腦膜炎奈瑟氏菌屬1.同學(xué)們大家好，歡迎來到微生物檢驗(yàn)技術(shù)微課堂。今天我們學(xué)習(xí)的內(nèi)容是奈瑟氏菌屬。2.奈瑟菌屬是一群革蘭陰性雙球菌，有23個(gè)種和亞種，人類是奈瑟菌屬的自然宿主，對(duì)人致病的只有腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌。首先，我們來學(xué)習(xí)腦膜炎奈瑟菌，腦膜炎奈瑟菌俗稱腦膜炎雙球菌，是引起流行性腦脊髓膜炎，簡稱為流腦的病原菌。3.首先我們來看看奈瑟氏菌屬的生物學(xué)性狀，一、形態(tài)與染色，腦膜炎奈瑟菌，革蘭染色陰性，單個(gè)菌體呈腎形或咖啡豆形，大多成雙排列，兩個(gè)凹面相對(duì)，沒有芽孢，沒有鞭毛，新分離的菌株大多有莢膜和菌毛。4.我們?cè)賮砜纯茨紊暇鷮俚呐囵B(yǎng)特性，首先生長條件，腦膜炎球菌專性需氧，營養(yǎng)要求比較高，需要在含有血液或血清或者是多種氨基酸，無機(jī)鹽培養(yǎng)基中才能生長。這里注意，初次培養(yǎng)時(shí)候需要供給5%到10%的二氧化碳，并保持50%的濕度環(huán)境下才能使其生長，大多在實(shí)驗(yàn)室，我們采用巧克力血瓊脂平板來培養(yǎng)腦膜炎球菌，它們的最適生長溫度為35到37攝氏度，最適的PH值為7.4到7.6，這里注意腦膜炎奈瑟菌在低于30度或者是高于40度的環(huán)境下均不能生長。5.我們?cè)倏纯茨X膜炎奈瑟氏菌屬的生長現(xiàn)象，這個(gè)是一張腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的生長圖，我們能夠看到形成直徑大概1.0到1.5毫米的無色，圓形，透明，光滑，似露滴狀的菌落，并且沒有發(fā)生溶血，在卵黃雙抗（EPV）平板上，因?yàn)楹卸嗾尘睾腿f古霉素兩種抗生素，因此可以抑制一些革蘭陽性菌和革蘭陰性菌，從而有利于腦膜炎奈瑟菌的生長，腦膜炎奈瑟氏菌屬在EPV平板上形成的菌落比較大，但是如果培養(yǎng)的時(shí)間過長，腦膜炎奈瑟氏菌屬由于產(chǎn)生自溶酶，從而出現(xiàn)自溶現(xiàn)象。6.那么腦膜炎奈瑟菌的生化反應(yīng)如何呢？我們?cè)賮砜此麄兊纳磻?yīng)，腦膜炎奈瑟菌絕大多數(shù)菌株能夠分解葡萄糖和麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣而淋病奈瑟氏菌不分解麥芽糖，因此，依據(jù)這個(gè)區(qū)別可以將腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌進(jìn)行區(qū)分，另外，腦膜炎奈瑟菌不分解乳糖，甘露醇，半乳糖和果糖，硝酸鹽還原試驗(yàn)陰性，不分解尿素，不產(chǎn)生硫化氫和靛基質(zhì)，觸酶試驗(yàn)陽性，氧化酶試驗(yàn)陽性。7.腦膜炎奈瑟菌屬的抗原構(gòu)造和分類，是根據(jù)莢膜多糖群特異性抗原的不同，將腦膜炎奈瑟氏菌分成13個(gè)血清群。我國流腦病例主要由A群引起；B群流腦常呈散發(fā)，但病情嚴(yán)重；C群流腦極少見。8.我們?cè)倏纯茨X膜炎奈瑟氏菌屬的抵抗力特點(diǎn)，腦膜炎奈瑟困的抵抗力很弱，細(xì)菌對(duì)干燥、熱、消毒劑都比較的敏感，比如在室溫中三小時(shí)立即死亡，55攝氏度五分鐘內(nèi)就會(huì)被破壞，1%的石碳酸，75%的乙醇，0.1%的新潔爾面都可以迅速將其殺滅。9.好！臨床意義方面首先我們看看致病物質(zhì)，腦膜炎奈瑟氏菌屬的致病物質(zhì)有菌毛、莢膜和脂寡糖，菌毛具有粘附作用，莢膜發(fā)揮抗吞噬功能，脂寡糖作用于小血管和毛細(xì)血管，可以引起壞死、出血從而引起皮膚瘀斑和微循環(huán)障礙，大量脂寡糖的釋放還可以引起DIC和重度性休克，所以脂寡糖是腦膜炎雙球菌的主要致病物質(zhì)，其次所致疾病，腦膜炎奈瑟菌是引起流腦的病原菌，流腦的傳染源為病人和帶菌者，細(xì)菌主要通過飛沫侵入人體的鼻咽部，流腦一般有三種臨床類型，有普通型，爆發(fā)型和慢性敗血癥型。其中，普通型大約占90%左右，細(xì)菌侵入機(jī)體以后首先引起鼻咽部炎癥，如果免疫力比較弱，細(xì)菌可以從鼻咽部黏膜進(jìn)入血液，引起菌血癥或者敗血癥，患者會(huì)出現(xiàn)突發(fā)的寒戰(zhàn)，高熱，惡心，出血性皮疹，極少數(shù)患者細(xì)菌可以經(jīng)過血流侵入腦脊髓膜，引起化膿性的炎癥，產(chǎn)生劇烈頭疼，噴射性嘔吐，頸項(xiàng)強(qiáng)直等等腦膜刺激癥狀。10.那么我們機(jī)體對(duì)腦膜炎菌的免疫性是什么呢？我們?nèi)梭w抗腦膜炎球菌的免疫是以體液免疫為主，在感染后或者疫苗接種后兩周血清中會(huì)出現(xiàn)群特異性多糖抗體，IgGIgM和IgA的水平會(huì)明顯升高，對(duì)機(jī)體有保護(hù)作用。11.根據(jù)所學(xué)的內(nèi)容，我們來看一下，在臨床上如何對(duì)腦膜炎奈瑟菌進(jìn)行檢驗(yàn)？首先我們進(jìn)行檢驗(yàn)程序的設(shè)計(jì)，再根據(jù)檢驗(yàn)程序進(jìn)行檢驗(yàn)方法的操作。流腦也可以用ELISA等免疫學(xué)方法來快速檢測標(biāo)本中的細(xì)菌抗原。12.首先進(jìn)行標(biāo)本的采集，根據(jù)流腦的臨床癥狀和體征的不同，通常我們采集病人的腦脊液，血液、鼻炎分泌物或刺破出血瘀斑取滲出物作為標(biāo)本，因?yàn)槟X膜炎奈瑟菌對(duì)理化因素抵抗力比較弱，因此我們采集標(biāo)本后應(yīng)注意保溫保濕，并且及時(shí)送檢，或者冬天我們可以采取床邊接種，接種之前培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行預(yù)溫。13.而對(duì)于腦脊液標(biāo)本則離心后可取沉淀物進(jìn)行涂片革蘭染色鏡檢，如果發(fā)現(xiàn)中性粒細(xì)胞內(nèi)外有革蘭陰性雙球菌呈腎型成雙排列時(shí)，可以做出初步診斷。14.另外對(duì)于血液標(biāo)本，我們應(yīng)該先用葡萄糖肉湯培養(yǎng)基進(jìn)行增菌24小時(shí)，每日觀察菌液的情況，如果沒有變化，則繼續(xù)培養(yǎng)至七天，如果仍然沒有細(xì)菌生長，則報(bào)告為陰性，如果菌液生長出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，則進(jìn)一步轉(zhuǎn)接種于巧克力瓊脂平板上進(jìn)行分離培養(yǎng)，而對(duì)于其他標(biāo)本我們可以直接分離于血瓊脂平板，巧克力平板或者是EPV平板上，置于5%到10%的二氧化碳環(huán)境中，經(jīng)35度至37度培養(yǎng)，18到24小時(shí)之后，觀察菌落特征，取可疑菌落進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定和藥敏試驗(yàn)，鑒定實(shí)驗(yàn)主要包括氧化酶實(shí)驗(yàn)陽性，觸酶實(shí)驗(yàn)陽性，分解葡萄糖，麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，莢膜多糖抗原直接凝集實(shí)驗(yàn)陽性等。15.最后對(duì)于流腦的防治原則方面發(fā)現(xiàn)病人我們應(yīng)該及時(shí)的治療病人，并且及早隔離患者，治療方面主要采用藥物，首選的是青霉素和磺胺類藥物，預(yù)防主要是給兒童注射流腦莢膜多糖疫苗進(jìn)行人工主動(dòng)免疫，在流腦流行期間，兒童還可以口服磺胺類藥來進(jìn)行預(yù)防。世界衛(wèi)生組織于今年2月8日曾報(bào)道，自2022年11月1日至2023年1月27日，尼日爾東南部的津德爾地區(qū)共報(bào)告了559例腦膜炎病例，其中至少有18人死亡。尼日爾每年都會(huì)反復(fù)出現(xiàn)季節(jié)性腦膜炎疫情，然而與前幾個(gè)季節(jié)性疫情相比，此次疫情病例數(shù)量和增長率都有所增加，世界衛(wèi)生組織發(fā)出警告，本次尼日爾暴發(fā)腦膜炎疫情有可能會(huì)蔓延至其他國家，成為危害最為嚴(yán)重的腦膜炎之一。尤其是對(duì)低齡嬰幼兒危害最大，我們應(yīng)時(shí)刻保持高度警惕