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文檔簡介
未知驅動探索,專注成就專業多克隆抗體制備免疫小鼠多克隆抗體制備免疫小鼠是一種常用的制備多克隆抗體的方法。下面是具體的步驟:1.選擇抗原:首先需要確定所需要制備抗體的抗原??乖梢允堑鞍踪|、多肽、多糖等。2.免疫小鼠:將所選抗原注射到小鼠體內,以誘導其產生特異性抗體。通常,抗原會和佐劑(如完全弗氏佐劑)混合,以增強免疫響應。3.免疫程序:將抗原注射到小鼠體內,通常分為初次免疫和加強免疫兩個階段。初次免疫后,會進行一定的間隔時間(通常是2-4周)再次注射抗原,以增強免疫效果。4.細胞融合:在小鼠免疫后,從其脾臟中采集免疫細胞(通常是脾細胞),與骨髓瘤細胞(如SP2/0或NS1等)進行細胞融合。5.篩選和培養:將融合細胞進行稀釋后,接種到培養基中,以培養成雜交瘤細胞。培養基中通常會添加相應的選擇劑,以選擇出雜交瘤細胞。6.克隆篩選:將培養出的雜交瘤細胞進行單克隆化,即分離成單個克隆細胞。這可以通過稀釋法或細胞限dilution法來進行。7.抗體鑒定:對篩選出的單克隆細胞進行抗體鑒定,通常采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)或免疫組化技術來檢測抗體的特異性和親和力。8.抗體生產:經過抗體鑒定后,將選出的單克隆細胞培養擴大,并進行大規模的培養和抗體生產。多克隆抗體制備免疫小鼠的主要優點是可以獲得多種不同的抗體,具有較高的靈敏性和多樣性。然而,由于免疫小鼠需要一定的時間來產生抗體,需要一定的動物資源和成本支出,而且制備的抗體可能存在一定的批次變異。因此,每
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