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文檔簡介
1牛羊冷凍精液重要垂直傳播人畜共患病原的檢測技術(shù)本標準規(guī)定了動物布魯氏菌病、結(jié)核病、Q熱、衣原體四種疫病診斷所用的常規(guī)分離鑒定及qPCR4縮略語BHQ1:無熒光猝滅基團(Blackholequencher-1)Ct值:每個反應管內(nèi)的熒光信號達到設(shè)定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)FAM:6-羧基熒光素(6-carboxyfluorescein)PCR:聚合酶鏈式反應(polymerase25.3精液采樣器。5.4高速臺式冷凍離心機,可控溫至4℃,離心速度可達12000g以上。5.6渦旋震蕩儀。5.7無菌注射器或EP管。5.10恒溫水浴鍋:0℃~1005.12高壓滅菌鍋。6.1除另有規(guī)定,本方法試驗用水應符合GB/T6682-2008規(guī)定的二級水,所用化學試劑均為分以種特異的基因組序列為模板;Q熱立克次體qPCR以IS1111為模板;流產(chǎn)衣原體以O(shè)mpA基因為3刺激其射精。也可按摩雄性動物的生殖器或用電刺激其發(fā)情中樞或性敏感區(qū),使其射精。臨床癥狀和采樣時間、采樣人等信息。此外采樣、樣品處理及檢測過程所涉及的實驗操作應遵守GB9.1精液前處理加1倍~2倍量的滅菌水,1000g離心20物涂片鏡檢、培養(yǎng)。安福民(antiformin)沉淀濃縮法具體操作參見附錄B9.2基因組DNA的提取在上述已完成前處的樣品(沉淀物)中加人509.3qPCR反應體系和條件42μL,補充ddH2O至20μL9.4結(jié)果判定5酸二氫鈉(NaH2PO4·2H2O)31.2g,溶于蒸餾水中B液(0.2mol/LNa2HPO4溶液稱取十二水合磷酸氫二鈉(N酸氫二鈉(Na2HPO4·2H2O)35.6g,溶于蒸餾水稱取17g氯化鈉,用適量蒸餾水溶解,量取13mLA液和87mLB液,混合,用蒸餾水定容至6物加蒸餾水恢復
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