體之間，主要特點是長臂和短臂中段各有1條深帶，有“一擔挑”之名。短臂：中段有一明顯的深帶，宛如竹節狀。在有些標本上遠側段還可以看見1條窄的著色淡的深帶，此臂分為2個區，中段的深帶為2區1帶。長臂：看見3～4條深帶，近中部1條最明顯，此臂分為2個區，近中段的深帶為2區1帶。D組：13-15號染色體，具有近端著絲粒和隨體。13號染色體著絲粒區深染。長臂：可見4條深帶，第1和第4深帶較窄，染色較淡；第2和第3深帶較寬，染色較濃。此臂分為3個區，第2深帶為2區1帶，第3深帶為3區1帶。14號染色體著絲粒區深染。長臂：近側和遠側各有1條較明顯的深帶。在處理較好的標本上，中段尚看見1條著色較淺的深帶。此臂分為3個區，近側深帶為2區1帶，遠側深帶為3區1帶。15號染色體著絲粒區深染。長臂：中段有一條明顯深帶；染色較濃，有的標本上近側段可見l～2條淡染的深帶。此臂分為2個區，中段深帶為2區1帶。E組：16-18號染色體16號染色體短臂：中段有1條深帶，在較好的標本上看見2條深帶，此臂只有1個區。長臂：近側段和遠側段各有1條深帶。有時遠側段1條不明顯，次縊痕著色濃；此臂分2個區，中段深帶為2區1帶。17號染色體短臂：有1條深帶，緊貼著絲粒，此臂只有1個區。長臂：遠側段看見1條深帶，這條深帶與著絲粒之間為一明顯而寬的淺帶，此臂分為2個區，這條明顯而寬的淺帶為2區1帶。18號染色體短臂：一般為淺帶，此臂只有1個區。長臂：近側和遠側各有1條明顯的深帶，此臂分為2個區，兩深帶之間的淺帶為2區1帶。19號染色體著絲粒及其周圍為深帶，其余為淺帶。短臂和長臂均只有1個區。20號染色體著絲粒區濃染。短臂有一條明顯的深帶，此臂只有1個區。長臂：中段和遠側段看見1～2條染色較淡的深帶，有時全為淺帶。此臂只有1個區。此染色體有“頭重腳輕”之名。G組：21-22號染色體和Y染色體，21、22號有隨體。21號染色體著絲粒區著色淡。其長度比22號短，其長臂上有明