第一章----第四章階段復(fù)習(xí)第一章蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能

各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近，平均為16％。

100克樣品中蛋白質(zhì)含量〔g%〕=每克樣品含氮克數(shù)×6.25×100

蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)蛋白質(zhì)的根本組成單位

—氨基酸組成人體的氨基酸僅有20種，稱為根本氨基酸。且均屬L-α-氨基酸〔甘氨酸除外〕。H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R非極性側(cè)鏈氨基酸極性中性側(cè)鏈氨基酸酸性側(cè)鏈氨基酸〔谷、天冬氨酸〕4.堿性側(cè)鏈氨基酸〔賴、精、組氨酸〕氨基酸的結(jié)構(gòu)與分類〔R側(cè)鏈〕一級(jí)結(jié)構(gòu)（AA序列）二級(jí)結(jié)構(gòu)超二級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)域三級(jí)結(jié)構(gòu)四級(jí)結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的層次性一、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)肽鍵：由一個(gè)氨基酸的

-羧基與另一個(gè)氨基酸的

-氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵。+-HOH甘氨酰甘氨酸肽鍵N末端：多肽鏈中有自由氨基的一端；C末端：多肽鏈中有自由羧基的一端。多肽鏈有兩個(gè)末端：N末端C末端牛核糖核酸酶一級(jí)結(jié)構(gòu)指多肽鏈中氨基酸的排列順序。連接鍵是肽鍵，有些還含有二硫鍵。蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的定義“一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的根底。〞生物活性肽生物體內(nèi)存在許多具有生物活性的小分子肽，它們?cè)诖x調(diào)節(jié)和神經(jīng)傳導(dǎo)等方面起著重要作用，故稱為生物活性肽。

二、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的主要層次一級(jí)結(jié)構(gòu)四級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu)primarystructuresecondary

structureTertiarystructurequariernarystructure超二級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)域

supersecondarystructureStructuredomain蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)的定義：蛋白質(zhì)分子肽鏈主鏈骨架原子的相對(duì)空間位置，并不涉及氨基酸殘基側(cè)鏈的構(gòu)象

。主要化學(xué)鍵是氫鍵。

蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)的主要形式

-螺旋(

-helix)

-折疊(

-pleatedsheet)

-轉(zhuǎn)角(

-turn)

無(wú)規(guī)卷曲(randomcoil)

蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)定義疏水鍵、氫鍵和鹽鍵等。主要的化學(xué)鍵整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。

結(jié)構(gòu)域多肽鏈中某些局部的二級(jí)結(jié)構(gòu)常常聚集在一起，形成能發(fā)揮生物學(xué)功能的特定區(qū)域，稱為結(jié)構(gòu)域〔domain〕。每個(gè)結(jié)構(gòu)域具有特定的功能。亞基之間的結(jié)合力主要是疏水作用，其次是氫鍵和離子鍵。蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)指二條或兩條以上的多肽鏈〔每一條多肽鏈都有完整的三級(jí)結(jié)構(gòu)，稱為蛋白質(zhì)的亞基〕的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用，。血紅蛋白的四級(jí)結(jié)構(gòu)

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間結(jié)構(gòu)形成的物質(zhì)根底；蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能是蛋白質(zhì)分子特定的天然構(gòu)象所表現(xiàn)的性質(zhì)或具有的屬性。蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)一、蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)蛋白質(zhì)分子除兩端的氨基和羧基可解離外，氨基酸殘基側(cè)鏈中某些基團(tuán)，在一定的溶液pH條件下都可解離成帶負(fù)電荷或正電荷的基團(tuán)。

蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)〔pI〕當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)溶液處于某一pH時(shí)，蛋白質(zhì)分子解離成正、負(fù)離子的趨勢(shì)相等，即成為兼性離子，凈電荷為零，此時(shí)溶液的pH稱為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。蛋白質(zhì)陽(yáng)離子蛋白質(zhì)兼性離子蛋白質(zhì)陽(yáng)離子二、蛋白質(zhì)的高分子性質(zhì)

蛋白質(zhì)屬于生物大分子之一，分子量可自1萬(wàn)至100萬(wàn)之巨，其分子的直徑可達(dá)1～100nm，為膠粒范圍之內(nèi)。*蛋白質(zhì)膠體穩(wěn)定的因素同種電荷水化膜三、蛋白質(zhì)的變性、復(fù)性*蛋白質(zhì)的變性：在某些物理和化學(xué)因素作用下，其特定的空間構(gòu)象被破壞，也即有序的空間結(jié)構(gòu)變成無(wú)序的空間結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致其理化性質(zhì)改變和生物活性的喪失。

造成變性的因素如高溫、高壓、紫外線等；強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬離子及生物堿試劑等。

變性的本質(zhì)——破壞非共價(jià)鍵和二硫鍵，不改變蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)。復(fù)性假設(shè)蛋白質(zhì)變性程度較輕，去除變性因素后，蛋白質(zhì)仍可恢復(fù)或局部恢復(fù)其原有的構(gòu)象和功能，稱為復(fù)性〔renaturation〕。

天然狀態(tài)，有催化活性

尿素、β-巰基乙醇

去除尿素、β-巰基乙醇非折疊狀態(tài)，無(wú)活性蛋白質(zhì)沉淀在一定條件下，蛋白疏水側(cè)鏈暴露在外，肽鏈融會(huì)相互纏繞繼而聚集，因而從溶液中析出。變性的蛋白質(zhì)易于沉淀，有時(shí)蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀，但并不變性。四、蛋白質(zhì)的紫外吸收在280nm波長(zhǎng)處有特征性吸收峰。第二章核酸的結(jié)構(gòu)與功能

核酸的分子組成基本組成——堿基：嘌呤堿，嘧啶堿——戊糖：核糖，脫氧核糖——磷酸：5′端3′端核苷酸的連接

核苷酸之間以磷酸二酯鍵連接形成多核苷酸鏈，即核酸。CGA1、DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)：指構(gòu)成DNA的各個(gè)單核苷酸之間連接鍵的性質(zhì)及排列順序〔即堿基排列順序〕。

DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)

——雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn)〔Watson,Crick,1953〕由兩條相互平行但走向相反的DNA鏈組成，以右手螺旋方式繞同一公共軸盤。螺旋直徑為2nm，形成大溝及小溝相間。堿基居雙螺旋內(nèi)側(cè)，以氫鍵互補(bǔ)配對(duì)〔互補(bǔ)配對(duì)形式：A=T;GC〕；螺旋一圈螺距3.4nm，一圈10對(duì)堿基。穩(wěn)定因素：堿基堆積力--維持雙鏈縱向穩(wěn)定性；氫鍵--維持雙鏈橫向穩(wěn)定性。DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)種類1、右手螺旋結(jié)構(gòu)：

由于DNA纖維的含水量不同，可分為三種：B-DNA、A-DNA、C-DNA。

當(dāng)DNA鈉鹽纖維相對(duì)濕度和鹽的種類改變時(shí)，DNA的構(gòu)象發(fā)生改變。

不同DNA纖維的空間結(jié)構(gòu)

類型結(jié)晶狀態(tài)ANa鹽，相對(duì)濕度75%時(shí)結(jié)晶BNa鹽，相對(duì)濕度92%時(shí)結(jié)晶C鋰鹽，相對(duì)濕度66%時(shí)結(jié)晶2、左手螺旋結(jié)構(gòu)

Z-DNA螺旋。

DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的多樣性3、DNA的超級(jí)結(jié)構(gòu)指在二級(jí)結(jié)構(gòu)的根底上，雙螺旋進(jìn)一步扭曲或再次螺旋所形成的結(jié)構(gòu)。原核生物：大局部原核生物的DNA是共價(jià)封閉的環(huán)狀雙螺旋，這種雙螺旋還可以再次螺旋化形成超螺旋。真核生物：DNA和蛋白質(zhì)組裝成染色體，染色體的根本單位是核小體。〔二〕RNA的種類和分子結(jié)構(gòu)RNA通常以單鏈形式存在，但也可形成局部的雙螺旋結(jié)構(gòu)。RNA分子的種類較多，分子大小變化較大，功能多樣化。主要的RNA種類有rRNA、mRNA、tRNA、HnRNA、SnRNA、SnoRNA、ScRNA等。

1、mRNA〔信使RNA〕約占總RNA的2%--5%；其功能是蛋白質(zhì)合成的模板。真核細(xì)胞成熟mRNA的特點(diǎn)：3’－末端有多聚腺嘌呤的結(jié)構(gòu)〔polyA〕；5’－末端具有帽子結(jié)構(gòu)〔m7GpppN〕；一種mRNA只含有一條多肽鏈的信息〔單順?lè)醋印场?、tRNA〔轉(zhuǎn)移RNA〕約占總RNA的15%；在蛋白質(zhì)合成中起攜帶氨基酸的作用；*

tRNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

含10~20%稀有堿基，如DHU3′末端為—CCA-OH5′末端大多數(shù)為G

具有T

C

tRNA的結(jié)構(gòu)tRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)

--三葉草型結(jié)構(gòu)

氨基酸臂

DHU環(huán)反密碼環(huán)額外環(huán)

TΨC環(huán)3、rRNA〔核蛋白體RNA〕約占全部RNA的80%;是核蛋白體的主要組成局部;核蛋白體是蛋白質(zhì)合成的場(chǎng)所。*rRNA的種類〔根據(jù)沉降系數(shù)〕

真核生物5SrRNA28SrRNA5.8SrRNA18SrRNA

原核生物5SrRNA23SrRNA16SrRNA核蛋白體的組成原核生物（以大腸桿菌為例）真核生物（以小鼠肝為例）小亞基30S40SrRNA16S1542個(gè)核苷酸18S1874個(gè)核苷酸蛋白質(zhì)21種占總重量的40%33種占總重量的50%大亞基50S60SrRNA23S5S2940個(gè)核苷酸120個(gè)核苷酸28S5.85S5S4718個(gè)核苷酸160個(gè)核苷酸120個(gè)核苷酸蛋白質(zhì)31種占總重量的30%49種占總重量的35%核酸的理化性質(zhì)一、核酸的紫外吸收

堿基含有共軛雙鍵；最大吸收峰260nm左右。二、DNA的變性定義：在某些理化因素作用下，DNA雙鏈解開(kāi)成兩條單鏈的過(guò)程。方法：過(guò)量酸，堿，加熱，變性試劑如尿素、酰胺以及某些有機(jī)溶劑如乙醇、丙酮等。變性后其它理化性質(zhì)變化：OD260增高

氫鍵和堿基堆積力的破壞，核酸分子高級(jí)結(jié)構(gòu)改變、理化性質(zhì)及生物活性發(fā)生改變，

磷酸二酯鍵不斷裂，故一級(jí)結(jié)構(gòu)不變。實(shí)質(zhì)DNA變性示意圖:Tm：變性是在一個(gè)相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成，在這一范圍內(nèi)，紫外光吸收值到達(dá)最大值的50%時(shí)的溫度稱為DNA的解鏈溫度，又稱融解溫度〔Tm)。其大小與G+C含量成正比。三、DNA的復(fù)性與分子雜交

DNA復(fù)性：在適當(dāng)條件下，變性DNA的兩條互補(bǔ)鏈可恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象，這一現(xiàn)象稱為復(fù)性。減色效應(yīng)DNA復(fù)性時(shí)，其溶液OD260降低。熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后即可復(fù)性，這一過(guò)程稱為退火。在DNA變性后的復(fù)性過(guò)程中，如果將不同種類的DNA單鏈分子或RNA分子放在同一溶液中，只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系，在適宜的條件下，就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈。這種雜化雙鏈可以在不同的DNA與DNA之間形成，也可以在DNA和RNA分子間或者RNA與RNA分子間形成。這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交。核酸分子雜交

第三章酶與維生素

酶的概念酶是一類由活細(xì)胞產(chǎn)生的，對(duì)其特異底物具有高效催化作用的生物大分子，包括蛋白質(zhì)和核酸。酶的結(jié)構(gòu)與功能

一、酶的分子組成蛋白質(zhì)部分：酶蛋白輔助因子金屬離子小分子有機(jī)化合物

全酶酶蛋白

蛋白質(zhì)部分+非蛋白質(zhì)部分+輔助因子=全酶（有活性）結(jié)合酶單純酶小分子有機(jī)化合物（B族維生素）無(wú)機(jī)金屬離子輔酶輔基酶維生素〔Vitamin〕：是人類生理活動(dòng)所必需的，從食物中獲得的一類有機(jī)小分子。它們并不是機(jī)體的能量來(lái)源，也不是結(jié)構(gòu)成分，大多數(shù)以輔酶、輔基的形式參與調(diào)節(jié)代謝活動(dòng)。脂溶性維生素：A、D、E、K水溶性維生素：B族維生素〔VitB1，VitB2，VitPP，VitB6，VitB12，泛酸，生物素，葉酸〕和VitC。二、維生素與輔酶的關(guān)系

維生素B1維生素B1又名硫胺素〔thiamine〕體內(nèi)活性形式為焦磷酸硫胺素〔TPP〕〔TPP〕維生素B2FMN及FAD是體內(nèi)氧化復(fù)原酶的輔基，主要起氫傳遞體的作用。缺乏癥：口角炎，唇炎，陰囊炎等。維生素B2又名核黃素〔riboflavin〕體內(nèi)活性形式為黃素單核苷酸〔FMN〕黃素腺嘌呤二核苷酸〔FAD〕維生素PP維生素PP包括：尼克〔煙〕酸、尼克〔煙〕酰胺體內(nèi)活性形式：尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸〔NAD+〕尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸〔NADP+〕多種脫氫酶的輔酶，起傳遞氫的作用。維生素B6維生素B6包括：吡哆醇，吡哆醛及吡哆胺。體內(nèi)活性形式：磷酸吡哆醛和磷酸吡哆胺。磷酸吡哆醛是氨基酸轉(zhuǎn)氨酶及脫羧酶的輔酶分布廣泛食物中富含，腸道細(xì)菌可以合成供人體需要。泛酸又名遍多酸體內(nèi)活性形式為輔酶A〔CoA〕CoA是酰基轉(zhuǎn)移酶的輔酶，參與酰基的轉(zhuǎn)移作用。葉酸體內(nèi)活性形式----四氫葉酸〔FH4〕FH4是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶，參與一碳單位的轉(zhuǎn)移。缺乏癥：巨幼紅細(xì)胞貧血系維生素B12或葉酸缺乏，DNA合成延緩,細(xì)胞分裂與成熟減緩，而呈現(xiàn)大紅細(xì)胞性貧血。

維生素B12維生素B12又稱鈷胺素〔coholamine〕體內(nèi)活性形式為甲基鈷胺素5-脫氧腺苷鈷胺素參與體內(nèi)甲基轉(zhuǎn)移作用；缺乏癥：巨幼紅細(xì)胞貧血、神經(jīng)疾患。生物素〔biotin〕：是噻吩與尿素相結(jié)合的駢環(huán)化合物，帶有一戊酸側(cè)鏈，有，兩種異構(gòu)體。生物素是羧化酶的輔基，在體內(nèi)參與CO2的固定和羧化反響。B族維生素及其輔酶形式B族維生素輔酶形式酶促反應(yīng)中的主要作用硫胺素（B1）硫胺素焦磷酸酯（TPP）α-酮酸氧化脫羧酮基轉(zhuǎn)移作用核黃素（B2）黃素單核苷酸（FMN）黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD）氫原子轉(zhuǎn)移氫原子轉(zhuǎn)移尼克酰胺（PP）尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）氫原子轉(zhuǎn)移氫原子轉(zhuǎn)移吡哆醇（醛、胺）（B6）磷酸吡哆醛氨基轉(zhuǎn)移泛酸輔酶A（CoA）酰基轉(zhuǎn)移葉酸四氫葉酸"一碳基團(tuán)"轉(zhuǎn)移生物素（H）生物素羧化作用鈷胺素（B12）甲基鈷胺素5′-脫氧腺苷鈷胺素甲基轉(zhuǎn)移酶的活性中心必需基團(tuán)：酶分子中氨基酸殘基側(cè)鏈的化學(xué)基團(tuán)中，一些與酶活性密切相關(guān)的化學(xué)基團(tuán)。活性中心內(nèi)的必需基團(tuán)結(jié)合基團(tuán)(bindinggroup)與底物相結(jié)合催化基團(tuán)(catalyticgroup)催化底物轉(zhuǎn)變成產(chǎn)物位于活性中心以外，維持酶活性中心應(yīng)有的空間構(gòu)象所必需。活性中心外的必需基團(tuán)指必需基團(tuán)在空間結(jié)構(gòu)上彼此靠近，組成具有特定空間結(jié)構(gòu)的區(qū)域，能與底物特異結(jié)合并將底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物。酶的活性中心〔activecenter〕底物活性中心以外的必需基團(tuán)結(jié)合基團(tuán)催化基團(tuán)

活性中心

四、酶原與酶原的激活酶原〔zymogen〕有些酶在細(xì)胞內(nèi)合成或初分泌時(shí)只是酶的無(wú)活性前體，此前體物質(zhì)稱為酶原。酶原的激活在一定條件下，酶原向有活性酶轉(zhuǎn)化的過(guò)程。酶原激活的機(jī)理酶原分子構(gòu)象發(fā)生改變形成或暴露出酶的活性中心

一個(gè)或幾個(gè)特定的肽鍵斷裂，水解掉一個(gè)或幾個(gè)短肽在特定條件下

胰蛋白酶原的激活

酶原激活的生理意義防止細(xì)胞產(chǎn)生的酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行自身消化，并使酶在特定的部位和環(huán)境中發(fā)揮作用，保證體內(nèi)代謝正常進(jìn)行。有的酶原可以視為酶的儲(chǔ)存形式。在需要時(shí)，酶原適時(shí)地轉(zhuǎn)變成有活性的酶，發(fā)揮其催化作用。酶促反響的特點(diǎn)與機(jī)理

催化反響歷程：一般化學(xué)反應(yīng)歷程：

SP酶促反應(yīng)歷程：

S+EESE+P

活化能：底物分子從初態(tài)轉(zhuǎn)變到活化態(tài)所需的能量。一種酶僅作用于一種或一類化合物，或一定的化學(xué)鍵，催化一定的化學(xué)反響并生成一定的產(chǎn)物。酶的這種特性稱為酶的特異性或?qū)Ｒ恍浴?酶的特異性〔specificity〕〔二〕酶促反響具有高度的特異性根據(jù)酶對(duì)其底物結(jié)構(gòu)選擇的嚴(yán)格程度不同，酶的特異性可大致分為以下3種類型：絕對(duì)特異性：只能作用于特定結(jié)構(gòu)的底物，進(jìn)行一種專一的反響，生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物。相對(duì)特異性：作用于一類化合物或一種化學(xué)鍵。立體化學(xué)特異性：作用于立體異構(gòu)體中的一種。絕對(duì)特異性酶只作用于特定結(jié)構(gòu)的底物，進(jìn)行一種專一的反響，生成一種特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物。

相

對(duì)

特

異

性

酶作用于一類化合物或一種化學(xué)鍵。一種酶僅作用于立體異構(gòu)體中的一種。乳酸脫氫酶(LD)

L-乳酸

D-乳酸立體化學(xué)特異性〔三〕酶促反響的可調(diào)節(jié)性對(duì)酶生成與降解量的調(diào)節(jié)酶催化效力的調(diào)節(jié)通過(guò)改變底物濃度對(duì)酶進(jìn)行調(diào)節(jié)等酶促反響受多種因素的調(diào)控，以適應(yīng)機(jī)體對(duì)不斷變化的內(nèi)外環(huán)境和生命活動(dòng)的需要。其中包括三方面的調(diào)節(jié)。〔四〕高度的不穩(wěn)定性

酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，凡影響蛋白質(zhì)活性的因素皆可影響酶的催化活性。

誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)---柔性學(xué)說(shuō)該學(xué)說(shuō)認(rèn)為酶外表并沒(méi)有一種與底物互補(bǔ)的固定形狀，而只是由于底物的誘導(dǎo)才形成了互補(bǔ)形狀。影響酶促反響速度的因素概念影響因素包括有酶濃度、底物濃度、pH、溫度、抑制劑、激活劑等。※研究一種因素的影響時(shí)，其余各因素均恒定。一、底物濃度對(duì)反響速度的影響在其他因素不變的情況下，底物濃度對(duì)反響速度的影響呈矩形雙曲線關(guān)系。當(dāng)?shù)孜餄舛容^低時(shí)反響速度與底物濃度成正比；反響為一級(jí)反響。隨著底物濃度的增高反響速度不再成正比例加速；為混合級(jí)反響。當(dāng)?shù)孜餄舛雀哌_(dá)一定程度反響速度不再增加，達(dá)最大速度；為零級(jí)反響。〔一〕米－曼氏方程式中間產(chǎn)物酶促反響模式——中間產(chǎn)物學(xué)說(shuō)E+S

k1k2k3ESE+P提出反響速度與底物濃度關(guān)系的數(shù)學(xué)方程式，即米－曼氏方程式，簡(jiǎn)稱米氏方程式。[S]：底物濃度V：不同[S]時(shí)的反響速度Vmax：最大反響速度Ｋm：米氏常數(shù)ＶVmax[S]

Km+[S]＝──當(dāng)反響速度為最大反響速度一半時(shí)，

Km值的推導(dǎo)Km＝[S]∴Km值等于酶促反響速度為最大反響速度一半時(shí)的底物濃度，單位是mol/L。2＝Km+[S]

Vmax

Vmax[S]Km〔二〕Km和Vmax的意義：1.當(dāng)=Vmax／2時(shí)，Km=[S]。因此，Km等于酶促反響速度達(dá)最大值一半時(shí)的底物濃度。──Vmax2Vmax[S]

Km+[S]

=

2.

Km可以反映酶與底物親和力的大小。Km越小，酶與底物的親和力越大。E+S

k+1k-1k+2ESE+Pk-1+k+2k+1Km==KsVmax定義：Vm是酶完全被底物飽和時(shí)的反響速度，與酶濃度成正比。二、酶濃度對(duì)反響速度的影響當(dāng)反響系統(tǒng)中底物的濃度足夠大時(shí)，酶促反響速度與酶濃度成正比，即ν=k[E]。雙重影響溫度升高，酶促反響速度升高；由于酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，溫度升高，可引起酶的變性，從而反響速度降低。三、溫度對(duì)反響速度的影響最適溫度：酶促反響速度最快時(shí)的環(huán)境溫度。*低溫的應(yīng)用四、pH對(duì)反響速度的影響最適pH：酶催化活性最大時(shí)的環(huán)境pH。0酶活性pH

pH對(duì)某些酶活性的影響

胃蛋白酶

淀粉酶

膽堿酯酶

246810五、抑制劑對(duì)反響速度的影響酶的抑制劑(inhibitor)凡能使酶的催化活性下降而不引起酶蛋白變性的物質(zhì)稱為酶的抑制劑。區(qū)別于酶的變性

抑制劑對(duì)酶有一定選擇性引起變性的因素對(duì)酶沒(méi)有選擇性

抑制作用的類型：不可逆性抑制〔irreversibleinhibition〕可逆性抑制〔reversibleinhibition〕競(jìng)爭(zhēng)性抑制(competitiveinhibition)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制(non-competitiveinhibition)反競(jìng)爭(zhēng)性抑制(uncompetitiveinhibition)〔一〕不可逆性抑制作用*概念抑制劑通常以共價(jià)鍵與酶活性中心的必需基團(tuán)相結(jié)合，使酶失活。

*舉例有機(jī)磷化合物羥基酶解毒--解磷定〔PAM〕重金屬離子及砷化合物巰基酶解毒--二巰基丙醇〔BAL〕酶的不可逆抑制作用分為：專一性抑制(如有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶的抑制〕〔作用于某一種酶的活性部位基團(tuán)〕非專一性抑制(如路易士氣對(duì)巰基酶的抑制)。〔作用于一/幾類基團(tuán)〕酶的不可逆抑制作用有機(jī)磷化合物膽堿酯酶失活的酶酸路易士氣巰基酶失活的酶酸〔二〕可逆性抑制作用*概念抑制劑通常以非共價(jià)鍵與酶或酶-底物復(fù)合物可逆性結(jié)合，使酶的活性降低或喪失；抑制劑可用透析、超濾等方法除去。競(jìng)爭(zhēng)性抑制非競(jìng)爭(zhēng)性抑制反競(jìng)爭(zhēng)性抑制

*類型１.競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用定義抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)相似，能與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，從而阻礙酶底物復(fù)合物的形成，使酶的活性降低。這種抑制作用稱為競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用。

+++EESIESEIEP競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用特點(diǎn)1.i與S結(jié)構(gòu)相似；2.i與S互相競(jìng)爭(zhēng)與酶活性中心結(jié)合；3.抑制程度取決于[i]和[S]的相比照例；4.↑[S]，可以減少或去除抑制作用。

丙二酸對(duì)琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制磺胺類藥物的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用磺胺藥與PABA相互競(jìng)爭(zhēng)與FH2合成酶結(jié)合。〔p-aminobenzoicacid,PABA〕〔sulfadrugs〕

PABA二氫蝶呤啶谷氨酸FH2合成酶

磺胺類藥物FH2FH2復(fù)原酶

MTXFH4相互競(jìng)爭(zhēng)相互競(jìng)爭(zhēng)〔-〕〔-〕氨甲蝶呤〔MTX〕促進(jìn)核酸的合成磺胺類藥物的抑菌機(jī)理2、非競(jìng)爭(zhēng)性抑制*反響模式E+SESE+P+

S－S+

S－S+ESIEIEESEP+IEI+SEIS+I

非競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用特點(diǎn)

1.i與S結(jié)構(gòu)不相似；

2.i與S互不干擾同時(shí)與酶結(jié)合；

3.抑制程度只取決于[i]的濃度；

4.↑[S]，不能去除抑制作用。

３、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制*反響模式E+SE+PES+IESI++ESESESIEP1、反競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑的化學(xué)結(jié)構(gòu)不一定與底物的分子結(jié)構(gòu)類似；2、抑制劑與底物可同時(shí)與酶的不同部位結(jié)合；3、必須有底物存在，抑制劑才能對(duì)酶產(chǎn)生抑制作用；抑制程度隨底物濃度的增加而增加；反競(jìng)爭(zhēng)性抑制的特點(diǎn)：六、激活劑對(duì)反響速度的影響激活劑〔activator〕使酶由無(wú)活性變?yōu)橛谢钚曰蚴姑富钚栽黾拥奈镔|(zhì)。?必需激活劑?非必需激活劑〔一〕變構(gòu)酶

變構(gòu)調(diào)節(jié)

(allostericregulation)幾個(gè)術(shù)語(yǔ)：變構(gòu)酶、變構(gòu)部位、變構(gòu)效應(yīng)劑〔變構(gòu)激活劑、變構(gòu)抑制劑〕一些代謝物可與某些酶分子活性中心外的某局部可逆地結(jié)合，使酶構(gòu)象改變，從而改變酶的催化活性，此種調(diào)節(jié)方式稱變構(gòu)調(diào)節(jié)。酶的別構(gòu)〔變構(gòu)〕效應(yīng)示意圖效應(yīng)劑別構(gòu)中心活性中心變構(gòu)調(diào)節(jié)的